Криопротектор гемопоэтических клеток

 

Использование: криобиология, медицина . Сущность изобретения: для консервирования гемопоэтических клеток при низкой температуре в качестве криопротектора применяют триэтилентиколь. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (3 l) (5()5 А 01 N 1 /02

1 111«;) Й

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР »»»»

„O

° » < Л )1»1«»«

I 1: .

»

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

»

»О (21) 4792862/13 (22) 2.5.12.89 (46) 23.05.92. Бюл. N 19 (71) Институт проблем криобиологии и криомедицины АН УССР (72) Г. С. Лобынцева, B. И. Грищенко, И. А, Вотякова, Э. И. Обозная-Печенежская, Л.А. Ханина и

В. М. Гучок (53) 612.41{088.8) (56) Несмеянов А. Н., Несмеянов Н. А. Начала органической химии. — М.: Химия, 1969, с.

124-125.

Симонова Л. И. Влияние гемотрансплантаций эмбриональной кроветворной ткани на .течение острой лучевой болезни у крыс и определение жизнеспособности консервированных клеток. Вопросы трансплантации костного мозга при лучевом поражении. — Л., 1965, с.

° 22 23.

Гемопоэтические клетки эмбриональной печени (эмбриогенез, трансплантация, криоконсервирование). — Киев: Наукова думка, 1988, с. 146, Изобретение относится к криобиологии, в частности к низкотемпературному консервированию клеток.

Цель изобретения является повышение сохранности гемопоэтических клеток при их . низкотемпературном консервировании.

Цель достигается применением триэтиленгликоля мол, м. 150 (ТЭà — 150) формулы

НОСН2СН20 - СН2СН20 - С НгСН2ОН в качестве криопротектора.

Пример. Гемопоэтические клетки получают иэ эмбриональной печени 6-12-недельных эмбрионов, удаленных из матки во время аборта. путем гомогенизации и фильтрации через систему для переливания крови. Разводят раствором Хэнкса. к полученным 1,5 мл клеток добавляют 10-ный (54) КРИОПРОТЕКТОР ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ КЛЕТОК (57) Использование: криобиология, медицина. Сущность изобретения: для консервирования гемопоэтических клеток при низкой температуре в качестве криопротектора применяют триэтиленгликоль. 1 табл.

»юй триэтиленгликоль мол. м. 150 в соотношении 1;1 до получения концентрации в суспензии 5, . Общий объем суспензии с Ф криопротектороу составляет 2-3 мл с коли- О

6 чеством клеток 10-80x10 s 1 мл, в зависи- раиф мости от возраста эмбриона. Через 30 мин а клетки замораживают на программном замораживателе типа УОП 6000000. Ф

Контроль температуры в образце осу- ществляют медькапелевой термопарой и регистрацией на двухкоординатном самописце "Эндим 622.01", Замораживание осуществляют от 20 С до температуры кристаллизации со скоростью 1 С мин, вы- . держивают 10 мин на плато кристаллизации, затем до-40 С со скоростью 10 С/мин с последующим по.ружением в жидкий

1734621

Составитель E.IVi.Ïàpøèí

Техред M.Ìîðãåíòàë Корректор Э.Лойчакова

Редактор И.Шулла

Заказ 1756 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035. Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101 азот. Отогрев производят на водяной бане при 37-40 С, Аналогично осуществляют консервирование с криопротектором ПЭО—

400.

После размораживания производят подсчет клеток в камере Горяева и эксплантацию в агаровую среду на заранее подготовленный и вызревший фидер по 100000 ядерных клеток на шесть чашек Петри. Результаты клонирования подсчитывают на постоянных препаратах. Суммарное количество колонйй и кластеров (КОЭ-ГМ) и сохранность KOE-ГМ после консервирования с криопротекторами ТЭГ-150 и ПЭО-400 представлены в таблице.

Из приведенных в таблице данных сле5 дует, что после замораживания клеток с

ТЭГ-150 их сохранность íà 90% выше по сравнению с известным.

Формула изобретения

10 Применение триэтиленгликоля мол. м, 150 в качестве криопротектора гемопоэтических клеток.