Способ количественного определения углеводородов в биомассе дрожжей,выращенных на углеводородах

 

Изобретение относится к микробиологической промьшшенности, а именно к способу определения количества углеводородов в биомассе дрожжей, выращенных на нефтяных дистиллятах. Цель изобретения - повьппение достоверности определения. Сухую биомассу дрожжей гидрализуют в течение 3 ч щелочью при кипении с обратным холодильником , смесь промывают водой, углеводороды экстрагируют циклогексаном, циклогексановый экстракт упаривают , остаток растворяют в бензоле или смеси равных объемов хлороформа и н-гексана и проводят колоночную хроматографию на окиси алюминия с использованием ,в качестве элюента тех же растворителей. Элюат после колонки упаривают и высушивают до постоянной массы, которая характеризует количество углеводородов в пробе биомассы . 1 табл. i СЛ

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

„„Яо„„1з9о5зо А1 (51)4 С 12 N 1/26

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АBTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (89) DD /161073/ DD /WPG 01 N/

/219515/ 77.03.80 (21) 7772364/30-13 (22) 16.04.82 (46) 23.04.88. Бюл. У 15 (71) ФЕБ Петролхемишес Комбинат

Шведт (DD) и Всесоюзный научно-исследовательский институт биосинтеза белковых веществ (SU) (72),10ргин Лангнер, Герт Генг (DD), Л.А. Зюкова (SU), Энгельберт Фаульхабер, Сигфрид Маршин, Фолькер Риис и Сабинс Креше (DD) (53) 663.18(088,8) (54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ УГЛЕВОДОРОДОВ В БИОМАССЕ ДРОЖЖЕЙ, ВЫРАЩЕННЫХ НА УГЛЕВОДОРОДАХ (57) Изобретение относится к микробиологической промьппленности, а именно к способу определения количества углеводородов в биомассе дрожжей, выращенных на нефтяных дистиллятах.

Цель изобретения — повышение достоверности определения. Сухую биомассу дрожжей гидрализуют в течение 3 ч щелочью при кипении с обратным холодильником, смесь промывают водой, углеводороды экстрагируют циклогексаном, циклогексановый экстракт упаривают, остаток растворяют в бензоле или смеси равных объемов хлороформа и и-гексана и проводят колоночную хроматографию на окиси алюминия с использованием,в качестве элюента тех же растворителей. Элюат после колонки упаривают и высушивают до постоянной массы, которая характеризует количество углеводородов в пробе биомассы. 1 табл.

1390530

Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к способу определения углеводородов в биомассе дрожжей, выращенных с использованием углеводоров в качестве источника углерода.

Известен способ определения углеводородов в биомассе дрожжей (IUPAC

Inform. Bulletin Techno1, Report, 1p

1974, h"- 12, р. 20) .

Цель изобретения — повышение достоверности определения.

Способ осуществляют следующим образом. 15

Сухую биомассу дрожжей, выращенных ча углеводородах, предварительно очищенную от основного количества углеводородов экстракцией, гидролизуют щелочью в течение 3 ч при ки- 20 пении с обратным холодильником. После гидролиза углеводороды экстрагируют многост,пенчато циклогексаном.

Полученные циклогексановые фракции промывают дистиллированной водой и сушат. Остаток растворяют в небольшом количестве бензола или смеси хлороформа и н-гексана (1;1) и хроматографируют на колонке с окисью алюмнния с использованием в качестве элюента указанных растворителей, После хроматографии раствор упаривают до постоянного веса, по которому судят о количестве остаточных углеводородов.

Пример 1. В круглодонной колбе объемом 500 мл при помощи сильного встряхивания смешивают 20 r cyхих кормовых дрожжей, выращенных на нефтяном дистилляте и экстрактивно очищенных, 20 г гидроокиси калия, 20 мл дистиллированной воды и 200 мл этанола, значение рН среды 12. Полученную смесь кипятят 3 ч с обратным холодильником. После гидролиза добавляют 100 мл дистиллированной воды и многоступенчато экстрагируют, 200 мл циклогексана. Циклогексановые фракции промывают дистиллированной водой и сушат сульфатом натрия. Пос- 50 ле отделения сульфата натрия углеводородсодержащий циклогексан сушат в вакууме до остаточного объема 1 мл.

Остаток растворяют в небольшом количестве бензола и хроматографируют в стеклянной колонке длиной 20 см и диаметром 2 см с окисью алюминия первой ступени активности, Элюацию ведут 125 мл бензола. Прошедший колонку раствор упаривают до постоянного веса в вакууме с помощью очищенного и высушенного газового потока.

Результаты представлены в таблице, Пример 2. Способ осуществляют согласно примеру 1, но в качестве растворителя при хроматографии используют смесь, состоящую Из равных объемов хлороформа и н-гексана. Содержание углеводородов составляет 2,31 г/кг дрожжей. При анализе аналогичных проб известным методом получают суммарное количество ароматических углеводородов и н-алканов, равное 1,15 r/êã дрожжей, Таким образом, описанный способ позволяет выделять все виды углеводородов и, следовательно, более достоверно проводить их определение.

Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я

Способ количественного определения углеводородов в биомассе дрожжей, выращенных на углеводородах, предусматривающий щелочной гидролиз биомассы, экстракцию углеводородов, очистку полученного экстракта колоночной хроматографией на окиси алюминия с последующим установлением количества углеводородов, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью повышения достоверности определения, щелочной гидролиз ведут в течение

3 ч при кипении, экстракцию углеводородов осуществляют циклогексаном, в качестве элюента при колоночной хроматографии используют бензол или смесь хлороформа и н-гексана, взятых в соотношении 1:1, а установление количества углеводородов проводят гравиметрическим методом.

1390530

Содержание углеводородов по способу, г/кг дрожжей

Проба предлагаемому известному

Ароматические н-Алканы Ароматические углевоуглеводороды дороды и н-алканы (сумма) 1,68

0,47

0,13

0,60

15,90

0,51

3,00

3,51

Составитель Г ° Смирнова

Техред М.Ходанич Корректор А.Обручар

Редактор С.Пекарь

Заказ 1760/42

Тираж 520 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г, Ужгород, ул. Проектная, 4