Способ получения сорбента для гемосорбции

 

Изобретение относится к получению сорбентов с полимерными покрытиями и позволяет увеличить эффективность гемосорбции. Толщина фибринной пленки V,покрывающей 1 см угля, может изменяться варьированием концентрации тромбина 1- 3 мг/мл, фибриногена 35-45 мг/мл без образования конгломератов при такой последовательности введения компонентов в процессе образования фибринной пленки: угольные гранулы, подготовленные к покрытию, центрифугируют до полного удаления фаз раствора, обрабатывают раствором тромбина концентрацией 1-3 мг/мл в течение 20-30 мин, удаляют избыток тромбина промывкой физраствором, повторно центрифугируют, затем обрабатывают раствором фибриногена концентрацией 35-45 мг/мл в течение 5-10 мин t/t полученный сорбент с фибринной пленкой промывают от избытка фибриногена физиологическим раствором. 2 табл.сл

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (51)5. В 01 J .20/22

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ логическим раствором, 2 табл. (21) 4496333/26 (22) 06.06.88 (46) 30.01.92. Бюл. М 4 (71) Таджикский государственный университет им. Ленина (72) З,У.Ниязова, Л.К.Гончарова, О.Г.Новикова, А.А.Дмитриев и П.M.Àøèðîâ (53) 661.183.2(088,8) (56) Синтетические полимеры медицинского назначения. Теэ. докладов Vll Всесоюэн. симпозиума. Минск, 1985, с. 33. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СОРБЕНТА ДЛЯ

ГЕМОСОРБЦИИ (57) Изобретение относится к получению сорбентов с полимерными покрытиями и позволяет увеличить эффективность гемосорбции. Толщина фибринной пленки V, Изобретение относится к области получения сорбентов с полимерными покрытиями и может быть использовано в медицинской практике, а именно при очистке крови от токсинов.

Целью изобретения является повышение эффективности процесса гемосорбции эа счет предотвращения образованя конгломератов гранул сорбента.

Предотвращение образования конгломератов угольных гранул достигается обработкой гранул раствором тромбина с концентрацией 1-3 мг/мл, удалением неабсорбированного тромбина, последующей обработкой гранул раствором фибриногена с концентрацией 35-45 мг/мл с последующим удалением остатка непрореагировавшего тромбина. Ж,» 1708400 A l покрывающей 1 см угля, может изменяться варьированием концентрации тромбина 13 мг!мл, фибриногена 35-45 мг/мл без образования конгломератов при такой последовательности введения компонентов в процессе образования фибринной пленки: угольные гранулы, подготовленные к покрытию, центрифугируют до полного удаления фаз раствора, обрабатывают раствором тромбина концентрацией 1-3 мг/мл в течение 20-30 мин, удаляют избыток тромбина промывкой физраствором, повторно центрифугируют, затем обрабатывают раствором фибриногена концентрацией

35-45 мгlмл в течение 5-10 мин и полученный сорбент с фибринной пленкой промывают от избытка фибриногена фиэиоПример. В качестве исходного сорбента для покрытия фибринной пленкой берут флоконизированный гемосорбент

СКН-1К крупнопористый. Размер сферических гранул 0,5-1 мм, Прочность гемосор- © бента не менее 80%, обьем созобционных 4 ь пор (по бензолу) не менее 0,9 см /г. О

Флакон с углем откупоривают и отбира- l Q ют гемосорбент из физиологического рас-,) твора, переносят гранулы B пластиковую пробирку с перфорированным дном до мет-

Ъ ки, соответствующей объему 1 см, дают физиологическому раствору стечь и в течение

1 мин центрифугируют гранулы.с пластиковой пробиркой для более полного удаления остатков физиологического раствора. Зтот т остаточный объем физиологического раствора измерен и составляет 0,4 мл. К подготовленным таким образом угольным

1708400

55 гранулам приливают 0,5 мл раствора тромбина соответствующей концентрации (т.е, объем немного превышает 0,4 мл). Раствор трамбина выдерживают с угольными гранулами в течение 20-30 мин, За зто время практически полностью осуществляется физическая сорбция тромбинэ в порах гранул.

Затем угольные гранулы промывают от не сорбированного тромбина пятнадцатикратным по сравнению с объемом угля объемом физиологического раствора. Гранулы повторно центрифугируют в течение 1 мин для удалению остатков физиологического раствора, чтобы не разбавлять концентрацию фибриногена в процессе следующей за центрифугированием стадией сорбции фибриногена.

Исходную концентрацию раствора фибриногена до сорбции готовят растворением навески . фибриногена в соответствующем объеме физиологического раствора. В данном случае обьем раствора фибриногена составляет 0,4 мл на каждый 1 см угля СКН 1К, т.е, минимальный объем, необходимый только для смачивания пор угольных гранул.

Угольные гранулы выдерживают в растворе фибриногена в течение 5-10 мин, 3а зто время в зависимости от концентрации фибриногена сорбируется и одновременно полимеризуется 65-90% фибриногена, Полученный гемосорбент, покрытый фибринной пленкой, промывают вновь пятнадцэтикратным объемом по сравнению с объемом угля физиологического раствора, в который переходит несорбированный фибриноген. Объем промывочных растворов учитывают. Промывку ведут до полного отсутствия в промывочных растворах следов несорбированного белка, Концентрацию несорбированного фибриногена определяют измерением оптической плотности промывочных растворов при длине волны. 280 нм на спектрофотометре СФ-26.

С помощью зависимости оптической плотности от концентрации фибриногена (калибровочному графику) находят концентрацию несорбированного фибриногена. Зная объем промывочных растворов и концентрацию фибриногена, определяют количество фибриногена в сливе после сорбции. По разнице количества фибриногена на входе в уголь(0,4 мл) и в сливе определяют величину сорбции фибриногена, Результаты исследований влияния концентраций растворов тромбина и фибриногена, а также последовательности сорбции

40 тромбины (Т) — фибриногены (Ф) или Ф-Т сведены в табл.1.

Из табл.1 следует, что сорбент, полученный с помощью обработки тромбин (1-3 мгlмл) — фибриноген (35-45 мг/мл), обладают оптимальной для гемосорбции толщиной фибриновой пленки, предотвращающей слипание гранул.

Повышение эффективности гемосорбции. Сорбенты СКН-1К промышленного изготовления СКН-1К, покрытые фибринной пленкой по схеме Ф-Т из растворов фибриногена 35 и 45 мг/мл, а также покрытые фибринной пленкой по схеме T-Ф из растворов фибриногена 35 и 45 мг/мл и концентрацией тромбина 2 мг/мл, испытаны в лабораторных условиях на сорбцию средних молекул с помощью маркера средних молекул Р12 (м.в. 1350).

Для этого по 3 мл витамина Вд, содержащих 600 мкг витамина, инкубируют в течение 1 ч с 1 см указанных сорбентов и з периодически встряхивают, После инкубации из флакона отбирают надосэдочную жидкость и спектрофотометрируют для определения оптической плотности несорбированного витамина Ви на спектрофотометре СФ-26 при длине волны 361 нм.

С помощью калибровочного графика зависимости оптической плотности стандартного раствора витамина В ц от его концентрации

on ределяют содержание несорбированного витамина В12. По разности содержания витамина до инкубации с сорбентами и после находят величину сорбции. Результаты испытаний приведены в табл.2.

Из данных табл.2 видно, что сообция, витамина В12 на сорбенте, полученного по схеме Т-Ф, на 3-9/, больше, чем нэ угле, покрытом фибриновой пленкой по схеме Ф-Т, Формула изобретения

Способ получения сорбента для гемосорбции, включающий обработку угольных гранул растворами тромбина и фибриногена, отл и ч а ю щи йс я тем, что, с целью повышения эффективности процесса гемосорбции за счет предотвращения образования конгломератов гранул сорбента, угольные гранулы обрабатывают раствором тромбина с концентрацией 1-3 мг/мл, затем удаляют неабсорбированный тромбин и обрабатывают раствором фибриногена с концентрацией 35-45 мг/мл с последующим удалением остатка непрореэгировавшего фибриногена.

1708400

Таблица!

Сорбцмя фибрнногена, на 1 снт угля СКИ-1К ло схеме тронбин-фмбриюген лри концентрации трснбнма, мг/мл

Исходная концемтрация фиб риногена до сорбцин фибрммоген тронЬе (лрототил) 0,25

0,5

1,0

3,0

2,0

О от исходи °

kl а от нг 2 От нг ц от исход. исход. исходи. нг/нл е пере с чете на 9, 0,4 нл

О от нг О от исход. исход нг

40

Таблица2

Сорбция витамина В1

° й

Сорбент

Содержание фибриногена в фибринной пленке,мг/смз сорбента

I мкг/смз Ф от исходсорбента ного кол-ва

СКН-1К промышленной

76+1

Ж5 5

СКН-1К, покрытый фибринной пленко" по схеме

Ф-Т " из растворфъфибрино гена:

35 мг/мл

83+1

216Щ

5,5

7,0

115 мг/мл (пр83тотип) 77+1

СКН-1К, покрытый фибринной пленкой по схеме

Т-Ф2 иэ растворов фибриногена:

86+1

515+5

515+5

1215 . 15,5

35 мгlмл

115 мг/мл (предлагаемый сорбент) .

86+1

Составитель С.Орлова

Редактор О.Спесивых Техред М.Моргентал Корректор А.Осауленко

Заказ 381 Тираж Подписное

8НИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, /К-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, yn,Гагарина, 101

14 49

16. 5,6

18 6,2

20 7,0

22 7,6

35 5,6

35 &,4

35 7,2

35 8,0

35 8,8

9,1 65

10,4 65

11,7 65

13 65

14>3 65

12,6 90

14,0 90

16,0 90

18,0:-, 90

Не крит- 90

pojlH p, слмлание гранул

12i3

13 9

15 ° 8

17,5

Слилание гранул

87,5

87 >5

87,5

87,5

87,5

5,6 40

6,4 40

7,2 40

8,0 40

8,8 40