Способ определения 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты

 

исследовательский институт экспериментальной ветеринарии (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ 2,4-ДИХЛОРФЕНОКСИУКСУСНОЙ

КИСЛОТЫ

Известен способ определения 2,4«ди хлорфеноксиуксусной кислоты путем обра;ботки пробы анализируемого вещества .бутилродамином в присутствии ацетатного буферного раствора с последующей эксч ракцией окрашенного раствора толуолом и

5 фотометрированием экстракта f 13 .

Недостаток способа состоит в его относительно невысокой чувствительности и точности. !О

Наиболее близким к предлагаемому по технической|сущности и достигаемым результатам является способ определения

2,4-днхлорфеноксиуксусной кислоты путем обработки анализируемого вещества соля- 15 ной кислотой, очистки полученного продуи та фосфорно-вольфрамовой кислотой, эксъракцни органическим растворителем - ме танолом, упаривания экстракта, метилиро» вания остатка с помощью диметилсульфата

20 ипи диаэометана с последующим гаэохроматографнрованием полученного ироду » та f2) .

Недостатками способа являются отно= сительно невысокие чувствительность и точность способа.

11ель изобретения - повышение - точности и чувствительности способа.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу определения 2,4-двхлорфеноксиуксусной кислоты путем обработки анализируемого вещества щелочью, очисти полученного продукта уксуснокислым свинцом в щелочной среде, эксч ракцни смесью гексана и эфира, взятых в объемном соотношении 40-60: 60-40, упаривания экстракта в присутствии спиртового раствора диэтиленгликоля, метили ровании остатка спиртовым раствором ацетилхолицхлорида нли диметнлглиоксима с последующим газохроматографнрованием полученного продукта.

Способ осуществляют следуюшим образом.

Для определения свободных форм 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты (2,4-й) бе3 97426 рут воды, мочи и молока до 20 мл, крови 10 мл, сена до 5 r, травы силоса, почвы, мышп„печени, почек, содержимого желудка до 10 г, жира до 2,5 г, номе шают в колбу Эрленмейера, добавляют

50-70 мл 0,1 н. водного раствора едкого натрия и встряхивают их на механическом встряхивателе 1 ч. Раствор оч» фильтровывают или отделяют центрифугированием. Осадок и фильтр промывают 10 два раза 30 - 40 мл 0,1 н. едкого натрии.

Доводят рН объединенного экстракта до

10,5-11,5 4н. соляной кислотой. Для определения суммы свободных и связанных форм 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты на анализ отбирают образцы тканей такой же массы. Помещают их в термостойкую колбу, приливают 20 мл 4н. соляной кис-" лоты и нагревают с обратным холодильником на кипящей водяной бане 1 ч. Затем © содержимое колбы охлаждают, приливают, 30-40 мл дистиллированной воды и устанавливавт рН 9-1 1 раствором 5 н. едко-го натрия. Жидкость отфильтровывают и отделяют центрифугированием, а осадок дважды промывают 30-40 мл 0,1 н. едкого натрия и все экстракта объединяют.

В полученные экстракты добавляют

2,5 мл 20 /-ного водного раствора уксуснокислого свинца, доводят рН 5 н. едким натрием до 9,5-10, снова добавляют такое же количество раствора уксуснокисло го свинца и устанавливают рН 8,0 - 8,5.

Осадок отделяют центрифугированием. Надосадочную жидкость сливают в мерный цилиндр и добавляют 2 мл концентрированной соляной кислоты, рН при этом должен составить 1-2. Затем добавляют этиловый спирт в количестве 2 мл на каждые 10мл жидкости. Смесь переносят в делительную воронку и экстрагируют 2,4-Д 50 мл равных по объему количеств гексана и афира (медицинского). После разделения верхний гексан-эфирный слой отделяют, а нижний, водно-спиртовый, повторно акстрагируют таким же количеством смеси гексана и эфира. Объединенный гексан-эфирный &Kc T» ракт промывают два раза 20 мл насыщенного раствора сернокислого натрия. При анализе почвы и растительных объектов гексан-эфирные акстракты дополнительно

50 дважды обрабатывают 15 мл 40%-ной серной кислоты, отделяют ее и промывают акстракт дистиллированной водой.

Полученные экстракты обезвоживают в колбочке 2-5 г безводного сернокисло- го натрия. Обезвоженные экстракты сливают в выпаривательную чашку. Остаток в колбе промывают 10 мл смеси гексана»

1 4 эфира и сливают в ту же чашку. Добавляют туда же 4-5 капель 50%-ного спиртового раствора диэтиленгликоля.и выпаривают под тягой вытяжного шкафа. Остаток в чашке смывают первый раз 1,5мл спирта, а второй раз 1 мл спирта и сливают его в термостойкую пробирку.

В пробирку добавляют 0,2 мл 1%-.ного спиртового раствора ацетилхолинхлорида или 0,2 мл 1%-ного спиртового раствора диметилглиоксима и 0,2 мл концентрированной серной кислоты. Проборку помешают на 5 мин в подогретую до кипения водяную баню.

Пробирку охлаждают, добавляют 1012 мл дистиллированной воды и переносят содержимое в делительную воронку. Метитилированную 2,4-Д извлекают 5-6 мл гексана, перемешивая смесь в воронке около 2 мии. Промывают гексановый экстракт дважды 5-6 мл 0,2%-ного pacw вора кислого углекислого натрия и сливают в сухую пробирку, обезвоживают безводным сернокислым натрием (0,2-0,4г) переносят гексановый акстракт в мерную

1 пробирку, промывая остаток 1 мл гексана.

При необходимости конечный экстракт концентрируют до объема 1-2 мл.

Стандарт 2,4-Д готовят следующим образом.

В термостойкую пробирку вносят 5мкг гербицида в виде спиртового раствора.

Объем доводит спиртом до 2,5 мл и проводят метилирование, а также последующую обработку пробы по описанной выше методике. Конечный объем гексана доводят до 5 мл . 1 MIQI этого pacTBopa cooT» ветствует 1 нг 2,4»Д.

Аликвотную часть экстрактов анализируемых проб (до 10 мкл) вводят в испаритель газового хроматографа с алектроннозахватным детектором. Для сравнения вводят стандартный раствор в количестве

4-S мкл (4-S нг).

Хроматографирование проводится с использованием стеклянной колонки длиной

1 м, заполненной Хроматоном с 5%

СЕ-30 или 3% ОУ-17. Расход газа (азот особой чистоты): на колонку 40 мл в 1 мин, на продувку детектора 60-80 мл/мин.

Рабочая температура: термостата испаритела 23СРС, термостата колонок 190 С, о термостата детекторов 250 С. Время удер ,живания 2,4-Д около 3 мин. Линейный динамический диапазон выдарживается в пределах 1 - 10 нг препарата во введенной в испаритель пробе.

974261

Расчет содержания 2,4-Д в анализируемой пробе проводят по формуле ор (мл) С1 (ur) Ипр ЮО ." юг/кг=

Ьв(мка) H M„p (r) 3 где X - количество пестицида в проое в мгна 1кг;

- конечный объем экстракта в мл;

С - количество пестицида в нг ввеТ денное в хроматограф со стандарт ным раствором;

- высота пика стандарта, см;

Н„- высота пика пробы, см; . (в - количество экстракта введенного, в хроматогрвф, мкл; lS

М„- масса пробы, взятой для экстракции, г; ф() К - коэффициент для внесения поправки на потери 2,4-Д в процессе обработки пробы, где К вЂ” опреде- () ляемость препарата, %.

При исследовании некоторых проб рас- тительного материала нв хроматограммах могут появляться пики, мешающие идентификации 2,4-Д. В этом случае экстракт, содержащий метилированную форму 2,4-Д, концентрируют до 0,1»0,2 мл и подвергают дополнительной очистке на хроматографическойпластннке Силуфол". Хроматографирование проводят в системе подвижного Е растворителя — бензол-гексан (8: 2). Вырезают участок пластинки шириной 1,5см по направлению движения исследуемой пробы. Слой адсорбента отдельно (или вместе с фольгой) помещают в пробирку 35 и дважды реэкстрагируют препарат 20%-ным раствором ацетона в бензоле, используя каждый рвз по 2 мл смеси растворителей.

Экстракт декантируют в мерную пробирку и аликвотную часть его вводят в испари- 40 тель хрома тографа.

Продолжение табл. 1

2,6

1 2,5

2 5,2

10 27,9

5 13,9

Стандарт

5,3

27,1

13,2

Таблица 2

64,7

59,3

Таблица 1

2 0,73 36,6 1,48 74

52,,07 41,4 3,80 76

И 10 3,91 39. 1 7,80 78

2,1 2

Внесено 2,4-Д 1

4,2

4,1

10,1

10,3

20,5

10 20,4

Результаты определения 2,4-Д при использовании различных метилирующих

О агентов приведены в табл. 1.

Определяемость 2,4-Д в траве при реэкстракции гербишща гексан-эфиром в различных соотношениях приведены в табл. 2.

5 25 75 2,67 О, 17 53,4

5 30 70 3,05+0,41 61

5 40 60 3,74 и 0,32 74,8

5 50 50 3,78 т 0,12 75,6

5 60 40 3,70+0,11 73,9

5 70 30 3,23 + 0,33

5 75 25 2,96 0,41

Результаты исследований показывают, что определяемость гербицида увеличивается,-когда для его реэкстрвкции испольЭ зуется смесь гексан-ефира в соотношениях от 40-60 до 60-40.

Определяемость 2,4-Д при различных способах анализа приведена в табл. 3.

1Твблицв 3

Расчеты показывают, что метрологическая характеристика предлагаемого спо7 97426 1 8 ! соба определения 2;4-дихлорфеноксиуксус- пробе 0,5-25 мкг, предел обнаружения ной кислоты, ее натриевой и аминной. со- 0,05 мг/кг. лэф следующая: диапазон определяемых В табл. 4 приведены показатели ха». концентраций пестицида в анализируемой рактеризуюшие способ определения 2,4-Д.

Табли ца 4

П(Среднее значение определения, % 75,4

72,9

Размах вариирования, % 64-93

64,4-75,4

Стандартное от клонение, 9,34

6,8

Относительное стандартное отклонение

0,09

0,12

Доверительный интервал

5,66

3,0 сутствии спиртового раствора днэтиленгликоля и в качестве метилирующего агента используют спиртовой раствор ацетилхолинхлорида или диметилглиоксима.

Ф орм ула изобретения

Составитель С. Хованская .

Редактор Н. Киштулинец Техред М.Тепер Корректор И. Ва трушкина

Заказ 8686/6 1 Тираж 887 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Способ определения 2,4 дихлорфеноксиуксусной кислоты путем обработки анализируемого вещества неорганическим реаген том, очистки полученного продукта, экст ракцни растворителем, упариМЬния экстрак- . та, метилирования остатка с последующим газохроматографированием полученного продукта, о т л и ч а ю ш и и с я тем, что, с news повышения чувствительности З и точности способа, в качестве неоргани-. ческого реагента используют щелочь, очистку ведут уксуснокислым свинцом в щелочной среде, в качестве растворителя при экстракции используют смесь гексана и эфира, взятых в объемном соот..ошении 40-60: 60-40, упаривание ведут в прйИсточники ифнормации, принятые во внимание при экспертизе

1. Коренман И. М. Фотометрический анализ. М., Химия, 1975, с. 828.

2. Чмиль В. Д. и др. Хроматографические методы определения остаточных количеств 2,4«дихлорфеноксиуксусной кислоты в воде, почве, фураже, продуктах питания растительного и животного проис» хождения. Методические указания по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питании, кормах и внешней среде. М., Госхимкрмиссия, 1977 (прототип).