146) 30.11.85. Вюл. У 44 (72) Ф.И. Полежаев, Г.И. Александрова, Г.Н ..Будиловский, Л.М. Гармашова, Ю.З. Гендон, А .М. Грунис, А.И..Климов, А.Н. Слепушкин, Т.Е. Медведева и Т.А. Коваль (53) 615.372 (088.8) (594 С 12.N 7/00 // А 61 К 39/145 (С 12 N 7/00 С 12 R 1:91) 1 .1003

Изобретение относится к микробиологической промышленности, в частности к производству вакцин.,Известен штамм:Н/32/5, разновидности А/СССР/90/77) (H1N?), исполь S зуемый для производства живой гриппозной вакцины.

Однако айтигенные свойства извест- ного штамма.не соответствуют свойствам циркулирующего вируса.

Целью изобретения является создание штамма А/17/42/3 (НЗ) 1 2), используемого для производства живой .гриппозной вакцины.

Для получения штамма был отобран 15 эпидемический вирулентный эталонный вирус А/Бангкок/1/79(НЗМ2), соответствующий по антнгенным свойствам современным эпидемическим вирусам, Указанный штамм обладает дифференцирую- 20 щим признаком (Т )-активной репродукцией при 40 С (разница в титрах при 32 и 40 С,З,О Fq ЭИД 50/0,2 мл ).

Вакцинный штамм 17/42/3(НЗМ2 ) выделен врезультате рекомбинациис тер- 25 мочувствительным (Т+).штаммом

А/Ленинград/ 134/17/57(H2N2) разница в титрах репродукции при 32 и 40 С

6,0 С ЭИД 50/0,2 мл ) вируса

А/Бангкок/?/79(НЗМ2). Высокая термо-, 30 чувствительность донора, аттенуации вируса А/Ленинград/134/17/57 (H282) обусловлена тремя tg мутациями в генах 1, и 6, кодирующих белки

Р3, 9Р и МА. 35

Вакцинный штамм 17/42/3 (H3N2) депонирован в коллекции вакцинных штаммов в Государственном институте стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов 40 им.Л.А.Тарасевича и 67.

Морфология штамма 17/42/3(НЗй2).

Полиморфная структура типичная для вируса гриппа.

Рекомбинант 17/42/3(НЗМ2) характеризуется следующим составом генома: гены 1,2,3,5,7 и 8, кодируюйие белки РЗ, Рl, Р2, МР, М и НЗ от донора аттенуации А/Ленинград/

134/17/57(Н2М2 ), а гены, кодирующие 50 поверхностные белки (4 и 6)гемагглютинины и нейраминидазу от вирулентного вируса А/Бангкок/1/79 (НЗМ2) .

Антигенная структура вЂ” НЗ 2.

В перекрестной РТГА и PIIHA вакцинный 55 штамм взаимодействует с антисывороткой А/Бангкок/ 1/79(НЗЮ) до гомологичного титра и не реагирует с анти539 2 сывороткой к вирусу А/Ленинград/

134/17/57(H2H2 ) .

Штамм 17/42/3(НЗ)?2) обладает высокой репродукционной активностью на развивающихся куриных эмбрионах, в которых накапливается до 8,5 (.

ЭИД 50/0,2 мл/ в течение 48 ч прй

34 С.

Агглютинирует эритроциты кур в разведении 1:256.

Репродукционная активность при

40пС снижена на 7.,75 fg ЭИД

50/0,2 мл/ по сравнению с репродукцией при 32ОC. Штамм 17/42/3 (НЗМ2) имеет три сз дефекта в генах 1,5 и 6 /кодирующих белки РЗ, УР и ВА/.

Проявляет стабильность биологических признаков в течение 5 пассажей на развивающихся куриных эмбрионах.

Обладает выраженной иммуногенной активйостью при интраназальном введенни, вызывая сероконверсию у

80,67. лиц с титром антител 0-1:8 и у 70,1Х лиц с титром антител

0-1:16, Безвреден для взрослых людей (вызывает не более 2Ж реакций после вакцинации с повьппением теьжературы выше 37, 5 С ) .

Пример. Группе волонтеров из 178 человек с титром антител 0-1: 16 (из них 105 человек 0-1:8 ) был введен вакцинный штамм 17/42/3(НЗ)?2), взятый в объеме 0,5 мл при концентрации

7,5 ЭИД 50/0,2 мл/. Среди привитых не было отмечено ни одной поствакцинальной реакции с повьппением температуры вьппе 37,5"С, Показатель реактогенности равен О. Допустимый показатель реактогенности вакцинного штамма по МРТУ-42 на живую гриппозную вакцину 27. При обследовании в РТГА парных сывороток 108 волонтеров с исходным титром антител 0-1:8, привитых двукратно, 4-кратный и более прирост специфических антител был отмечен у 79 лиц, что составило

80,6Х. При расчете иммуногенности на группу привитых с титром 0-1:16, сероконверсии были отмечены в

70,1Х случаев (110 человек с диагностическим приростом антител на 157 обследованных ).

Использование вакцинного штамма

17/42/3(НЗН2 ) для иммунизации позволит создать иммунитет, специфичный современным циркулирующим эпидемическим штаммам вируса гриппа А.