Способ получения подкожных ксенографтов клеточной линии меланомы кожи человека mel cher с мутацией v600e braf для доклинического изучения противоопухолевых таргетных средств



Способ получения подкожных ксенографтов клеточной линии меланомы кожи человека mel cher с мутацией v600e braf для доклинического изучения противоопухолевых таргетных средств
Способ получения подкожных ксенографтов клеточной линии меланомы кожи человека mel cher с мутацией v600e braf для доклинического изучения противоопухолевых таргетных средств
Способ получения подкожных ксенографтов клеточной линии меланомы кожи человека mel cher с мутацией v600e braf для доклинического изучения противоопухолевых таргетных средств
Способ получения подкожных ксенографтов клеточной линии меланомы кожи человека mel cher с мутацией v600e braf для доклинического изучения противоопухолевых таргетных средств
Способ получения подкожных ксенографтов клеточной линии меланомы кожи человека mel cher с мутацией v600e braf для доклинического изучения противоопухолевых таргетных средств

Владельцы патента RU 2572569:

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Российский онкологический научный центр имени Н.Н. Блохина" (ФГБНУ "РОНЦ им. Н.Н. Блохина") (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной онкологии, и касается создания подкожных ксенографтов меланомы кожи человека для доклинического изучения противоопухолевых таргетных средств. Способ получения подкожных ксенографтов клеточной линии меланомы кожи человека mel Cher с мутацией V600E BRAF для доклинического изучения противоопухолевых таргетных средств включает адаптацию клеточной линии меланомы кожи человека mel Cher к росту у иммунодефицитных мышей Balb/c nude путем многократного пассирования до девяти пассажей взвеси опухолевых клеток по 50-60 мг на мышь со стабильной кинетикой роста и тестирование на наличие мутации V600E BRAF. Получены подкожные ксенографты клеточной линии меланомы кожи человека mel Cher с мутацией V600E BRAF для доклинического изучения противоопухолевых таргетных средств. 3 ил., 4 табл.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной онкологии, и касается создания подкожных ксенографтов меланомы кожи человека для доклинического изучения противоопухолевых средств.

Диссеминированная меланома кожи человека отличается чрезвычайно низкой чувствительностью к различным видам терапии [Демидов Л.В., Орлова К.В. Индивидуализация лекарственного лечения меланомы кожи // Практическая онкология, 2013, Т.14, №4, С. 239-246].

Известно, что мутация V600E в экзоне 15 гена BRAF приводит к гиперактивации серинтреониновой BRAF-киназы с последующей аномальной пролиферацией клеток и быстрой прогрессией меланомы [Graeme J. Walker, et al. Modeling melanoma in mice // Pigment Cell Melanoma Res., 2011, 24, P. 1158-1176; Davies H., et al. Mutations of the BRAF gene in human cancer // Nature, 2002, 417, P. 949-954; Tsai J. et al. Discovery of a selective inhibitor of oncogenic B-Raf kinase with potent antimelanoma activity // Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2008, 10, P. 3041-3046].

Избирательное блокирование BRAF-киназы определило создание противоопухолевых таргетных средств, среди которых наиболее эффективным в лечении диссеминированной меланомы является вемурафениб [Ribas A., et al. BRIM-2: an open label, multicenter phase II study of vemurafenib in previously treated patients with BRAFV600E mutation positive melanoma // J. Clin. Oncol., 2011, 29, P. 8509].

Задачей изобретения является получение подкожных ксенографтов клеточной линии меланомы кожи человека mel Cher с мутацией V600E BRAF для доклинического изучения противоопухолевых таргетных средств.

Поставленная задача решается тем, что для получения подкожных ксенографтов использована клеточная линия меланомы кожи человека mel Cher, адаптированная к росту у иммунодефицитных мышей Balb/c nude со стабильной кинетикой роста, тестированная на наличие мутации V600E BRAF и использованная для доклинического изучения противоопухолевых таргетных средств.

Для доклинического изучения противоопухолевых таргетных средств была использована клеточная линия меланомы кожи человека mel Cher, депонированная в Коллекции клеточных культур института цитологии РАН РККК (П) 704Д. Клеточная линия меланомы кожи человека mel Cher имеет стабильные культуральные, морфологические и индивидуальные фенотипические характеристики и высокий митотический потенциал [патент РФ №2364624].

В клеточной линии меланомы кожи человека mel Cher определена мутация V600E в экзоне 15 гена BRAF.

Технический результат изобретения.

Получены подкожные ксенографты клеточной линии меланомы кожи человека mel Cher с мутацией V600E BRAF для доклинического изучения противоопухолевых таргетных средств.

Способ осуществляли следующим образом.

Адаптацию клеточной линии меланомы кожи человека mel Cher к росту у иммунодефицитных мышей Balb/c nude осуществляли многократным пассированием мышам различных прививочных доз клеток. В стабильных пассажах подкожных ксенографтов определяли мутацию V600E BRAF с последующим применением вемурафениба.

Контролем состоявшейся адаптации клеточной линии меланомы кожи человека mel Cher к росту in vivo служили следующие трансплантационные характеристики: прививочная доза клеток для 100% получения подкожных ксенографтов, цитологически идентичных клеточной линии меланомы кожи человека mel Cher после имплантации у мышей (первый пассаж); устойчивая многократная трансплантация до девятого пассажа взвесью опухолевой ткани; устойчивая кинетика роста меланомы кожи человека mel Cher у мышей на поздних пассажах; гистологическая верификация меланомы.

Критерием к применению подкожных ксенографтов меланомы кожи человека mel Cher для доклинического изучения противоопухолевых таргетных средств считали наличие мутации V600E BRAF и высокую чувствительность к вемурафенибу.

Трансплантационные характеристики клеточной линии меланомы кожи человека mel Cher получали следующим образом.

Инокулятом для имплантации служила культивированная в CO2 клеточная линия меланомы кожи человека mel Cher. Отмытые физиологическим раствором от культуральной среды клетки помещали в питательную среду 199 и имплантировали подкожно в дозах 0,1×107; 0,5×107; 1,0×107 клеток на мышь в 0,2 мл питательной среды 199. В исследовании использовали 12 иммунодефицитных мышей Balb/c nude по 4 мыши на каждую дозу клеток. Контроль прививаемости клеток осуществляли по наличию пальпируемых опухолей у мышей с регистрацией длительности латентного периода в течение 21 дня. По окончании исследования определили оптимальную прививочную дозу 1,0×107 клеток на мышь, обеспечивающую 100% прививаемость.

Получение подкожных ксенографтов клеточной линии меланомы кожи человека mel Cher с мутацией V600E BRAF.

Подкожные ксенографты меланомы кожи человека mel Cher получали на 10 мышах Balb/c nude. Многократные пассажи выполняли взвесью опухолевой ткани по 50-60 мг на мышь в разведении 1:20 питательной средой 199. Наличие трансплантированных опухолей у мышей в одни и те же сроки при многократном пассировании свидетельствовали о достижении стабильных кинетических характеристик подкожных ксенографтов in vivo.

Кинетику роста подкожных ксенографтов определяли по среднему объему опухолей, начиная от появления всех пальпируемых опухолей с учетом латентной фазы роста. Период увеличения среднего объема опухоли (Vcp=a×b×c) в два и более раз определял длительность экспоненциальной фазы роста, а стабилизация роста опухоли на уровне менее двукратного увеличения - длительность стационарной фазы роста. О кратности роста опухоли судили по соотношению последующего среднего объема к предыдущему (Vt/Vt-1) при измерении опухоли каждые 3-4 дня в течение 2-4 недель.

Статистический анализ параметров роста четвертого пассажа выполняли с помощью стандартного метода Фишера. Отсутствие значимых различий кривых роста опухоли двух пассажей в полулогарифмической системе координат подтверждало устойчивость кинетических характеристик роста подкожных ксенографтов меланомы кожи человека mel Cher у мышей Balb/c nude.

Гистологическую верификацию подкожных ксенографтов меланомы кожи для сравнения клеточного состава с исходной клеточной линией меланомы кожи человека mel Cher выполняли в девятом пассаже с устойчивой кинетикой роста с помощью световой микроскопии срезов опухоли, окрашенных гематоксилином и эозином.

Изобретение иллюстрируется таблицами (1-4) и фигурами (1-3).

Табл. 1. Выбор оптимальной прививочной дозы клеток меланомы кожи человека mel Cher для получения подкожных ксенографтов у мышей Balb/c nude.

Табл. 2. Динамика роста опухоли после имплантации 1,0×107 клеток меланомы кожи человека mel Cher у мышей Balb/c nude (первый пассаж).

Табл. 3. Средний объем опухоли меланомы кожи человека mel Cher у мышей Balb/c nude (четвертый пассаж).

Табл. 4. Средний объем опухоли меланомы кожи человека mel Cher у мышей Balb/c nude (девятый пассаж).

Фиг. 1. Гистологическая картина подкожного ксенографта меланомы кожи человека mel Cher на 14 сутки роста опухоли (девятый пассаж).

Фиг. 2. Выявление мутации V600E BRAF в подкожных ксенографтах меланомы кожи человека mel Cher у мышей Balb/c nude (девятый пассаж).

Фиг. 3. Противоопухолевая активность вемурафениба у мышей с подкожными ксенографтами меланомы кожи человека mel Cher.

В табл. 1 показана зависимость роста опухоли после подкожной имплантации клеток меланомы кожи человека mel Cher от прививочной дозы клеток. Оптимальной была прививочная доза 1,0×107 клеток на мышь. При применении оптимальной прививочной дозы 1,0×107 клеток на мышь на 10 сутки (латентная фаза) у 100% мышей определяли пальпируемые опухоли.

В табл. 2 показано, что кинетика роста опухолей первого пассажа была относительно медленной (21 день), объем опухоли не достиг 1,0 см, а фаза экспоненциального роста практически отсутствовала. Кратность увеличения опухоли в течение этого периода была менее 2,0. Средний объем опухоли составил: на 10 сутки 42,2±10,5 мм3, на 15 сутки 112,0±35,1 мм3. Далее к 21 суткам объем опухоли достиг 133,0±27,8 мм3, превышая в 3,2 раза исходный объем.

В табл. 3 показано, что кинетика роста опухолей прогрессивно изменялась на четвертом пассаже. Латентная фаза сократилась до 8 дней, средний объем опухоли составил 68,0±25,0 мм3, почти в 1,6 раз превышающий объем опухоли первого пассажа. На 11 сутки средний объем опухоли составил 200±67,0 мм3 при кратности роста опухоли 2,9. На 14, 17 и 21 сутки, соответствующие стационарной фазе, кратность роста опухоли варьировала между 1,9; 2,1 и 1,8. Средний объем опухоли на 21сутки достиг 1526,3±496,0 мм3, в 10 раз превышая средний объем опухоли первого пассажа.

Устойчивая кинетика роста опухоли, достигнутая к четвертому пассажу, сохранялась до девятого пассажа с одинаковыми временными характеристиками: латентной фазой до 8 дней, экспоненциальной фазой до 14 дней и стационарной фазой до 21 дня после трансплантации (табл. 4).

При гистологическом исследовании подкожных ксенографтов меланомы кожи человека mel Cher девятого пассажа выявлено наличие крупных полиморфных клеток, идентичных цитологической характеристике культуры клеток меланомы кожи человека mel Cher (фиг. 1).

Мутацию V600E BRAF определяли в клетках опухоли меланомы кожи человека mel Cher девятого пассажа на пике экспоненциальной фазы роста.

На фиг. 2 представлена мутация V600E BRAF в подкожных ксенографтах меланомы кожи человека Mel Cher у мышей (а - дикий тип, b - мутация 1799Т>А, приводящая к замене валина на глутаминовую кислоту в позиции 600 (V600E), триплет GTG (GAG выделен серой полосой).

Для оценки чувствительности к ингибитору BRAF-киназы вемурафениб в разовой дозе 75 мг/кг вводили в желудок 10 мышам ежедневно с 4 по 19 сутки после трансплантации опухоли. Контрольная группа мышей не получала вемурафениб. Динамику роста опухоли в обеих группах оценивали во время и после применения вемурафениба каждые 4-5 дней в течение 20 дней.

На фиг. 3 показано непрерывное прогрессивное увеличение объема опухоли у мышей контрольной группы, в то время как вемурафениб полностью ингибировал рост опухоли в течение 7 дней с последующим ростом опухоли (серая кривая - контрольная группа, черная кривая - опытная группа).

Способ получения подкожных ксенографтов клеточной линии меланомы кожи человека mel Cher с мутацией V600E BRAF для доклинического изучения противоопухолевых таргетных средств, включающий адаптацию клеточной линии меланомы кожи человека mel Cher к росту путем многократного пассирования до девяти пассажей взвеси опухолевых клеток по 50-60 мг на мышь со стабильной кинетикой роста и тестирование на наличие мутации V600E BRAF.



 

Похожие патенты:

Представленная группа изобретений относится к области биотехнологии и касается способов сбора функциональных клеток (варианты). Охарактеризованные решения заключаются в имплантации имплантируемой медицинской емкости под кожу на срок не более двух недель, где популяция клеток мобилизована в емкость с помощью любого из белков HMGB1, HMGB2, HMGB3, S100A8, S100A9 или гиалуроновой кислоты или смеси любых двух или более из указанных.

Изобретение относится к биотехнологии, регенеративной медицине и может быть использовано в цитологии, гистологии, трансплантологии, микробиологии, биомедицинских исследованиях.

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к выделенному пептиду, который имеет индуцибельность цитотоксических Т-лимфоцитов (CTL), а также к его применению. Предложенный пептид может использоваться в противораковой иммунотерапии, более конкретно, в противораковых вакцинах.

Изобретение относится к области молекулярной биологии. Предложено применение терапевтически эффективного количества плацентарных стволовых клеток в получении фармацевтической композиции для использования в лечении индивидуума, имеющего заболевание, расстройство или патологическое состояние легких, причем терапевтически эффективное количество представляет собой количество, достаточное для того, чтобы вызвать детектируемое улучшение одного или нескольких симптомов указанного заболевания, расстройства или патологического состояния; где указанное заболевание, расстройство или патологическое состояние легкого представляет собой легочный саркоидоз, астму, бронхит или острый респираторный дистресс-синдром, и при этом плацентарные стволовые клетки являются CD10+, CD34-, CD105+ и CD200+, что определяется с помощью проточной цитометрии.

Изобретение относится к медицине. Для получения культуры клеток ретинального пигментного эпителия (РПЭ) взрослого донора-трупа производят удаление из глазного яблока донора-трупа роговично-склерального диска.

Изобретение относится к области молекулярной биологии. Предложен способ получения постоянной линии клеток-амниоцитов человека, включающий трансфекцию зародышевых клеток-амниоцитов человека молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую продукты генов аденовирусов Е1А и Е1В, причем указанную последовательность нуклеиновой кислоты получают из серотипа 5 аденовируса человека, и последующую трансфекцию постоянной линии клеток-амниоцитов человека, полученной на первом этапе, молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую большой SV40 Т-антиген.

Изобретение относится к биотехнологии и трансплантологии (клеточной терапии). Описан способ получения пациент (донор)-специфических фибробластоподобных клеток из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток человека.

Изобретение относится к области биотехнологии. Описан способ предифференцировки стромальных стволовых клеток костного мозга.

Группа изобретений относится к области биотехнологии. Способ выделения ганглиозида GM1 предусматривает получение тканей не бычьего и не свиного происхождения, содержащих клетки, продуцирующие GM1; выделение из указанных тканей клеток, продуцирующих ганглиозид GM1; экспансию указанных клеток, продуцирующих GM1, в культуре при подходящих условиях, способствующих экспансии указанных клеток; экспрессию ганглиозида GM1 в культуре при подходящих условиях; выделение указанного ганглиозида GM1 из указанной культуры, который может быть использован для лечения болезни Паркинсона и других неврологических заболеваний.

Изобретение относится к медицине и биотехнологии, в том числе к медицинской и косметической трансплантологии, и представляет собой микротрансплантат (MKT), состоящий из клеток человека, прикрепившихся на поверхности микроносителя, состоящего из полигликолидных волокон, или их группы, диаметром до 20 мкм и длиной от 100 до 1000 мкм.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу криоконсервации клеток животных. Способ основан на применении коллагенового клеточного носителя, имеющего особый состав, а также специфическую толщину и соответствующие механические свойства, которые сохраняются после размораживания. Применение такого коллагенового клеточного носителя создает удобную основу для криоконсервации, что проявляется в очень высокой выживаемости после размораживания. Изобретение также относится к замороженному комплексу коллагенового носителя-клеток, получаемому с помощью указанного способа, а также к его применению после размораживания, в частности, для фундаментальных исследований или для in vitro тест-систем. Изобретение позволяет достичь очень высокой выживаемости клеток после размораживания и получать клетки и комплексы тканей, которые уже прикреплены к механически прочному и биологически совместимому каркасу. 4 н. и 9 з.п. ф-лы, 6 ил., 4 табл., 5 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложены стволовые клетки, полученные культивированием моноцитов человека в присутствии (i) M-CSF с концентрацией от 5 до 100 нг/мл и (ii) по меньшей мере одного представителя, выбранного из группы, состоящей из ганглиозида с концентрацией от 1 до 100 мкг/мл и растворимого в воде растительного экстракта, экстрагированного методом экстракции Folch, с концентрацией от 0,1 до 100 мкг/мл, посредством этого дедифференцируя моноциты, где экспрессия гена CSCR4 указанных стволовых клеток более чем в три или четыре раза больше по сравнению с экспрессией стволовыми клетками, полученными путем культивирования моноцитов человека в присутствии M-CSF и IL-3, и экспрессия гена CSCR4 указанных стволовых клеток более чем в два или три раза больше по сравнению с экспрессией мезенхимальными стволовыми клетками, полученными из костного мозга, для лечения заболеваний, связанных с клеточными повреждениями, повреждениями тканей или органов. 4 н. и 11 з.п. ф-лы, 7 ил., 3 табл., 2 пр.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для рекомбинантной экспрессии иммуномодуляторных белков. Конструируют вектор, содержащий полинуклеотид, кодирующий генный переключатель, при этом указанный полинуклеотид содержит (1) по меньшей мере одну последовательность фактора транскрипции, которая функционально связана с промотором, при этом указанная по меньшей мере одна последовательность фактора транскрипции кодирует лиганд-зависимый фактор транскрипции, и (2) полинуклеотид, кодирующий полипептид IL-12 и один или более иммуномодуляторных полипептидов, выбранных из IL-2, IL-7, IL-15, IL-18, IL-21, GM-CSF, CCL3 (MIP-1a), CCL5 (RANTES), CCL7 (MCP3), XCL1 (лимфотактин), CCL19 (MIP-3b), CXCL9 (MIG), CXCL10 (IP-10), CXCL12 (SDF-1), CCL21 (6Ckine) или TNF-альфа. Изобретение позволяет использовать вектор для управляемой экспрессии иммуномодуляторных белков. 4 н. и 8 з.п. ф-лы, 9 ил., 4 табл., 2 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии. Полученная новая клеточная линия рака почки человека IBGVAT R 27 обладает стабильными культуральными и морфологическими характеристиками. Линия клеток может использоваться, например, для создания противоопухолевых вакцин (цельноклеточных или генноинженерных), тестирования активности различных фармацевтических препаратов, создания диагностических наборов и тест-систем для разработки новых лекарственных средств. Клеточная линия депонирована во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ВКПМ) под регистрационным номером Н-152. 1 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии. Полученная новая клеточная линия рака почки человека IBGVAT R 6 обладает стабильными культуральными и морфологическими характеристиками. Линия клеток может использоваться, например, для создания противоопухолевых вакцин (цельноклеточных или генноинженерных), тестирования активности различных фармацевтических препаратов, создания диагностических наборов и тест-систем для разработки новых лекарственных средств. Клеточная линия депонирована во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ВКПМ) под регистрационным номером Н-151. 1 пр.

Изобретение относится к биотехнологии. Предложена биодобавка в питательную среду для культивирования клеток животных и репродукции на них вирусов, представляющая собой экстракт из кабачков и мышц щуки. Указанный экстракт получают экстрагированием измельченных гомогенизатором тканей кабачков и мышц щуки раствором Хэнкса в соотношении 1:3 при температуре 1-2°С в течение 24 ч, центрифугированием и сбором супернатантов. Осуществляют замораживание супернатантов при температуре -20°С в течение 5-7 суток, оттаивание при температуре 4-20°С, очистку. Смешивают полученные экстракты растительного и животного происхождения в соотношении 1:1 и стерилизуют фильтрацией. Полученный экстракт характеризуется следующими показателями: оптической плотностью 0,081±0,004 ед. опт. пл., рН 7,26±0,04, содержанием общего белка 9,1±0,04 г/л, свободного гемоглобина 0 г/л, общих липидов 0,15±0,07 г/л, общего холестерина 0,02±0,01 ммоль/л. Изобретение обеспечивает повышение роста клеток животных и репродукции на них вирусов. 6 табл., 5 пр.

Предложенное изобретение относится к области биотехнологии, а именно к вирусоподобной частице (VLP) для применения в вакцинах или антигенных композициях для лечения или профилактики инфекции вируса бешенства (RV), а также способам их получения и применения. Вирусоподобная частица содержит один или несколько гликопротеинов (G-белков) RV, где G-белки находятся в форме мицеллы и формируют триммер и где указанная мицелла содержит детергент нонилфенол этоксилат 9 (NP-9). Предложенное изобретение позволяет с высокой эффективностью лечить или профилактировать инфекции вируса бешенства. 5 н. и 16 з.п. ф-лы, 6 ил., 2 табл., 5 пр.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии. Предложен способ получения нагруженных антигеном, активированных дендритных клеток (DC) для применения в иммунотерапии, включающий нагрузку по меньшей мере одним антигеном неактивированных DC; активацию неактивированных DC IFN-γ и липополисахаридом (LPS) для образования активированных DC; криосохранение активированных DC и размораживание активированных DC; где степень извлечения и жизнеспособность активированных DC после размораживания выше или равна приблизительно 70%, и где размороженные активированные DC продуцируют эффективное количество по меньшей мере одного цитокина для создания Т-клеточного ответа. Также рассмотрена криосохраненная композиция, содержащая DC, и способ вызова иммунного ответа у млекопитающего, включающий введение композиции по изобретению. Данное изобретение может найти дальнейшее применение в производстве лекарственных средств на основе DC. 3 н. и 12 з.п. ф-лы, 8 ил., 4 пр.

Настоящее изобретение относится к способу получения панкреатических гормонпродуцирующих клеток (варианты). Представленный способ включает культивирование человеческих индуцированных плюрипотентных стволовых (iPS) клеток в среде, содержащей (+)-(R)-транс-4-(1-аминоэтил)-N-(4-пиридил)циклогексанкарбоксамид дигидрохлорид; далее культивирование полученных клеток в среде, содержащей (i) 6-[[2-[[4-(2,4-дихлорфенил)-5-(4-метил-1Н-имидазол-2-ил)-2-пиримидинил]амино]этил]амино]никотинонитрил и/или (ii) (2′Z,3′Е)-6-броминдирубин-3′-оксим; далее культивирование полученных клеток в среде, содержащей (i) 6-[[2-[[4-(2,4-дихлорфенил)-5-(4-метил-1Н-имидазол-2-ил)-2-пиримидинил]амино]этил]амино]никотинонитрил и/или (ii) (2′Z,3′E)-6-броминдирубин-3′-оксим и активин; далее образование клеточной массы из полученных клеток и культивирование клеточной массы в суспензионном состоянии в среде; далее культивирование полученных клеток в среде, содержащей ретиноевую кислоту, дорсоморфин, 4-[4-(1,3-бензодиоксол-5-ил)-5-(2-придинил)-1Н-имидазол-2-ил]-бензамид и основной фактор роста фибробластов; далее культивирование полученных клеток. При осуществлении заявленного изобретения не используется питающая клетка, а среда не содержит сыворотку. Изобретение может быть использовано в клеточной терапии при лечении сахарного диабета. 2 н. и 1 з.п. ф-лы, 8 ил., 3 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен способ получения клеток дефинитивной эндодермы, включающий культивирование стволовых клеток, полученных из партеногенетических клеток в присутствии трихостатина A в условиях отсутствия активина А, где TSA изменяет эпигенетический статус клетки, последующее культивирование стволовых клеток в отсутствие TSA, с получением таким образом клеток дефинитивной эндодермы, где TSA присутствует в концентрации 100 нМ-100 мкМ и где культивирование в присутствии TSA проводят в течение 24-72 часов и культивирование в отсутствие TSA проводят в течение 6-72 часов. 8 з.п. ф-лы, 4 табл., 3 ил., 2 пр.
© Патентный поиск, поиск патентов на изобретения - FindPatent.RU 2012-2024
Политика конфиденциальности 2016-01-20 2016-01-20T19:54:07
Наверх