Способ получения моноцианэтиловых эфиров защищенных мононуклеотидов

 

им. Ленинского комсомола (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МОНОЦИАНЭТИЛОВЫХ ЭФИРОВ

ЗАЩИЩЕННЫХ МОНОНУКЛЕОТИДОВ

Изобретение относится к усовершенствованному способу получения моноцианэтиловых эфиров защищенных моионуклеотидов общей формулы

RI -e О ооЕЕн3

R,О OR, (z5 20{ % {) 3 п3САО ,Я 0 ОЯ но <

2 где В - урацил, цитозин, аденин, гуанин с защищенными реакционными центрами; являющихся промежуточными соединениями для получения олигонуклеотидов, 3 91064 применяемых в молекулярной биологии и молекулярной генетике.

Известен способ получения моноцианэтиловых эфиров защищенных мононуклеотидов формулы путем взаимодействия в пиридине защищенных нуклеотидов с 2-цианэтанолом в присутствии триизопропилбензолсульфохлорида, экстракции хлороформом и последующей обработки смеси эфиров смесью 1в абсолютных триэтиламина и пиридина в соотношении 1:1 11. Выход целевых продуктов 40-65>. Время проведения процесса 18 ч.

Недостатками такого способа явля" 1з ются значительная продолжительность процесса (18 ч) и относительно невысокий выход целевого продукта (40.654).

Целью изобретения является упрощение процесса и повышение выхода целевого продукта.

Цель достигается тем, что при получении моноцианэтиловых эфиров защищенных мононуклеотидов.формулы в качестве конденсирующего агента используют арилсульфотетразолид, а в качестве органического растворителя смесь хлороформ - бутанол в соотношении 7:3. зе

Выход целевых продуктов 60-803.

Время проведения процесса 1-3 ч. Отличиями предлагаемого способа получения моноцианэтиловых эфиров монозамещенных нуклеотидов являются использование в качестве конденсирующего агента арилсульфотетразолида и использование в качестве органического растворителя при экстракции смеси хлороформ - бутанол в соотношении 7:3, что позволяет сократить время проведения процесса до 1-3 ч и

9 4 ,увеличить выход целевого продукта до 60-803.

Пример. 243 мг (0,3 ммоль)

5 -0-диметокситритил-2 -О-тетрагидро-! пиранилуридин-3-фосфата (в виде триэтиламмонийной соли) сушат многократным упариванием с абсолютным пиридином, растворяют в 1,5 мл абсолютного пиридина, добавляют 227 мг(0,9 ммоль) мезитиленсульфотетразолида, через

l0 мин " 0,2 мл (3 ммоль) 2-цианэтанола. Контроль за ходом реакциитонкослойная хроматография (ТСХ) на силикагеле в системе А (хлороформ:

:метанол:триэтиламин, 75:24:1), Через 2 ч реакцию прекращают, реакционную смесь упаривают досуха на ротационном испарителе при 30ОС, раст-, . воряют в 30 мл охлажденной льдом смеси хлороформ-н-бутанол (7:3) и энергично встряхивают с 30 мл охлажденного 1 М триэтиламмонийбикарбонатного буфера. Слой буфера отделяют, про" мывают хлороформом (20 мл 2 ). Объели« ненные органические слои упаривают, сушат с добавлением абсолютного пиридина, растворяют в смеси абсолютный триэтиламин - абсолютный пиридин.

Контроль - ТСХ в системе А. Через 3 ч реакционную смесь упаривают досуха, сушат упариванием с абсолютным этанолом и осаждают вещество из хлороформного раствора его в смесь петролейный эфир - серный эфир (1:3). Получают. 156 мг (603) 5-0-диметокситритил-2"0-тетрагидропиранилуридин-3-цианэтилфосфата (триэтиламмонийной соли).

Выходы и характеристики синтезированных моноцианэтиловых эфиров защищенных нуклеотидов приведены в таблице.

9l0649 в

Растворитель

Время ракции, ч

Выход, 3

Соединение

) .А Б

lа,,8-урацил

60+ (ЗИТ ) ОЕК3

0,43 0,5 0,3 (отн. Ср. ) J$ а,S«N-бензоилцитозин

RI2-DHTr

4 б, В-N,N-дибензоиладенин

1,5

1 2

Хроматографическая подвижность Hà Kieselgel 60 F 254 (Merck); системы растворителей: А — хлороформ-метанол-триэтиламин, 75: 24: l (по объему), Б - ацетонитрил-вода, 4:1 (по объему).

Электрофоретическая подвижность в 0,03 И триэтиламмонийбикарбонатном буфере, рН 7,5; 1,3 kv; 45 мин, ДИТг-группу предварительно удаляют выдерживанием с 23-ным раствором бензолсульфокислоты в хлороформе при ОвС в течение 7 мин.

Конденсирующий агент-мезитиленсульфотетразолид, %48 4A

Конденсирующий агент - бензолсульфотетразолид.

Формула изобретения где В " урацил, цитозин, аденин, гуанин с защищенными реакционными центрами

R„- (тьр)

О ф с Q, оск, Способ получения моноцианэтиловых эфиров защищенных мононуклеотидов формулы

Е2ООН2 „В

СМС цО, 2 ро Ов

75 0,32 0,53 0,55(отн,Hp) 77 "» 0,36 0,55 0,33 (отн. рд) ос,н сц

0= 0- О в

Rt0 О31 р) i ) О

Я,- -С O ОСИ, юсн

О

If

R =к=-с Q

1 2

Составитель Л, Никулина

Редактор 3. Бородина Техред Л. Пекарь Корректор 8. Бутяга

Заказ 1021/26

Тираж 390 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП -"Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4 путем взаимодействия в пиридине защищенных йуклеотидов с 2-цианэтанолом в присутствии конденсирующего

910649 8 агента, экстракции органическим растворителем и последующей обработки образующейся смеси эфиров смесью а6соJlloTMblx триэтиламина и пиридина в соотношении 1:1, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью упрощения процесса и увеличения выхода целевого продукта, в качестве конденсирующего агента используют арилсульфотетраIO Золид, а в качестве органического растворителя смесь хлороформ-бутанол в соотношении 7:3.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. ВМ. Adamiak et а1. "The che

mica l s!nthesis of the anticodon

loop of eukoryotic initiator tRNA

containing the hypermod ified nuc leosl,de N 5N-threony1corbonyl3adenosinet А 1

Nuc i. .Асtds. Res. 5, 1889-1905(1978) (прототип).

Способ получения моноцианэтиловых эфиров защищенных мононуклеотидов Способ получения моноцианэтиловых эфиров защищенных мононуклеотидов Способ получения моноцианэтиловых эфиров защищенных мононуклеотидов Способ получения моноцианэтиловых эфиров защищенных мононуклеотидов 

 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, точнее к хирургии, и может найти применение при лечении очаговых поражений органов брюшной полости

Изобретение относится к области химико-фармацевтической промышленности и касается ренгеноконтрастных веществ и способа получения

Изобретение относится к медицине, а именно к хирургической стоматологии

Изобретение относится к медицине, рентгенологии, может быть использовано для получения радиологического изображения пациента
Наверх