Патент ссср 163188

 

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

OII N CAB N E

ИЗОБРЕТЕНИ.Н

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

go 1ЩО8

Класс

12ч, 6о1

531, 1в;

МПК

С 07b

А 23j

Заявлено 16.V 1.1961 (№ 734432!28-13)

Опубликовано 1964. Бюллетень № 12

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ

КОМИТЕТ ПО ДЕЛАМ

ИЗОВРЕТЕНИИ е ОТКРВ1ТИИ

СССР

УДК

Подписная г р упт а Ж 4б

С. Д. Шестаков и М. Д. Мулярчук

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АМИНОКИСЛОТ ИЗ БЕЛКОВОГО

СЫРЬЯ

Известен способ получения аминокислот из белкового сырья, например кератинсодержащего, путем очистки его от механических примесей, мойки, измельчения, кислотного гидролиза, фильтрации, осветлвния, упаривания, кристаллизации хлористоводородной соли глютаминовой кислоты с последующим ее отделением фильтрацией.

По предлагаемому способу обеспечивается извлечение ббльшего числа отдельных аминокислот и повышается их выход.

Особенностью этого способа является то, что гидрол из исходного сырья производят при температуре 115 — 120 С,под избыточным давлением в реакторе 1,5 — 2 атл1 в течение

7 — 10 час и гидролизат обезжиривают, адругие аминокислоты выделяют из оставшегося после выделения глютаминовой кислоты раствора известными способами в следующей последовательности: вначале тирозин, затем цистин, аргинин, гистидин, лизин, фенилаланин, лейцин, изолейцин, при этом остаток раствора высушивают до получения твердого вещества с последующим его использованием в качестве комплекса невыделенных аминокислот, Способ может быть осуществлен по следующей схеме, Белковое сырье, например рога, копыта, щетина, фибрин и другие, очищают на барабано-встряхивающей машине от грязи и механических примесей, затем промывают, измельчают на дробилке, загружают в стальной эмалированный реактор. Для проведения кислотного гпдролиза берут 750 кг сырья, 750 кг водопроводной воды и 625 и1 кс нцентрировапной техпичес:oi серной кислоты. Гндролиз проводят при температуре

115 †1"С около десяти часов ирн непрерывном перемешнвании и давлении в реакторе

l,5 — 2 атл .. Полученный гндролнзат охла>кдают, после охла>кде|шя до температуры 15—

20 C фильтруют на путч-фильтре для отделения жира и жирных кислот п подают в реактор> куда для очистки загру>кают актнв111>ованный уголь в количестве 2,5"„, к исходному сырью. Очистку продолжают в течение одного часа при температуре 60 — 70 С» гпдролнзат фильтруют на втором путч-фильтре, после чего упаривают до уд. в. 1,28.

К упаренному гидролизату добавляют 25",,, 1по объему) коцентрнрованной химически чистой кислоты и в течение 24 — 48 час проводят кристаллизацию хлоргидрата глютаминовой кислоты, которую затем отделяют от маточного раствора на гумированной центрифуге.

Осадок глютаминовой кислоты растворяют при температуре 70 — 80 С в дистиллированной воде, к раствору добавляют 2,, (и весу осадка) активированного угля и перемешивают 30 .иин. После этого смесь фильтруют на нутч-фильтре, снабженном бумажным пли асбестовым фильтру1ощим слоем. Прозрачный с зеленоватым оттенком раствор подают в реактор для выделения глютаминовой кис№ 163188 лоты, в который добавляют кальцинированпую соду до рН 3,2, Осадок глютаминовой кислоты отфильтровывают, промывают ледяной дистиллированной водой и этиловым спиртом, после чего высушивают.

Маточный раствор после выделения хлоргидрата глютаминовой кислоты упаривают под вакуумом на 1,4 объема для удаления соляной кислоты, добавляют к нему воду (1: 1), нагревают до 70 — 80 С и вносят активированный уголь в количестве 2,5), (по объему). Смесь в течение 30 мин перемешивают и затем фильтруют на нутч-фильтре. Очищенный фильтрат нейтрализуют 4О -ным раствором едкого патра до рН 7,5 — 8 и оставляют при температуре 15 — 20 С на 2 час для осаждения тирозина, кристаллы тирозина промывают холодной водой, этиловым спиртом, высушивают при 60 — 65 С.

Освобожденный от тирозина маточный раствор подкисляют уксусной кислотой и оставляют на 12 час для осаждения цистина.

Маточный раствор после выделения глютаминовой кислоты, тирозина и цистина подкисляют соляной кислотой до рН 2 и добавляют флавианат из расчета 20 г на 1 л раствора, а затем смесь тщательно перемешивают в течение одного часа. Образовавшиеся флавианаты аргинина, гистидина, лизина и примесей некоторых других аминокислот выпадают в осадок. Осадок отфильтровывают и промывают дистиллированной водой до отрицательной реакции на хлор. Флавианат аргинина остается на фильтре, а флавианаты гистидина, лизина и других аминокислот растворяются и переходят в фильтрат. Осадок флавианата аргинина смешивают с концентрированной соляной кислотой (1:2), в результате чего образуется солянокислый аргинин и флавиановая кислота, которая выпадает в осадок и затем отфильтровывается. Раствор солянокислого аргинина упаривают до густой сиропообразной массы, растворяют в кипящей дистиллированной воде, выдерживают в течение часа и очищают активированным углем. Очищенный раствор хлоргидрата пропускают через аниониты (ЭДЭ-10П) для освобождения от ионов хлора, Раствор аргинина упаривают до сиропообразного состояния и осаждают аргинин этиловым спиртом в количестве 5 — 8 частей по объему. Осадок аргинина отфильтровывают и высушивают.

Фильтрат, содержащий флавианаты лизина, гистидина и других аминокислот упаривают под вакуумом до сухого остатка, который затем растворяют в концентрированной соляной кислоте (1: 2). При этом образуются хлоргидраты гистидина и лизина, а также флавиановая кислота, которая выпадает в осадок и отфильтровывается. Фильтрат упаривают, растворяют в кипящей дистиллированной воде, сставляют на 1 час, а затем очищают активированным углем. После пропуска через аниониты (ЭДЭ-10П) полученный раствор с рН

4 — 5, содержащий лизин и гистидин и другие аминокислоты, пропускают через ионообменную колонку с КБ-2 или КВ-4П-2. Лизин и гистидин осаждаются в колонке, а остальные аминокислоты проходят через нее. Гистидин десорбируют слабым раствором соляной кислоты, а лизин — 5О,-ным раствором аммиака. Полученные растворы выпаривают до полной кристаллизации лизина и гистидина.

После выделения из маточного раствора глютами новой кислоты, тирозина, цистина, а затем аргинина, гистидина и лизина, раствор пропускают через колонку, заполненную активированным углем, предварительно обработанным сероводородом. При этом фенилаланин адсорбируется на угле. Колонку промывают дистиллированной водой. Десорбцию адсорби ров а нного фенил анин а производят пропусканием через колонку нормального раствора соляной кислоты. Раствор фенилаланина освобождают от избытка соляной кислоты упариванием, в процессе которого фенилаланин кристаллизуется.

В кипящий маточный раствор после последовательного выделения глютаминовой кислоты, тирозина, цистина, аргининина, гистидина, лизина и фенилаланина добавляют углекислую медь до прекращения пенообразования. Затем смесь упаривают досуха и осадок экстрагируют несколько раз водой, при этом лейцин и изолейцин остаются в нерастворимом состоянии в виде медных солей.

Остаток медных солей растворяют в нормальной соляной кислоте, раствор очищают активированным углем и обрабатывают в течение 7 — 8 час сероводородом до полного осаждения меди, которую отфильтровывают.

Избыток сероводорода удаляют из раствора продуванием через него воздуха. Раствор упаривают и получают кристаллические лейцин и изолейцин. Оставшийся гидролизат (маточный раствор) направляют в вакум-вальцевую сушилку, высушенный твердый остаток представляет собой групповую смесь невыделенных аминокислот (комплексамин).

Предмет изобретения

Способ получения аминокислот из белкового сырья, например кератинсодержащего, путем очистки его от механических примесей, мойки, измельчения, кислотного гидролиза, фильтрации, осветления, упаривания, кристаллизации хлористоводородной соли глютаминовой кислоты с последующим ее отделением фильтрацией; отличающийся тем, № 163188

Составитель В. Д. Лопатенкова

Редактор Л. Герасимова Техред А. Кудрявицкая Корректор Ю. М. Федулова

Поди. к печ. 16>VI — 64 г. Формат бум. 60х90 /s Объем 0.3 изд. л, Заказ l368/10 Тираж 550 Цена 5 коп.

ЦНИИПИ Государственного комитета по делам изобретений и открытий СССР

Москва, Центр, пр. Серова, д. 4

Типография, пр. Сапунова, 2 что, с целью извлечения из гидролизата ббльшего числа отдельных аминокислот и повышения их выхода, гидролиз исходного сырья производят при температуре 115 — 120 С под избыточным давлением в реакторе 1,5 — 2 атл1 в течение 7 — 10 час и гидролизат обезжиривают, а другие аминокислоты выделяют из оставшегося после выделения глютаминовой кислоты раствора известными способами в следующей последовательности: вначале тирозин, затем цистин, аргинин, гистидин, лизин, фенилаланин, лейцин, изолейцин, при этом остаток раствора высушивают до получения твердого вещества с последующим его использованием в качестве комплекса невыделенных аминокислот.