Способ ранней диагностики перинатального поражения цнс у новорожденных с умеренной асфиксией при рождении

Изобретение относится к области медицины и касается способа ранней диагностики перинатального поражения ЦНС у новорожденных с умеренной асфиксией при рождении. Сущность способа заключается в том, что у новорожденных берут кровь из артерии пуповины и далее в сыворотке пуповинной крови определяют концентрации ИЛ-6, ИЛ-8 и NO₂ методом иммуноферментного анализа. Затем вычисляют диагностический индекс (DI) по формуле и при DI менее 0 делают заключение об отсутствии лабораторных признаков неврологической патологии, а при DI более 0 диагностируют наличие лабораторных признаков перинатального поражения нервной системы у новорожденных. Использование способа позволяет диагностировать перинатальное поражение нервной системы у новорожденного на доклинической стадии.

 

Область применения

Предлагаемое изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике.

Уровень техники

Патология центральной нервной системы у детей раннего возраста является одной из наиболее актуальных проблем в детской неврологии. Возникающие в перинатальном периоде нарушения ЦНС часто ведут к формированию стойкого неврологического дефицита. Этиологические факторы, способствующие возникновению данных состояний, многообразны. Однако, по данным исследований последних лет, ведущим является гипоксическое поражение мозга.

Аналогами данного изобретения являются широко внедренные в клиническую практику акушерства и неонатологии современные методы диагностики состояния нервной системы плода и новорожденного: нейросонография (НСГ), доплеровская энцефалография (ДЭГ), компьютерная томография (КТ), магниторезонансная томография (МРТ), электроэнцефалография (ЭЭГ) и др. (1, 2, 3, 4, 5). Однако инструментальные способы диагностики достаточно трудоемки и чаще всего используются при наличии неврологических симптомов, которые не всегда имеют четкую и ясную картину и развитие их может быть отсрочено во времени [6].

Предложенные биофизические (инфракрасная спектроскопия сыворотки крови) и биохимические способы выявления риска формирования перинатальных поражений ЦНС, основанные на определении как неспецифических (алькогольдегидрогеназа, малоновый диальдегид, супероксиддисмутаза, глутатион пероксидаза, оксид азота), так и специфических маркеров повреждения нервной ткани (креатенинкиназа-ВВ, нейронспецифическая енолаза, гомокарнозин), а также иммунологические исследования уровня цитокинов (ИЛ-1β, ФНО-α и ИЛ-4) в большинстве случаев применяются для дифференцировки поражений ЦНС (гипоксические, травматические, метаболические), прогнозирования течения неврологических расстройств у детей раннего возраста (благоприятное, неблагоприятное) и оценки степени тяжести и исходов неврологической патологии у новорожденных с асфиксией тяжелой степени [7, 8, 9, 10, 11, 12, 13]. Вместе с тем, при легкой и средней степени асфиксии в отсутствие неврологической симптоматики при рождении у новорожденных впоследствии выявляется поражение ЦНС. В этом случае как следствие имеет место несвоевременное назначение адекватной терапии.

Прототипом предложенного изобретения является описанный в отечественной литературе метод прогнозирования поражений центральной нервной системы у новорожденных, заключающийся в определении уровня малонового диальдегида в передних водах в начале первого периода срочных родов и показателя общей антиоксидантной активности пуповинной крови новорожденного [14]. Несмотря на очевидные достоинства метода (наличие прогностических пороговых уровней данных показателей) имеются и некоторые недостатки: так, не всегда возможно произвести забор амниотической жидкости для исследования при раннем излитии околоплодных вод, при операции кесарево сечения.

Сущность изобретения

Целью изобретения является разработка способа ранней диагностики перинатального поражения ЦНС у новорожденных с асфиксией умеренной степени тяжести на основании лабораторного исследования венозной крови, взятой из артерии пуповины, заключающегося в определении концентрации интерлейкина 6 (ИЛ-6), интерлейкина 8 (ИЛ-8) и общего нитрита азота (NO₂).

Способ осуществляют следующим образом: в первые минуты после рождения у новорожденного берут кровь из артерии пуповины и далее в сыворотке пуповинной крови проводят определение концентрации ИЛ-6, ИЛ-8 и NO₂ иммуноферментным анализом согласно инструкции фирмы производителя (BioSource Immunoassay Kit Human IL-6, BioSource Immunoassay Kit Human IL-8/NAP-1 - США, R&D Total NO/Nitrite/Nitrate Assay - США-Канада). Измерение оптической плотности образцов выполняют на анализаторе "VICTOR²" фирмы "PerkinElmer" ("Wallac Oy", Финляндия).

На основании математической обработки результатов исследования методом дискриминантного анализа [15] получены информативные признаки и сформировано правило ранней диагностики перинатального поражения ЦНС у новорожденных с умеренной асфиксией, которое заключается в определении диагностического индекса (DI) по формуле:

DI=0,005X₁-0,004Х₂+0,162Х₃-2,055, где

X₁ - концентрация ИЛ-6, пг/мл;

Х₂ - концентрация ИЛ-8, пг/мл;

Х₃ - концентрация общего NO₂, мкмоль/л.

При DI менее 0 делают заключение об отсутствии лабораторных признаков развития неврологической патологии, а при DI более 0 диагностируют наличие лабораторных признаков перинатального поражения нервной системы у новорожденных.

Предлагаемый способ дает вероятность правильной классификации (специфичность метода) - 92,9% для нормы, для патологии (чувствительность метода) - 90,9%. Эффективность метода - 92,0%.

Пример 1. Новорожденная Ф-на (истор. родов №247), родилась от пятой беременности, вторых родов. Беременность протекала на фоне гестоза легкой степени тяжести (с 24 нед.), анемии легкой степени (с 18 нед.), хронической внутриутробной гипоксии компенсированной формы. Ребенок родился в удовлетворительном состоянии, массой 3650 г, длиной 54 см, оценкой по шкале Апгар 6-8 баллов (асфиксия легкой степени), по показателям кислотно-основного состояния (КОС) - умеренная асфиксия. Развитие неврологических симптомов зафиксировано через несколько часов после рождения: мышечная гипотония, перекрест голеней, "мраморность" кожных покровов. На 3-сутки отмечено развитие субиктеричного оттенка кожных покровов.

При исследовании сыворотки пуповинной крови получены следующие данные: концентрация ИЛ-6 - 5,8 пг/пл, ИЛ-8 - 55,38 пг/мл, содержание общего NO₂ - 25,62 мкмоль/л. По формуле определили значение диагностического индекса: 5,8×0,005+55,38×(-0,004)+25,62×0,162-2,055=1,90 (что больше 0), свидетельствует о лабораторных признаках перинатального поражения нервной системы. Результаты нейросонографии на 1-е сутки: субэпендимальные 2-сторонние псевдокисты в стадии частичного лизиса, на 5-е сутки - данные изменения сохранялись, динамики не отмечено. По результатам доплерометрии (1-е и 5-е сутки) патологии не выявлено. Выписана домой на 18-е сутки. Диагноз при выписке: Перинатальное поражение ЦНС гипоксически-ишемического генеза легкой степени тяжести, субэпендимальное кровоизлияние, псевдокисты, конъюгационная желтуха, анемия легкой степени тяжести.

Пример 2. Новорожденный З-в (истор. родов №1558), родился от первой беременности, первых родов. Беременность протекала на фоне угрозы прерывания (21 нед.), хронической внутриутробной гипоксии плода декомпенсированной формы, НЦД по гипертоническому типу, позднего гестоза (36 нед.). Ребенок родился в состоянии средней тяжести, массой 3150 г, длиной 52 см, оценкой по шкале Апгар 6-8 баллов (асфиксия легкой степени), по показателям кислотно-основного состояния (КОС) - умеренная асфиксия. Кожные покровы и слизистые розовые, чистые, дыхание проводится во все отделы, хрипов нет, неврологическая симптоматика отсутствует. Диагноз при рождении: асфиксия умеренной степени тяжести, кефалогематома теменной области.

При исследовании сыворотки пуповинной крови получены следующие данные: концентрация ИЛ-6 - 122,88 пг/пл, ИЛ-8 - 25,0 пг/мл, содержание общего NO₂ - 20,5 мкмоль/л. По формуле определили значение диагностического индекса: 122,88×0,005+25,0×(-0,004)+20,5×0,162-2,055=1,73 (что больше 0), свидетельствует о лабораторных признаках перинатального поражения нервной системы. Результаты НСГ и ДЭГ на 1-е-5-е сутки жизни в пределах нормы. На 6-е сутки у ребенка отмечена неврологическая симтоматика: снижение физиологических рефлексов, их быстрая истощаемость, тремор конечностей, умеренная гипотония, дистальная спастика, вялость сосания, частое срыгивание. По результатам нейросонографии (7-е сутки) определены локальные гиперэхогенные очаги в мозговой ткани субкортикальной области, умеренная вентрикуломегалия слева, расширение передних рогов. По результатам доплеровской энцефалографии - увеличение диастолической составляющей скорости кровотока, снижение индекса резистентности.

Выписан домой на 12-е сутки. Диагноз при выписке: Перинатальное поражение ЦНС гипоксически-ишемического генеза средней степени тяжести, кефалогематома теменной области, дисбактериоз.

Пример 3. Новорожденная Т-ва (истор. родов №4063), родилась от второй беременности, вторых родов при оперативном родоразрешении (ОАА - рубец на матке). Беременность протекала на фоне угрозы прерывания беременности (12 нед.), анемии легкой степени тяжести, позднего гестоза (35 нед.). Ребенок родился в состоянии средней степени тяжести, массой 3190 г, длиной 51 см, с оценкой по шкале Апгар 6-7 баллов (асфиксия легкой степени тяжести), оценка по КОС - асфиксия умеренной степени тяжести. Неврологические симптомы при рождении отсутствовали. Диагноз при рождении: асфиксия умеренной степени тяжести, период новорожденности.

При исследовании сыворотки пуповинной крови получены следующие данные: концентрация ИЛ-6 - 7,83 пг/пл, ИЛ-8 - 8,51 пг/мл, содержание общего NO₂ - 5,81 мкмоль/л. По формуле определили значение диагностического индекса: 7,83×0,005+8,51×(-0,004)+5,81×0,162-2,055=-1,109 (что менее 0), свидетельствует об отсутствии лабораторных признаков перинатального поражения нервной системы. Результаты нейросонографии и доплерометрии на 1-е и 5-е сутки жизни в пределах нормы. На 2-е сутки отмечено развитие физиологической желтухи. Выписана домой на 7-е сутки. Диагноз при выписке: период новорожденности, физиологическая желтуха.

Таким образом, заявляемый способ ранней диагностики перинатального поражения нервной системы у новорожденных с асфиксией умеренной степени тяжести в сравнении с существующими имеет следующие преимущества:

1. Способ является неинвазивным (используется пуповинная кровь, полученная при стандартном заборе для диагностики и оценки тяжести асфиксии в родах согласно МКБ X).

2. Способ позволяет диагностировать перинатальное поражение нервной системы у новорожденного на доклинической стадии.

3. Предлагаемый способ позволяет врачу с первых часов жизни оценить возможность развития неврологической патологии и своевременно назначить адекватную терапию.

Источники информации

1. Лобанова Л.В. Доплерография в диагностике гипоксических поражений головного мозга у доношенных новорожденных / Л.В.Лобанова //Российский вестник перинатологии и педиатрии. - 2001. - №4. - С.21-23.

2. Володин Н.Н. Стандартизация протокола ультразвукового исследования головного мозга у новорожденного и детей раннего возраста / Н.Н.Володин, В.В.Митьков, Е.А.Зубарева и др. // Ультразвуковая и функциональная диагностика: Научно-практический журнал. - 2001. - №4. - С.74-76.

3. Володин Н.Н. Диагностика поражений головного мозга у детей раннего возраста с помощью компьютерной томографии / Н.Н.Володин, М.А.Корнюшин, А.В.Горбунов, М.И.Медведев // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С.Корсакова. - 2001. - т.101. - №11. - С.40-43.

4. Кузнецова А.В. Диагностика поражений ЦНС у новорожденных с дыхательными расстройствами / А.В.Кузнецова, О.А.Степанова, Р.Ф.Акберов, Г.З.Юсупова // Вопросы современной педиатрии. - 2005. - №5. - С.5-10.

5. Володин Н.Н. Спектральные характеристики ЭЭГ спокойного сна у детей первого месяца жизни как критерии тяжести и прогноза исходов перенесенного перинатального поражения ЦНС / Н.Н.Володин, Т.А.Строганова, М.Г.Дегтярева, С.О.Рогаткин // Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии. - 2005. - т.4. - №5-6. - С.34-43.

6. Буркова А.С. Классификация перинатальных поражений нервной системы и их последствий у детей первого года жизни (Методические рекомендации Российской ассоциации специалистов перинатальной медицины) / А.С.Буркова, Н.Н.Володин, Л.Т.Журба и др. // Вопросы практической педиатрии: научно-практический журнал для неонатологов и педиатров. - 2006. - т.1. - №5. - С.38-70.

7. Слюсарь Т.А Способ дифференциальной диагностики перинатальных гипоксических и травматических поражений нервной системы у новорожденных / Т.А.Слюсарь, Н.А.Яковлев, А.В.Каргаполов, Т.Л.Костюкова // Патент на изобретение №2249823 от 10.04. 2005 г.

8. Переслегина И.А Способ выявления риска формирования органических поражений нервной системы у новорожденных детей / И.А.Переслегина, Н.Ю.Щельцина, Ю.В.Зимин, С.Л.Нестеров // Патент на изобретение №2077059 от 10.04.1997.

9. Желев В.А. Активность супероксиддисмутазы, глутатион пероксидазы и уровень малонового диальдегида у недоношенных новорожденных с гипоксическим поражением центральной нервной системы / В.А.Желев, Г.П.Филлипов, Л.П.Смирнова и др. // Клиническая лабораторная диагностика. - 2004. - №12. - С.13-16.

10. Костылева А.Ю. Способ диагностики степени тяжести перинатального гипоксического поражения ЦНС у новорожденных детей / А.Ю.Костылева М.С.Философова, Е.В.Шниткова // Патент на изобретение №2257587 от 27.07.2005 г.

11. Баканов М.И. Новые биохимические критерии диагностики и прогноза перинатальных поражений ЦНС у новорожденных детей / М.И.Баканов, В.В.Алатырцев, В.Н.Подкопаев // Медицинский научный и учебно-методический журнал. - 2001. - №1. - С.126-141.

12. Афонин А.А. Способ прогнозирования течения неврологических расстройств у детей раннего возраста с перинатальным поражением ЦНС / А.А.Афонин, С.Е.Авилов, А.В.Шокарев, Н.Г.Зайцева, В.В.Строгулин. Т.А.Афонина // Патент на изобретение №2286575 от 27.10.2006 г.

13. Громада Н.Е. Диагностическое значение цитокинов у новорожденных с тяжелым гипоксическим поражением центральной нервной системы / Н.Е.Громада // УРМЖ. - №12. - С.-140-145.

14. Видеркер Т.В. Клинические, инструментальные и биохимические маркеры гипоксии плода в прогнозировании поражений центральной нервной системы у новорожденного / Т.В.Видеркер, О.В.Ремнева, Н.И.Фадеева // Росс. вестник акушера-гинеколога. - 2008. - №6. - С.4-8.

15. Математическое моделирование медицинских и биологических систем / Под ред. Мазурова В.Д., Смирнова А.И. - УрО АН СССР, 1988. - 104 с.

Способ ранней диагностики перинатального поражения ЦНС у новорожденных с умеренной асфиксией при рождении на основании иммуноферментного исследования сыворотки пуповинной (венозной) крови, отличающийся тем, что определяют концентрацию ИЛ-6 (X₁), ИЛ-8 (Х₂), NO₂ (Х₃), вычисляют диагностический индекс DI по формуле DI=0,005Х₁-0,004Х₂+0,162Х₃-2,055,
и при DI менее 0 делают заключение об отсутствии лабораторных признаков неврологической патологии, а при DI более 0 диагностируют наличие лабораторных признаков перинатального поражения нервной системы у новорожденных.