Способ амперометрического определени5^'«=-—-•->&-.-—- ^

 

Союз Советских

Социалистиыеских

Республик

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

I6797l

Зависимое от авт. свидетельства №

Кл. 30|т, 14

Заявлено 11,Х11.1963 (№ 869949/31-16) с присоединением заявки №

Приоритет

Опубликовано 05.11.1965. Бюллетень ¹ 3

Дата опубликования описания 2.111,1965

Государственный комитет по делам изобретений и открытий СССР

МПК А 61Ь

УДК 612.129 (088.8) Авторы изс:бретения

Г. В. Селюжицкий, И. Е, Шварцман и А. В. Смольский;.

Заявитель

СПОСОБ АМПЕРОМЕТРИЧЕСКОГО ОПРЕДЕЛЕНИЖ—

СУЛЬФГИДРИЛЪНЫХ ГРУПП В СЪ|ВОРОТКЕ И ЦЕЛЬНОЙ

КРОВИ и Н. 100

N.m раствора нитрата серебра, 10 где К вЂ” количество лл;

m — количество

N — отклонение и — отклонение

15 субстрата,,ил; стрелки вправо, деления; стрелки влево, деления.

11 0,5 ° 100 65 4

84 0,1

Подписная группа JN 189

Известные способы амперометрического определения сульфгидрильных групп в сыворотке и цельной крови в присутствии буферного раствора NH4OH и NH4NOg с помощью раствора азотнокислого серебра, например титрованием, весьма трудоемки и требуют значительной затраты времени.

Предложен способ, по которому в буферный раствор предварительно вносят раствор азотнокислого серебра, измеряют диффузионный ток, затем добавляют исследуемый субстрат, вновь измеряют диффузионный ток и определяют концентрацию сульфгидрильных групп по разности потенциалов.

Такой анализ позволяет затрачивать на одно определение не более 5 — 6 лин.

Для определения концентрации сульфгидрильных групп в 25 лл буферной смеси, содержащей 0,01 люль аммиака и 0,08 л1оль нитрата аммония, вносят некоторое количество (0,001 М) раствора нитрата серебра. В силу возникновения диффузионного тока стрелка микроамперметра отклоняется вправо; при этом количество раствора нитрата серебра не должно быть таким, чтобы стрелка отклонялась за пределы шкалы. При добавлении исследуемого раствора происходит уменьшение диффузионного тока за счет связывания ионов серебра сульфгидрильными группами, и стрелка микроамперметра отклоняется на определенное число делений влево. Учитывая, что

1 л4л 0,001М раствора нитрата серебра эквивалентен 1 М сульфгидрильных групп, содержание которых обычно относят к 100 лл субстра

5 та, расчет производят по формуле

Пример. 0,1 лы цельной крови гемолизируют в бидистиллированной воде при разведении 1: 20, берут 0,1 лы гемолизата и вносят в 25 лл буферной смеси, в которую предва20 рительно добавляют 0,5 лл 0.001 М раствора нитрата серебра. Отклонение стрелки микроамперметра вправо при введении нитрата серебра составляет 84 деления, а отклонение влево при введении гемолизата крови — 11 де25 лений. Концентрация сульфгидрильных групп (с учетом разбавления) в миллимолях на

100 лл сыворотки крови составляет

167971

Предмет изобретения

Составитель В. А. Таратута

Редактор П. Вербова Текред Л. К. Ткаченко

Корректор Л. В. Тюниева

Заказ 65/15 Тираж 975 Формат бум. 60+90i/в Объем О,l изд. л. Цена 5 коп.

ЦНИИПИ Государственного комитета по делам изобретений и открытий СССР

Москва, Центр, пр. Серова, д, 4

Типография, пр. Сапунова, 2

Способ амперометрического определения сульфгидрильных групп в сыворотке и цельной крови в присутствии буферного раствора

NH„;OH и NHgNO) с помощью раствора

АдМОа отличающийся тем, что, с целью ускорения и упрощения исследования, в буферный раствор предварительно вносят раствор

AgNO>, измеряют диффузионный ток, затем добавляют исследуемый субстрат, вновь измеряют диффузионный ток и вычисляют содержание сульфгидрильных групп по разности потенциалов.