Способ диагностики респираторных аллергозов

 

Изобретение относится к медицине, в частности к аллергологии. Целью является снижение травматичности и повышение точности. Для этого у больного натощак производят забор конденсата выдыхаемого воздуха, добавляют исследуемый аллерген, раствор томинола, смесь термостатируют 30 мин, добавляют перекись водорода и измеряют светосумму хемилюминесценции и при увеличении ее значения в 2 раза и более относительно контрольной пробы не содержащей аллергена, диагностируют респираторный аллергоз. Способ абсолютно безвреден для больного, что позволяет проводить тестирование в любой период заболевания. Точность диагностики составляет 98%. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (51) 4 G 01 N 33/497

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А ВТОВСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

8 г.

P) 1

l ! (21) 4339548/28-14 (22) 07.12.87 (46) 15.12.89, Бюл. 11 - 46 (71) Киевский медицинский институт им. акад. А.А. Богомольца (72) Н.И. Якуба, А.А. Андрущук, А,Н. Кадоненко, Л.И. Скрипка и F..Ô. Чернушенко (53) 616.07 (088.8) (56) Бережная Н.А., Бобкова А.Н,, Петровская И.А., Якут С.И. Аплергология, Киев: Наукова Думка, 1986, с. 1,69- 1.80. (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ РЕСПИРАТОРMIX АЛЛЕРГОЗОВ (57) Изобретение относится к медицине, в частности к аллергологии.

Изобретение относится к медицине и используется в частности, для диагностики респираторных аллергозов в любой период заболевания.

Целью изобретения является повышение точности и снижение травматичности способа за счет измерения хемилюминесценции конденсата выдыхаемого воздуха.

Способ осуществляется следующим образом.

Больному утром натощак, после тщательного полоскания рта физиологическим раствором, предлагают выдыхать воздух в конденсоприемник, содержащий камеру, охлажденную льдом, в течение

30 мин. Полученный конденсат разливают во флаконы по 0,5 мл. В контроль„„SU„„1529117 А 1

Цель — снижение травматичности и повышение точности. Для этого у больного натощак производят забор конденсата выдыхаемого воздуха, добавляют исследуемый аллерген, раствор томинола, смесь термостатируют 30 мин, добавляют перекись водорода и измеряют светосумму хемилюминесценции и при увеличении ее значения в 2 раза и более относительно контрольной пробы, не содержащей аллергена, диагностируют респираторный аллергоз, Способ абсолютно безвреден для больного, что позволяет проводить тестирование в любой период заболевания, Точность диагностики составляет 98%.

1 табл. ный флакон добавляют 0,05 мл физиологического раствора, в опытные— по 0,05 мл исследуемых аллергенов (растительного, бактериального, эпи-, дермального, грибкового и др. происхождения). Во все пробы вносят по

0,05 мл 2.8 ьМ ояствова люминола и, после 30-минутной инкубации в термостате — 0,1 мп 3%-ного раствора перекиси водорода. Проводят измерение светосуммы хемилюминесцентного свече" ния контрольных и опытных проб за

10 с с помощью АЗУ-39, и при увеличении числа импульсов в опытной пробе в 2 и более раз по сравнению с контрольной диагностируют специфический аллерген респираторного тракта, а следовательно, респираторный аллергоз.

1529117

Пример 1 ° Ребенок К., 4 лет, поступил с жалобами на приступы удушья, возникающие, в основном, внезапно, среди полного здоровья. В весенне-летний период приступы чаще возникают на улице, в осенне-зимний— чаще дома. Ребенок поступил в период обострения с выраженными признаKBMH 6PoHxHRJIbHoH oc K HH. Coc oH- 1P ние средней тяжести, Одышка смешанного (преимущественно зкспираторного) характера, частота дыхания - 38 в минуту. Кожные покровы бледные, периоральный цианоэ, синева под глазами.

При физикальном исследовании: коробочный оттенок перкуторного тона над всей поверхностью легких; дыхание жесткое, выдох удлинен, рассеянные сухие и разнокалиберные малозвучные влажные хрипы с двух сторон. Границы сердца в пределах возрастной нормы, тоны несколько приглушены, тахикардия (частота сердцебиения 120 в минуту).

Анализ крови: эритроциты 4,5 10 /л, гемоглобин 125 г/л; лейкоциты 6,4к10 /л; формула крови: з-17;

9 п-1, с-30; л-48, м-4, СОЭ-6 мм/ч, Подбор испытуемых аллергенов про- 30 изведен с учетом тщательного анализа анамнеза жизни ребенка. Было создано

18 проб (17 опытных и одна контрольная), В первую (контрольную) пробу добавляли 0,05 мл физиологического раствора, во 2-18-ю добавляют по

0,05 мл следующих исследуемых аллергенов: 2-я проба — домашняя пыль, 3-я — пыль подсолнуха, 4-я — пыль кукурузы, 5-я — пыль ольхи, 6-я пыль пырея, 7-я пыль костра, 8-я пыль лещины, 9 — я — пыль полыни, 10-я — пыль ржи, 11-я — пыль одуванчика, 12-я — пыль клена, 13-я — пыль дуба 14-я — пыль лебеды 15-я — ко1

45 шачья шерсть, 16-я — коровья шерсть, 17-я — кроличья шерсть, 18- я — собачья шерсть.

Для проведения диагностики респираторного аллергоэа согласно пред50 лагаемому способу у больного утром натощак после полоскания рта физиологическим раствором проведен забор конденсата респираторного тракта, который распределяли в контрольную пробу и в пробы, содержащие исследуемые аллергены по 0,5 мл .. Во все пробы вносили по 0,05 мл 2,8 мМ раствора люминола и, после инкубации в термостате в течение 30 мин вносили 0,1 мл 37,-ного раствора перекиси водорода, затем проводили измерение светосуммы хемилюминесценции за

10 с с помощью @ЭУ-39.

В таблице приведены полученные результаты исследований.

Пр оба, ф

Уровень хемилюминесУровень хемилюминесПроба, ф ценции эа

10 с (в импульсах фотоиов) ценции эа 1О с (в импульсах фототонов) 178249

125068

121301

287789

686852

110311

122168

124589

574677

)?3742

615761

258539

169327

198863

11

12

13

14

16

17

1

3

5

7

Как свидетельствуют приведенные данные, повышение хемилюминесцентного свечения в 2 и более раз по сравнению с контрольной пробой отмечалось в пробе Ф 3 (пыльца кукурузы), N - 6 (пыльца пырея), Ф 13 (пыль дуба) и М - 7 (пыль костра). Наиболее высокие значения хемилюминесценции отмечены в пробе 11 5 (пыль ольхи) и М - 14 (пыль лебеды).

Результаты полученных исследований позволили диагностировать респираторный аллергоэ — повышенную чувствительность к указанным растительным аллергенам и отсутствие сенсибилизации к другим испытуемым аллергенам (растительного и бактериального происхождения). Приступы удушья зимой были связаны с наличием печного отопления, в летнее время — с атопической сенсибилизацией к растительным (пыльцевым) аллергенам, Учитывая отсутствие обострения заболевания в настоящее время, для подтверждения диагностической значимости указанных аллергенов ребенку проведено кожное тестирование. При этом положительные реакции, проявляющиеся на коже в виде волдыря с ди5 15291 аметром 0,5 мм, окруженного гиперемией, получены с аллергенами, вызывающими усилие хемилюминесценции кон— денсата респираторного тракта в 2 и более раз (пыль подсолнуха, пыль пы5 рея, пыль костра, пыль дуба) . Кожная реакция на пыль ольхи и пыль лебеды была резко положительной 1,волдырь с гиперемией в диаметре более 10 мм), что подтверждает высокую точность предлагаемого способа. При использовании аллергенов, не вызывающих изменения вспышки хемилюминесценции, кожные реакции были отрицательными °

Провокационный ингаляционный тест был проведен с этиологически значимым аллергеном (пыльцой пырея) и этиологически незначимым аллергеном (пыльцой одуванчика), однако в обоих случаях получен положительный результат, проявляющийся бронхоспазwoM (коэффициент бронхоспазмы составлял соответственно 23 и 25,).

Пример 2. Ребенок С., 4 лет, поступила с диагнозом: бронхиальная астма, смешанная форма, тяжелое течение, приступный период. Выражена бледность, синева под глазами, периоральный цианоз, экспираторная одышка. В легких тимпанический оттенок перкуторного тона, дыхание ослаблено, выдох удлинен, множество рассеянных сухих и разнокалиберных незвучных влажных хрипов с двух сторон. Из анамнеза выяснено, что девочка болеет в течение 1,5 лет. Приступы удушья возникают как в связи с острыми респираторными заболеваниями, так и вне вирусно-бактериального поражения 40 респираторного тракта.

Было создано 29 проб. Кроме перечисленных в примере 1 проб с аллергенами растительного и эпидермального происхождения были созданы пробы с грибковыми аллергенами: Альтернария, Кладоспориум, Пенициллинум, Ботрис, Аспергилюс; а также бактериальными аллергенами: нейссерия катарралис, гемофилюс инфлюенце, гемолитического стрептококка, гемолитического стафилококка, бациллюс субтиллис, кишечной палочки.

17 6

Всего было собрано 30 мп конденсата, которые разделили на пробы по 0,5 мЛ и провели исследование согласно методике предлагаемого способа. В ре зультате проведенных исследований получены следующие данные: хемилюминесцентное свечение в контроле

223510 имп,/10 с; в пробе, содержащей аллерген нейссерия катарралис

506171 имп./10 с1 в пробе, содержащей аллерген рода Аспергилюс 455521 имп./10 с1 в пробе, содержащей пыльцу полыни 532900 имп,/10 с. Хемилюмицесцентное свечение в пробах с другими аллергенами существенно не отличалось от такового в контроле.

На основании усиления хемилюминесценции в пробах, содержащих аллергены нейссерия катарралис, грибы рода

Аспергилюс и пыльцу полыни, в 2 и более раз по сравнению с контролем установлена диагностическая значимость указанных аллергенов, Для подтверждения точности способа проведена алпергодиагностика известными методами. "читывая выраженное обострение, постановка ингаляционного провокационного теста и кожного тестирования была невозможной, Исследование проведено методами in

vitro. Получены следующие результаты, Положитепьные данные, свидетельствующие о сенсибилизации к нейссерия катарралис получены в реакции бластной трансформации (РБТЛ с фГА

21,5 .; РБТЛ с нейссерия катарралис

41%), в то время как при исследовании другими методами (ППН, реакция дегрануляции базофилов, торможение миграции лейкоцитов) специфическая сенсибилизация к этому алл ргену не обнаруживалась. Положительная реакция на пыльцу полыни (25 ) получена методом дегрануляции базофилов, в то время как проведение других проб

in vitro (РБТЛ, реакции торможения лейкоцитов, ППН) не дали положительных результатов, Гпецифическую сенсибилизацию к грибкам рода Аспергилюс удалось выявить только методом

ППН (0,24).

Конденсат из респираторного тракта больного был собран за 2 дня (до проведения исследования конденсат, собранный в первый день хранили в морозильном отделении холодильника), Выявленный спектр этиологически значимых бактериальнмх аллергенов у данного больного явился обоснованием для проведения антибактериально— го лечения, что позволило быстро ликвидировать явления обострения, 1529117

Гоставитель А. Козлов

Редактор Т. Парфенова Техред N.Äèäûê Корректор А. Обручар

Заказ 7634/39 Тираж 789 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж 35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина,101

Учитывая то, что грибки рода Аспергилюс преимущественно вегитируют s сырых помещениях, дано заключение о необходимости улучшения квартир5 ных условий.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет достоверно и объективно диагностировать респираторные аллергозы и специфичность аллергенов. Точность диагностики по предВ лагаемому способу составляет 98, Способ абсолютно безвреден для больного, что позволяет проводить тестирование в любой период заболевания.

Формулаизобретения

Способ диагностики респираторных аллергозов путем оценки аллергической реакции, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и снижения травматичности, производят сбор конденсата из выдыхаемого -. воздуха, добавляют к нему исследуе-1 мый аллерген, раствор люминола и раствор переКиси водорода, затем измеряют интенсивность хемилюминесценции полученного образца и при увеличении ее значения в 2 раза и более относительно контрольной пробы, диагностируют респираторный аллергоз, 1