Антиаллергическое и противовоспалительное средство

 

Изобретение относится к медицине, в частности к фармакологии, касается антиаллергического и противовоспалительного средства формулы I, обладающего низкой токсичностью. 1 табл.

Изобретение относится к фармакологии, в частности к лекарственным средствам, проявляющим антиастматические, противовоспалительные и антиаллергические свойства.

Указанные свойства позволяют предлагать возможность применения данного соединения в качестве препарата для базисной терапии ряда аллергических заболеваний: бронхиальной астмы, атопических дерматитов, аллергических конъюктивитов и др.

Из известных антиаллергических /антиастматических препаратов по типу фармакологических эффектов к заявляемому соединению наиболее близки кромогликат натрия (интал) и глюкокортикостероид будесонид. Кортикостероиды широко используются в качестве противоаллергических средств при лечении аллергических заболеваний, однако вызывают целый спектр выраженных побочных эффектов, особенно при использовании таблетированных форм, что лимитирует их назначение больным (1,2). Кромогликат натрия(Интал) эффективен только при ингаляционном пути введения и лишь в случае легких проявлений аллергических заболеваний (2). Известные антигистаминные препараты обладают выраженными побочными эффектами и, кроме того, не оказывают терапевтического действия при бронхиальной астме, аспириновой триаде, астме физического усилия и др.(3).

В связи с этим актуальной является попытка поиска новых соединений в других химических классах, на основе которых можно разработать высокоэффективные и экономически выгодные лекарственные препараты для лечения аллергических заболеваний.

Целью предлагаемого изобретения является создание лекарственного средства, обладающего антиаллергическим/антиастматическим, противовоспалительным действием и низкой токсичностью.

Поставленная цель достигается применением известного антидиабетического препарата формулы I: в качестве антиаллергического и противовоспалительного средства.

Соединение I относится к классу кислотно-аддитивных солей сульфокислот, которое получается по методике, приведенной в патенте РФ N 1838296.

В научно-технической и патентной литературе соединение I в качестве антиаллергического и противовоспалительного средства не описано и в медицине не применялось.

МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И РЕЗУЛЬТАТЫ ИЗУЧЕНИЯ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ СОЕДИНЕНИЯ I 1. Определение острой токсичности Изучена острая токсичность веществ в опытах на белых мышах весом 18-20 г с определением ЛД₅₀ по методу Прозоровского (4) при внутрибрюшинном введении. Наблюдение за животными проводили в течение 48 час после введения препарата. Результаты исследований показали, что ЛД₅₀ исследуемого соединения больше 4000 мг/кг. Это свидетельствует о низкой токсичности заявляемого соединения.

2. Изучение антианафилактической активности соединения I на модели экспериментальной астмы in vivo В эксперименте использовались морские свинки весом 350-500 г. Животных сенсибилизировали введением овальбумина в дозе 20 мкг/кг овальбумина + 100 мг Al(ОН)₃ на свинку по Anderson (6). Через 21 день после начала сенсибилизации животных наркотизировали этаминалом натрия (40 мг/кг внутрибрюшинно). Разрешающую дозу овальбумина вводили внутривенно (V.jugularis). Исследуемое соединение вводили также внутривенно (1 мг/кг) за 2-3 мин до внесения разрешающей дозы овальбумина (150-200 мкг/кг). Бронхоспастическую реакцию моделировали по Konzett - Rossler (7).

Аппарат искусственного дыхания, связанный с датчиком (Ugo Basile), с помощью которого регистрировали изменения сопротивления дыхательных путей воздушному потоку, подсоединялся через канюлю к препарированной трахее. Эффект исследуемого соединения оценивали по степени предупреждения бронхоспазма, выраженной в процентах по отношению к контролю. Анализ эффективности соединения проводился в сравнении с кромогликатом динатрия (Интал). Полученные данные представлены в таблице.

4. Изучение противовоспалительной активности соединения I на модели острого воспаления Модель ПАФ-индуцированного отека у крыс по методу Ezeamuzie и Urnezurike (8) В эксперименте были использованы крысы-самцы весом 200-300 г. Полный адъювант Фрейнда (ПАФ) вводили субплантарно по 0,1 мл в правую лапу. Исследуемое соединение вводили внутрижелудочно в дозе 10 мг/кг в 0,5 мл 1%-ного раствора крахмала за 24 и 2 час до введения флогогенногоагента. Объем лап измерялся через 24 часа после инициации процесса с помощью плетизмометра (Ugo Basile). Терапевтическую эффективность соединения сравнивали с активностью известного противовоспалительного препарата - индометацина. Процент угнетения воспалительной реакции рассчитывали по формуле II: где П - объем правой лапы;
Л - объем левой лапы;
Опыт - леченые животные;
Контроль - нелеченые животные.

Изучаемое соединение оказывало существенное противовоспалительное действие: торможение ПАФ-индуцированного отека составило 52%. Индометацин тормозил отек на 82%, однако вызвал гибель всех получавших внутрижелудочно этот препарат животных. В случае использования исследуемого соединения I не было зарегистрировано ни одного случая гибели животных.

5. Изучение противоаллергической активности соединения I
В эксперименте были использованы линейные мыши-самцы СВА массой 18-20 г. В качестве аллергена применяли пикрилхлорид и эритроциты барана. Исследуемое соединение вводили внутрижелудочно три раза в дозе 10 мг/кг в 0,5 мл 1%-ного раствора крахмала за 24, 2 час до и 2 час после введения разрешающей дозы аллергена. Количество животных в каждой группе составляло 10-12. Терапевтическую эффективность изучаемого соединения сравнивали с действием эталонного глюкокортикостероидного препарата будесонида. Торможение развития аллергического отека вычисляли по формуле II.

5.1. Модель контактной гиперчувствительности к пикрилхлориду у мышей по методу Taraure(9)
Мышей сенсибилизировали нанесением на выбритый участок живота, 1 мл 3%-ного раствора пикрилхлорида в ацетоне. Через 7 суток разрешающую дозу пикрилхлорида (0,025 мл 3%-ного раствора) наносили на обе поверхности правого уха. Через 24 часа после индукции отека мышей забивали, уши отрезали и взвешивали. Аллергическую реакцию оценивали по изменению веса правого уха относительно интактного левого. Противоаллергический эффект исследуемого соединения изучали, анализируя разницу увеличения веса правого уха у леченых и нелеченых животных согласно формуле II.

Торможение развития отека правого уха у леченых животных составило 39 ± 1,5%; у будесонида при внутрижелудочном введении в условиях данной модели эффект был также значителен и составил 73 ± 8,9%.

5.2. Модель гиперчувствительности замедленного типа к эритроцитам барана у мышей по методу Lagrange (10)
Мышей сенсибилизировали введением 0,1 мл (2·10⁷) суспензии эритроцитов подкожно. Через 4 суток разрешающую дозу эритроцитов барана (1·10⁸) в 0,04 мл вводили субплантарно в правую лапу. Через 24 часа измеряли отек лапы с помощью плетизмометра (Ugo Basile). Терапевтический эффект оценивали по разнице объемов лап (правой и левой) с воспалительным отеком у леченых и нелеченых животных. Торможение развития реакции вычисляли согласно формуле II. Противоаллергический эффект для соединения I составил 56 ± 6,0% и был сопоставим с эффектом препарата сравнения (кромогликата натрия), который вызвал торможение аллергического ответа на введение антиген, равное 63 ± 4,6% (относительно контроля).

Таким образом, заявляемое соединение обладает антиаллергическим антиастматическим, противовоспалительным действием, сопоставимым в условиях использованных экспериментальных моделей по величине эффекта традиционным лекарственным препаратам с антиаллергическим и антиастматическим действием.

В качестве дополнительного положительного эффекта соединения I следует считать, что оно может успешно применяться у больных диабетом, т.к. основное заболевание у некоторых больных может осложняться развитием повышенной чувствительности к аллергиям. Учитывая, что соединение I успешно прошло клинические испытания и получило разрешение Минздрава РФ на выпуск и использование в качестве антидиабетического препарата, применение его по новому назначению значительно расширяет возможности лекарственного препарата.

Литература
1. Чучалин А.Г. Бронхиальная астма. В 2-х томах. М., Агар, 1997.

2. Barnes P.J. Glucocorticosteroids. In: Allergy and Allergic Disieses. Ed. by A.B.Kay Blackwell Science. Oxford. 1997, v.1, 619-641.

3. Гущин И.С. Аллергическое воспаление и его фармакологический контроль. Москва, Фармарус Принт. 1998, с.141-172.

4. Прозоровский В.Б., Прозоровская М.П. Табличный метод определения ЕД50 веществ с низкой биологической активностью. Фармакология и токсикология, 1980, 6, 733-735.

5. Blattner R., Classen H.G., Dehnert H. et al. Experiments on isolated smooth muscle preparation. Ed. J.M.Barnden a. R.Colson, 1980.

6. Andersson P. Antigen-induced bronchiaal anapylaxsis in actively sensitized guineapigs. Allergy 1980, 35, 63-71.

7. Konzett H., Rossler, R. Versuchsanord nung zu untersuchungen an der Bronchialmuskulatur. Naunyn-Schmiedebergs Arch. Exp. Path. Pharmak., 1940, 195, 71-74.

8. Ezamuzie Ch, Umezurike C.C. Effect of histamine H2-receptor antagonists on acute inflammatory of the rat paw oedema. J.Pharmacol., 1989, 41, 261-265.

9. Tarayre J.P., Barbara M., Aliaga M. and Tisne-Versailles. Comparative actions of immunosuppressants, glucocorticoids and non-steroidal anti-inflammatory drugs on various models of delayed hypersensitivity and on a non-immune inflammation in mice. Arzneim. -Forsch. Drug Res., 1990, 40, 1125-1131.

10. Lagrange Ph. Mecanismes de regulation de l'activite des cellules lymphocytaries T: applications a la pathologie infectieuse et tumorale. I. - Hypersensibilite de type retarde et reponse humorale. Pathologie Biologie. 1976, January, 67-73.

Формула изобретения

Применение кислотно-аддитивной соли 2,4-дихлор-5-карбокси-бензолсульфокислоты и гуанидина формулы I

в качестве антиаллергического и противовоспалительного средства.

РИСУНКИ

Рисунок 1