Способ получения /2,8- @ н @ /инозина

 

Союз Советскик

Социалистических

Республик

ОПИСАНИЕ

ИЗОВРЕтЕНИУЯ ""89957О

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-sy (22) Заявлено 210280 (21) 2888523/23-04 (ЯФ) М. КЛ. с присоединением заявки Йо (23) Приоритет

С 07 H 19116

А 61 К 49/00

Государственный комитет

СССР по делам изобретений и открытий (33) УДК 547 ° 853.7.07,088.8) Опубликовано 230182.Бюллетень k9 3

Дата опубликования описания 230182 (72) Авторы изобретения

Ю.Л. Каминский и И.Ф. Иванова (71) Заявитель (54 ) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИИ (3, 8- H2 )-ИНОЗИНА

Изобретение относится к способу получения нового вещества — меченного тритием в положении 2,8 инозина ((2,8 — Нд) -инозин 1, который находит примененйе в биохимии, молекулярной биологии и медицине.

Известен (8- 8) èíoçèí, который получают путем деэаминирования (8- Н)-аденозина нитритом натрия в

9 уксуснои кислоте при молярно:1 соотношении компонентов 1:7-7:14, реакционная смесь выдерживается в течение суток при комнатной температуре.

Целевой продукт из реакционной смеси выделяют путем его ацилирования уксусным ангидридом в пиридине, экстракцией ацетильного производного хлороформом, перекристаллизацией ацетильного производного из этанола в присутствии угля, снятием ацетильной защиты метанольным раствором аммиака и перекристаллиэациеи иэ водного спирта. Получают (8- Н)-инозин с удельной активностью 0,483 Ки/ммоль, выход 42% (1 ).

Недостатками известного способа являются невысокая удельная активность получаемого меченного инозина, ограничивающая сферу era применения, относительно низкий выход целевого продукта и длительность проведения процесса Основной причиной низкого выхода реакции является неполнота превращения исходного реагента,обусловленная указанным выбором cooTHQ шения исходных компонентов.

Цель изобретения — получение нового вещества — (2,8- Н )-иноэина э с высокой удельнои активностью (40 Ки/ммоль) и выходом, достигающим около 90%.

Поставленная цель цостигается способом получения 2,8-ЗН -инозина,заключаюЩимсЯ в том, что (2,8- ЭНт)-аденозин подвергают действию нитрита натрия. и уксуснои кислоты при малярном соотношении (2,8- Н2 )-аденозин. — нитрит натрия — уксусная кислота, равном 1:,100-110):(125-135), и выделение целевого продукта осуществляют колоночной хроматографией на б ионосбменном сорбенте в Н -форме при элюировании водой.

25 II р и м е р. 35 мл раствора (2,8- ЗНд )-аденозина с удельной активHocTblo 43 KH/ììîëü в 50%-ном (по объему) водном этаноле с радиоактиэной концентрацией 4,9 мКи/ил упариваЗО ют досуха в вакууме ротационного ис899570

Формула изобретения

Составитель Л.никулина

Редактор Г.Кацалап Техред Т.Маточна Корректор О.Билак

Заказ 12054/31 Тира .< 389 Подписное

ВНННПН Государственного комитета СССР по долам изобретений и открытии

113035, Москва,;К-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ппп "патент", г. Ужгород, ул. проектная, 4 парителя при 30-40"С. Остаток (170 мКи, 4,1 мкмоль, 1,1 мг) (2,8- Hz) аденозина растворяют в

Ъ, 0,2 мл воды, добавляют 0,03 мл (530 мкмоль) ледяной уксусной кисло ты, а затем вносят в один прием

30 мг (430 мкмоль) нитрита натрия.Реакционную смесь (молярное соотношение 1:105:130) перемешивают, оставляют на 24 ч при комнатнои температуре далее добавляют 1 мл воды.

Для отделения от непрореагировавшего (2,8- ЗН2)-аденозина и солеи реакционную смесь наносят на колонку

10 <200 мм с сефадексом 5Е С = 25 в

Н+-форме и элюируют водой со "коростью 30-40 ..лл/ч. После выхода солеи 15 (;>ракция 6-.12 мл) элюируется (2,8- Hz )-инозин (фракция 14-25 мл.).

Выход Е2,8- Hz)-инозина составляет

90%, считая на исходный (2,8-3Н )—

-аденозин. Удельная активность полу- Щ ченчого (2,8- Н )-инозина соответствует удельной активности исходного (2,8- П2)-аденозина.

Характеристика УФ-спектра поглощения при рН 7 (HgO) Л „c 248 нм;

Оргд/Од,о = 1,69/ О О/026о = 0,26; при рН 12 (0,01 н. NaOH) Л „с 253 нм;

026о /Dzg,o = 1, 08 i О Во /О 26о О, 18., звсстные данные: при рН 7 X мокс 248 нм; 0 so /О26о — — 1, 73; Ozgo /02ь

0,24, при рН 12 Л,„акс 253 нм, О /О„ = 1,05; О,,Oz, = 0,18. (ля хранения элюат, содержащий

Е2,8- Н )-инозин, разбавляют 50%-ным ..3 (по объему) водным этанолом до радио. активной концентрации 1-5 мКи/мл.

Радиохимическая чистота препарата не ниже 95%. Хроматографирование проводилось на бумаге Ватман 3 в системе изопропиловый спирт-вода-аммиак (75:25:5) Способ получения (2,8- Н )-иноэина, отличающийся тем, что (2,8- И )-аденоэин подвергают 3. деиствию нитрита натрия и уксусной кислоты при молярном соотношении (2,8-- Hz) аденозин — нитрит натрия ..3 уксусная кислота, равном 1:(100110):(125-135), с последующим выделением целевого продукта колоночной хроматографией на ионообменном сорбенте в Н -форме при элюировании воФ дой.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Вдовенко В.М. Боброва B.Н. и

Айрапетянц Э.Г..Синтез меченных тритием биологически активных соединений. Л., 1966.