Способ получения авермектинового комплекса и препарат авермектинового комплекса для профилактики и комплексного лечения заболеваний, вызванных эндо- и эктопаразитами животных

 

1. Способ получения авермектинового комплекса, включающий культивирование продуцента вида Streptomyces avermitilis в питательной среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные соли, в условиях аэрации и перемешивания, отделение мицелиальной биомассы, экстракцию из нее авермектинового комплекса растворителями, смешивающимися с водой, и последующую его очистку, отличающийся тем, что в качестве продуцента используют штамм Streptomyces avermitilis ВНИИСХМ-54, дополнительно перед культивированием методом тонкослойной хроматографии отбирают клоны, продуцирующие авермектиновый комплекс в количестве не ниже 1800 мкг/мл следующего состава, %: Авермектины серии А₁(А_1а + А_1в) - 18,0 ± 1,85 Авермектины серии А₂(А_2а + А_2в) - 26,0 ± 1,62 Авермектины серии В₁(В_1а + В_1в) - 36,7 ± 1,35 Авермектины серии В₂(В_2а + В_2в) - 18,88 ± 1,64 и проводят выращивание вегетативного посевного материала в два этапа, при этом на первом этапе используют питательную среду следующего состава, мас.%: Лактоза - 1,0 - 2,5 Кукурузный экстракт - 0,2 - 0,5 Белково-витаминный концентрат - 0,3 - 0,8 Вода водопроводная - Остальное
на втором этапе используют питательную среду следующего состава, мас.%:
Соевая мука - 0,3 - 1,0
Глюкоза - 1,0 - 2,0
Зеленая патока - 1,0 - 2,0 (по техническому весу)
Кукурузный экстракт - 0,2 - 0,6 (по техническому весу)
Белково-витаминный концентрат - 0,4 - 1,0
Мел - 0,1 - 0,4
Калий фосфорно-кислый двузамещенный - 0,01 - 0,1
Вода водопроводная - Остальное,
культивирование вегетативного посевного материала осуществляют на питательной среде следующего состава, мас.%:
Глюкоза - 5,0 - 7,0
Крахмал кукурузный - 1,0 - 2,0
Соевая мука - 0,6 - 1,2
Кукурузный экстракт - 0,2 - 0,6 (по техническому весу)
Белково-витаминный концентрат - 0,4 - 1,0
Калий фосфорно-кислый двузамещенный - 0,01 - 0,1
Мел - 0,1 - 0,4
Вода водопроводная - Остальное
в течение 4 - 8 сут отделенную мицелиальную биомассу высушивают, дробят, увлажняют, а очистку полученного этанольного экстракта авермектинового комплекса осуществляют выдерживанием его при температуре минус 35 ± 5^oС в течение 24 - 72 ч с последующей обработкой его активированным углем и ионообменными смолами при комнатной температуре.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что для отделения мицелиальной биомассы осуществляют нагревание культуральной жидкости до температуры 80 ± 5^oС, выдерживание ее в течение одного часа, фильтрование, промывание водой и отжимание на фильтр-прессе.

3. Способ по пп.1 и 2, отличающийся тем, что высушивание мицелиальной биомассы проводят в кипящем слое при температуре 80 ± 5^oС на входе и 40 ± 5^oС на выходе.

4. Способ по пп.1 - 3, отличающийся тем, что дробление биомассы осуществляют до частиц размером 0,56 мкм.

5. Способ по пп.1 - 4, отличающийся тем, что увлажнение биомассы проводят раствором, состоящим из 96%-ного этилового спирта и водопроводной воды при соотношении компонентов сырье : спирт : вода, равном 1,0 : 0,9 : 0,1 соответственно, при температуре 18 ± 5^oС в течение 30 - 40 мин.

6. Способ по пп. 1 - 5, отличающийся тем, что экстракцию осуществляют добавлением 2 - 3 частей 96%-ного этилового спирта, содержащего поливинилпиролидон с молекулярным весом 12800 ± 700 в конечной концентрации 0,5% на одну часть биомассы в течение 40 - 60 мин.

7. Способ по пп.1 - 6, отличающийся тем, что очистку авермектинового комплекса проводят активированным углем марки "Карбосфер" и последовательным пропусканием через колонку с катионитом КУ-2 · 8 в Н⁺ форме и с анионитом ЭДЭ-1ОП в ОН^- - форме.

8. Препарат авермектинового комплекса для профилактики и комплексного лечения заболеваний, вызванных эндо- и эктопаразитами животных, содержащий активное начало из мицелия Streptomyces avermitilis и фармакологически приемлемый носитель, отличающийся тем, что в качестве активного начала он содержит 1,8 - 83 г/л высокоочищенного авермектинового комплекса из мицелия Streptomyces avermitilis ВНИИСХМ-54 в этаноле следующего компонентного состава, %:
Авермектин А_1а - 0,9 ± 3,0
Авермектин В_1а + А_1в - 37,0 ± 3,0
Авермектин В_1в - 7,0 ± 3,0
Авермектин А_2а - 23,0 ± 10,0
Авермектин В_2а + А_2в - 19,0 ± 5,0
Авермектин В_2в - 1,5 ± 0,6
в эффективном количестве.

9. Препарат по п.1, отличающийся тем, что в инъекционной лекарственной форме он содержит, мас.%:
18 - 20 г/л авермектинового комплекса в этаноле - 32 - 63
Фармакологически приемлемый носитель - Остальное
10. Препарат по п.1, отличающийся тем, что в мазевой лекарственной форме он содержит, мас.%:
1,8 - 2,0 г/л авермектинового комплекса в этаноле - 0,5 - 5,0
Фармакологически приемлемый носитель - Остальное
11. Препарат по п.1, отличающийся тем, что в лекарственной форме в виде пасты он содержит, мас.%:
75 - 83 г/л авермектинового комплекса в этаноле - 10 - 25
Фармакологически приемлемый носитель - Остальное
12. Препарат по п. 1, отличающийся тем, что в лекарственной форме для орошения животных он содержит, мас.%:
18 - 20 г/л авермектинового комплекса в этаноле - 10 - 50
Фармакологически приемлемый носитель - Остальное
13. Препарат по п.1, отличающийся тем, что в лекарственной форме в виде таблеток он содержит (на 100 г таблеточной массы), мас.%:
18 - 20 г/л авермектинового комплекса в этаноле - 0,25 - 1,0
Фармакологически приемлемый носитель - Остальное

MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 01.03.2003

Номер и год публикации бюллетеня: 14-2004

Извещение опубликовано: 20.05.2004        

---