Способ получения половых продуктов от карповых рыб

 

Изобретение относится к рыбоводству , а именно к способам получения половых продуктов от карповых рыб. Изобретение направлено на упрощение способа и повышение процента созревания производителей. Для этого производителям карповых рыб вводят однократно путем внутриполостных инъекций стероидный гормон 17с(-21 -диокси-4-прегнен-3,20-дион. Инъекцию проводят при температуре воды от 23,3 до 2б с и производителей после инъекции выдерживают при этой температуре от 7 до 9 ч. Самкам горИон вводят в количестве от 7 до 9 мг/кг массы тела, а самцам - от 2 до 3 мг/кг массы тела, 6 табл.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

РЕСПУБЛИН

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМ У СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И OTHPblTVM (21) 3855335/28-13 (22) 18.02.85 (46) 15.01.87. Бюл. Р 2 (7 1) МГУ им. М.В. Ломоносова (72) А.Б. Бурлаков, A.B. Зуморин, В.Н. Труш и А.И. Шило (53) 639.3.034.2(088.8) (56) Леманова Н.А., Сакун О.Ф. Методическое пособие по гормональной стимуляции производителей карпа при раннем получении личинок. — Ленинград, 1975.

Кролиководство и звероводство, пчеловодство и шелководство, рыболовство. — РЖ ВАСХИИЛ. — М., 1982, Ð 2, с. 19.

Попов О.П. и Бударин В.В. Применение прогестерона для стимулирования созревания самок карпа и сазана. — Рыбное хозяйство, 8 2, 1976, с. 18-19.

Я0„, 1282832 А1 (д) 4 А 01 К 61/00 (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛОВЫХ ПРОДУКТОВ ОТ КАРПОВЫХ РЫБ

{57) Изобретение относится к рыбоводству, а именно к способам получения половых продуктов от карповых рыб. Изобретение направлено на упрощение способа и повышение процента созревания производителей, Для этого производителям карповык рыб вводят однократно путем внутриполостных инъекций стероидный гормон 17o(-?1-диокси-4-прегнен-3,20-дион, Инъекцию проводят при температуре воды от 23,5 до 26 С и производителей после инъекции выдерживают при этой температуре от 7 до 9 ч.

Самкам горМон вводят в количестве от 7 до 9 .мг/кг массы тела, а самцам — от 2 до 3 мг/кг массы тела.

6 табл.

f5

1 12

Изобретение относится к рыбовод ству, а именно к способам получения половых продуктов от карповых рыб, и может быть использовано в рыбоводной пратике, ихтиологии, физиологии и генетике.

Цель изобретения — упрощение способа и повышение процента созревания производителей.

Использование описываемого способа позволяет окончить инкубацию икры в более ранние сроки за счет ускорения созревания производителей, а также снизить себестоимость воспроизводства карповых рыб.

Сущность способа состоит в том, что производителям карповых рыб при достижении температуры воды в прудах

23,5 — 26,0 С вводят однократно путем внутриполостной инъекции 17о -21-диокси-4-прегнен-3,20-дион и выдерживают при этой температуре в течение

7 — 9 ч, при этом самцам вводят препарат в количестве 7 — 9 мг/кг, а самкам 2 — 3 мг/кг.

После выдерживания в течение указанного выше времени половые продукты получают путем отцеживания. 1 Ы-21-Диокси-4-прегнен-3,20-дион представляет собой стероидный гормон из группы кортикостероидов (глюкокортикоиды) и является промежуточным продуктом при синтезе гидрокортизона и лреднизолона.

Введение гормона в указанных выше количествах вызывает созревание и овуляцию осцитов у самок и получение зрелых половых продуктов у самцов карповых рыб, таких как карп, большеротый и малоротый буффало, причем однократное введение гормона способствует сокращению времени получения половых продуктов.

В табл. 1 приведены данные, показывающие преимущества использования

173. — 21-диокси-4-прегнен-3 20-диона по сравнению с известными стероидными препаратами — прогестероном и 17d.— вЂ.гидрокси-20р-дигидропрогестероном.

Как видно из приведенных в табл.1 данных, наиболее эффективным действием при температуре воды 23,5 С при прочих равных условиях обладает 17d-2 1-диокси-4-прегнен-3,20-дион. Прогестерон и 17Ы-гидрокси-20р-дигидропрогестерон обладают меньшей эффективностью действия на созревание самок карпа. При действии однократной инъекции прогестерона наибольший про82832 2 цент созревания рыб составляет 687. при действии 17с/=гидрокси-20 -дигидропрогестерона — 77K, в то время как при действии 17д;21-диокси-4-прегнен-3,20-диона — 977.

В табл. 2 — 6 приведены данные, подтверждающие возможность достижения цели при осуществлении способа с заявленными режимами.

В табл. 2 приведены данные по созреванию самок карпа (контролем служил гипофиз сазана) .

Аналогичные хакономерности получены и на самцах карпа при применении в качестве гормонального стимулятора ускоренного созревания половых продуктов 17oL-21-диокси-4-прегнен-3 20-дион, представленные в табл. 3 °

Как видно из полученных данных, наилучшие результаты получены при введении гормона в количестве 7—

9 мг/кг массы тела самок и 2-Змг/кг массы тела самца при температуре

23,5 — 26 С.

Аналогичные закономерности получены и на. других представителях карпо-, образных рыб (семейство чукучановые—

Catostomidae) — на рыбах буйволах— большеротом и малоротом буффало.

В табл. 4 представлены результа-. ты, полученные на самках большеротого буффало.

В табл. 5 представлены результаты, полученные на самках малоротого

35 буффалоВ табл. 6 представлены результаты, полученные на самцах большеротого буффало.

Пример 1. Проведено искусственное воспроизводство карпа с примененим 1k -21-диокси-4-прегнен-3,20-дион. Отловленных в-маточных прудах производителей (21 самку и 20 самцов) инъецировали внутриполостной инъекцией 17d--21-диокси-4-прегнен-3,20-дион в дозе 9 мг/кг для каждой самки и 2 мг/кг для каждого самца при температуре воды в прудах 23,5 С и рассаживали раздельно самок в один инъекционный пруд, а самцов в другой инъекционный пруд. Для контроля за

12 ч до этого провели аналогичный отлов производителей (20 самок и

20 самцов) и первую внутриполостную инъекцию самкам в дозе 0 5 мг/кг каждой, После этого самок и самцов рассадили в разные инъекционные пруды при температуре 23,5 С. Через

82832 4

3 12

12 ч после первой инъекции пруды приспустили и (одновременно с введением 174-2 1-диокси-4 — прегнен-3,20дион) провели вторую внутриполостную инъекцию контрольным производителям карпа. Доза экстракта гипофиза во II инъекцию самкам карпа составляет 4 мг/кг, а для самцов (проводят всегда одну только инъекцию независимо от вида гормонального препарата) 4 мг/рыбу массой 45 кг. После инъекций рыб поместили в в те же инъекционные пруды. Через

8 ч после проведения таких инъекций, инъекционные пруды приспустили и получили созревшие половые продукты от самцов и самок способом, общепринятым при искусственном воспроизведении карповых рыб. Собранную икру оплодотворяли сухим способом, обесклеивали и инкубировали в аппаратах

Вейса. Получили, что при проведении ускоренного созревания половых продуктов инъекцией 17Ы-21-диокси-4-прегнен-3,20-дион отдали икру 86Х инъецированных самок, и 907. инъецированных самцов отдали не менее

4 мл эякулята. Процент оплодотворения полученной икры от разных самок составил 55-88Х. В контроле при действии инъекций экстракта гипофиза сазана созрело 807, инъецированных самок и 75Х инъецированных самцов отдали не менее 4 мл эякулята. Процент оплодотворения полученной икры в контроле при действии инъекций экстракта гипофиза сазана у разных самок составил 46-90Х.

Пример 2. Проведено искус,ственное воспроизводство карпа с применением 17Ы-21-диокси-4-прегнен-3,20-дион. Отловленных в маточных прудах производителей (30 самок и

21 самец) инъецировали внутриполостной инъекцией 17с -21-диокси-4-прегнен-3,20-дион в дозе 7 мг/кг для каждой самки и 3 мг/кг для каждого самца при температуре воды в прудах

26 С и рассаживали раздельно самок в один инъекционный пруд, а самцов в другой инъекционный пруд (как это принято в существующем производствен,ном процессе) .

Через ? ч после проведения таких инъекций инъекционные пруды припускают и начинают получать созревшие половые продукты от самцов и самок известным способом. Собранную икру оплодотворяют сухим способом (известный способ), обесклеивают и инкуби— руют в аппаратах Вейса. Получили, что при проведении ускоренного созревания половых продуктов инъекций

17 -21-диокси-4-прегнен-3,20-дион отдали икру 937. инъецированных самок и 957. инъецированных самцов отдали не менее 4 мл эякулята. Процент оплодотворения полученной икры от раэ10 ных самок составил 50-967.

Пример 3. Тоже, что в примере 1, но 17Ы-21-диокси-4-прегнен3,20-дион вводили производителям большеротого буффало в количестве

15 9 мг/кг массы для самца при температуре воды 26 С. Всего проинъецировали 11 самцов и 11 самок. Производителей выдерживали в прудах при этой же температуре в течение 8 ч.

2р После истечения этого времени пруды приспустили и путем отцеживания получили половые продукты, которые после обесклеивания инкубировали в аппаратах Вейса. Получено икры от

917. самок и 91Х самцов. Процент оплодотворения икры составил в среднем

63,5Х.

Пример 4. То же, что и в примере 1, но гормон вводили про30 изводителям малоротого буффало в дозе — 7 мг/кг массы тела для самки и 3 мг/кг массы тела самца.

Инъекции проводили при температуре 24 С и производителей выдерживали 9,5 ч. Получена икра от 82Х самок и 857. самцов.

Процент оплодотворения икры составил в среднем 58Х.

Пример 5. То же, что и в при4р мере 1, но инъекции делали производителям большеротого буффало в дозе

7 мг/кг для каждой самки и 2 мг/кг для каждого самца при температуре воды 26 С. Было взято 10 самок и

11 самцов. Производителей выдержиI вали 8 ч, после чего полученные.половые продукты использовали для оплодотворения.

Получены половые продукты от 90Х самок и 91Х самцов. Процент оплодотворения от разных самок составил в среднем 677..

Пример 6. То же, что и в при примере 1, но инъекции делали производителям большеротого буффало. Проинъецировали 13 самок и 13 самцов, вводя им гормон в дозе 9 мг/кг каждой самки и 3 мг/кг для каждого самца при температуре воды 24 С, 32 ющее отцеживание половых продуктов, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа и повышения процента созревания производителей, в качестве стероидного гормона рыбам вводят 17+-2 1-диокси-4-прегнен-3,20-дион, инъекцию проводят однократно при температуре воды

23,5 — 26,0 С, а выдерживание производителей осуществляют при этой температуре 7 — 9 ч, при этом самкам гормон вводят в количестве 7-9 мг/кг массы тела, а самцам в количестве

2 — 3 мг/кг массы тела.

I Та блица 1

Температу Время созра-воды, "ревания са о

С мок после

Созре вание

Препарат

Доза, мг/кг самок

Х инъекции, ч

17Ы-21-Диокси-4-преген-3,20- 9

-дион

23,5

25,0

25

8,5

24,0

24,0

9,0

Прогестерон

23,5

9,5

24,5

9,25

23,5

14,0

1 7d-Гидрокси- 9

20р-Дигидропрогестерон 7

24,0

8,75

9,25

23,5

24,5

24,0

10,75 .

5 13828

Через 9,5 ч от производителей получили половые продукты. Было установлено, что созрели и дали половые продукты 85Х самок и 85Х самцов.

Процент оплодотворения икры составил в среднем 58Х.

Формула из обр ет ения

Способ получения половых прбдук- 10 тов от карповых рыб, предусматривающий введение производителям путем внутриполостных инъекций стероидных гормонов, их выдерживание и последу15

Опродот- Число самок ворение в опыте икры, %

86 88

97 96

86 95

52 85

60 89

68 90

40 87

60 92

77 95

71 93

43 88

128?832 (Темпера тура во ды, С

Доза в

I инъек

Созре вание рыб, Доза во II

Время между

Iu II

Препарат цию, мг/кг инъек инъекцни,ч цию, мг/кг инъекциями, ч, 178.-21Диокси4-прегнен-3,20дион (11 24,0 8,0

11 25 0 7 5

11 26,0 7,0

11 26 5 7 0

9 210 150

9 22,5 12,0

9 235 90

9 25,0 8,0

1 7ю(-21Диокси-4-прегнен-3,20дион

26,0

7,25

26,5 7,25

21,5

16,5

22,5 13 5

7 240. 85

7 26,0 7,75

7 27,0 7,0

6 215 165

6 24 0 11 0

625590

5 22,0

14,0

12,5

9,0

7,5

0,5 12

0,5 12

7,0

6,5

Экстрат 0,5 12 гипофиза сазана 0 5 12

5 235

5 26,0

4,0 21,5

4,0 23,0

3 5 24,0

3 5 25,5

Время созревания рыб после II

Таблица 2

Оплодот Число ворение рыб в икры, 7 опыте

84 48,5 25

86 65,5 30

84 64,5 25

75 58,0 20

21 52 30

55 57,5 31

86 71 5 21

97 80,0 31

95 76,0 42

87 63,5 23

10 52 0 20

43 60,0 23

88 73,5 25

93 73,0 30

83 48,0 12

55 47,0 20

74 62,0 23

15 44,0 20

40 52,0 25

82 65,0 40

84 68,5 25

88 72,0 50

87 66,5 46

1282832

Таблиц а 3

Доза, Температура Время созремг/кг воды, С вания самцов ч

Созревшие самцы, отдавшие не менее 4 мл эякулята,Ж

Число рыб

Препарат

8,5

24,0

1 7с -21-Диок- 1 . си-4-прегнен

3,20-дион 1

8,25

25,0

56

8,0

25,5

74

22,0

9,0

8,5

23 5

96

8,0

25,0

26,5

7,25

73

22,5

9,0

24,0

8,0

20

21

25,5

8,75

31

22,0

4 24,0

4 26,5

8,0

57

7,25

Контроль экс- 4 мг/рыбу 23,0 тракт гипофиза сазана 4 мг/рыбу 24,0

8,0

8,75

28

4 мг/рыбу 25,0

7,25

30

Таблица 4

Препарат Доза в I

Время созревания рыб после II инъек цике мг/кг инъекции, ч

46 51

58 55

60 50,25

24,5

8,75

26, 0

8,75

1 7d-21—

Диокси4-прегнен-3,20-дион

Время между инъек циями ч

Доза во II инъек цию мг/кг

Темпера тура во ды, С

Созре вание рыб, Оплодот Число рыб

I ворение в опыте икры, Ж

12 1282832

14,5

22,0

24,0

9,0

26,0

7,75

27,0

7,5

8,25

25,5

14,5

22,0

9,25

24,0

26,0

7,75

24,0

13

1О

13,5

26,0

0,5 12

0,5 12

05 12

8,75

Экстракт гипофиза сазана

8,0

7,5

17с -21Диокси4-прегиен-3,20-дион

8,0

24,0

9,0

7,75

26,0

7,75

26,5

15,0

22,0

9,0

24,0

7,75

26,0

7.,5

24,5

17Ы-21—

Диокси-4-преген-3

20-дион

11,5

26,0

8,0

8,0

Экстракт 0,5 12 гипофиза сазана 0 5 12

4,0 22,5

4,0 24,0

4 0 25,5

10,5 25,5

4,0 24,0

4,0 25,5

Продолжение табл, 4

1 S Q

30 47,0

85 60,5

91 69,5

83 56,0

90 65,5

30 50,5

83 62,0

90 67,0

40,48,5

50 50,0

65 54,0

77 61,0

81 63 5

Таблица 5

77 57,0 13

83 58,0 12

91 63,5 11

90 62,0 10

20 51,5 10

82 . 64,0 11

91 65,0

30 52,0

50 47,5

78 60,5

82 60,0

1282832

13

Таблица 6

Препарат

Доза, MI /кг

Температура во" о ды, .С

Число рыб

24,0

8,5

&,0

26,0

13

22,5

9,75

24,0

8,5

26,0

7,75

24,0

8,0

7,5

91.8,5

14

7.,5

13

8 0

7,75

13

4,5 мг/рыбу 25,5

7,5

Техред N. Ходанич

Редактор М. Товтин

Корректор А. Тяско

Заказ 7305/1 Тираж 631 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035 Москва, Ж-35, Раушская наб,, д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

1 7d.-21-Ди- 1 окси-4прегнен-3,20- 1

-дион

3 255

4 23,5

4 250

4 26,0

Контроль 4 мг/рыбу 23,5 экстракт гипофиза 4 мг/рыбу 24,5 сазана

Время соз Созревшие ревания самцы, отсамцов, ч давшие не менее 3 мл эякулята,X