Способ окраски тромбоцитов на мазках

 

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторным методам исследования. Целью изобретения является более четкая дифференцировка грануломера и гиаломера клеток. Эта цель достигается тем, что перед приготовлением мазков кровь смешивают с 4 - 5%-ным раствором цитрата натрия в соотношении 1:3, а в качестве красителя используют смесь, содержащую метиленовый голубой и углекислый натрий в следующих соотношениях, мас.%: метиленовый голубой 0,1 - 0,15

углекислый натрий 7,9 - 7,6

вода остальное, при этом PH красителя доводят до 11,4 - 11,8.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (19) (11) g:;- . ЯЗНЦ

5АТ ) Яа

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И (ЛНРЫТИЙМ

APH ГКНТ СССР

1 (21) 4274188/28-14 (22) 02.07,87 (46) 30.12.89. Бюл. К- 48 (71) Научно-исследовательский кожновенерологический институт (72) Л.Н.Тимофеева, В Н.Кемайкина, Э.Б.Кешилева, Г.Д.Волох и П.И.Волкова (53) 616-0,89. 9 (088.8) (56) Альтгауэен А.Я. Лабораторные клинические исследования. М.: Медгиз, 1956, с.100-101. (54) СПОСОБ ОКРАСКИ ТРОИБОЦИТОВ НА

ИАЗКАХ (57) Изобретение относится к медициИзобретение относится к медицине,, а именно к лабораторным методам исследов ан ия .

Цель изобретения — получение более четкой дифференцировки грануломера и гиаломера в тромбоцитах. Особенно важна такая дифференцировка структур клетки у больных псориазом, так как у этих больных отмечается изменение способности тромбоцитов окрашиваться известными методами.

Способ осуществляют следующим образом °

Иэ пальца обследуемого берут

0,75 мл крови в пробирку, содержащую

0,25 мл 5Х-ного раствора цитрата натрия.

Готовят тонкие мазки, фиксируют любым способом (метиленовым спиртом, сме сью Никифорова, спирт-ацетона. и т.д,) .

На фиксированный мазок наносят.1,0 мл

0,1%-ного раствора метиленового голубого, приготовленного на 7,5Х-ном растворе углекислого натрия, и красят (11 4 С 01 N 1/28, А 61 В 10/00 не, а именно к лабораторным методам исследования. Белью изобретения является более четкая дифференцировка грануломе ра и г иаломе ра кле ток . Эта цель достигается тем, что перед приготовлением мазков кровь смешивают с

4-5%-ным раствором цитрата натрия в соотношении 1:3, а в качестве красителя используют смесь, содержащую метиленовый голубой и углекислый нат; рий в следующих соотношениях, мас.Х: метиленовый голубой О, 1-0,15; углекислый натрий 7,9-7,6; вода остальное, при этом рН красителя доводят до

11,4-11,8, 2 табл. в течение 1-2 мин, затем, не сливая .краски, на мазок наносят смесь красок

Аэур П и Эозина К на !5-20 мин. Приготовление смеси проводят следующим образом. К 120 мл нейтральной (рН 7,2) дистиллированной воды прибавляют

9,0 мл 0,1%-ного раствора Аэура П и

8,0 мл 0,1%-ного раствора Эоэина К.

0,1Х-ный раствор Азура П и 0,1Х-ный раствор Эозина К готовят на кипяшей дис тиллиров анной воде (рН 7, 2), Затем мазки промывают водопроводной водой, Тромбоциты в мазках, окрашенных таким образом, расположены по одиночке или группами темно-азуро-синего цвета, имеют то невполне округлую, то вытянутую или звездчатую дюрму, одно родную ипи зернистую структуру. В них хорошо видна зернистая часть (грануломер) и пе рифе рическая гомо генная часть (глаломер) . Грануломер состоит иэ аэурофильных зерен, в гиаломере хорошо различаются вакуоли и псевдо1532548

Таблица

Колич ес т во к ле ток

Показатель после ле- 30 чения до лечения

Количе ство тромбо цитов, 10 л

Из них форм, 7 зрелых юных

250

7 старых форм раздражения

Тромбоциты с хорошо различимым грануломером и гиаломе-, Ж

В данном примере предлагаемый споч соб окраски позволяет выявить значительно большее количество тромбоцитов у больного псориазом, и, особенно, после лечения. Способ позволяет .также выявить большее количество форм раздражения.. Как видно из данных табл. 1 ПУЗА-терапия у больного псо- 55 риазом значительно изменяет способ— ность тромбоцитов окрашиваться по известному способу и не влияет на качеподии. Хо рошо идентифицируются при такой окраске и другие форменные элементы крови, Н р и м е р 1, Обследование при профосмотре. Результаты подсчета тромбоцитов следующие. количество тромбоцитов 310 10 /л; из них форм, 9

7.: зрелых 87; юных 5; старых 5; форм раздражения 3; тромбоцитов с хорошо различимым грануломером и гиаломером

99, 57..

У здорового человека абсолютное: количество тромбопитов, подсчитанных известным и предлагаемым способом., мало различается, однако предлагаемый способ значительно облегчает подсчет тромбопитов .

Пример 2. Больной поступил в клинику с диагнозом псориаз рас- 20 пространенный, прогрессирующая стадия. Больному была проведена ПУВА-терапия с псобераном F< - 1 О. До и после лечения проведено определение тромбоцитов, данные представлены в табл, Таблица 2

Количество клеток

Показатели до лече- после ления чения

Количество тромбоцитов, 1 О /л

Из них форм, Х з релых юных

300

320

4

3 старых форм раздражения

Тромбоциты с хорошо различимым грануломером и гиаломером, X

100

100

У больного фурункулезом количество тромбоцитов, определенное известным способом и предлагаемым, мало различалось, однако по предлагаемому способу 10ОЕ тромбоцитов были хорошо окрашены„что значительно облегчает и ускоряет подсчет мазка. Пенициллино- и витаминотерапия практически не отразились на способности тромбоцитов окрашиваться по известному и предлагаемому способам.

Следовательно, предлагаемый способ окраски тромбоцитов в отличие от прототипа обеспечивает высокую стабильность окраски тромбоцитов за счет выявления грануломера и гиаломера, в том числе и у больных псориазом после

ПУВА-терапии в сочетании с фотосенсибилизаторами, что значительно облегчает точный подсчет тромбоцитов в мазке с учетом их форм, а также имеет большое значение при контроле лечения больных псориазом и профилактике ослош ений, вызываемых лечением, Формула изобретения

Способ окраски тромбоцитов на мазках.путем их инкубации с красителем ство окраски по предлагаемому способу.

Пример 3. Больной поступил в клинику с диагнозом. фурункулез, Был проведен курс пенициллино- и витаминотерапии. Данные по определению тромбоцитов до и после лечения приведены в табл. 2.

1532548

Составитель А.Стебаева

Редактор И.Киштулинец Техред M.Xîäàíè÷ Корректор В Кабаций

Заказ 8066/35 Тираж 789 Подписное сс

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытням при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина,101 с последующей докраской в растворе

Акр-Эозина, отличающийся тем, что, с целью более четкой дифференцировки грануломера и гиаломера клеток, перед приготовлением мазков кровь смешивают с 4-57.-ным раствором цитрата натрия в соотношении 1:3, а в качестве красителя используют смесь, содержащую метиленовый голубой и уг-:, лекислый натрий в следующих соотношениях, мас.Х:

Метиленовый голубой О,1 — О, 15

Углекислый натрия 7 4 - 7,6

Вода Остальное при этом рН красителя доводят до

11,4 — 11,8.