Способ определения показателя сферичности эритроцитов

 

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОКАЗАТЕЛЯ СФЕРИЧНОСТИ ЭРИТРОЩГГОВ, основанный на разведении цельной крови, освещении суспензии коллимированным пучком света, регистрации световых потоков излучения, прошедших через суспензию, о тли чающий ся тем, что, с целью упрощения способа и повьппения точности, регистрируют в телесном угле О ; Q : 2,4 10 ср минимальное значение светового потока, прошедшего через суспензию в спектральном интервале 450-800 нм до и после введения в суспензию вещества, формирующего эритроциты в сферу без изменения их объема, а затем по отношению измеренных минимальных (Л значений световых потоков судят об искомой величине.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСЙУБЛИН

4(st) G 01 Н 15 14

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н АВТОРСИОМЪ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

1903ЩФУСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ГЮ ДЕЛАМ ИЗОБРОЪНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3687552/24-25 (22) 09.11.84 (46) 07,03.85. Бюл. У 9 (72) А.Я . Хайруллина (71) Ордена Трудового Красного Знамени институт физики АН Белорусской ССР (53) 548.137(688.8) (56) 1. Gibbs R.J. Light эсас ering

from particles of 90 different

shapes. — J. Geophus. Res., 1978, Ф 1, с. 83, р. 501-502.

2. Авторское свидетельство СССР

У 989388, кл. С 01 N 15/02, 1983.

3. Kuroda К.,Purno И. On fhe . cause of increase in light transparency of erythrocyte suspension in

flow. — "8iorheo1ogy", 1963, М 3, р. 298-308 (прототип).

„„SU „„.1144031 (54)(57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОКАЗАТЕЛЯ СФЕРИ !НОСТИ ЭРИТРОЦИТОВ, основанный на разведении цельной крови, освещении суспензии коллимированным пучком света, регистрации световых потоков излучения, прошедших через суспензию, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа и повышения точности, регистрируютв телесном угле 0 842,4 ° 10 +ср минимальное значение светового потока, прошедшего через суспензию в спектральном интервале -450-800 нм до и после введения в суспензию вещества, формирующего эритроциты в сферу беэ изменения ик объема, а затем по отношению измеренных минимальных значений световых потоков судят об искомой величине

1144031 3 необходимостью обеспечения ориентации эритроцитов в одной из кювет, а также погрешность порядка 5Х в определении оптической плотности, возникающая за счет фотохимических реакций при облучении светом с 9 = 415 нм ввиду образования дериватов гемоглобина.

Кроме того, при создании ламинарного потока происходит деформация эритроцитов и их разрушение.

Цель изобретения — упрощение способа и повышение точности измеренийе

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу определения показателя сферичности эритроцитов, основанному на разведении цельной крови, освещении суспенэии коллимированным пучком света, регистрации световых потоков излучения, прошедших через суспензию,регистрируют в телесном угле Оi 9.а 2,4 10 4ср минимальное значение светового потока, прошедшего через суспензию в спектральном интервале 450-800 нм до и после введения в суспензию вещества, формирующего эритроциты в сферу без изменения их объема, а затем па отношению измеренных минимальныхзначений световых потоков судят об искомой величине.

При регистрации минимального светового потока Ф ;„, прошедшего через суспензию эритроцитов, определяемой физической величиной является показатель ослабления E: о

Я=-Ln — ) . мин где Ю

Ф— о

Е; где 1„ —

Изобретение относится к спектрофотометрии крови и может быть исполь. зовано для диагности в гематологии.

Известен способ определения параметра сферичности водных суспензий, основанный на освещении суспенэии коллимированиым пучком света, измерении яркости рассеянного частицами излучения под двумя углами $ 140 и

90 (1).

Недостатком данного способа является его применимость только к суспензиям, у которых действительная часть показателя преломления лежит в интервале 11 = 1,1-1,15, что де- 1 лает его неприемлемым для эритроцитов, у которых и 4 1,07.

Известен способ определения показателя сферичности частиц Р, основанный на измерении логарифмической производной яркости по углу, в интервале углов 135-140 )2J.

Недостатком указанного способа является его сложность, заключающая1 ся в необходимости перемещения прием-д ника рассеянного излучения.в углах

135-140 с высоким угловым разрешением для определения логарифмической производной яркости по углу. 11ри недостаточном угловом разрешении возрастает погрешность измерений. Необходимость измерения малых световых потоков по сравнению с падающим и превышение над фоном не более 10 раз в углах 135-140 также увеличивает погрешность измерений. Недостатки, связанные со сложностью и погрешнос-; тями, делают способ неприемлемым для широкого использования в гематологии.

Наиболее близким по технической 40 сущности к предлагаемому является способ определения показателя сферичности эритроцитов, основанный на разведении цельной крови, помещении суспензии ритроцитов в две кюветы, 45 создании ламинарного потока в одной из кювет, освещении их излучением длиной волны 415 нм,, где эритроциты имеют максимум поглощения, определении по показателям поглощения опти- 50 ческих плотностей двух кювет 2,, в одной из которых эритроциты находятся в состоянии покоя, а в другой направленно движутся в потоке, и определении среднего значения показателя сфе-55 ричности эритроцитов р по О, j3) .

Недостатком известного способа является его сложность, связанная с толщина слоя суспензии; падающий световой поток излучения; щц — прошедший минимальный световой поток излучения, в одной из длин волн в спектральном интервале 450-800 нм.

В данном счучае о « рг

Ь и 62 Еп ъ показатель ослабления светового потока Фо, при прохождении его через слой толщины суспензии эритроцнтов;

Eg — показатель ослабления светового потока при прохождении его через слой толщины суспензии эритроцитов с добавкой вещества, формирующего эритроциты в сферу;

3 11440 .Ф, — минимальное значение светового потока, прошедшего через суспензию эритроцитов; - минимальное значение светового потока, прошедшего че- S рез суспензию эритроцитов с добавкой вещества, формирующего эритроциты в сферу.

Отсюда следует, что г Г 19 ь Р /e, Е<

Е, 1„ О, Иг

Используя грацуировочный график за С, 15 висимости --(), полученной контEz рольным способом, определяют показатель сферичности эритроцитов р.

Выбор спектрального интервала

450-800 нм обусловлен тем, что возможные минимальные значения светового потока, и з, прошедшего через суспензию эритроцитов с различными значениями показателя сферичности до и после введения в нее д вещества, формирующего эритроциты, в угле 0<962,4 10 4ср, находятся в спектральной области 450-800 нм, а следовательно, ввиду слабости полос поглощения функциональные взаим- З< ные превращения гемоглобина эритроцитов несущественны и не вносят погрешности при определении p ..

Угол приема 0<8<2,4 10 ср обеспечивает измерение показателя ослабления F прошедшего излучения в указанном спектральном интервале с минимальной погрешностью (1-2X) возникающей, в основном, за счет вклада рассеянного вперед излучения, чем и 40 определяется точность измерения показателя сферичности р эритроцитов 1-2X.

В качестве вещества, формирующего эритроциты в сферу без изменения их 45 объема, используют лецитин, в качестве разбавителей — плазму или физиологический раствор, что гарантирует неизменность формы эритроцитов при 18-22 С.

На фиг. 1 изображен градуировочный график; на фиг.2 — график спектральной зависимости отношений световых потоков Ф /Ф для эритроцитов с различными показателями сферичности.

На градуировочном графике (фиг.l) определяют показатель сферичности эритроцитов (по величине отношения .

31 ф показателей ослабления f, /Я для соответствующих минимальных значений световых потоков 9 ц„, прошедших через суспензию эритроцитов (У<) и суспензию с добавлением лецитина(ф ), При построении градуировочного графика значения показателя сферичности р, равного отношению максимального размера эритроцита к минимальному, определяют микроскопическим способом. Определяют средний диаметр дискообразных эритроцитов, затем сферических Jqy и иа основе равенства их объемов определяют среднее значение показателя сферичности эритроцитов

Ъ д(2 с ду

На фиг.2 показано совпадение значений Ф1/90,и 4 г / P>< для эритроцитов (точки) с соответствующими значением

Р и сплюснутых эллипсоидов вращения (сплошные линии).

Пример. Определяют показатель сферичности эрнтроцитов, используя три различных пробы крови человека. Измерения проводят при 18-22 С.

Цельную кровь разводят в 2000 раз физиологическим раствором, помещают в плоскую кювету толщпной = 1 см.

Суспензию освещают коллнмированным пучком света (угол расходимости ис-4 точника 2,4 10 ср, дисперсия монохроматора 50 А/мм ).Измеряют световой поток прошедшего излучения в телес-Ф. ном угле 2,4 10 ср в спектральном интервале 450-800 нм, регистрируют минпмальпое значение прошедшего светового потока 1. Затем в кювету добавляют лицитин в количестве

30 мг/л и повторяют измерения, регистрируя минимальное значение прошедшего светового потока, По отношению измеренных минимальных значений световых потоков Р, / Р„, и

9 / Р„г определяют отношение показателей ослаблениями,/Fz и по градуи— ровочнсму графику находят показатель сферичности эритроцитов

В таблице приведены экспериментальные результаты определения для трех проб крови человека.

Использование предлагаемого способа позволяет упростить определение показателя сферичности О эритро i цитов„ а также повысить точность измерения в 2-5 раз важного диагнос тического параметра крови.

1144031

Образец

Показатели

Образец

Показатели

1 3

1 (2 3

1О

Ж»!»1 о» л I 02

0,51 0,41 0,69

0,66 0,846 0,96

1,2 1,65 1,38

Продажкение таблиц

26 5 37 р (контроль) 2,5 4,6 3,5

1144031 .Составитель В. Вощанкин

Редактор В. Петра@ Техре@И.бергель Корректор А. Обручар

Заказ 897/36 . Тираж 897 Подиисное

ВЯКНИ Государетвенного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ИПП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4