Способ прогнозирования течения ишемического инсульта

 

Изобретение относится к области медицины, а именно неврологии, и касается прогнозирования течения ишемического инсульта путем проведения иммунофенотипирования лимфоцитов. Сущность способа состоит в том, что на 1, 10, 21-й день от момента развития ишемического инсульта определяют средний уровень CD95-лимфоцитов, %, при значении уровня CD95-лимфоцитов на 1-й день более 7,2±2,8% и возврате к норме на 21-й день прогнозируют благоприятный исход, при уровне CD95-лимфоцитов выше 7,2±2,8% и сохранении среднего уровня показателя на 21-й день - прогнозируют благоприятный прогноз для жизни и неблагоприятный для восстановления неврологического дефицита, а при значении среднего показателя CD95-лимфоцитов выше 29,12±3,1% - прогнозируют неблагоприятный прогноз для жизни. Техническим результатом является разработка способа, обеспечивающего высокую точность прогноза, позволяющего проводить адекватную терапию. 1 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии. Острые нарушения мозгового кровообращения (ОНМК) являются важнейшей медико-социальной проблемой, что обусловлено их высокой долей в структуре заболеваемости и смертности населения, значительными показателями временных трудовых потерь и первичной инвалидности. В России заболеваемости цереброваскулярными болезнями составляет около 400 человек на 100 тыс. населения. Показатель смертности за последние 15 лет возросли на 18% и достигли 280 человек на 100 тыс. населения. Смертность от сосудистых заболеваний мозга в нашей стране занимает 2-е место, что не намного уступает смертности от сердечно-сосудистых заболеваний. Поэтому прогнозирование течения инсульта имеет большое значение в практической неврологии.

В качестве прототипа авторы предлагают “Способ прогнозирования течения ишемического инсульта” (патент №2195672 от 30.03. 2001 г., бюллетень №36 от 27.12.2002 г. М.М.Герасимовой, Г.Н.Жданова и Ю.В.Антипиной), заключающийся в определении в сыворотке крови больных с ишемическим инсультом уровня анти-ДНК способом иммуноферментного анализа. С этой целью авторы исследовали сыворотку крови больных на 1,10 и 21-й день заболевания с последующим проведением клинико-иммунологического анализа. Было достоверно (р≤0,05) выявлено, что при повышении уровня анти-ДНК на 1-й день в пределах 0,196±0,01 ед. ОП и снижения практически к норме на 21-й день - прогноз благоприятный, если на 21-й день уровень анти-ДНК выше показателя контрольной группы и к 21-му дню уровень анти-ДНК держится примерно на том же уровне, то прогноз относительно благоприятен для жизни, но неблагоприятен для восстановления неврологического дефицита. Если же на 1-й день показатель выше 0,601±0,04 ед. ОП, то прогноз неблагоприятный для жизни.

Некоторым недостатком этого способа является малодоступность и дороговизна приборов и тест-систем.

Авторы предлагают свой способ прогнозирования течения ишемического инсульта способом иммунофенотипирования лимфоцитов. Лимфоциты выделяют из гепаринизированной крови центрифугированием на градиенте фиколл-верографии (плотность 1,077 г/мл). 1 мл лимфоцитов в объеме 50 мкл вносят в центрифужные пробирки и добавляют 5 мкл тестируемого моноклонального антитела CD95 с последующим инкубированием в течение 30 мин. Затем добавляют 150 мкл раствора Хенкса и центрифугируют 5 мин при 200 g, удаляют супернатант, затем опять вносят 150 мкл раствора Хенкса, суспендируют и центрифугируют повторно. К осадку добавляют 50 мкл фрагментов овечьих антител, меченных ФИТЦем с последующим суспендированием и инкубированием. Дважды отмытые клетки готовы для просмотра в флюорисцентном микроскопе. Количество антиген позитивных клеток определяют как процент флюорисцирующих клеток при просматривании 200 лимфоцитов за вычетом процента флюорисцирующих клеток, наблюдаемых в препарате отрицательного контроля (приложение к лицензии №42/98-065-0509 от 06.05.1998 г. “Перечень медицинских изделий, разрешенных к использованию обществу с ограниченной ответственностью (ООО) Сорбент, г. Подольск Московской области). Полученный результат сравнивают с результатом контрольной группы, который составил 7,2+2,8% (n=30).

У всех больных производился забор венозной крови с определением среднего уровня CD95 - лимфоцитов на 1, 10 и 21-й день от момента развития ишемического инсульта. Заявители предлагают производить забор крови из локтевой вены на 1-й день от начала заболевания (т.к. это острейший период, с целью подтверждения наличия или отсутствия повышения уровня CD95-лимфоцитов), на 10-й день (т.к. к этому сроку должна наблюдаться максимальная реакция иммунной системы на действие повреждающего фактора - острую ишемию), на 21-й день (с целью наблюдения последствий иммунного процесса).

В условиях клиники обследованы 47 больных. Из них выделено 3 группы в зависимости от исхода заболевания. 1-я группа (12 больных) - больные с практически полным восстановлением неврологического дефицита. У больных этой группы уровень CD95-лимфоцитов на 1-й день составил 11,16±1,79%, на 10-й день - 7,5±2,05%, на 21-й день 5,3±1,13%. 2-я группа (23 человека) - больные, у которых оставался стойкий неврологический дефицит к 21-м суткам. В этой группе уровень CD95 в 1-й день -18,52±3,68%, 10-й день - 17,88±1,11%, на 21-й день - 17,11±0,89%. 3 группа (13 человек) - больные с неблагоприятным прогнозом для жизни (с летальным исходом). В 3-й группе в 1-й день - 29,12±3,1%, на 10-й день - 31,5±1,4%, причем 6 больных не дожили до 10-го дня, а 3 больных - до 21 дня. 4-ую группа - контрольная (30 человек) составили практически здоровые люди, у которых CD95 составил 7,2±2,8%. Наглядно клинико-иммуннологические данные сгруппированы в таблицу.

Достоверность р≤0,05

Таким образом, было достоверно установлено, что при повышении уровня CD95 в 1-й день более 7,2±2,8% и возвращении практически к норме на 21-й день свидетельствует о благоприятном исходе ОНМК. Если на 1-й день уровень CD95 выше 14,8%, а к 21-му дню этот показатель держится на том же уровне, то прогноз относительно благоприятный для жизни, но не благоприятный для восстановления неврологического дефицита. Если же уровень CD95 выше 29,12±3,01% - прогноз неблагоприятен для жизни.

Способ не требует дорогостоящего оборудования, прост в исполнении, позволяет достоверно прогнозировать течение ишемического инсульта, что помогает своевременно вносить коррекцию в проводимую терапию, а значит, влиять на показатели летальности и инвалидизации.

Клинический пример:

1. Григорьев В.И., 62 года, и/б №9134

Дs: ишемический инсульт в бассейне правой средне-мозговой артерии при атеросклерозе сосудов головного мозга и гипертонической болезни с умеренным левостороннем гемипарезом.

Уровень CD95 крови:

1-й день - 15%

10-й день - 29%

21-й день - 7%.

Подъем CD95 на 10-е сутки совпадает с объективным ухудшением состояния больного, обусловленным углублением очаговой неврологической симптоматики с изменением сознания, однако отрицательная динамика достаточно быстро купирована проведением оптимальной терапии, что привело к значительному улучшению состояния больного и к значительно меньшему неврологическому дефициту на 21-й день (сохранялся легкий, больше рефлекторный левосторонний гемипорез), что соответствует уровню CD95-лимфоцитов (7%) на 21-й день заболевания.

2. Решетов Ю.В., 65 лет, и/б №5195

Дs: основной: ишемический инсульт в правой среднемозговой артерии при гипертонической болезни.

Осложнения: отек и дислокация головного мозга

Соп.дs: последствия ишемического инсульта в правой СМА.

1-й день - уровень CD95-лимфоцитов 25%.

У больного отмечаются высокие цифры СD95-лимфоцитов, что соответствует неблагоприятному течению инсульта. Летальный исход у больного наступил на 3 сутки от начала ишемического инсульта.

Формула изобретения

Способ прогнозирования течения ишемического инсульта, включающий исследование крови, отличающийся тем, что в венозной крови способом иммунофенотипирования лимфоцитов на 1, 10, 21-й день от момента развития ишемического инсульта, определяют средний уровень CD95-лимфоцитов в %, при значении уровня С095-лимфоцитов на 1-й день более (7,2±2,8)% и возврате к норме на 21-й день прогнозируют благоприятный исход, при уровне СD95-лимфоцитов выше (7,2±2,8)% и сохранении среднего уровня показателя на 21-й день - прогнозируют благоприятный прогноз для жизни и неблагоприятный для восстановления неврологического дефицита, а при значении среднего показателя CD95-лимфоцитов выше (29,12±3,1)% - прогнозируют неблагоприятный прогноз для жизни.