Способ идентификации фазы эстрального цикла морфометрической диагностикой секреторной активности тучных клеток мезометриальной брыжейки

 

Изобретение относится к биологии репродукции. Способ идентификации фаз эстрального цикла (эструс, диэструс) основан на морфометрической оценке секреторной активности тучных клеток мезометриальной брыжейки лабораторных крыс. Показателем фазы эструс является процесс активной дегрануляции периваскулярных тучных клеток, при котором выявляются их максимальные плоскостные величины (периметр, площадь, длина, ширина). В фазе диэструс указанные величины становятся минимальными. Установленная дискордантность морфометрических характеристик подтверждается параллельной вагинальной цитодиагностикой и свидетельствует об объективности способа. Способ обеспечивает повышение точности идентификации. 1 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к биологии репродукции, анализу циклической деятельности репродуктивной системы представителей "Грызуновых", и может служить целям объективной диагностики фаз эстрального цикла.

Известен морфологический способ идентификации фаз эстрального (полового) цикла вагинальной цитодиагностикой (1), использующий особенности строения клеток влагалищного эпителия (размеры, форма ядра) в зависимости от гормонального профиля организма (2). Его недостатком является отсутствие информации о морфологическом статусе других отделов репродуктивной системы, включая маточную брыжейку.

Известен также способ морфологической и гистохимической идентификации фазы эстрального цикла на основании изменения цитологических характеристик эпителия матки (4). Этот способ, регистрируя изменения секреторной активности эпителиоцитов эндометрия, не изучает динамику железистой активности тучных клеток маточной брыжейки, являющихся, наряду с другими, причинным фактором преимплантационной подготовки матки.

Предложен способ идентификации фаз эстрального цикла (эструс, диэструс) на основании морфометрической оценки секреторной активности тучных клеток мезометриальной брыжейки лабораторных крыс. Он отличается от предыдущих тем, что критерием овуляторного пика (фаза эструс) является процесс активной дегрануляции периваскулярных тучных клеток, при котором выявляются их максимальные линейные и площадные величины. Напротив, на фазе диэструс указанные величины становятся минимальными. Данная дискордантность морфометрических характеристик подтверждается параллельной вагинальной цитодиагностикой, что свидетельствует об объективности предложенного способа.

Способ осуществляют следующим образом. При забое животного (остром опыте) из материала мезометриальной брыжейки изготавливают пленочные препараты, окрашивают альциановым синим-кармином, четко идентифицируя границы тучных клеток или зону их дегрануляции. С помощью компьютерной системы анализа (3) полученное изображение контуров тучных клеток и их ядер подвергают интерактивной обработке по специальной программе для морфометрических исследований и многомерной статистической обработки линейных и площадных значений (периметр, площадь, длина, ширина). Устанавливают параметры тучных клеток маточной брыжейки для фазы диэструс: периметр 29,83±4,01 мкм, площадь 58,01±15,63 мкм², длина 9,61±0,65 мкм, ширина 5,33±0,41 мкм. На фазе эструс (овуляторный пик эстрального цикла) названные параметры составляют: периметр 60,76±14,15 мкм, площадь 238,75±11,14 мкм², длина 19,86±5,14 мкм, ширина 11,76±4,09 мкм. Статистически достоверное (p<0,001) увеличение размеров тучных клеток идентифицирует фазу овуляции параллельно максимальному корнификационному индексу при вагинальной цитодиагностике. Минимальные плоскостные величины тучных клеток характерны для фазы диэструс эстрального цикла (таблица).

Описанный способ предложен для внедрения после апробации на 1100 экспериментальных животных (беспородные белые крысы).

Предложенный способ морфометрической идентификации фазы эстрального цикла диагностикой секреторной активности тучных клеток мезометриальной брыжейки, наряду с известными, впервые определяет еще один важнейший диагностический критерий фазовых изменений репродуктивной деятельности животных и позволяет рассматривать выявленные изменения секреторной активности тучных клеток как в качестве морфологического маркера фаз эстрального цикла, так и в роли одного из причинных факторов динамических морфогенетических преобразований половых органов.

Способы и критерии оценки фаз эстрального цикла приведены в таблице.

Источники информации: 1. Арсенева М.Г. Кольпоцитологические исследования в диагностике и терапии эндокринных заболеваний. -Л. -М.: - 1973.

2. Бабичев В.Н. Нейроэндокринология пола. - М.: Наука, - 1981, с. 222.

3. Генкин В.Л., Ерош И.Л., Москалев Э.С. Системы распознавания автоматизированных производств. - Л.: Машиностроение, 1988.

4. Зайцев Н.А. Дисфункциональные маточные кровотечения - Киев: 1977, с. 196,

Формула изобретения

Способ идентификации фазы эстрального цикла у млекопитающего, включающий исследование клеток отделов репродуктивной системы, отличающийся тем, что в качестве клеток отдела репродуктивной системы исследуют тучные клетки мезометриальной брыжейки, определяют их секреторную активность путем оценки их морфометрических показателей (периметр, площадь, длина, ширина) и при выявлении минимальных значений этих показателей идентифицируют фазу эстрального цикла диэструс, а при выявлении максимальных значений - фазу эстрального цикла эструс.

РИСУНКИ

Рисунок 1