Способ контроля генетической структуры колоний неинбредных мышей

 

Изобретение относится к генетике животных, в частности к способу конт .роля генетической структуры колоний неинбредных мышей по комплексу генов :гистосовместимости Н-2 (комплекс Н-2) Целью изобретения является повышение контроля генетической структуры популяции неинбредных мьшей с широким охватом идентифицируемых генов. В заявленном способе при скрещивании с конгенно-резистентными линиями (КР) с последующей трансплантацией кожи потомкам (FI) от других КР-линий появляется возможность контролировать структуру популяции нелинейных мьшей более, чем по 100 аллелям комплекса Н-2, включающего 8-10 локусов. со ел со СО 00

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

COLiHA JlHCTWECHMX

РЕСПУБЛИК

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ(СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3978425/28-13 (22) 12 ° 11.85 (46) 23,11,87. Бюл. У 43 (71) Научно-исследовательская лаборатория экспериментально-биологических моделей АМН СССР (72) В.П. Чиркова, З.К. Бландова и А.А. Ведерников (53) 591.613;59.082(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

У 1223429, кл. А 01 К 67/00, 03.04.84. (54) СПОСОБ КОНТРОЛЯ ГЕНЕТИЧЕСКОЙ

СТРУКТУРЫ КОЛОНИЙ НЕИНБРЕДНЫХ МЫШЕЙ (57) Изобретение относится к генетике животных, в частности к способу конт„„SU„„1 53380 А1 (50 4 А 01 К 67/02, G 09 В 23/28. роля генетической структуры колоний неинбредных мышей по комплексу генов гистосовместимости Н-2 (комплекс Н-2)

Целью изобретения является повьпнение контроля генетической структуры популяции неинбредных мышей с широким охватом идентифицируемых генов.

В заявленном способе при скрещивании с конгенно-резистентными линиями (КР) с последующей трансплантацией кожи потомкам (F 1) от других KP-линий появляется возможность контролировать структуру популяции нелинейных мышей более, чем по 100 аллелям комплекса Н-2, включающего 8-10 локусов.

1353380

Гомоэиготами по Н-2 считают мышей, если у всех гибридов FI приживался трансплантат только одной KP линии.

Гетероэиготами по Н-2 считают мышей, если у одной части потомков Fl прижился трансплантат одной КР-линии, у другой части гибридов У вЂ” трансплантат другой KP-линии или трансплантат не прижился.

По результата м приживления кожи у мышей Fl определяют частоту гаплотипов и генотипов. В случае выявления мьппей с неизвестными гаппотипами по Н-2 закладывают новую линию мышей и изучают ее гаплотип с поИзобретение относится к генетике животных в частности к способу контроля генетической структуры колоний неинбредных мышей по комплексу re5 нов гистосовместимости Н-2 (комплекс

Н-2) .

Цель изобретения — повышение точности контроля генетической структуры популяции неинбредных мышей с широким охватом идентифицируемых генов.

В предлагаемом способе при скрещивании с конгенно-резистентными мы шами (KP) и последующей трансплантацией кожи потомкам (Г!) от других

КР-линий появляется воэможность контролировать структуру популяции нелинейных мышей более, чем 100 аллелям комплекса Н-2, включающего

8-10 локусов.

Пример 1. Исследуемых неинбредных мышей скрещивают с мышами конгенно-резистентной линии В10.M

4 (Н-2 ) ° Получают гибридных мышей 25 !

F l индивидуально от каждой исследуемой неинбредной мыши, на которых пересаживают кожу других конгенно-реэистентных линий, выведенных в данном случае на основе линии С57В1/10Sn.

На каждого реципиента трансплантиру- . ют кожу 3-4 доноров КР-линии с разными гаплотипами. Приживание одного иэ трансплантатов, кроме контрольного считают результатом идентичнос35 ти гаплотипов Н-2 донора и реципиента. Если генотип неинбредных мышей не удалось определить по результатам первой трансплантации, тем же реципиентам трансплантируют кожу 3-4

40 других доноров КР-линий через 30 дн.

Эту операцию повторяют по исчерпанию набора KP-линий. мощью других иммуногенетических методов.

Установленная таким образом гене тическая структура популяции неинбредных мышей по Н-2 дает воэможность контролировать стабильность структуры популяции неинбредных мышей по первоначально установленным частотам генотипов Н-2, используя общепринятый метод статистической обработки.

Положительный эффект предлагаемого способа состоит в том, что расширяется возможность исследования и контроля генетической структуры популяции неинбредных мьппей по большему число локусов, что обеспечивает воспроизводимость результатов в экспериментах, тем самым повышается эффективность исследования, выполненного на неинбредных мышах. Кроме того, знания о генофонде популяции дают возможность закладывать новые линии мышей для медико-биологических исследований.

В разработке предлагаемого способа использовано 28КР-линий 20 аллелей Н-2 коллекции СССР, сосредоточенной в НИЛбиомоделей АМН СССР, в т.ч. 9 из них выведены авторами предлагаемого изобретения. Всего же мировая коллекция включает более

200 конгенно-резистентных линий.

Для получения гибридов Fl при разработке предлагаемого способа использованы три типа KP-линий; на генетической основе В10/Sn — В10.М Н-2

1 с

° ф В10.RDI (Н-2 ) и сама линия В10 (Н-2 ), а на генетической основе А/Sn (Н-2 )

А.СА(Н-2 ), ASM (Н-2 ), А,СА-fm на генетической основе СЗН/Sn

СЗН..ПС(Н-2 ) СЗНН B(H-2 ), СЗ H.ÎÍ (Н-2 ). Это дало возмож" ность типировать Н-2 комплекс у неинбредных мышей по результатам трансплантации кожи от доноров-мьппей всех KP-линий, которые имелись в коллекции со следующими аллелями Н-2, а, Ь, д, f, fml, g1, h2, i5, i7, iq5, j, k, m, о2, р, q, r, s, ч, У1, °

Формула изобретения

Способ контроля генетической структуры колоний неинбредных мышей путем определения генотипов полиморфных систем, о т л и ч а ю—

1353380

Составитель Н.Кузенкова

Техред Л.Сердюкова . Корректор С,Шекмар

Редактор В.Данко

Заказ 5623/3

Тираж 628 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул, Проектная, 4 шийся тем, что, с целью повышения точности контроля генетической структуры популяции неинбредных мышей с широким охватом идентифицируемых генов, неинбредных мышей скрещивают с конгенно-резистентной линией с известным гаплотипом Н-2, полученным гибридным мышам первого поколения трансплантируют кожу других конгенно-резистентных линий с разными .гаплотипами Н-2 и по результатам

5 приживления трансплантата устанавливают гомо- и гетерозигот по Н-2 в колонии мышей и вычисляют частоты гаплотипов и генотипов по комплексу генов гистосовместимости.