Патент ссср 178052

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

)78052

Союз Соеетскиа

Социалистических

Республик

Зависимое от авт. свидетельства ¹

Кл. 30h, 14

Заявлено 16.Х1,1962 (№ 803060/31-16) с присоединением заявки №

МПК А 61b

Комитет по делам изобретений и открытий при Сосете Министров

СССР

Приоритет

Опубликовано 08.1.1966. Бюллетень № 2

Дата опубликования описания 24.II,1966

УДК 616 — 097:576.8.097 (088.8) СПОСОБ ПОСТАНОВКИ РЕАКЦИИ АГЛОМЕРАЦИИ

Известны способы постановки реакции агломерации в пробирках путем взаимодействия антител и антигенов с предварительной адсорбцией одного из ингредиентов реакции на активированном угле и отмывкой в буферном физиологическом растворе. Указанные способы недостаточно чувствительны.

С целью повышения точности индикации вирусов, бактерий, бутулинового токсина и диагностики вызываемых ими заболеьаний, насыщение угля антигенами или антителами предлагается производить при рН около 6,0.

При отмывке и суспензировании насыщенного адсорбента в буферный физиологический раствор добавляют нормальную кроличью сыворотку.

Насьпцение угля антителами или антигенами производят однократно в условиях избытка адсорбируемого вещества.

Для осуществления реакции агломерации к

0,5 лл исследуемой жидкости, в которой предварительно с помощью физиологического бррсрного раствора устанавливают рН 6,4 и добавляют 4 /р нормальной кроличьей сыворотки, добавляют 0,05 игл приготовленного угольного гомогената, встряхивают и оставляют на 1 час при 37"-С и на 12 — 14 час при комнатной температуре. После оседания угля в контрольных пробирках в виде плотного диска или колечка кгохкно произвести учет результатов. В положительных случаях уголь распределяется по всему дну в виде рыхлого осадка, а в отрицательных oli собирается в самой нижней части дна пробирки в виде диска или колечка. Реакцию осуществляют в хорошо промытых серологических пробирках при последовательном двойном разведении исследуемого субстрата. При этом можно не только обнаружить искомый агент, но и определить его примерную концентрацию. В качестве контрольного используют физиологический буферный раствор, содержащий 4% нормальной кроличьей сыворотки.

Для приготовления активировашгого угля кусочки сосновой древесины высушивают при

70 — 80 С до постоянного веса, обрабатывают

30%-ным раствором КОН при 100 С в течение 2 час и сжигают в тнгельной или вакуумной печи при 420 — 450 С в течение 2 час. Пос20 ле охлаждения печи уголь выгружают, отмывают от щелочи, сушат до постоянного веса при 35 — 37 С н измельчают в шаровой мельнице.

Пример. К 10 иг актнвнрованного угля добавляют 2 лог антитоксической противоботул гипческой сыворотки, разбавленной в отношении 1: 10 фосфатным буферным физиологическим раствором (рН 6). Смесь гомогенизпруют и ост",âëÿþò на 1 час при комнатной

30 температуре. После этого уголь отмывают

17о052

Предмет изобретения

Составитель В. А. Таратута

Редактор А. И. Пименова Текред T. П. Курилко Коррек горы: В. П. Федулова и T. В. Муллина

Заказ 211/II Тираж 500 Формат бум. 60><90 /ц Объем 0,1 изд. л, Подписное

ITIIl4IIII11 Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССЕ

Москва, Центр, пр. Серова, д. 4

Типография, пр. Сагунсва, д. 2

2 раза в физиологическом буферном фоофатном растворе и 1 раз в таком же растворе, но с добавлением 1% нормальной кроличьей сыворотки. Отмытый уголь суспензируют в 5 мл буферного фосфатного физиологического раствора, содержащего 1% нормальной кроличьей сыворотки и хранят в холодильнике не более недели.

Предлагаемый способ достаточно прост, обладает высокой чувствительностью и может быть использован для определения ботулинового токсина в полевых условиях, для определения природы заболевания по нарастанию титра антител (особенно при вирусных болезнях), а также для проверки качества бактериальных препаратов, в частности имунных сывороток.

Способ постановки реакции агломерации в пробирках путем взаимодействия антител и

5 антигенов с предварительной адсорбцией одного из ингредиентов реакции на активированном угле и отмывкой в буферном физиологическом растворе, отличающийся тем, что, с целью повышения точности индикации виру10 сов, бактерий, ботулинового токсина и диагностики вызываемых ими заболеваний, насыщение угля антигенами или антителами проводят при рН около б,О; при отмывке и суспензировании насыщенного адсорбента в буфер15 пый физиологический раствор добавляют нормальную кроличью сыворотку.