Способ получения биомассы базидиомицетов
- 1. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОМАССЫ БАЗВДИОМИЦЕТОВ путем культивирования мицелия в питательной среде,в присутствии источника углерода в аэробных глубинных условиях, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода целевогопродукта, мицелий базидиомицетов, принадлежащих к виду Coridlus, предварительно гомогенизируют до получения однородного шпамма и полученный гомогенат вносят в питательную среду в количестве 0,01-0,2 г/л питательной среды, содержащей в качестве источника углерода декстрозу. , . 2.Способ по П.1, отличающийся тем, что мицелии гомогенизируют до образования комков размером 50-1000 мкм. 3.Способ по п.2, отличают щ и и с я тем, что, гомогенат вносят, (Л в питательную среду в количестве с 0,05-0,15 г/л среды.
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
PECFlYSJlHH (19) (10 I i I J1JLI I I2
С 12 R 1/645
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Pp_#_l. л .
И ПАТЕНТ У
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИ1 ЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОЧНРЫТИЙ (21) 25,1 3900/28-13 (22) 24.08.77 (31) 51-100157 (32) 24.08.76 (33) Япония (46) 30.04.84. Бюл. В 16 (72) Тикао Есикуми, Тосихико Вада, Хиромицу Макита и Кинзабуро Сузуки (Япония) .. (71).Куреха Кагаку Когио Кабусики
Кайся (Япония) (53) Бг76.8.093.33(088.8) (56) 1. Заявка Японски В 50-29034, кл. 36(2) В 221, опублик. 1975 (прототип) . (54) (57) 1. CrrOCOS nOnnZHm Б 10 1АССЫ БАЗицИОМИЦЕТОВ путем культивирования мицелия в питательной среде.в присутствии источника углерода в аэробных глубинных условиях, о т л и . ч а ю шийся тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта, мицелий базидиомицетов, принадлежащих к виду Сог о1из, предварительно гомогенизируют до получения однородного шпамма и полученный гомогенат вносят в питательную среду в количестве
0,01-0,2 г/л питательной среды, содержащей в качестве источника угле Р рода декстрозу.
2. Способ по п.1, о т л и ч а юЭ шийся тем, что мицелйи гомогенизируют до образования комков размером 50-1000 мкм.
3. Способ по п.2, о т л и ч а ю —, шийся тем, что, гомогенат вносят . в питательную среду в количестве
0,05-0, 15 г/л среды.
1090261
Табл
В
1 0
0,011
О, 011
2 2
Изобретение относится к микробиологической промышпенности и касается культивирования бавидиомицетов, которые могут быть использованы в качестве основного материала для медицин- 5 ских препаратов.
Известен способ получения биомассы базидиомицетов, в частности Schizophyffum или Zenntinus путем культи10 вирования мицелия в питательной среде в присутствии источника углерода в аэробных глубинных условиях f1).
Однако известный способ не обеспечивает высокого выхоДа целевого.про15 дукта.
Цель изобретения — повышение выхода целевого продукта.
Поставленная цель достигается тем, что согласно способу получения биомассы базидиомицетов путем культивирования мицелия в питательной среде в присутствии источника углерода в аэробных глубинных условиях, мицелий базидиомицетов, принадлежащих., 25 к виду CorxoFus предварительно гомо- генизируют до получения однородного шпамма и полученный гомогенат вносят в питательную среду в количестве 0,01-0,2 г/л питательной среды, содержащей в качестве источника углерода декстрозу.
Кроме того, мицелий гомогенизируют до образования комков размером 50—
1000 мкм.
Гомогенат вносят в питательную 35 среду.в количестве 0,05-0, 15 г/л.
Способ осуществляют следующим образом.
Посевная культура состоит из нитевидного мицелия (зернистый или 40 в форме комков {гранул}, образуя негомогенную смесь).
Для гомогенизации посевной куль-: туры гранулы разделяют. Получают шпам, в котором мицелий диспергирован равномерно. Иицелий гомогенизируют до тех пор, пока размер комков находится в пределах 50 — 1000 мк.
Гомогенизацию посевной культуры проводят с помощью известных средств, например гомогенизатора, гомосмесителя, дисперсионного смесителя, соковыжималки или винтового смесителя.
Время, необходимое для образования шпамма посевной культуры с помощью гомогенизирующнх средств, составляет от 30 с до 10 мин. Если для измельчения комков мицелия до 2-3 ,:или 10-50 мк приложены черезмерные
;усилия, сказывается неблагоприятный эффект на развитие грибков при последующей культивации.
Количество мицелия, применяемого для эаряжения среды, для культивирования обычно составляет 0,01-0,2 г/л предпочтительно О, 05-0, 15 г/л среды.
Среда, применяемая для культивирования базидиомицетов, является водной средой и к ней не предъявляют никаких специальных требований, условия культивации в отношении температуры, скорость аэрации и скорость перемешивания обычные.
Пример 1. 120 л среды (pH
6,5) следующего состава, г/л воды:, Декстроза 50
Дрожжевой экстракт 7,5 загружают в бродильный чан емкостью
200 л и подвергают стерилизацию под давлением при 120 С по обычному методу.
Затем мицелий CorioXus ver sicofor (Fr) Quei,культивированный в сосуде емкостью 30 л, гомогенизируют в гомосмесителе до тех пор, пока гранулы станут неразличимыми невоору" женным глазом. Гомогенизированным мицелием заражают.среду в бродильном чане емкостью 200 л и затем культивируют в течение 150 и при 25 С, скорос. ти аэрирования 0,5 об ./об . в мин, и скорости перемешивания 250 об/мин.
Иицелий отделяют, промывают водой, этиловым спиртом и высушивают при
80 С.
Полученные результаты показаны .в табл. 1.
Комки мицелия присут- 5,5 ствовали
Комки мицелия присут - - 10,9 ствовали незначительно
1090261
Продолжение табл. 1
-3 7
Комки ми исчезли
11,6
О, 100
Комки мицелия +.
4 О
Выход мицелия, г/л среды
КоличестОпыт Время гомо.генизации посевной во мицелия, г/л среды культуры, мин
О, 005
0,015
5,9
11,9
1
0,05
12,8
0,10
13,5
О, 15
13,3
0,20
13,2
0,30
12,0, 0,50 11,9
Таким образом, при одинаковом выходе мицелия. для осуществления предлагаемого способа необходимо всего
1/10 ч. посевной культуры, используемой по известному способу. Культивацию осуществляют с применением посев. ной культуры, гомогенизированной согласно предлагаемому способу и с
20 негомогенизированной культурой. Сравнивают время, требуемое для получения выхода мицелия 11 г/л.
Посевную культуру, аналогичную примеру 1, гомогенизируют по примеру
1. Зараженную среду подвергают культивации. Для сравнения посевную культуру не гомогенизируют. Результаты показали, что в случае применения гомогенизированной посевной культуры время, требуемое для достижения вы30 хода мицелия 11 г/л значительно короче при меньшем количестве посевной куль туры.
Пример 3. В ферментер емкостью 200 л помещают 120 л культу-. З5 ральной среды (рН 6, 5) > имеющей сле-. дующий состав, г/л воды:
Декстроза 50
Дрожжевой экстракт 7,5
Среду стерилизуют обычным образом 40 о под давлением при 120 С. Затем мице.лий Coriolus versicolor {Fr) Яие1, предварительно выращенный в банкообразных ферментерах емкостью 30 л, гомогенизируют гомогенизатором-смеси-45 телем до тех пор, пока гранулы мицелия станут неразличимыми для невооруженного глаза. Такой гомогенизи- рованный мицелий просеивают в ферментер емкостью 200 л при соответствующих количествах инокулята выращиЭ вают в течение 150 ч при 25 С,скорости аэрации 60 л/мин и скорости перемешивания 250 об/мин. Разросшийся мицелий отделяют от полученной культу- 55 ры, промывают водой, этанолом и ацетоном в указанном порядке, а затем сушат при 80 С.
Результаты приведены в табл. 2.
Таблица 2
Сравнительные данные по выходу мицелия в зависимости от концентрации посевного материала
П р и м е ч а н и е. Комки мицелия исчезали во всех опытах.
П р и и е р 4. Мицелий базидиомицетов гомогенизируют в течение 7 мин до тех пор, пока размер комков мицелия не достигнет 100-1000 мкм, и инокулируют в питательную среду.
Культивируют при 25 С, скорости . о аэрации 0,5 об./об. питательной среды в мин и скорости перемешивания
250 об/мин в течение 150 ч ° Выросший мицелий выделяют из среды, промывают водой, этиловым спиртом и ацетоном и затем сушат при 80 С ° о
Результаты представлены в табл. 3.
109026 1
Таблица 3
Сравнительные данные по выходу биомассы при использовании гомогенизированного и негомогенизированного мицелия Разновидность грибков
Депонирование
Выход мицелия.через
150 ч культивации, г/л культурной среды
Предлагае- Сравнительмый способ ный пример
Corio2us versicolor(FrgQueI.
РЕКИ-Р
Ф
5,4
12,8
24 12
0,031
О, 030
5 6
2413
12,7
То же
5,3
12,8
О, 031
О, 031
2414
5,3
2415
12,5
12,6
5,5
2416
5,2
12,8
241 7
5,5
12,4
2418
2419
12,8
5,3
5,0
2420
5,6
12,6
2421
Coriokus чегз1со1ог(Рг)Яие2.
FERN-Р
5,4
2422
0,031
12,7
То же
5,6
5,5
5,4
12,8
2423
0, 031
О, 031
О, 030
12,7
2424
12,6
2425
Corio2us versicolor(Fr) Que J., РЕКИ-P
О, 031
5,2
12,8
2426
Car ioйиз bi f ormi s (KXotz) Pat.
NiId strain
not-deposited 0,030
5,3
4,7
Согхойиз conchif ed (Schv.) Pat
То же
0,030
0,030
О, 031
Coriofus versicolor(Fr)Quef.
Corio2us pubescens(Fr)@ ей.
4 5
4,6
Coriolus hirsutus(Fr)Цоем.
PERM-P No
12,8. 2711 0,031
5,2
988 0,030
11, 9
4,7
„2712 О 030 12 4 5 О
Таким образом, использование биомассы базидиомицетов вида Corioius, гомогенизированного мицелия в .Каче- что, в свою очередь, повышает выход стве посевного материала и декстрозы биологически активных препара-. в качестве источника углерода позво- 5> тов на основе данных кульяет значительно увеличить вьщод . тур.
Ю
3HHHQH Заказ 2962/56 Типаж 522 Доущсиое
Филиал. ПОП Патеат, г.Ужгород, ул.Проектйая, 4
Coriofus consors(Berk)Imaz.
FERN-Р No
Coriofus pargamenus(Fr)Pat.
РЕВИ-Р No.
Норма инокулирования, r/ë. 0,031
О, 031
О, 030
О, 031
О, 030
О, 030
12,6 ,11, 7
11 4 I0,8
