Способ прогнозирования риска развития аденокарциномы желудка при хронических процессах язвообразования органа

Авторы патента:

Семячкин-Глушковский Игорь Александрович (RU)

Семячкина-Глушковская Оксана Валерьевна (RU)

G01N33/68 - с использованием протеинов, пептидов или аминокислот

Владельцы патента RU 2612021:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Саратовский национальный исследовательский государственный университет имени Н.Г. Чернышевского" (RU)

Изобретение относится к области медицины, а именно к области гастроэнтерологии и онкологии, и может быть использовано для прогнозирования риска развития аденокарциномы желудка. Сущность способа: проводят биохимическое определение содержания бета-аррестина-1 и оксида азота в крови; при концентрации в крови бета-аррестина-1 выше 0,5 нг/мл и оксида азота выше 0,5 мкг/мл делают вывод о риске развития аденокарциономы желудка. Изобретение обеспечивает прогнозирование развития ранних форм рака желудка. Изобретение обеспечивает снижение травматического воздействия на пациента. 1 табл.

Изобретение относится к области медицины, а именно к гастроэнтерологии и онкологии, и предназначено для прогнозирования риска развития аденокарциономы желудка при наличии хронических язв органа.

Известен способ диагностики рака желудка на ранней стадии (см. патент РФ на изобретение №2204835, МПК G01N 33/50, C12Q 1/68, опубл. 20.05.2003), основанный на иммуногистохимическом определении в слизистой оболочке желудка экспрессии мРНК циклооксигеназы-2 (ЦОКС-2) или белка ЦОКС-2. На повышенный риск развития рака желудка указывают высокие уровни данной экспрессии по сравнению с контрольными образцами. Диагностические наборы содержат в одном случае реагенты для выделения РНК или поли-А+мРНК, специфические праймеры Цокс-2 для ОТ-ПЦР и фрагменты кДНК для изготовления пробных ДНК или РНК, а в другом - специфичные в отношении Цокс-2 поликлональные или моноклональные антитела, специфические пептиды, обладающие связывающим сродством к Цокс-2, или олигонуклеотиды, обладающие связывающим сродством к Цокс-2.

Недостатком данного способа диагностики рака желудка является его неспецифичность, травматичность (взятие биопсии тканей желудка), трудоемкость и дороговизна как в отношении использовании специфических реактивов при проведении иммуногистохимического анализа, а также секвенирования ДНК, так и самого оборудования, которое не только дорого в эксплуатации, но и требует высококвалифицированных и специально подготовленных специалистов. Оценка проведенного анализа также требует опыта гистологов, как правило, двух трех человек для постановки правильного диагноза вне зависимости от положительной иммуногистохимической реакции. Таким образом, данный метод может быть использован для уточнения диагноза рака желудка, но не заменяет рутинного традиционного опыта клиницистов в этом случае. Также данный метод за счет дороговизны может быть внедрен только в экспериментальные клинические центры, но не в широкую медицинскую практику, особенно в районные клиники.

Известен способ ранней диагностики злокачественных образований желудка (см. патент РФ на изобретение №2008791, МПК A61B 5/00, A61B 1/00, опубл. 15.03.1994), основанный на применении витальных специальных красителей при эндоскопическом обследовании желудка, что позволяет повысить надежность диагностики указанного состояния при данном виде исследования органа. Сущность изобретения основана на том, что при первых эндоскопических признаках дисплазии врач устанавливает координаты этих участков с использованием цилиндрической координатной сетки и заносит их в специальную базу данных. Если при последующем гистологическом анализе биоптатов выявляются признаки дисплазии или метаплазии, проводят повторную биопсию из ранее установленных участков и при нарастании степени дисплазии устанавливают диагноз рака желудка. Однако проводить повторные эндоскопические исследования в одном и том же участке желудка не представляется возможным. Для повышения качества и технического усовершенствования повторного эндоскопического обследования больных авторы указанного способа предложили применение специфических красителей, которые накапливаются в пораженных участках желудка и определяют тем самым необходимое положение для повторной биопсии.

Известен способ диагностики неопластических изменений слизистой оболочки пищеварительного тракта (см. патент РФ на изобретение №2491029, МПК A61B 18/20, A61K 49/00, опубл. 27.08.2013). Согласно известному способу используют орошение желудка 0,3% водным раствором конгорота в количестве 10-15 мл или 0,5% водным раствором индигокармина в количестве 10-15 мл с последующим спектрофотометрическим исследованием стенок желудка на длине волны лазерного излучения - 532 нм (для индигокармина) и на длине волны - 632 нм (для совместного использования индигокармина или конгорота).

Недостатком данных способов является их травматичность, обусловленная необходимостью проведения повторных биопсий, а также невысокая достоверность. Связано это как с качеством визуализации эффектов флуороидов на ткани желудка из-за снижения интенсивности сигнала по длине гастрокоспического зонда, так и с концентрацией применяемых флуорисцентных агентов для исследования.

Наиболее близким к предлагаемому способу является способ прогнозирования риска развития аденокарциномы желудка при хронических язвах органа (Wang LG, Su BH, Du JJ. Expression of β-arrestin 1 in gastric cardiac adenocarcinoma and its relation with progression. Asian Pac J Cancer Prev. 2012;13(11):5671-5). Авторы, используя иммуногистохимическое определение бета-аррестина-1, показали высокую экспрессию данного фактора клеточного гомеостаза на 50 пациентах с аденокарциномой кардиального отдела желудка. Сущность метода состоит в следующем. У пациентов при эндоскопическом обследовании берут биоптаты с подозреваемых участков, помещают в 10% формалин, далее в парафин и проводят иммуногистохимический анализ с применением специфических антител на бета-аррестин-1. Выявление высокой экспрессии данного фактора, о которой судят по интенсивности окрашивания гистологических срезов, делают заключение о наличии злокачественных изменений в тканях желудка.

Указанный способ по применению бета-аррестина-1 в качестве маркера аденокарциономы желудка является пионерской работой и потому представлен в качестве экспериментального образца, который не внедрен в широкую медицинскую практику в силу его дороговизны, необходимости привлечения для выполнения работ специально обученных специалистов, долговременного проведения анализа, а также отсутствия четких количественных критериев экспрессии бета-аррестина-1, что невозможно при проведении иммуногистохимии.

Эти факты послужили основанием для создания нового способа прогнозирования риска развития злокачественных образований желудка, в частности аденокарциономы у пациентов с хроническими язвенными процессами.

Сущность изобретения состоит в том, что кровь берется натощак в количестве 2 мл у пациентов, у которых за сутки исключается белковая пища. Затем кровь центрифугируется в течение 20 минут при 3000 оборотах. Из полученной надосадочной жидкости забирается 1 мл. Далее методики выполняются в соответствии со: 1) стандартным алгоритмом иммуноферментного определения бета-аррестина-1 с применением специфических антител, например, ИФА набор Beta-arrestin-1 (ARRB1) ELISA kit, 96, CSB EL002134 RA и биохимическим определением оксида азота, подробно описанном в представленном нами ранее методе (Патент РФ № 2469330).

Технический результат заключается в снижении травматического воздействия на пациента.

Указанный технический результат достигается тем, что в способе прогнозирования риска развития аденокарциномы желудка согласно решению у пациентов с хроническими язвами желудка проводят биохимическое определение содержания бета-аррестина-1 и оксида азота в крови; при уровне в крови бета-аррестина-1, превышающего 0,5 нг/мл и для оксида азота выше 0,5 мкг/мл делают заключение о риске развития аденокарциномы желудка.

Заявляемый способ позволяет спрогнозировать риск развития аденокарциономы желудка у пациентов с хроническим язвообразованием по биохимическому определению в крови концентраций бета-аррестина-1 и оксида азота. Согласно способу кровь берут в количестве 2 мл натощак (за сутки исключается белковая пища). Проводят биохимическое определение содержания бета-аррестина-1 и оксида азота в крови. При концентрации в крови бета-аррестина-1 выше 0,5 нг/мл и оксида азота выше 0,5 мкг/мл делают вывод о риске развития аденокарциономы желудка.

Способ прогнозирования риска развития аденокарциономы при хроническом язвообразовании желудка и обострении этих процессов прошел клиническую апробацию в хирургическом отделении центра гастроэнтерологии г. Саратова. Контролем служили биоптаты нормальной слизистой желудка у 17 пациентов (10 мужчин и 7 женщин, средней возраст 52 года), которые проходили эндоскопическое исследование перед проведением хирургических манипуляций, связанных с удалением пупочной грыжи. В качестве контроля служили две группы пациентов (Таблица). Первая группа включала 133 пациента (87 мужчин и 46 женщин, средний возраст 48 лет) с кровоточащими хроническими язвами желудка (степень активности кровотечения Forrest II). Вторая группа контроля включала пациентов (n=37, средний возраст 57 лет) с аденокарциономой желудка. Диагноз был установлен по гистологическому исследованию биоптатов двумя специалистами морфологами.

Показано, что при хронических язвах увеличивается в 1,3 и 1,5 раза содержание оксида азота как в крови, так и в тканях желудка, в то время как уровень бета-аррестина-1 остается в пределах нормы. При развитии аденокарциономы желудка у пациентов, длительно наблюдающихся с диагнозом хронических язв органа и проходящих лечение после остановки острого язвенного кровотечения, наблюдается повышение продукции бета-аррестина-1 в тканях желудка в 2,1 раза, что также соответствует высокому его содержанию в крови (в 1,9 раза).

На основе проведенных данных было заключено, что определение в крови оксида азота и бета-аррестина-1 является дополнительным клиническим маркером риска развития аденокарциономы желудка в группе пациентов с хроническими язвами органа и имеющими случаи кровотечения из пептических язв. Так, при язвообразовании повышается содержание оксида азота в крови и тканях желудка до 0,44±0,07 мкг/мл и 0,48±0,02 мкг/мл без изменения концентрации бета-аррестина-1. Развитие аденокарциономы сопровождается параллельным увеличением продукции оксида азота 0,5 мкг/мл и бета-аррестина-1 0,5 нг/мл, что является маркером для проведения дополнительных диагностических мероприятий по прогнозированию заболевания.

Преимуществом предлагаемого метода является его проста в выполнении, безопасность для пациентов, точность и скорость в выполнении (в течение 60 мин), не требующего специального обучения и опыта врачей лаборантов. Определение бета-аррестина-1 проводится с помощью специфических антител, рассчитанных на 96 определений и имеющих длительный срок годности. Для определения бета-аррестина-1 иммуноферментным методом требуется стандартные аппаратные комплексы, широко распространенные в городских и районных клиниках. Определение оксида азота в крови и тканях желудка требует применение спектофотометра, входящий в комплекс оборудования любой клинической лаборатории, и стандартный недорогой набор реактивов. Предлагаемый способ прогнозирования риска развития аденокарциномы желудка при хроническом язвообразовании органа и обострении этих процессов имеет также преимущества в том, что позволяет проводить многократно уточняющие анализы по крови в силу высокой корреляции изменений бета-аррестина-1 и оксида азота в тканях желудка и крови и снимает необходимость травмирования органа при повторных биопсиях.

Способ прогнозирования риска развития аденокарциномы желудка, отличающийся тем, что проводят биохимическое определение содержания бета-аррестина-1 и оксида азота в крови; при концентрации в крови бета-аррестина-1 выше 0,5 нг/мл и оксида азота выше 0,5 мкг/мл делают вывод о риске развития аденокарциономы желудка.

Похожие патенты:

Меченые дендримерные пептиды // 2611399

Изобретение относится к медицине, а именно к молекулярной фармакологии, и может быть использовано для получения меченых катионных дендримерных пептидов для внутриклеточной доставки нуклеиновых кислот (НК).

Способ мониторинга эффективности противоопухолевой терапии немелкоклеточного рака легкого // 2611340

Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и касается способов мониторинга эффективности противоопухолевого лечения немелкоклеточного рака легкого.

Новый аллерген // 2608494

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к новым аллергенам лошади, и может быть использовано в медицине для профилактического или терапевтического лечения или диагностики аллергии типа I на лошадей.

Способ получения агента, связывающегося с препро-вазопрессином или с его фрагментами // 2607588

Группа изобретений относится к медицине и касается способа получения связывающего агента или смеси связывающих агентов, способных связываться с эпитопом, содержащимся в аминокислотной последовательности, соответствующей С-концевой части препро-вазопрессина, состоящей из аминокислот 146-163, но не содержащей аминокислоту 164, где указанный способ включает стадии получения связывающего агента с использованием формирующего агента; определения способности связывающего агента связываться с аминокислотной последовательностью длиной по меньшей мере 12 аминокислот, содержащейся в аминокислотной последовательности, соответствующей С-концевой части, но не содержащей аминокислоту 164 препро-вазопрессина; отбора связывающего агента из множества связывающих агентов.

Способ определения характеристик по меньшей мере одного микроорганизма с помощью масс-спектрометрии // 2604199

Настоящее изобретение относится к области микробиологии и касается способа определения таких характеристик, как типирование, потенциальная устойчивость по меньшей мере к одному антимикробному средству и фактора вирулентности, по меньшей мере, одного микроорганизма из образца.

Способ оценки степени тяжести воспалительных заболеваний органов малого таза // 2602914

Изобретение относится к области медицины, а именно к гинекологии и гемостазиологии, и может быть использовано для оценки степени тяжести воспалительных заболеваний органов малого таза.

Способ прогнозирования эффективности терапии пероральным сахароснижающим препаратом метформином у больных сахарным диабетом 2 типа // 2602663

Изобретение относится к области медицины, и касается способа прогнозирования эффективности монотерапии пероральным сахароснижающим препаратом метформином у больных сахарным диабетом 2 типа.

Способ диагностики генетической предрасположенности к развитию ишемического инсульта у больных с фибрилляцией предсердий // 2602451

Изобретение относится к области медицины и касается способа диагностики генетической предрасположенности к риску развития ишемического инсульта у больных с фибрилляцией предсердий (ФП).

Способ отбора доноров крови для получения плазмы с целью лечения пациентов с инфекционными заболеваниями и осложнениями после оперативных вмешательств, травм и ожогов // 2601372

Изобретение относится к области медицины, в частности трансфузиологии, и результаты его будут востребованы в практической медицине. Способ касается отбора доноров для получения плазмы крови с целью лечения пациентов с инфекционными заболеваниями и осложнениями после оперативных вмешательств, травм и ожогов, путем исследования иммунологических показателей крови.

Средства и способы диагностики и лечения рассеянного склероза // 2601298

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к применению пептида, состоящего из по меньшей мере 8 последовательных аминокислотных остатков последовательности, представленной в SEQ ID NO:3, для диагностики рассеянного склероза, что может быть использовано в медицине.

Способ неинвазивной диагностики энтеропатии, индуцированной белком коровьего молока, у детей грудного возраста // 2613160

Способ относится к области медицины, а именно к аллергологии в педиатрии, детской гастроэнтерологии, и может быть использован для диагностики аллергической энтеропатии, индуцированной белком коровьего молока у детей грудного возраста. Сущность способа заключается в определении в копрофильтратах у детей с подозрением на энтеропатию до начала элиминационной терапии зонулина, β-дефензина 2, эозинофильного катионного протеина. При повышении β-дефензин 2 более 34,8 нг/мл, зонулина более 1,59 нг/мл, эозинофильного катионного протеина более 455,57 нг/мл у пациента регистрируется непереносимость белков коровьего молока. Способ обеспечивает безопасную, неинвазивную и эффективную диагностику пищевой гиперчувствительности у детей любого возраста и позволяет своевременно определять тактику патогенетической терапии. 1 табл., 3 пр.

Способ прогнозирования развития плацентарной недостаточности при беременности, индуцированной экстракорпоральным оплодотворением // 2613309

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для прогнозирования развития плацентарной недостаточности в первом триместре беременности у женщин после процедуры экстракорпорального оплодотворения. Способ заключается в определении в ранние сроки беременности содержания ренина, эндоглина и растворимого рецептора-1 к васкуло-эндотелиальному фактору роста (sVEGF-R1) в сыворотке крови женщины с последующим вычислением прогностического индекса PI. При РI>0 прогнозируют развитие плацентарной недостаточности во второй половине беременности, при PI<0 делают заключение о низком риске развития данного патологического состояния, а при PI равном нулю проводят повторное исследование через две недели. Предлагаемый способ позволяет повысить до 88% эффективность прогноза развития плацентарной недостаточности у женщин, беременность которых наступила в результате вспомогательных репродуктивных технологий с первого триместра гестации, что дает возможность осуществления превентивных мероприятий, направленных на профилактику формирования данного патологического состояния. 3 пр.

Биомаркеры для диагностики, прогноза, оценки и стратификации терапии обмороков // 2613885

Настоящее изобретение относится к способу стратификации терапии обморока у пациента путем определения уровня СТ-проЕТ-1 в образце жидкости организма указанного пациента, корреляции уровня СТ-проЕТ-1 со стратификацией терапии обморока, где пациентов стратифицируют в соответствии с их потребностью в кардиостимуляторе посредством определения уровня СТ-проЕТ-1. Уровень выше предопределенного порогового уровня является показательным для пациентов, страдающих ортостатической гипотензией, которые не нуждаются в кардиостимуляторе, и где уровень ниже предопределенного порогового уровня является показательным для пациентов, страдающих кардиоингибирующим рефлексом, которые нуждаются в кардиостимуляторе. Предопределенный пороговый уровень составляет между 30 и 70 пмоль/л, где образец отбирают в исходной точке до начала теста ортостатической устойчивости, предпочтительно теста HUT или теста активного вставания. Изобретение также касается применения уровня СТ-проЕТ-1 для стратификации терапии обморока. 2 н. и 13 з.п. ф-лы, 12 табл., 12 ил.

Способ скрининговой диагностики острого клеточного отторжения трансплантированного сердца // 2618404

Изобретение относится к медицине, а именно к трансплантации органов и клинической лабораторной диагностике, может быть использовано при ведении пациентов после трансплантации сердца для диагностики отторжения трансплантированного сердца. Сущность способа: в сыворотке крови определяют концентрацию VEGF-A и при уровне VEGF-A выше 317 пг/мл диагностируют острое клеточное отторжение. Преимущество изобретения заключается в обеспечении простоты, доступности, неинвазивности диагностики, сокращении времени ее проведения при одновременном достижении достоверного диагностического скрининга острого клеточного отторжения как в раннем, так и в отдаленном посттрансплантационных периодах у реципиентов сердца, а также в улучшении результатов трансплантирования сердца, повышении выживаемости реципиентов путем своевременного определения показаний к внеплановой эндомиокардиальной биопсии, коронароангиографии и уточнения тактики ведения больных путем определения уровня концентрации VEGF-A в сыворотке крови. 2 пр.

Оценка прогноза и риска пациентов с неспецифическими жалобами // 2618437

Настоящее изобретение относится к определению уровня маркерных пептидов в образце, полученном из физиологической жидкости субъекта, поступившего в отделение неотложной помощи с неспецифическими жалобами. Изобретение раскрывает способ оценки вероятности возникновения у пациента неблагоприятных событий, прогноза его выживаемости или принятия конкретных решений при его ведении, включающий определение уровня маркерного пептида, выбранного из группы, содержащей проANP, проBNP, проAVP, проADM, проЕТ-1, РСТ, PRX-4, или их фрагментов, включающих по крайней мере 12 аминокислот в длину. Маркерные пептиды или их фрагменты представляют собой независимые прогностические факторы для серьезных состояний, включая смерть и госпитализацию, у пациентов, доставленных в отделения неотложной медицины с неспецифическими жалобами. 16 з.п. ф-лы, 45 ил., 16 табл.

Способ оценки степени тяжести интоксикации // 2618447

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторной диагностике в медицине неотложных состояний и к экспериментальной медицине, и может быть использовано для оценки степени тяжести любой этиологии у пациентов и лабораторных животных. Сущность способа: первоначально измеряют концентрацию белка в пробе жидкого биологического материала человека или животного, затем пробу инкубируют в кипящей водяной бане в течение 3 минут, повторно определяют концентрацию белка в прогретой пробе и при снижении концентрации белка в пробе после прогревания более чем в 25 раз оценивают как отсутствие интоксикации, при снижении в 25-21 раз - как интоксикацию легкой степени, при снижении в 20-16 раза - как интоксикацию средней степени, а при снижении концентрации белка менее чем в 16 раз - как интоксикацию тяжелой степени. Изобретение обеспечивает упрощение и повышение универсальности процедуры оценки степени тяжести интоксикации как у пациентов с подозрением на интоксикационный синдром, так и лабораторных животных при моделировании эндогенной или экзогенной интоксикации. 1 табл., 7 пр.

Линия клеток pigas, содержащая стабильно интегрированный в геном сайт связывания транскрипционного фактора stat-1 // 2619643

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к клеточной инженерии, и может быть использовано для определения биологической активности IFN-γ. Получают линию клеток меланомы человека PiGAS с регистрационным номером ВКПМ Н-161 путем трансфекции родительской линии клеток меланомы человека MelP плазмидой pGAS(x6)-Luc//Neo, кодирующей репортерную конструкцию 6xGAS-Luc, состоящую из последовательности SEQ ID NO: 1, включающую 6 повторов сайта связывания транскрипционного фактора STAT-1, минимального промотора SV-40 и гена люциферазы светлячка Photinus pyralis (Luc), а также последовательности SEQ ID NO: 2, включающую ген устойчивости Neo к селективному антибиотику G418 под контролем своего конститутивного промотора PGK-1. Изобретение обеспечивает получение репортерной клеточной линии, позволяющей определять биоактивный IFN-γ путем детекции активации JAK/STAT-1 - сигнального пути. 6 ил., 5 пр.

Анализы и способы выбора режима лечения пациента с депрессией // 2622082

Группа изобретений относится к области биохимии. Предложен способ для идентификации субъекта с депрессией или имеющего риск развития депрессии, который имел бы положительный эффект от или ответил на режим лечения, включающий фолат-содержащее соединение, где указанный субъект идентифицируется таким, как указанно выше при условии детекции в генотипах двух локусов наличия аллеля с тимином Т в положении 677 (в гене MTHFR) и аллеля с гуанином G в положении SNP2756 (в гене MTR). Предложено применение фолат-содержащей композиции в комбинации с антидепрессантом при лечении депрессии у человека, который несет вышеуказанные однонуклеотидные полиморфизмы. Группа изобретений позволяет наиболее эффективно решить проблему назначения фолат-содержащего соединения пациентам с депрессией или риском ее развития за счет выбора оптимальной комбинации полиморфизмов генов фолатного пути для генотипирования, в результате чего пациенты с указанным заболеванием получают наибольшую пользу от приема фолат-содержащего соединения. 2 н. и 9 з.п. ф-лы, 24 ил., 42 табл., 4 пр.

Способы скрининга и их применения // 2622089

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии и касается способа выделения антилиганда, представляющего собой антитело или его антигенсвязывающий вариант, производное или фрагмент, каркасную молекулу со сконструированными вариабельными поверхностями; рецептор или фермент, к дифференциально-экспрессирующемуся целевому лиганду. Представленный способ включает стадии: (а) выполнение дифференциального биопэннинга на библиотеке антилигандов с тем, чтобы выделить по меньшей мере один антилиганд; (b) выполнение секвенирования с высокой пропускной способностью на антилигандах, выделенных на стадии (а), и (c) выполнения подтверждающего скрининга на специфичность к антилиганду для дифференциально-экспрессирующегося лиганда. Представленное изобретение позволяет проводить скрининг библиотек антилигандов для идентификации антилигандов, специфичных для дифференциально и/или не часто экспрессирующихся лигандов. 17 з.п. ф-лы, 9 ил., 4 табл., 8 пр.

Способ определения биологического возраста трупа // 2623141

Изобретение относится к области медицины, а именно к судебно-медицинской экспертизе, криминалистике, и предназначено для определения биологического возраста трупа. В коре неповрежденного мозжечка трупа определяют расстояние между грушевидными нейронами, их высоту при расположении ганглионарного слоя по диаметру объектива с помощью гистологического исследования и процентное содержание иммунопозитивных грушевидных нейронов к белку S100 с помощью иммуногистохимического исследования. При расстоянии, равном 160-200 мкм, высоте, равной 40 мкм и более, и количестве иммунопозитивных грушевидных нейронов к белку S100 15% и менее делают вывод о биологическом возрасте трупа 20-30 лет. При расстоянии - 201-230 мкм, высоте - 38 мкм и менее и количестве иммунопозитивных грушевидных нейронов к белку S100 более 15% делают вывод о биологическом возрасте трупа 60-70 лет. Использование изобретения обеспечивает возможность определения биологического возраста трупа по одному фрагменту - мозжечку - с высокой точностью. 2 пр.