Способ получения клинического декстрана

 

¹ 121908

Класс 3011, 2оз

СССР

;..";АГЛЯ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Иностр анцы

Ульрих Беренс и Манфред Рингпфейль (Германская Демократическая Республика)

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КЛИНИЧЕСКОГО ДЕКСТРАНА

Заявлено 20 января 1958 г, за № 590406/31 в Комитет по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР

Опубликовано в «Бюллетене изобретений: > ¹ 16 за 1959 r.

Изобретение относится к способам получения клинического декстрана путем микробиологического синтеза.

Предлагаемый способ позволяет повысить выход указанного преларата.

Отличительная особенность способа заключается в том, что к среде, содержащей первичный декстран, добавляется живая культура активного штамма Zenconostoc mesentегоides, выращенная на питательной среде, содержащей необходимые для развития культуры органические кислоты и низшие спирты и не содержащей инициаторов синтеза декстрана (особенно сахаров мальтозного и изомальтозного ряда).

Способ позволяет, перепрививая указанную живую культуру на синтетическую среду с сахарозой и добавлением иницирующих агентов или без них, обеспечивать синтез декстрана желаемого молекулярного веса.

Г1 р и мер 1. Берется агарная питательная среда, поросшая Zenconostoc mesentегоides (5% сахарозы; 0,5% Na>HPO4 12Н О; 0,1% КС1, 0,1% пептона; 1% автолизата дрожжей; ди,"тиллированной воды до

100; рН 7). Бактериальные клетки отмываются физиологическим раствором поваренной соли и отгоняются на центрифуге. Затем производится декантация, и клетки обрабатываются вновь физиологическим раствором поваренной соли Эта процедура отмывки повторяется до тех пор, пока в клеточной взвеси не остается осаждаемый декстран. Как правило, достаточны две промывки.

Затем клеточная взвесь прививается питательному прививочному раствору следующего состава: 1% лимонной кислоты, 0,5% i%a>HPO4. 12Н20, 0,1% КС1, 0,1% пептона, 1,0% автолизата дрожжей. рН 7 дистиллированной воды до 100.

¹ 121908

После того, как достигнута мак симальная мутность, этот прививочный раствор добавляется в соотношении 1: 10 к синтетическому раствору следующего состава: 10% сахарозы, 2% первичного декстрана (молекулярный вес 20.000), 0,5% NagHPO4 12Н20, 0,1% КС1, 0,1% пептона, 1,0% автолизата дрожжей, рН 7, дистиллированной воды до 100.

Когда значение рН снизится до 3,9, синтез можно считать законченным. Дальнейшая обработка декстрана производится по известным методам.

Пример 2 Берется .небольшое количество слизи, содержащееся в культуре Zericonostoc mesentегоides, и наносится на питательную среду, налитую на дно вертикальной колбы.

Состав питательной среды: 3% агара, 0,5% фруктозы, 0,5% Na HPO< ° 12Н20, О,1 (о КС1, 0,1% пептона, 1,0% автолизата дрожжей, дистиллированной воды до 100.

После интенсивного развития колоний добавляется питательный (прививочный) раствор следующего rîñòàBà: 0,5% пропанола, 0,5%

1Ча2НР04 12Н20, 0,1% КС1, 0,1% пептона, 1,0% автолизата дрожжей, рН 7, дистиллированной воды до 100.

Когда достигнуто максимальное заму пенис, этот раствор добавляется в соотношении 1: 100 к синтетическому раствору (см. пример 1) .

Когда значение рН снизится до 3,9, синтез завершен.

Дальнейшая обработка декстрана производится по известным методам.

Пример 3. Управляемый синтез декстрана.

Прививочные растворы изготовляются в соответствии с примерами

1 и 2. Названные углеродные источники (лимонная кислота, фруктоза, пропанол) могут быть заменены другими подходящими оединениями, как, например, эталон, уксусная кислота, винная кислота и молочная кислота. Прививочные растворы добавляются в соотношении 1: 10.

1) Синтез декстрана желаемого мол. веса 40000.

Синтетический раствор: 20% сахаровы, 2,5% первичного декстрана (мол. ве; 10 000) 0,5% NaqHPO4 12Н20, 0,1% КС1, 0,1% пептона, 1,0% автолизата дрожжей, рН 7, дистилированной воды до 100

Выход равен в среднем 80% расчетных теоретических показателей (мол. вес 40000).

2) Синтез декстрана с расчетом на мол. вес 75000 (клинический декстран) .

Синтетический раствор: 10% сахарозы, 2% первичного декстрана (остальные примеси как в первом случае).

Выход равен в среднем 90% расчетных теоретических показателей (мол. вес 75 000).

3) Синтез декстрана с расчетом на мол. вес 150000.

Синтетический раствор: 10% сахарозы, 1% первичного декстрана, (мол. вес 20000) (остальныв примеси, как во втором случае).

Выход равен в среднем 85% расчетных теоретических показателей (мол. вес 150000).

4) Синтез декстрана желаемого мол. веса 300000.

Синтетический раствор: 10% сахарозы, 1,3% первичного декстрана (мол. вес 75000) (остальные примеси, как во втором случае).

Выход равен в среднем 75% расчетных теоретических показателей (мол. вес 300 000).

5) Синтез декстрана ведется с расчетом на оптимальный молекуляр. ный вес (технический декстран). № 121908

Синтетический раствор: 7,5% сахарозы, первичный декстран не добавляется (остальные примеси, как в первом или втором случаях).

Выход равен в среднем 90% теоретических расчетных показателей.

Предмет изобретения

Способ получения клинич8ского декстрана путем микробиологического синтеза, отличающийся тем, что, в целях повышения выхода указанного препарата, к среде, содержащей первичный декстран, добавляется живая культура активного штамма Zenconostoc mesentегоides, выращенная на питательной среде, содержащей необходимые для развития культуры органические кислоты и низшие спирты и не содержащей инициаторов синтеза декстрана (особенно сахаров мальтозного и изомальтозного ряда) .