Дермальный филлер на основе поперечносшитой гиалуроновой кислоты и карбоксиметилцеллюлозы в качестве лубриканта

Авторы патента:

ХАГЕДОРН Надине (DE)

ВИЛЛЕЙН Франк (FR)

ШТРАГИС Роланд (DE)

БЕЛКОВИ Лубин (DE)

ЭЛЬ-БАННА Радия (DE)

A61L27/52 - гидрогели или гидроколлоиды

A61L27/26 - смеси высокомолекулярных материалов

A61L27/20 - полисахариды

Владельцы патента RU 2712641:

МЕРЦ ФАРМА ГМБХ УНД КО. КГАА (DE)

Группа изобретений относится к косметологии и медицине, а именно: к инъекционной композиции дермального филлера; к способу ее получения; к набору, содержащему такую композицию и инструкцию по ее применению; к применениям указанных композиции и набора для использования в косметологии; а также к способу замены или заполнения биологической ткани или увеличения объема биологической ткани в косметических целях путем введения эффективного количества предложенной композиции. Инъекционная композиция дермального филлера выполнена в виде геля и содержит поперечносшитую гиалуроновую кислоту и карбоксиметилцеллюлозу в концентрации 5-20 %об./об. Группа изобретений обеспечивает легко вводимый дермальный филлер длительного действия с улучшенными реологическими свойствами. 6 н. и 37 з.п. ф-лы, 14 пр., 7 ил.

ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к инъекционным композициям дермального филлера в виде геля, содержащего поперечносшитую гиалуроновую кислоту (ГК), карбоксиметилцеллюлозу (КМЦ) и необязательно микрочастицы, такие как микрочастицы гидроксиапатита кальция (СаНАР). Инъекционные композиции дермального филлера обладают улучшенными реологическими свойствами и одновременно позволяют использовать низкие силы экструзии. Настоящее изобретение дополнительно относится к способу получения таких инъекционных композиций дермального филлера и их применению для косметических и терапевтических целей.

ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Многим людям свойственно желание выглядеть молодыми и сохранять внешнюю молодость как общепризнанный показатель красоты. Однако со временем кожа, особенно на лице, начинает утрачивать молодой вид. Наиболее частые эстетические признаки старения лица включают видимые морщины кожи, глубокие носогубные складки, межбровные морщины, губоподбородочные морщины, морщины на щеках и периоральные морщины.

Такие изменения, связанные со старением, часто устраняют инъекцией дермальных филлеров для увеличения объема тканей. В настоящее время существует множество дермальных филлеров, которые в целом можно подразделить на две категории. Первая категория филлеров обеспечивает долгосрочный эффект за счет создания объема и включает в себя такие филлеры, как, например, филлеры на основе поперечносшитой галуроновой кислоты (ГК). Вторая категория филлеров обеспечивает долгосрочный эффект за счет стимуляции неоколлагенеза. Наиболее известным и широко распространенным примером является препарат Radiesse^®, который содержит микросферы гидроксиапатита кальция, гель-носитель из карбоксиметилцеллюлозы (КМЦ) и глицерин.

Идеальные дермальные филлеры должны быть биосовместимыми, отличаться низким профилем нежелательных явлений и обеспечивать достаточно продолжительную стабильность (ресурс действия), эффективную способность увеличения объема и легкость выполнения инъекции. Филлеры на основе ГК обладают многими из таких желательных свойств дермальных филлеров. Поскольку ГК присутствует в организме почти у всех биологических видов, она не имеет антигенных свойств и отличается прекрасной переносимостью. Кроме того, поперечное сшивание ГК позволяет производить поперечносшитые продукты ГК, которые обладают хорошей способностью обеспечения лифтинга и стабильны в течение периода от более 12 месяцев до двух лет.

Однако основной недостаток филлеров на основе ГК связан с тем, что их часто сложно вводить посредством инъекции. По этой причине для облегчения выполнения инъекции в качестве лубриканта обычно добавляют несшитую ГК («свободную» ГК). К сожалению, желательное снижение силы экструзии, которое обеспечивается добавлением свободной ГК, ухудшает другие необходимые физические свойства геля. В частности, уменьшается показатель G-штрих (G'), что приводит к пониженному эффекту увеличения объема и уменьшению динамической вязкости.

Radiesse^® представляет собой дермальный филлер, в котором также обеспечены желаемые характеристики дермального филлера, включая приемлемую продолжительность действия, биосовместимость и хорошую способность к созданию объема. При инъекционном введении небольшие по размерам микросферы гидроксиапатита кальция выступают в качестве каркаса, который стимулирует образование новых тканей, подобных окружающей их среде. Однако поскольку КМЦ, которая является носителем для Radiesse^®, быстро абсорбируется in vivo (приблизительно за 3 месяца), это приводит к потенциальному и постепенному снижению заполняющего эффекта, так как неоколлагенез невозможно синхронизировать с выведением КМЦ. Кроме того, для КМЦ не существует антидота (препарата обратного действия), который позволял бы проводить частичную коррекцию после введения филлера.

В Европейском патенте №1080698, поданном в 1993 г., описан инъекционный материал для увеличения объема мягких тканей, содержащий мелкодисперсные керамические частицы (например, СаНА), в сферу действия которого, среди прочего, попадает и препарат Radiesse^®. Кроме того, в WO 2014/056723 описан вязкоэластичный гель, содержащий поперечносшитую ГК в концентрации от 1% до 4% (мас./об.) и частицы гидроксиапатита в концентрации от 10% до 70% (мас./об.).

ЦЕЛЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

На основании вышеизложенного цель настоящего изобретения заключается в создании композиции дермального филлера с продолжительным действием, обладающей улучшенными реологическими свойствами, которая одновременно отличается легкостью выполнения инъекции.

ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Описанная выше цель достигается за счет предоставления инъекционной композиции дермального филлера в виде геля, в которой в качестве лубриканта используется карбоксиметилцеллюлоза. Такой дермальный филлер нового типа отличается хорошей продолжительностью действия, легкостью выполнения инъекции и обладает улучшенными реологическими свойствами (показатель G-штрих (G') и динамическая вязкость), которые обеспечивают превосходную способность создания объема.

В первом аспекте настоящего изобретения предлагается инъекционная композиция дермального филлера в виде геля, содержащая поперечносшитую (например, поперечносшитую диглицидиловым эфиром бутандиола (BDDE)) гиалуроновую кислоту (ГК) и карбоксиметил целлюлозу (КМЦ).

Поперечносшитая ГК обычно присутствует в концентрации от 0,1% до 4.0% мас./об. (например, от 0,5% до 4,0% или от 1,0% до 4,0% мас./об.) и обеспечивает поперечносшитую матрицу, тогда как КМЦ обычно присутствует в концентрации от 1,0% до 25% об./об. и добавляется в качестве лубриканта/фазы смазки. В предпочтительном варианте осуществления инъекционная композиция дермального филлера дополнительно содержит рассасывающиеся биосовместимые микрочастицы, в частности микрочастицы гидроксиапатита кальция.

Во втором аспекте настоящего изобретения предлагается набор, содержащий инъекционную композицию дермального филлера в соответствии с первым аспектом изобретения.

В третьем аспекте настоящего изобретения предлагается способ получения инъекционной композиции дермального филлера в соответствии с первым аспектом настоящего изобретения, включающий следующие этапы:

(a) получение геля поперечносшитой гиалуроновой кислоты;

(b) получение геля карбоксиметилцеллюлозы;

Четвертый аспект настоящего изобретения относится к использованию инъекционной композиции дермального филлера в соответствии с первым аспектом изобретения или набора в соответствии со вторым аспектом изобретения для применения в косметологии, например для устранения морщин на лице.

В пятом аспекте настоящего изобретения предлагается инъекционная композиция дермального филлера в соответствии с первым аспектом изобретения или набор в соответствии со вторым аспектом изобретения для применения в терапии, в частности для применения в лечении стрессового недержания мочи, пузырно-мочеточникового рефлюкса, функциональной недостаточности голосовой складки и для медиализации голосовой складки.

В шестом аспекте настоящего изобретения предлагается способ замены или заполнения биологической ткани или увеличения объема биологической ткани, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту эффективного количества инъекционной композиции дермального филлера в соответствии с первым аспектом изобретения.

В прилагаемой формуле изобретения представлены конкретные варианты осуществления настоящего изобретения.

Дополнительные цели, преимущества и особенности настоящего изобретения станут очевидны специалистам в данной области после прочтения следующего подробного описания изобретения и изучения рисунков и примеров.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ РИСУНКОВ

На ФИГ. 1 показана сила экструзии композиции дермального филлера в соответствии с настоящим изобретением, содержащей ГК/КМЦ (гель MHAG с 15% (об./об.) КМЦ; серый столбец), и композиции дермального филлера, содержащей ГК/свободную ГК (гель MHAG с 15% (об./об.) свободной ГК; заштрихованный столбец), в сравнении с гелем «только ГК» (гель MHAG; черный столбец).

На ФИГ. 2 показан модуль упругости (G') композиции дермального филлера в соответствии с настоящим изобретением, содержащей ГК/КМЦ (гель MHAG с 15% (об./об.) КМЦ; серый столбец), и композиции дермального филлера, содержащей ГК/свободную ГК (гель MHAG с 15% (об./об.) свободной ГК; заштрихованный столбец), в сравнении с гелем «только ГК» (гель MHAG; черный столбец).

На ФИГ. 3 показана вязкость композиции дермального филлера в соответствии с настоящим изобретением, содержащей ГК/КМЦ (гель MHAG с 15% (об./об.) КМЦ; серый столбец), и композиции дермального филлера, содержащей ГК/свободную ГК (гель MHAG с 15% (об./об.) свободной ГК; заштрихованный столбец), в сравнении с гелем «только ГК» (гель MHAG; черный столбец).

На ФИГ. 4 показана сила экструзии композиции дермального филлера в соответствии с настоящим изобретением, содержащей ГК/СаНАР/КМЦ (MHAI с 10% (об./об.) КМЦ; черный столбец), в сравнении с гелем, содержащим ГК/СаНАР (MHAI; серый столбец), гелем, содержащим ГК/СаНАР/свободную ГК (MHAI с 10% свободной ГК; заштрихованный столбец), и разбавленным гелем MHAI (MHAI с разбавленной ГК (15 мг/мл ГК); незаштрихованный столбец).

На ФИГ. 5 показан модуль упругости (G') композиции дермального филлера в соответствии с настоящим изобретением, содержащей ГК/СаНАР/КМЦ (MHAI с 10% (об./об.) КМЦ; черный столбец), в сравнении с гелем, содержащим ГК/СаНАР (MHAI; серый столбец), гелем, содержащим ГК/СаНАР/свободную ГК (MHAI с 10%) свободной ГК; заштрихованный столбец), и разбавленным гелем MHAI (MHAI с разбавленной ГК (15 мг/мл ГК); незаштрихованный столбец).

На ФИГ. 6 показана вязкость композиции дермального филлера в соответствии с настоящим изобретением, содержащей ГК/СаНАР/КМЦ (MHAI с 10% (об./об.) КМЦ; черный столбец), в сравнении с гелем, содержащим ГК/СаНАР (MHAI; серый столбец), гелем, содержащим ГК/СаНАР/свободную ГК (MHAI с 10% свободной ГК; заштрихованный столбец), и разбавленным гелем MHAI (MHAI с разбавленной ГК (15 мг/мл ГК); незаштрихованный столбец).

На ФИГ. 7 показано влияние различных концентраций КМЦ на силу экструзии дермального филлера, содержащего ГК/СаНАР (MHAI; черный столбец), геля ГК/СаНАР с 5% КМЦ (MHAI с 5% КМЦ; серый столбец), геля ГК/СаНАР с 10% КМЦ (MHAI с 10% КМЦ; заштрихованный столбец) и геля ГК/СаНАР с 15% КМЦ (MHAI с 15% КМЦ; незаштрихованный столбец).

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Инъекционный дермальный филлер настоящего изобретения обеспечивает ряд преимуществ по сравнению с известными филлерами, в том числе превосходную биосовместимость, повышенную стойкость, высокий уровень удержания влаги, отсутствие иммуногенности и безопасную абсорбцию в организме, при этом сохраняются желаемые механические и реологические свойства для применения в качестве дермального филлера.

В частности, авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружили, что добавление к гелю поперечносшитой ГК небольшого количества карбоксиметилцеллюлозы (КМЦ) приводит к образованию композиции дермального филлера с продолжительным действием и низкой силой экструзии, которая одновременно обладает улучшенными механическими свойствами (т.е. высоким модулем упругости (G') и высокой динамической вязкостью), что обеспечивает высокую способность увеличения объема. Иными словами, неожиданно было обнаружено, что дермальный филлер в соответствии с настоящим изобретением обеспечивает оптимальный баланс продолжительного действия, способности обеспечения лифтинга и легкости выполнения инъекции.

Кроме того, в предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения, в котором композиция дермального филлера дополнительно содержит микрочастицы (например, микрочастицы гидроксиапатита кальция (СаНАР)), преимущества Radiesse (т.е. неоколлагенез, вызванный действием частиц гидроксиапатита кальция) можно сочетать с преимуществами частичной обратимости/корректируемости за счет возможности использования фермента гиалуронидазы для разложения и растворения носителя поперечносшитой ГК. Другое преимущество заключается в том, что носитель с поперечносшитой ГК будет сохраняться дольше по сравнению с носителем с несшитой КМЦ, используемым в настоящее время, например, в препарате Radiesse^®. Это позволяет устранить известный разрыв между функциональными характеристиками/эффектом увеличения объема, который наблюдается в период между временем растворения КМЦ и стимуляцией неоколлагенеза микрочастицами.

В первом аспекте настоящее изобретение относится к инъекционной композиции дермального филлера в виде геля, содержащей поперечносшитую гиалуроновую кислоту и карбоксиметилцеллюлозу.

В контексте настоящего документа термин «дермальный филлер» в целом относится к материалу или композиции, предназначенной для увеличения объема в областях с недостатком мягких тканей. В контексте настоящего документа термин «дермальный филлер» имеет такое же значение, что и термин «филлер для мягких тканей», и используется взаимозаменяемо с ним. При этом термин «дермальный филлер» не должен толковаться как налагающий какие-либо ограничения в отношении места и вида инъекции, и по существу он включает виды применения на множестве уровней под дермой, например под мышцами, выше надкостницы и в подкожной плоскости. В соответствии со смыслом настоящего изобретения термин «мягкие ткани» по существу относится к тканям, которые соединяют, поддерживают или окружают другие структуры и органы тела. В настоящем изобретении к мягким тканям относятся, например, мышцы, сухожилия (группы волокон, которые соединяют мышцы с костями), волокнистые ткани, жир, кровеносные сосуды, нервы и синовиальные ткани (ткани вокруг суставов).

В соответствии с настоящим изобретением инъекционная композиция дермального филлера представляет собой гель. В контексте настоящего документа термин «гель» по существу относится к материалу, текучесть которого при комнатной температуре характеризуется состоянием между жидкостью и твердым телом. Кроме того, подразумевается, что термин «гель» означает материал, способный адсорбировать воду (т.е. «гидрогель»). В рамках настоящего изобретения инъекционная композиция дермального филлера в общем случае содержит физиологически приемлемый жидкий носитель, такой как апирогенный изотонический буфер, в частности физиологический солевой раствор, который предпочтительно забуферен.

Кроме того, композиция дермального филлера настоящего изобретения является «инъекционной». Это означает, что композиция дермального филлера подходит для введения с помощью инъекции в кожу и другие ткани с целью доставки ее в заданную целевую область. В соответствии со смыслом настоящего изобретения «инъекционную» композицию можно вводить с помощью шприцев в нормальных условиях и при нормальном давлении.

В соответствии с настоящим изобретением концентрация карбоксиметилцеллюлозы предпочтительно составляет от 1,0% до 25,0%, более предпочтительно от 5,0% до 20% и наиболее предпочтительно от 10% до 15% об./об. В настоящем изобретении ее по существу используют в качестве лубриканта или фазы смазки. Подходящая для использования в настоящем изобретении карбоксиметилцеллюлоза может иметь молекулярную массу в диапазоне от 5,0×10⁴ Да (КМЦ низкой вязкости) до 1,5×10⁶ Да (КМЦ высокой вязкости), например в диапазоне от 9,0×10⁴ Да до 7,0×10⁵ Да, в частности в диапазоне от 1,5×10⁵ до 5,0×10⁵ Да.

Кроме того, подходящую для использования в настоящем изобретении карбоксиметилцеллюлозу можно выбирать из карбоксиметилцеллюлозы низкой вязкости с вязкостью от 75 мПа⋅с до 750 мПа⋅с по результатам измерений на ротационном вискозиметре Брукфильда (модель LVT) при 25°С и скорости вращения 60 об/мин со шпинделями размера №1 или №2 с использованием 2% водного раствора, карбоксиметилцеллюлозы средней вязкости с вязкостью от 750 мПа⋅с до 4000 мПа⋅с по результатам измерений на ротационном вискозиметре Брукфильда (модель LVT) при 25°С и скорости вращения 30 об/мин со шпинделями размера №2 или №3 с использованием 2% водного раствора, и карбоксиметилцеллюлозы высокой вязкости с вязкостью от 4000 мПа⋅с до 25000 мПа⋅с по результатам измерений на ротационном вискозиметре Брукфильда (модель LVT) при 25°С и скорости вращения 30 об/мин со шпинделями размера №3 или №4 с использованием 1% водного раствора.

Более того, карбоксиметилцеллюлоза обычно имеет степень замещения от 0,20 до 1,50, предпочтительно от 0,40 до 1,10, более предпочтительно от 0,60 до 0,95 и наиболее предпочтительно от 0,70 до 0,90. В контексте настоящего документа термин «степень замещения» (степень этерификации) определяется следующим образом: [C₆H₇O₂(OH)_x(OCH₂COO_m)_у]_n, где n обозначает степень полимеризации (например, от 450 до 4000), а х+у=3, где у соответствует степени замещения. Степень замещения может определяться способами, известными специалистам в данной области (например, в соответствии со способами, описанными в Международном энологическом кодексе COEI-1-СМС:2009).

Гиалуроновая кислота присутствует в композиции предпочтительно в концентрации от 0,1% до 5,0%, или от 0,2% до 4,5%, или от 0,3% до 4,0%, или от 0,4% до 4,0%, или от 0,5% до 4,0%, или от 0,7% до 4,0%, или от 1,0% до 4,0%, более предпочтительно от 0,5% до 3,0%, или от 1,0% до 3,0%, или от 1,5% до 3,0%, или от 2,0% до 3,0%, наиболее предпочтительно от 1,0% до 2,5% или от 2,0% до 2,5% мас./об. В рамках настоящего изобретения поперечносшитая ГК образует «матрицу». В контексте настоящего документа термин «матрица» подразумевает сеть из полисахаридов, как поперечносшитых. так и несшитых, в виде раствора или геля. Кроме того, термин «гиалуроновая кислота» или ГК в контексте настоящего документа означает гиалуроновую кислоту, гиалуронат и любую соль гиалуроновой кислоты, такую как гиалуронат натрия.

В контексте настоящего изобретения поперечносшитая гиалуроновая кислота не имеет конкретных ограничений и включает поперечносшитую гиалуроновую кислоту, полученную из одной молекулы гиалуроновой кислоты или из двух или более молекул гиалуроновой кислоты, которые отличаются молекулярной массой (см., например, US 2010/0316683 А1 или WO 2013/185934 А1, которые включены в настоящий документ путем ссылки). Кроме того, в рамках объема настоящего изобретения поперечносшитая гиалуроновая кислота может образовывать «полиуплотненный» гель, для которого характерна переменная степень поперечного сшивания внутри геля, т.е. «полиуплотненный» гель отличается (по меньшей мере) двумя уровнями плотности: он имеет более плотные области (более высокая степень поперечного сшивания) и менее плотные области (более низкая степень поперечного сшивания).

Полиуплотненные гели можно получать, например, посредством проведения первой реакции поперечного сшивания для связывания первого (-ых) полисахарида (-ов) с последующей второй реакцией поперечного сшивания для связывания второго (-ых) полисахарида (-ов) с образованием геля с двойной поперечной сшивкой. В качестве указанного (-ых) первого (-ых) и указанного (-ых) второго (-ых) полисахарида (-ов) можно, например, независимо использовать одинаковые молекулы гиалуроновой кислоты или две разные молекулы гиалуроновой кислоты, которые отличаются средней молекулярной массой (например, низкомолекулярную и высокомолекулярную гиалуроновую кислоту). Процесс двойного поперечного сшивания (технология динамического поперечного сшивания) известен специалистам в данной области и описан, например, в ЕР 1711552 В1, который включен в настоящий документ путем ссылки.

В рамках настоящего изобретения поперечносшитую гиалуроновую кислоту можно получить путем поперечного сшивания одинаковых молекул гиалуроновой кислоты или поперечного сшивания первой молекулы гиалуроновой кислоты и второй молекулы гиалуроновой кислоты и необязательно по меньшей мере еще одной молекулы гиалуроновой кислоты, причем первая, вторая и по меньшей мере еще одна молекулы гиалуроновой кислоты отличаются средней молекулярной массой.

Указанная единственная молекула гиалуроновой кислоты предпочтительно имеет среднюю молекулярную массу от 0,1×10⁶ до 4,0×10⁶ Да, или от 0,3×10⁶ до 4,0×10⁶ Да, или от 0,5×10⁶ до 4,0×10⁶ Да, в частности от 1,0×10⁶ до 3,0×10⁶ Да, или от 1,5×10⁶ до 2,5×10⁶ Да. Указанная первая молекула гиалуроновой кислоты предпочтительно имеет среднюю молекулярную массу от 1,0×10⁵ Да до менее 1,0×10⁶ Да, более предпочтительно от 3,0×10⁵ Да до 9,0×10⁵ Да и наиболее предпочтительно от 5,0×10⁵ Да до 8,0×10⁵ Да. Указанная вторая молекула гиалуроновой кислоты предпочтительно имеет среднюю молекулярную массу от более 1,0×10⁶ Да до 5,0×10⁶ Да. в частности от 1,5×10⁶ Да до 4,0×10⁶ Да, и предпочтительно от 2,0×10⁶ Да до 3,0×10⁶ Да. Массовое соотношение первых молекул ГК и вторых молекул ГК в инъекционной композиции дермального филлера настоящего изобретения не имеет конкретных ограничений и может находиться, например, в диапазоне от 0,001:99,999 до 99,999:0,001, предпочтительно от приблизительно 70:30 до приблизительно 99,9:0,1 и наиболее предпочтительно от приблизительно 90:10 до приблизительно 99,0:1,0.

В настоящем изобретении могут применяться различные способы определения молекулярной массы ГК, например измерение характеристической вязкости (например, в соответствии с Китайской Фармакопеей, 2-я редакция, 2006 г.), капиллярный электрофорез (СЕ) (например, в соответствии с работой Kinoshita et al., Biomed. Chromatogr., 2002, 16:141-45), высокоэффективная гель-проникающая хроматография (ВЭГПХ) (например, в соответствии с работой Kim et al., Food Chem., 2008. 109: 63-770) и многоугловое лазерное светорассеяние в сочетании с эксклюзионной хроматографией (SEC-MALLS) (например, в соответствии с работой Hokputsa et al., Eur. Biophys. J. Biophys. Lett., 2003. 32:450-456).

Поперечное сшивание инъекционной композиции дермального филлера в соответствии с настоящим изобретением предпочтительно осуществляется с использованием BDDE (диглицидиловый эфир 1,4-бутандиола). Поперечносшитая с помощью BDDE гиалуроновая кислота может иметь ту или иную степень модификации, которая выражается в виде соотношения суммы одиночных и двойных BDDE-поперечных сшивок и суммы дисахаридных звеньев гиалуроновой кислоты, которое составляет от 0,5% до 25%, предпочтительно от 1,0% от 15%, более предпочтительно от 2,0% до 10% и наиболее предпочтительно от 3,0% до 8,0% или от 4,0% до 7%.

Степень модификации можно определять посредством ЯМР в соответствии с методами, известными специалистам в данной области (Edsman et al., Gel Properties of Hyaluronic Acid Dermal Fillers, Dermatol. Surg. 2012, 38:1170-1179; Guarise et al., SEC determination of cross-link efficiency in hyaluronan fillers, Carbohydrate Polymers 2012, 88:428-434; Kenne et al., Modification and cross-linking parameters in hyaluronic acid hydrogels - Definitions and analytical methods, Carbohydrate Polymers 2013, 91:410-418).

Коротко, перед проведением измерений с помощью ЯМР диализированные и стерилизованные гели подвергают разложению. Разложение можно проводить с использованием хондроитиназы AC (Edsman et al., supra; Kenne et al., supra), NaOH (Guarise et al., supra), с добавлением гиалуронидазы (например, 150 Ед овечьей гиалуронидазы на 1 г геля) или посредством инкубации при 90°С в течение по меньшей мере 35 ч. Полученные растворы затем лиофилизируют, растворяют в D₂O и тщательно гомогенизируют.

Измерения с помощью ЯМР можно проводить, например, при 500 МГц, импульсе 20 градусов с несколькими повторами при температуре окружающей среды, чтобы получить спектр с надлежащим разрешением. В соответствии с данными из специализированной литературы степень модификации (MoD) оценивают, рассчитывая соотношение сигналов N-ацетила ГК и сигналов метилена BDDE. Для N-ацетила ГК значимые сигналы находятся приблизительно при 2,0 м. д. и приблизительно при 1,6 м. д. для BDDE при растворении в D₂O. Чтобы рассчитать степень модификации, определяют значения интегралов и в расчете используют соотношение протонов 3Н при N-ацетиле (СН₃) к 4Н метилена (СН₂СН₂), как это предлагается в специализированной литературе (Edsman et al., supra и Kenne et al., supra).

В соответствии с предпочтительным вариантом осуществления настоящего изобретения инъекционная композиция дермального филлера дополнительно содержит рассасывающиеся биосовместимые микрочастицы. В контексте настоящего документа термин «микрочастицы» в общем относится к по существу круглым или сферическим частицам. Кроме того, микрочастицы предпочтительно имеют средний диаметр от 5 мкм до 500 мкм, более предпочтительно от 10мкм до 200 мкм, особенно предпочтительно от 15 мкм до 100 мкм или от 20 мкм до 75 мкм и наиболее предпочтительно от 25 мкм до 45 мкм. В соответствии с контекстом настоящего изобретения термин «рассасывающийся» по существу относится к материалу, который может разрушаться и абсорбироваться в тканях и/или текучих средах организма.

Микрочастицы предпочтительно присутствуют в композиции в концентрации от 0,5% до 50% или от 1,0% до 50%, более предпочтительно от 1,0% до 40%, особенно предпочтительно от 5,0% до 35%, в частности от 15,0% до 30% или от 20% до 25%, и наиболее предпочтительно от 25,0% до 35% об./об.

В контексте настоящего изобретения рассасывающиеся биосовместимые микрочастицы могут состоять из материалов на основе фосфата кальция, материалов на основе окиси алюминия, биоразлагаемого природного полисахарида или его производного или биоразлагаемого синтетического полимера полиэфира, полиортоэфира или полиангидрида.

В контексте настоящего документа термин «природный полисахарид» по существу относится к полисахариду, который встречается в природе. В контексте настоящего документа термин «производное» в связи с природным полисахаридом относится к полисахариду, который получают из природного полисахарида посредством химической модификации, например карбоксилирования, этерификации, метилирования, сульфирования и т.п. В контексте настоящего документа термин «биоразлагаемый» в целом относится к материалам, которые могут разлагаться in vivo в организме живою человека, и не должен рассматриваться как ограничиваемый определенным временем или продолжительностью разложения.

Материалы на основе фосфата кальция можно выбирать из гидроксиапатита кальция, фторапатита кальция, хлорапатита кальция, карбоната-апатита кальция, тетракальцийфосфата, пирофосфата кальция, трикальцийфосфата и октакальцийфосфата. Материал на основе фосфата кальция предпочтительно представляет собой гидроксиапатит кальция.

В качестве биоразлагаемого синтетического полимера полиэфира, полиортоэфира или полиангидрида можно использовать гомополимер или сополимер гликолида, лактида, капролактона и п-диоксанона или триметиленкарбоната или полимер поли(гидкросибутирата) или поли(гидроксивалерата). Биоразлагаемый синтетический полимер полиэфира, полиортоэфира или полиангидрида предпочтительно выбирают из поли-ε-капролактона, полигликолидов, полилактидов, полидиоксанона, сополимера молочной и гликолевой кислот, сополимера гликолевой кислоты и капролактона и сополимера гликолида и триметиленкарбоната, а наиболее предпочтительным является поли-ε-капролактон или полидиоксанон.

В соответствии с настоящим изобретением инъекционная композиция дермального филлера может дополнительно содержать одно или более соединений, которые выбирают из группы, состоящей из полиолов, витаминов, аминокислот, металлов, антиоксидантов и минеральных солей. К подходящим полиолам для использования в настоящем изобретении относятся, без ограничений, глицерин, маннит, сорбит, пропиленгликоль, эритрит, ксилит, мальтит и лактит. Особенно подходящими для использования в настоящем изобретении являются маннит и глицерин. Кроме того, предпочтительно полиол представляет собой гликоль, необязательно в комбинации с одним или более перечисленными выше соединениями полиолов, в частности маннитом. Полиол(-ы), например, может (могут) входить в состав инъекционной композиции дермального филлера в концентрации от 1% до 25%, или от 2% до 17%, или от 3% до 13% об./об., в частности в концентрации от 5% до 11% или от 7% до 10% об./об.

К подходящим витаминам относятся витамин С, витамин Е и витамины группы В, т.е. один или более из витаминов B₁, В₂, В₃, В₅, В₆, В₇, В₉ и В₁₂. Концентрация витамина С или витамина Е предпочтительно составляет от приблизительно 0,01 мг/мл до приблизительно 10,0 мг/мл, более предпочтительно от приблизительно 0,1 мг/мл до приблизительно 5,0 мг/мл, а суммарная концентрация витаминов группы В предпочтительно составляет от приблизительно 0,01 мг/мл до приблизительно 10,0 мг/мл, более предпочтительно от приблизительно 0,1 мг/мл до приблизительно 5,0 мг/мл. Витамины можно вводить для стимуляции и поддержания клеточного метаболизма и, таким образом, для повышения выработки коллагена. Особенно предпочтительным в данном случае является использование витамина С, витамина Е и витамина В₆.

Кроме того, инъекционная композиция дермального филлера в соответствии с настоящим изобретением может дополнительно содержать анестезирующее средство, в частности средство для местной анестезии, предпочтительно лидокаин, в концентрации, например, от 0,05% мас. до 5,0% мас., от 0,1% мас. до 4,0% мас., от 0,2% мас. до 3,0% мас., от 0,3% мас. до 2,0% мас. или от 0,4% мас. до 1,0% мас.

В настоящем документе дополнительно предполагается, что инъекционная композиция дермального филлера может включать в себя поперечносшитые и/или несшитые полимеры, которые отличаются от поперечносшитых ГК и КМЦ. В частности, инъекционная композиция дермального филлера может дополнительно содержать от 0,001% до 15%, в частности от 1% до 10% об./об. несшитой гиалуроновой кислоты. Молекулярная масса указанной несшитой гиалуроновой кислоты предпочтительно составляет от 3,0×10⁵ Да до 4,0×10⁶ Да, в частности от 1,0×10⁶ Да до 3,0×10⁶ Да.

Другие поперечносшитые или несшитые полимеры, такие как хондроитинсульфат, кератан, кератансульфат, гепарин, гепаринсульфат, целлюлоза и ее производные, хитозан, каррагинан, ксантан и альгинат или одна из их солей, также могут быть включены в состав инъекционной композиции дермального филлера настоящего изобретения в небольших количествах (например, менее 10%, обычно менее 5% или менее 1% об./об.). Однако в настоящем документе также предполагается, что инъекционная композиция дермального филлера не содержит каких-либо поперечносшитых полимеров, кроме поперечносшитой ГК, описанной в настоящем документе, и/или не содержит каких-либо несшитых полимеров, кроме описанной в настоящем документе КМЦ. В контексте настоящего документа термин «полимер» относится к любому природному или синтетическому полимерному соединению с повторяющимися структурными звеньями, включая полисахариды, такие как ГК.

В предпочтительных вариантах осуществления настоящего изобретения инъекционная композиция дермального филлера в соответствии с настоящим изобретением, включая композицию, содержащую микрочастицы (например, микрочастицы гидроксиапатита кальция), дополнительно содержит анестезирующее средство, предпочтительно лидокаин, и/или один или более из описанных выше полиолов. Особенно предпочтительно, чтобы инъекционная композиция дермального филлера в соответствии с настоящим изобретением, включая композицию, содержащую микрочастицы СаНАР, дополнительно содержала лидокаин и глицерин.

Более того, в соответствии с настоящим изобретением инъекционная композиция дермального филлера может обладать одним или более из следующих свойств:

(i) модуль упругости G' при частоте (f) 0,4 Гц и 25°С составляет от 50 Па до 4500 Па, предпочтительно от 100 Па до 4000 Па, более предпочтительно от 150 Па до 2500 Па;

(ii) вязкость при частоте 0,4 Гц и 25°С составляет от 20 Па⋅с до 1400 Па⋅с, предпочтительно от 25 Па⋅с до 1000 Па⋅с, более предпочтительно от 30 Па⋅с до 900 Па⋅с; и

(iii) тангенс дельта (G''/G') при частоте 0,4 Гц и 25°С составляет от 0,20 до 0,8, предпочтительно от 0,25 до 0,6.

Кроме того, сила экструзии для инъекционной композиции дермального филлера в соответствии с настоящим изобретением, в которой отсутствуют какие-либо микрочастицы (например, микрочастицы гидроксиапатита кальция), обычно находится в диапазоне от 10 Н до 30 Н по результатам измерений с использованием иглы размерами 25G×1,6 см (5/8 дюйма) (например, Neoject) при скорости экструзии приблизительно 50 мм/мин с использованием стандартного шприца объемом 1 мл (например, шприца 1,0 мл производства BD). Сила экструзии для инъекционной композиции дермального филлера в соответствии с настоящим изобретением с микрочастицами (например, микрочастицами гидроксиапатита кальция) обычно находится в диапазоне от 35 Н до 70 Н по результатам измерений с использованием иглы размерами 25G TW (например, Terumo K pack II) при скорости экструзии приблизительно 50 мм/мин с использованием стандартного шприца объемом 1,5 мл (например, пластикового шприца 1,5 мл).

Кроме того, инъекционная композиция дермального филлера обычно содержит буфер, например фосфатный буфер, для регулирования уровня рН. Поскольку инъекционная композиция дермального филлера настоящего изобретения предназначена для введения в тело человека, ее рН обычно находится в диапазоне от 6,5 до 7,5, предпочтительно в диапазоне от 6,8 до 7,4. Кроме того, осмоляльность предпочтительно составляет от приблизительно 200 мОсмоль/л до приблизительно 400 мОсмоль/л, более предпочтительно от приблизительно 280 мОсмоль/л до приблизительно 330 мОсмоль/л.

Во втором аспекте настоящее изобретение относится к набору, содержащему инъекционную композицию дермального филлера в соответствии с первым аспектом настоящего изобретения. Набор может также содержать инструкции по применению.

В третьем аспекте настоящее изобретение относится к способу получения инъекционной композиции дермального филлера в соответствии с первым аспектом настоящего изобретения, включающему следующие этапы:

(a) получение геля поперечносшитой гиалуроновой кислоты;

(b) получение геля карбоксиметилцеллюлозы;

Гель поперечносшитой гиалуроновой кислоты, обеспеченный на этапе (а), и/или гель карбоксиметилцеллюлозы, обеспеченный на этапе (b), предпочтительно содержит один или более из упомянутых выше полиолов, в частности глицерин. Дополнительно или в качестве альтернативы, один или более из упомянутых выше полиолов, в частности глицерин, можно также добавлять на этапе (с) или после этапа (с). Кроме того, в рамках настоящею изобретения микрочастицы могут быть суспендированы в геле карбоксиметилцеллюлозы. обеспеченном на этапе (b), или альтернативно микрочастицы можно смешивать с гелем поперечносшитой гиалуроновой кислоты и гелем карбоксиметилцеллюлозы на этапе (с). Микрочастицы можно также добавлять в смесь, полученную на этапе (с).

Поперечносшитый гель гиалуроновой кислоты, полученный на этапе (а), и/или гель карбоксиметил целлюлозы, полученный на этапе (b), предпочтительно содержит анестезирующее средство, например лидокаин. Более предпочтительно на этапе (с) или после этапа (с) добавлять в смесь, полученную на этапе (с), анестезирующее средство (например, лидокаин).

В четвертом аспекте настоящее изобретение относится к использованию инъекционной композиции дермального филлера в соответствии с первым аспектом настоящего изобретения или набора в соответствии со вторым аспектом настоящего изобретения для применения в косметологии.

Применение в соответствии с четвертым аспектом предпочтительно включает косметическое лечение морщин и складок кожи (например, морщин и складок на лице), межбровных морщин, носогубных складок, морщин на подбородке, губоподбородочных морщин, морщин на щеках, периоральных морщин, «гусиных лапок», углублений кожи, рубцов, морщин на висках, проведение подкожной поддержки бровей, коррекции объема скул и щек, слезных борозд, носа, губ, щек, периоральной области, подглазничной области, коррекции асимметрии лица, контуров нижней челюсти и подбородка.

В пятом аспекте настоящее изобретение относится к инъекционной композиции дермального филлера в соответствии с первым аспектом настоящего изобретения для применения в терапии. В частности, инъекционную композицию дермального филлера в соответствии с первым аспектом настоящего изобретения можно применять для лечения стрессового недержания мочи, пузырно-мочеточникового рефлюкса, функциональной недостаточности голосовой складки и для медиализации голосовой складки.

В шестом аспекте настоящее изобретение относится к способу замены или заполнения биологической ткани или увеличения объема биологической ткани, включающему введение нуждающемуся в этом субъекту эффективного количества инъекционной композиции дермального филлера в соответствии с первым аспектом настоящего изобретения.

Как правило, инъекционную композицию дермального филлера вводят посредством инъекции, например посредством подкожной или внутрикожной инъекции. Например, композицию можно вводить внутрикожно или подкожно с использованием методики последовательных проколов. Термин «эффективное количество» относится к количеству инъекционной композиции дермального филлера, достаточному для достижения благоприятных или желательных косметических (эстетических) или терапевтических результатов. В контексте настоящего изобретения термин «субъект» относится к любому лицу или пациенту, нуждающемуся в лечении определенного состояния или заболевания. В рамках настоящего изобретения субъектом, как правило, является человек.

Композицию предпочтительно вводят для лечения косметического состояния, например для лечения морщин или складок кожи (например, морщин и складок на лице), межбровных морщин, носогубных складок, морщин на подбородке, губоподбородочных морщин, морщин на щеках, периоральных морщин, «гусиных лапок», углублений кожи, рубцов, морщин на висках, проведения подкожной поддержки бровей, коррекции объема скул и щек, слезных борозд, носа, губ, щек, периоральной области, подглазничной области, коррекции асимметрии лица, контуров нижней челюсти и подбородка. Однако композицию можно также вводить по терапевтическим показаниям, например в случае стрессового недержания мочи, пузырно-мочеточникового рефлюкса, функциональной недостаточности голосовой складки и для медиализации голосовой складки.

Все пояснения и замечания, приведенные выше в отношении первого аспекта изобретения (например, в отношении ингредиентов или веществ, содержащихся в инъекционной композиции дермального филлера, способа ее изготовления и определений некоторых технических терминов), в равной степени относятся и к способу в соответствии с шестым аспектом изобретения.

Настоящее изобретение будет дополнительно проиллюстрировано ниже с помощью следующих не имеющих ограничительного характера примеров.

ПРИМЕРЫ

Приведенные ниже примеры демонстрируют, что композиция дермального филлера в соответствии с настоящим изобретением отличается существенно более низкой силой экструзии, при этом се механические свойства (например, модуль упругости (G') и вязкость) неожиданно остаются неизменными или даже улучшаются.

Измерение силы экструзии

Силу экструзии гелей ГК (с КМЦ или фазой смазки из свободной ГК или без них) определяли с использованием шприца объемом 1,0 мл BD и игл Neoject 25G × 1,6 см (5/8 дюйма). Для этой цели использовали анализатор текстуры TA.XTPLUS. Тестирование проводили с использованием предварительной нагрузки 0,500 Н и при скорости тестирования 5 см/мин (2 дюйма/мин).

Силу экструзии гелей ГК/СаНАР (с КМЦ или фазой смазки из свободной ГК или без них) определяли с использованием пластикового шприца объемом 1,5 мл и игл Terumo K pack II 27G TW . Для этой цели использовали анализатор текстуры TA.XTPLUS. Тестирование проводили с использованием предварительной нагрузки 0,500 Н и при скорости тестирования 5 см/мин (2 дюйма/мин).

Измерение модуля упругости (G') и динамической вязкости

Модуль упругости (G') и вязкость измеряли с помощью реометра Anton Paar MCR 302 с системой параллельных пластин диаметром 20 мм.

В случае гелей ГК (с КМЦ или фазой смазки из свободной ГК или без них) показатель G' и вязкость определяли при следующих параметрах:

В случае гелей ГК/СаНАР (с КМЦ или фазой смазки из свободной ГК или без них) показатель G' и вязкость определяли при следующих параметрах:

ПРИМЕР 1

Получение гелей ГК без фазы смазки и с частицами гидроксиапатита кальция (СаНАР) или без них (гель MHAG и гель MHAI) (сравнительные гели)

Получение растворов для поперечного сшивания

Прессованный осадок ГК получали растворением 43 г гиалуроната натрия (со средней молекулярной массой приблизительно 2,8 МДа) в 270,35 г фосфатного буфера. Полученный осадок ГК можно хранить в холодильнике до использования. Затем получали щелочной раствор, растворяя 3,31 г твердого гидроксида натрия в 10 мл буфера. Кроме того, получали раствор BDDE посредством смешивания 12,5 г 2 М раствора NaOH с 88,5 г фосфатного буфера, а затем смешивали 8,21 мл полученного раствора и 3,395 мл BDDE.

Поперечное сшивание

Осадок ГК вручную разделяли на небольшие части. Весь щелочной раствор добавляли в чашку, а затем перемешивали в течение 30-40 минут при скорости 12 об/мин. Затем в чашку добавляли раствор BDDE и перемешивание продолжали в течение 10-15 минут при 25 об/мин. Параметры температуры меняли на 33,33°С и смесь выдерживали при этой температуре в течение 4 часов.

Нейтрализация и очистка

Раствор для нейтрализации получали добавлением 920,99 г буфера к 84,62 г 1 М HCl. После этого весь раствор для нейтрализации добавляли в чашку и перемешивали в течение 2 часов при 5°С. Затем гель очищали в соответствии со способами, известными специалистам в данной области. Полученный гель («гель МНА») использовали впоследствии для получения описанных ниже составов гелей MHAG (без СаНАР) и MHAI (с СаНАР).

Гель MHAG

Чтобы получить гель MHAG, готовили концентрированный раствор лидокаина LS1 посредством добавления 2 г лидокаина к 2 г фосфатного буфера с последующим осторожным перемешиванием с использованием магнитной мешалки до полного растворения. Затем 467 г геля МНА, полученного в примере 1, смешивали с 2116 мкл раствора LS1 в течение 15 минут с использованием подходящей мешалки. После этого добавляли 33 г глицерина и смесь перемешивали на умеренной скорости в течение 1,5 часа. Затем, после дополнительного этапа дегазирования, наполняли шприцы объемом 1 мл и стерилизовали при 127°С в течение 4 мин.

Гель MHAI

Кроме того, в соответствии с процедурой, описанной выше для геля MHAG, получали гель, который соответствует гелю MHAG, но дополнительно содержит частицы СаНАР в тех же количествах, что и гели, полученные в примерах 4-6. В приведенном ниже описании гель поперечносшитой ГК с СаНАР обозначается как MHAI.

ПРИМЕР 2

Получение геля ГК с 15% КМЦ в качестве фазы смазки (гель, обладающий признаками изобретения)

Раствор LB1 получали добавлением 62,75 г глицерина к 2,150 г гидрохлорида лидокаина и растворяли полученную смесь в 135,142 г фосфатного буфера. Затем проводили осторожное перемешивание с использованием магнитной мешалки до полного растворения.

После этого 2,764 г карбоксиметилцеллюлозы натрия (NaCMC) активно перемешивали в течение 1 часа в чашке с 105,24 г LB1. После дегазирования добавляли 392,025 г геля MHAG, полученного в примере 1, и перемешивали на умеренной скорости в течение 1,5 часа. Затем, после дополнительного этапа дегазирования, наполняли шприцы объемом 1 мл и стерилизовали при 127°С в течение 4 мин.

ПРИМЕР 3

Получение геля ГК с 15% (об./об.) свободной ГК в качестве фазы смазки (сравнительный гель)

Раствор LB2 получали растворением 1,131 г гидрохлорида лидокаина в 72,743 г фосфатного буфера. Затем добавляли 1,170 г гиалуроната натрия (2,5-3,0 МДа). После полного растворения добавляли 33,005 г глицерина. Затем смесь перемешивали на умеренной скорости в течение 1 часа и 30 минут и до использования хранили при температуре 5°С.

Гель ГК с 15% (об./об.) свободной ГК в качестве лубриканта получали смешиванием 106,721 г LB2 с 387,357 г геля MHAG, полученною в примере 1. Умеренное перемешивание продолжали в течение 2 часов. После дегазирования смесь переносили в шприцы объемом 1 мл и стерилизовали при 127°С в течение 4 мин.

ПРИМЕР 4

Получение геля ГК/СаНАР с 5% (об./об.) КМЦ в качестве фазы смазки (гель, обладающий признаками изобретения)

Раствор LB3 получали аналогично раствору LB1, однако при этом использовали следующие материалы и количества: 4,633 г NaCMC, 274,16 г глицерина и 121,3 г фосфатного буфера.

Гель ГК/СаНАР с 5% (об./об.) КМЦ в качестве лубриканта получали, помещая в чашку для смешивания 280,02 г СаНАР (от 25 мкм до 45 мкм), 48,22 г LB3 и 171,84 г геля MHAG, полученного в примере 1. Затем добавляли 2,120 мл раствора лидокаина (2 г лидокаина в 2 г фосфатного буфера). Смесь перемешивали при средней скорости в течение 1,5 часа. После дегазирования под вакуумом наполняли шприцы объемом 1 мл и стерилизовали при 121°С в течение 20 минут.

ПРИМЕР 5

Получение геля ГК/СаНАР с 10% (об./об.) КМЦ в качестве фазы смазки (гель, обладающий признаками изобретения)

Раствор LB4 получали аналогично раствору LB1, однако при этом использовали следующие материалы и количества: 7,039 г NaCMC, 208,527 г глицерина и 184,46 г фосфатного буфера.

Гель ГК/СаНАР с 10% (об./об.) КМЦ в качестве лубриканта получали, как описано в примере 4, однако при этом использовали следующие количества: 280,02 г СаНАР (от 25 мкм до 45 мкм), 63,29 г LB4 и 156,79 г геля MHAG, полученного в примере 1.

ПРИМЕР 6

Получение геля ГК/СаНАР с 15% (об./об.) КМЦ в качестве фазы смазки (гель, обладающий признаками изобретения)

Раствор LB5 получали аналогично раствору LB1, однако при этом использовали следующие материалы и количества: 8,529 г NaCMC, 168,266 г глицерина и 223,29 г фосфатного буфера.

Гель ГК/СаНАР с 15% (об./об.) КМЦ в качестве лубриканта получали, как описано в примере 4, однако при этом использовали следующие количества: 280,02 г СаНАР (от 25 мкм до 45 мкм), 78,46 г LB5 и 141,562 г геля MHAG, полученного в примере 1.

ПРИМЕР 7

Получение геля ГК/СаНАР с 10% (об./об.) свободной ГК в качестве фазы смазки (сравнительный гель)

Раствор LB6 получали аналогично раствору LB2, однако при этом использовали следующие материалы и количества: 208,548 г глицерина, 3,108 г гиалуроната натрия и 188,581 г фосфатного буфера.

Гель ГК/СаНАР с 10% (об./об.) свободной ГК в качестве лубриканта получали посредством смешивания 156,781 г геля MHAG. полученного в примере 1, с 63,32 г LB6 и 2120 мкл раствора лидокаина (2 г лидокаина в 2 г фосфатного буфера). Затем добавляли 280,02 г СаНАР (от 25 мкм до 45 мкм) и перемешивали на умеренной скорости в течение 1,5 часа. После дегазирования наполняли шприцы объемом 1 мл и стерилизовали при 121°С в течение 20 мин.

ПРИМЕР 8

Влияние КМЦ в качестве лубриканта или свободной ГК в качестве лубриканта на силу экструзии геля поперечносшитой ГК

В данном примере изучали влияние добавления КМЦ или свободной ГК в качестве лубриканта на силу экструзии геля ГК. Для этого измеряли силу экструзии следующих гелей: гель MHAG (пример 1), гель MHAG с 15% КМЦ (пример 2) и гель MHAG с 15% свободной ГК (пример 3).

Было установлено, что использование КМЦ в качестве лубриканта значительно снижало силу экструзии. Такое снижение было аналогично наблюдаемому для свободной ГК (см. ФИГ. 1).

ПРИМЕР 9

Влияние КМЦ в качестве лубриканта или свободной ГК в качестве лубриканта на модуль упругости (G') геля поперечносшитой ГК

В данном примере изучали влияние КМЦ в качестве лубриканта или свободной ГК в качестве лубриканта на модуль упругости (G') геля ГК. Для этого измеряли показатель G' (при 1 Гц, 25°С) тех же гелей, что и в примере 8.

Было установлено, что добавление КМЦ незначительно увеличивало показатель G', тогда как добавление свободной ГК уменьшало показатель G' (см. ФИГ. 2). Неизменность показателя G' имеет важное значение, поскольку данный параметр влияет на способность филлера обеспечивать лифтинг. Таким образом, поскольку в присутствии КМЦ наблюдалось даже незначительное увеличение, ожидается, что после введения под кожу гель MHAG с 15% (об./об.) КМЦ с меньшей вероятностью будет подвержен смещению, т.е. будет обеспечивать более заметный «лифтинг».

ПРИМЕР 10

Влияние КМЦ в качестве лубриканта или свободной ГК в качестве лубриканта на вязкость геля поперечносшитой ГК

В данном примере изучали влияние КМЦ в качестве лубриканта или свободной ГК в качестве лубриканта на вязкость. Для этого измеряли вязкость (при 0,4 Гц, 25°С) тех же гелей, что и в примере 8.

Было установлено, что добавление КМЦ увеличивает вязкость, тогда как добавление свободной ГК незначительно уменьшало вязкость (см. ФИГ. 3). Вязкость также является важным показателем композиции филлера, поскольку повышенная вязкость будет ограничивать распространение геля в мягких тканях и будет также обеспечивать эффект увеличения объема.

ПРИМЕР 11

Влияние КМЦ в качестве лубриканта или свободной ГК в качестве лубриканта на силу экструзии геля поперечносшитой ГК/СаНАР

Для изучения того, изменяет ли добавление частиц гидроксиапатита кальция (СаНАР) приведенные выше результаты, полученные в случае добавления КМЦ или свободной ГК к гелю поперечносшитой ГК, получали следующие гели: MHAI (содержит поперечносшитую ГК и частицы СаНАР; см. пример 1), MHAI с 10% КМЦ (пример 5) и MHAI с 10%) свободной ГК (пример 7). Кроме того, получали «разбавленный гель MHAI», который по составу соответствовал гелю MHAI, но в разбавленном геле MHAI концентрация ГК составляла 15 мг/г. Затем измеряли силу экструзии перечисленных выше гелей.

Было установлено, что добавление 10% КМЦ в качестве лубриканта значительно снижало силу экструзии. Снижение было несколько больше, чем наблюдавшееся при использовании свободной ГК. Кроме того, следует отметить, что использование КМЦ или свободной Г К в качестве лубриканта обеспечивает снижение силы экструзии аналогично наблюдаемому для «разбавленного геля MHAI» с менее концентрированной матрицей ГК (см. ФИГ. 4).

Таким образом, включение частиц СаНАР в состав геля поперечносшитой ГК не меняет основных результатов, наблюдаемых для геля поперечносшитой ГК без частиц СаНАР; однако снижение силы экструзии было еще более заметным при использовании геля ГК с частицами СаНАР.

ПРИМЕР 12

Влияние КМЦ в качестве лубриканта или свободной ГК в качестве лубриканта на модуль упругости (G') геля поперечносшитой ГК/СаНАР

В данном примере изучали влияние КМЦ в качестве лубриканта или свободной ГК в качестве лубриканта на модуль упругости (G') геля поперечносшитой ГК/СаНАР. Для этого измеряли показатель G' (при 1 Гц, 25°С) тех же гелей, что и в примере 11.

Было установлено, что добавление 10% КМЦ приводит к огромному увеличению показателя G'. Напротив, добавление 10% свободной ГК сопровождается незначительным снижением показателя G', а разбавление матрицы ГК приводит к существенному падению модуля упругости, что резко изменяет свойства геля и клинические результаты (см. ФИГ. 5).

Как отмечалось выше, гель с высоким показателем G' будет обеспечивать лучший эффект увеличения объема. Соответственно, данный пример показывает, что добавление КМЦ в качестве лубриканта к гелю поперечносшитой ГК/СаНАР обеспечивает великолепную способность обеспечения лифтинга.

ПРИМЕР 13

Влияние КМЦ в качестве лубриканта или свободной ГК в качестве лубриканта на вязкость геля поперечносшитой ГК/СаНАР

В данном примере изучали влияние КМЦ в качестве лубриканта или свободной ГК в качестве лубриканта на вязкость геля поперечносшитой ГК/СаНАР. Для этого определяли вязкость (при 0,4 Гц, 25°С) тех же гелей, что и в примере 11.

Было установлено, что добавление 10% КМЦ приводит к существенному повышению вязкости, тогда как добавление ГК оказывает лишь минимальное влияние. Как и ожидалось, разбавление матрицы ГК приводит к уменьшению вязкости не менее чем приблизительно на 75%.

Таким образом, следует отметить, что концентрацию добавленной КМЦ в качестве лубриканта можно регулировать в зависимости от необходимой силы экструзии, как показано ниже в примере 14.

ПРИМЕР 14

Влияние меняющихся концентраций КМЦ, используемой в качестве лубриканта, на силу экструзии геля поперечносшитой ГК/СаНАР

В данном примере анализировали корреляцию между меняющимися концентрациями добавленной в качестве лубриканта КМЦ и силой экструзии. Для этого измеряли силу экструзии для следующих гелей: MHAI (гель с поперечносшитой ГК/СаНАР; пример 1), MHAI с 5% КМЦ (пример 4), MHAI с 10% КМЦ (пример 5) и MHAI с 15% КМЦ (пример 6).

Было установлено, что добавление всего лишь 5% КМЦ приводит к существенному уменьшению силы экструзии, которую можно дополнительно снизить посредством добавления 10% КМЦ и еще больше снизить посредством добавления 15% КМЦ (см. ФИГ. 7).

В целом приведенные выше примеры 1-14 показывают, что разбавление геля ГК приводит к снижению силы экструзии, но также связано со значительным уменьшением модуля упругости (G') и вязкости, что будет оказывать значительное влияние на клинические результаты использования филлера. Эксперименты дополнительно показывают, что при добавлении свободной ГК в качестве лубриканта сила экструзии снижается, но, к сожалению, при этом также наблюдается незначительное или умеренное уменьшение показателя G' и вязкости.

Напротив, неожиданно было обнаружено, что использование в качестве лубриканта КМЦ в соответствии с настоящим изобретением не только приводит к резкому уменьшению силы экструзии, но также вызывает увеличение G' и вязкости, особенно в случае геля поперечносшитой ГК с диспергированными частицами (частицами СаНАР). Как увеличение показателя G', так и рост вязкости улучшают эффект лифтинга при введении композиции дермального филлера. Кроме того, за счет поперечносшитой природы геля ГК можно будет обеспечить продолжительное сохранение эффекта в организме человека.

Таким образом, представленные выше эксперименты обеспечивают доказательства того, что композиция дермального филлера в соответствии с настоящим изобретением обеспечивает оптимальный баланс продолжительности действия, способности обеспечения лифтинга и легкости выполнения инъекции.

1. Инъекционная композиция дермального филлера в виде геля, содержащая поперечносшитую гиалуроновую кислоту и карбоксиметилцеллюлозу, где

карбоксиметилцеллюлоза присутствует в концентрации от 5,0% до 20,0% об./об.

2. Инъекционная композиция дермального филлера по п.1, в которой поперечносшитая гиалуроновая кислота присутствует в концентрации от 1,0% до 4,0% мас./об.

3. Инъекционная композиция дермального филлера по п.1 и 2, в которой поперечное сшивание поперечносшитой гиалуроновой кислоты осуществляется с помощью BDDE (диглицидилового эфира 1,4-бутандиола), и предпочтительно степень модификации, которая выражается в виде соотношения суммы одиночных и двойных BDDE-поперечных сшивок и суммы дисахаридных звеньев гиалуроновой кислоты, составляет от 0,5% до 25%.

4. Инъекционная композиция дермального филлера по п.1 и 2, которая дополнительно содержит рассасывающиеся биосовместимые микрочастицы в концентрации от 1% до 50% об./об.

5. Инъекционная композиция дермального филлера по п.3, которая дополнительно содержит рассасывающиеся биосовместимые микрочастицы в концентрации от 1% до 50% об./об.

6. Инъекционная композиция дермального филлера по п.4, в которой рассасывающиеся биосовместимые микрочастицы состоят из материалов на основе фосфата кальция, материалов на основе окиси алюминия, биоразлагаемого природного полисахарида или его производного или биоразлагаемого синтетического полимера полиэфира, полиортоэфира или полиангидрида, причем материалы на основе фосфата кальция включают гидроксиапатит кальция, фторапатит кальция, хлорапатит кальция, карбонат- апатит кальция, тетракальцийфосфат, пирофосфат кальция, трикальцийфосфат и октакальцийфосфат.

7. Инъекционная композиция дермального филлера по п.5, в которой рассасывающиеся биосовместимые микрочастицы состоят из материалов на основе фосфата кальция, материалов на основе окиси алюминия, биоразлагаемого природного полисахарида или его производного, или биоразлагаемого синтетического полимера полиэфира, полиортоэфира или полиангидрида, причем материалы на основе фосфата кальция включают гидроксиапатит кальция, фторапатит кальция, хлорапатит кальция, карбонат- апатит кальция, тетракальцийфосфат, пирофосфат кальция, трикальцийфосфат и октакальцийфосфат.

8. Инъекционная композиция дермального филлера по любому из пп.1, 2, 5, 6 и 7, дополнительно содержащая одно или более соединений, которые выбирают из группы, состоящей из анестезирующих средств, полиолов, витаминов, аминокислот, металлов, антиоксидантов и минеральных солей.

9. Инъекционная композиция дермального филлера по п.3, дополнительно содержащая одно или более соединений, которые выбирают из группы, состоящей из анестезирующих средств, полиолов, витаминов, аминокислот, металлов, антиоксидантов и минеральных солей.

10. Инъекционная композиция дермального филлера по п.4, дополнительно содержащая одно или более соединений, которые выбирают из группы, состоящей из анестезирующих средств, полиолов, витаминов, аминокислот, металлов, антиоксидантов и минеральных солей.

11. Инъекционная композиция дермального филлера по любому из пп.1, 2, 5, 6, 7, 9 и 10, которая содержит полиол и/или анестезирующее средство.

12. Инъекционная композиция дермалыюго филлера по п.11, которая содержит в качестве полиола глицерин и в качестве анестезирующеего средства лидокаин.

13. Инъекционная композиция дермального филлера по п.3, которая содержит полиол и/или анестезирующее средство.

14. Инъекционная композиция дермального филлера по п.13, которая содержит в качестве полиола глицерин и в качестве анестезирующеего средства лидокаин.

15. Инъекционная композиция дермального филлера по п.4, которая содержит полиол, например глицерин, и/или анестезирующее средство, например лидокаин.

16. Инъекционная композиция дермального филлера по п.15, которая содержит в качестве полиола глицерин и в качестве анестезирующеего средства лидокаин.

17. Инъекционная композиция дермального филлера по п.8, которая содержит полиол, например глицерин, и/или анестезирующее средство, например лидокаин.

18. Инъекционная композиция дермального филлера по п.17, которая содержит в качестве полиола глицерин и в качестве анестезирующеего средства лидокаин.

19. Инъекционная композиция дермального филлера по любому из пп.1, 2, 5, 6, 7, 9, 10 и 12-18, которая обладает одним или более из следующих свойств: