Новый ген элонгазы и способ получения полиненасыщенных кислот жирного ряда

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения композиции масел и/или кислот жирного ряда с высоким содержанием полиненасыщенных кислот. В микроорганизм, животное или растение вводят ген элонгазы или его гомолога, производного или аналога, либо конструкт, содержащий такой ген. Экспрессия данного гена приводит к активации биосинтеза жирных кислот в организме, а именно обеспечивает удлинение молекулы жирной кислоты с 16, 18, 20 или 22 атомами углерода с, по меньшей мере, двумя двойными связями на, по меньшей мере, два атома углерода. 4 н. и 10 з.п. ф-лы, 16 ил., 7 табл.

 

Текст описания приведен в факсимильном виде.

1. Выделенная нуклеиновая кислота, включающая нуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид, который элонгирует кислоты жирного ряда с 16, 18 или 20 атомами углерода с, по меньшей мере, двумя двойными связями в кислотной молекуле на, по меньшей мере, два атома углерода, выбранную из группы, включающей

а) представленную в SEQ ID NO:1, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:5 или SEQ ID NO:7 последовательность нуклеиновой кислоты,

б) последовательность нуклеиновой кислоты, которая в соответствии с вырожденностью генетического кода происходит от представленной в SEQ ID NO:1, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:5 или SEQ ID NO:7 последовательности,

в) производные представленной в SEQ ID NO:1, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:5 или SEQ ID NO:7 последовательности, кодирующие полипептиды представленной в SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:6 или SEQ ID NO:8 аминокислотной последовательности и имеющие, по меньшей мере, 50%-ную гомологию на аминокислотном уровне, без значительного снижения ферментативного действия полипептидов.

2. Выделенная нуклеиновая кислота по п.1, отличающаяся тем, что нуклеотидная последовательность происходит из растения, водоросли или гриба.

3. Выделенная нуклеиновая кислота по п.1 или 2, отличающаяся тем, что нуклеотидная последовательность происходит из организмов Physcomitrella, Thraustochytrium или Crythecodinium.

4. Генный конструкт, кодирующий полипептид, который элонгирует кислоты жирного ряда с 16, 18 или 20 атомами углерода с, по меньшей мере, двумя двойными связями в кислотной молекуле на, по меньшей мере, два атома углерода, включающий выделенную нуклеиновую кислоту по одному из пп.1-3, в котором нуклеиновая кислота функционально связана с одним или несколькими регуляторными сигналами.

5. Генный конструкт по п.4, отличающийся тем, что экспрессия его гена усилена регуляторными сигналами.

6. Генный конструкт, кодирующий полипептид, который элонгирует кислоты жирного ряда с 16, 18 или 20 атомами углерода с, по меньшей мере, двумя двойными связями в кислотной молекуле на, по меньшей мере, два атома углерода, включающий последовательность нуклеиновой кислоты по одному из пп.1-3 или генный конструкт по п.4 или 5, отличающийся тем, что дополнительно включает, по меньшей мере, одну нуклеиновую кислоту, которая кодирует ген биосинтеза кислоты жирного ряда.

7. Генный конструкт по п.6, отличающийся тем, что нуклеиновая кислота, кодирующая ген биосинтеза кислоты жирного ряда, выбрана из группы, включающей Δ19-, Δ17-, Δ15-, Δ12-, Δ9-, Δ8-, Δ6-, Δ5-, Δ4-десатуразу, гидроксилазу, Δ12-ацетиленазу, ацил-АСР-тиоэстеразу, β-кетоакрил-АСР-синтазу или β-кетоакрил-АСР-редуктазу.

8. Способ получения полиненасыщенных кислот жирного ряда, включающий выращивание организма, включающего нуклеиновую кислоту по п.1 или генный конструкт по п.5 для кодирования полипептида, который элонгирует кислоту жирного ряда с 16, 18 или 20 атомами углерода с, по меньшей мере, двумя двойными связями в кислотной молекуле на, по меньшей мере, два атома углерода в условиях, при которых образуются полиненасыщенные кислоты жирного ряда в организме.

9. Способ по п.8, отличающийся тем, что получают полиненасыщенные кислоты жирного ряда, представляющие собой молекулы кислоты жирного ряда с 18, 20 или 22 атомами углерода с, по меньшей мере, двумя двойными связями в кислотной молекуле.

10. Способ по п.8, отличающийся тем, что используют кислоту жирного ряда с 16, 18 и 20 атомами углерода с тремя двойными связями в молекуле.

11. Способ по одному из пп.8-10, отличающийся тем, что молекулы кислоты жирного ряда с 18, 20 или 22 атомами углерода в молекуле выделяют из организма в форме масла, липида или свободной кислоты жирного ряда.

12. Способ по одному из пп.8-10, отличающийся тем, что в качестве организма используют микроорганизм, животное или растение.

13. Способ по п.12, отличающийся тем, что в качестве организма используют трансгенное растение.

14. Способ по п.12, отличающийся тем, что молекулы кислоты жирного ряда с 18, 20 и 22 атомами углерода выделяют из микроорганизма в форме масла, липида или свободной кислоты жирного ряда.

Приоритет по пунктам и признакам:

09.02.2000 - п.1 в части признаков, касающихся нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид, удлиняющий жирные кислоты с 18 атомами углерода, и включающей последовательность SEQ ID NO:1, производные и происходящие из нее нуклеотидные последовательности; п.2 в части того, что последовательность происходит из растения; п.3; пп.4, 5, 8, 9 и 11 в части, относящейся к жирным кислотам с 18 атомами углерода; п.10 в части, относящейся к применению кислоты жирного ряда с 16 атомами углерода; пп.12 и 13;

17.05.2000 - п.1 в части признаков, касающихся нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид, удлиняющий жирные кислоты с 16 и 20 атомами углерода, и включающей последовательность SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:5 или SEQ ID NO:7, производные и происходящие из них нуклеотидные последовательности; п.2 в части того, что последовательность происходит из водоросли и гриба; пп.4, 5 и 8, в части, касающейся жирных кислот с 16 и 20 атомами углерода; пп.6 и 7; п.9 в части, касающейся кислот жирного ряда с 20 и 22 атомами углерода, имеющей три двойные связи в молекуле; п.10 в части применения кислоты жирного ряда с 18 или 20 атомами углерода; п.11 в части выделения кислоты жирного ряда с 20 или 22 атомами углерода;

08.02.2001 - пп.1-13 в части остальных признаков; п.14.