1,3-динитроглицериновые эфиры простагландина е @ или 9- оксима простагландина е @ , обладающие вазодилататорной и антиагрегационной активностями

 

Использование: в качестве сосудорасширяющего средства, обладающего также антиэгрегационным действием на тромбоциты . Сущность: продукт 1,3-динитроглицериновые эфиры простагландина Ei или 9-оксима поостагландина EI общей формулы О и Г-ОМО, oj-н ON07 ОН ОН где А - 0 или NOH; выход 57.4 и 11,3%. Реагент 1: простагландин Ei или оксим простагландина Ei. Реагент2: 1,3-динитрат глицерина . Условия реакции в среде абсолютного ацетона в присутствии п-толуолсульфохлорида и триэтиламина 2 табл. Ё

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕ СКИХ

РГСПУБЛИК (я ts С 07 С 401/00

ГОСУДАРСТВЕНЮЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛ ЬСТВУ (21) 4902827/04 (22) 15.01.91 (46) 07.07.93. Бюл, N. 25 (71) Институт биоорганической химии им.

M.Ì.Øåìÿêèíà. Институт физиологически актив ых веществ АН СССР, Всесоюзный гематологический научный центр и Институт химии АН Эстонской Республики (72) И.B.Ñåðêîâ, В.В.Безуглов, Л.М.Пачева, Г.Н.Петрухина. Н.Э,Самель, В.А.Макаров, В.В.Малыгин, Ю.Э.Лилле, P.Ã.Ãàôóðîâ и

Л.Д. Бе ргел ьсон (54) 1.3-ДИНИТРОГЛИЦЕРИНОВЫЕ ЭФИРЫ ПРОСТАГЬАНДИНА Е1 ИЛИ 9-ОКСИМА

ПРОСТАГЛАНДИНА Ei, ОБЛАДАЮЩИЕ

ВАЗОДИЛАТАТОРНОЙ И АНТИАГРЕГАЦИОННОЙ АКТИВНОСТЬЮ

Изобретение относится к области органической химии, конкретно к производным простагландина 1=1 Формулы.

tI 0140

1 ,-.- - .С-0

Оно, ОН OH где А - 0 или МОй, обладающим вазодилататорной и антиагрегационной активностями, которые могут быть использованы в экспериментальной биологии и медицине.

Цель изобретения — получение соединений, обладающих вазодилататорной активностью в сочетании с антиагрегационным эффектом на тромбоциты.

Поставленная цель достигается синтезом динитроглицериновыми эфирами простагландина Е1 и 9-оксима простагландина

Е1 приведенной выше формулы, обладающих антиагрегационной активностью и спо„„. Ж ÄÄ 1825786 А1 (57) Использование: в качестве сосудорасширяющего средства, обладающего также антиагрегационным действием на тромбоциты, Сущность: продукт 1,3-динитроглицериновые эфиры простагландина Е1 или

9-оксима поостагландина Е I общей формулы Д 0МО

2 ..= С-0 Н

ON0

ОН ОН где А =- 0 или = NOH; выход 57,4 и 11,3 .

Реагент 1: простагландин Е1 или оксим простагландина ÅI. Реагент 2; 1,3-динитрат глицерина. Условия реакции в среде абсолютного ацетона в присутствии и-толуолсульфохлорида и триэтиламина. 2 табл. собностью расслаблять гладкую мускулатуру аорты.

Динитроглицериновые эфиры простагландина Е1 (ПГЕ|ДНГ) и 9-оксима простагландина Ei (ПГЕ1ДНГ-ОХ) получают этерификацией простагландина Е1 или его

9-оксима 1,3-динитратом глицерина в присутствии хлорангидрида ароматической сульфокислоты и третичного амина.

ПГЕ1ДНГ представляет собой бесцветное, вязкое масло, растворимое в спирте, эфире и других органических растворителях и практически нерастворимое в воде.

ПГЕ 1ДНГ-ОХ представляет собой белое кристаллическое вещество, хорошо растворимое в спирте.

Миотропное действие ПГЕ1ДНГ и

ПГЕ1ДНГ-ОХ изучали на изолированных препаратах аорты крысы. Проведенные исследования показали, что ПГЕ1ДНГ и

ПГЕ 1ДНГ-OX обладают сильным сосудорас1825786

55 ширяющим действием (ECgp 2,1 мкМ и 0,64 мкМ соответственно), а отличие от ПГЕ1, вызывающего сокращение изолированной аорты крысы.

В то же время показано, что как

ПГЕ1ДНГ, так и ПГЕ1ДНГ-OX обладают, хотя и в разной степени, способностью ингибировать агрегацию тромбоцитов человека, вызванную АДФ (1C p 0,19 мкМ и 1,1 мкМ сoo T ветст ве H но).

Способ синтеза ПГЕ1ДНГ и ПГЕ1ДНГОХ, а также их биологические свойства иллюстрируются примерами, Пример 1. Получение 1,3-динитроглицеринового эфира простагландина Е1 (Ч Г Е 1Д Н Г).

Простагландин Е i (300 мг, 0,85 мМ) растворяют в 3 мл абсолютного ацетона, К полученному раствору добавляют последовательно и-толуолсульфохлорид (175 мг, 0,92 мМ), триэтиламин (145 мг, 1.45 мМ) и 1,3-динитрат глицерина (200 мг, 1,1 мМ) и перемешивают 10 ч при 25 С.

Реакционную смесь разбавляют 10 мл воды и экстрагируют этилацетаTом (3 х 25 мл).

Объединенный органический экстракт промывают последовательно водой, насыщенным раствором хлористого натрия, высушивают сульфатом натрия и упаривают досуха. Маслянистый остаток растворяют в минимальном количестве бензола, наносят на колонку с 50 г силикагеля Л (40 — 100 мкм) и элюируют градиентной системой бензол— этанол с постепенным возрастанием полярной фазы (бензол, банзол - этанол 10:1, 8:1, 7:1, 5;1. 4;1, 3:1, 2;1, 1:1, этанол; обьем каждой системы 200 мл), Элюат после колонки собирали в пробирки по 20 мл. Пробирки, содержащие продукт реакции (контроль осуществляют с помощью TCX). объединяют и упаривают, Получено 252 мг (57,4%)

ПГЕ1ДНГ, бесцветное вязкое масло. R< =

=0,51 (бензол:диоксан;уксусная кислота—

20:10:1); ПМР-спектр, (дейтерохлороформ), м.д.: 5,59 (м., 2Н„С1зН, СиН), 5,38 (м„1Н.

C>zH). 4,77, 4,57 (2 дд., 4Н, С»НН, С1зНН), 4,09 (м., 2Н, C»H, C)sH), 2,75 (дд., 2Н, С1оН Н), 0,89 (т., ЗН, СиМе).

Пример 2. Получение 1,3-динитроглицеринового эфира 9-оксима простагландина Е i (П ГЕ1ДН Г-OX).

Оксим простагландина Е1 (50 мг, 0,16 мМ) растворяют в 1,5 мл абсолютнбго ацетона. К полученному раствору добавляют последовательно и-толуолсульфохорид (35 мг, 0,18 мМ), триэтиламин (45 мг.

0,45 MM) и 1,3-динитрат глицерина (50 мг.

0,25 мМ) и перемешивают 3 ч при 25 C.

Реакционную смесь разбавляют 3 мл воды и экстрагируют этилацетато» (3 х 10 мл).

Обьединенный органический экстракт промывают последовательно водой, насыщенным раствором хлористого натрия, высушивают сульфатом натрия и упаривают досуха. Маслянистый остаток растворяют в минимальном количестве бензола, наносят на колонку с 10 г силикагеля Л (40 — 100 мкм) и элюируют градиентной системой бензолэтанол с постепенным возрастанием полярной фазы (бензол, бензол-этанол 10;1, 8:1, 7:.1, 5:1, 4:1, 3:1, 2:1, 1:1, этанол; объем каждой системы 40 мл). Элюат после колонки собирали в пробирки по 10 мл. Пробирки, содержащие продукт реакции (контроль осуществляют с помощью TCX). объединяют и упаривают. Получено 8,3 мг (11,.3 g)

ПГЕ1ДНГ-ОХ, бесцветное вязкое масло, Rt =

=0,55 (хлороформ-ацетон, 1:1); ПМР-спектр, (дейтерохлороформ), м.д.: 5,57 (м., 2Н, С1зН, СмН), 5,39 (м, 1Н, С12Н), 4,77, 4,67 (2 дд„4Н, С»НН, С1зНН), 4,09 (м., 1Н, C»H), 3,87 (м., 1 Н, С1 Н), 3,09 (дд., 2Н, С юН Н), 0,81 (т., ЗН.

С иМе).

Пример 3. Миотропная активность

ПГЕ1ДНГ и ПГЕ1ДНГ-ОХ на изолированных препаратах гладких мышц аорты крыс.

B опытах использовались крысы обоего пола. весом 230+30 г. Препарат аорты помещали в термостатируемую ванночку объемом 10 мл. В качестве физиологического раствора использовали раствор Кребса, температуры среды 30+2 С, рН вЂ” 7,8, аэрация — карбогеном, Все эксперименты проводились в присутствии.в среде индометацина в концентрации 3 мкМ для подавления эндогенного биосинтеза простагландинов.

Вещества вносили в ванночку в возрастающих концентрациях. Активность препаратов выражали в единицах их молярной концентрации (ЭКбо), вызывающей эффект, составляющий 50;ь от максимального (для агонистов), либо снижающей действие стандартного агониста на 50$ (для антагонистов). ЭК-.„p определяли расчетным методом.

В качестве стандартного агониста использовали простагландин El в концентрации

0,16 мкМ (данные приведены в табл,1,).

Пример 4. Антиагрегационная активность ПГЕ1ДНГ и ПГЕ1ДНГ-ОХ, В опытах использовалась обогащенная тромбоцитами плазма крови человека, которую получали центрифугированием стабилизированной раствором цитратв натрия крови в течение 10 мин при 1000 обор-мин.

Запись агрегации тромбоцитов проводили на агрегометрах фирм "Chrono-Log Corp." (США) и "Payton" (США). Степень агрегации оценивали по проценту падения оптической плотности богатой тромбоцитами плазмы

О

И ОИО2

С-О И

0>>О на Е1 формулы д

Таблица!

Действие производных простагландина Е1 на изолированную эорту крысы

Таблица 2

Ингибирование агрегации тромбоцитов человека производными простагландина Е1

Составитель И. Серков

Редактор Т. Никольская Техред М.Моргентал Корректор М. Куль

Закаэ 2305 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35. Раущская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Умгород, ул.Гагарина, 101 крови после окончания реакции по сравнению с исходным уровнем.

Растворы испытуемых веществ готовили непосредственно перед тестированием иэ исходных 1 и 0,1;(,-ных спиртовых растворов путем разведения их спиртом или физиологическим раствором до нужной концентрации, Для определения антиагрегационной активности исследуемых соединений в кювету агрегометра помещали 0,45 мл богатой тромбоцитами плазмы и 1 мкл раствора простаноида необходимой концентрации. Кювету термостатировали

10 мин при +37 С, затем к содержимому кюветы прибавляли 50 мкл раствора АДФ до конечной концентрации 10 М и при постоянном перемешивании регистрировали степень агрегации трдмбоцитов (данные приведены в табл.2).

Таким образом показано, что ПГЕ1ДНГ и ПГЕ1ДНГ-ОХ обладают сильным вазодилататорным действием, тогда как сам ПГЕ1 вь>зывает сокращение изолированной аорты. R то же время заявляемые вещества сохранили антиагрегационную активность

5 присущую ПГЕ1.

Заявляемые вещества имеют новую, не описанную ранее структуру, которая обусловливает у них наличие новых полезных свойств, а именно сочетание вазодилата10 торной и антиагрегационной активностей.

Формула изобретения

1,3-Динитроглицериновые эфиры простагландина Е1 или 9-оксима простагланди2

ОИ где А - О, =NOH, 20 обладающие ваэодилататорной и антиагрегационной активностью.