Жидкая фармацевтическая композиция

Авторы патента:

Группа изобретений относится к области фармации, в частности к водной фармацевтической композиции, содержащей адалимумаб, также к предварительно заполняемым шприцам или ручкам, содержащим водную фармацевтическую композицию адалимумаба. Композиция содержит (a) 45-55 мг/мл адалимумаба; (b) 2-50 мМ ацетатной буферной системы; (c) 190-300 мМ сахара-стабилизатора, представляющего собой невосстанавливающий дисахарид, выбранный из группы, состоящей из трегалозы и сахарозы; и (d) 0,9-1,1 мг/мл полисорбата 80; где композиция имеет pH между pH 5,1 и 5,3; не содержит аргинин; не содержит фосфатные буферные средства; не содержит аминокислоты; не содержит поверхностно-активные вещества, за исключением полисорбата 80; и содержит по большей мере один сахар-стабилизатор. Группа изобретений обеспечивает стабильность биофармацевтического белка во время всех этапов его получения, хранения, транспортировки и применения. 2 н. и 14 з.п. ф-лы, 22 ил., 18 табл., 3 пр.

ВВЕДЕНИЕ

[0001] Настоящее изобретение относится к новому белковому составу. В частности, изобретение относится к жидкой фармацевтической композиции адалимумаба, к способу изготовления композиции, к набору, который содержит композицию, к упаковке, которая содержит композицию, к способу изготовления упаковки и к способам лечения с применением композиции и/или упаковки.

ПРЕДПОСЫЛКИ

[0002] Лечение аутоиммунных заболеваний, связанных с фактором некроза опухоли альфа (TNF-α), таких как ревматоидный артрит, псориаз и другие аутоиммунные заболевания, осуществляют через применение лекарственных средств, одобренных FDA, таких как адалимумаб (ХУМИРА®, Abbott Corporation). Адалимумаб представляет собой моноклональное антитело человека, которое ингибирует активность TNF-α человека с тем, чтобы препятствовать ему активировать рецепторы TNF, тем самым осуществляя понижающую регуляцию воспалительных реакций, связанных с аутоиммунными заболеваниями. Одобренные медицинские показания для адалимумаба включают ревматоидный артрит, псориатический артрит, анкилозирующий спондилит, болезнь Крона, язвенный колит, хронический псориаз от умеренного до тяжелого и ювенильный идиопатический артрит.

[0003] Адалимумаб в целом доставляют пациенту через подкожную инъекцию и, таким образом, предоставляют в жидкой форме, типично в упаковках, таких как сосуды, предварительно заполняемые шприцы или предварительно заполняемые «устройства по типу ручки». Коммерчески доступные устройства по типу ручки (ручка ХУМИРА®) в целом включают 1 мл предварительно заполняемый стеклянный шприц, предварительно заполняемый 0,8 мл стерильного состава из 40 мг адалимумаба (см. далее), с прикрепленной иглой (версия или с серым природным каучуком или без латекса) и колпачком иглы. Коммерческие составы (ХУМИРА®) адалимумаба содержат следующие ингредиенты:

Ингредиент	Количество на контейнер (мг) (заполняемый объем=0,8 мл)	Количество (мг/мл)
Адалимумаб	40	50
Моногидрат лимонной кислоты	1,04	1,3
Двухосновный дигидрат фосфата натрия	1,22	1,53
Маннит	9,6	12
Одноосновный дигидрат фосфата натрия	0,69	0,86
Полисорбат 80	0,8	1
Хлорид натрия	4,93	6,16
Цитрат натрия	0,24	0,3
WFI и гидроксид натрия	q.b., чтобы корректировать pH до 5,2	q.b., чтобы корректировать pH до 5,2

[0004] Адалимумаб и способ его изготовления описан в WO97/29131 (BASF) как D2E7 и в другом месте в данной области.

[0005] Хотя указанный выше коммерческий состав адалимумаба стабилен (по меньшей мере в определенной степени), соответствующее антитело может быть нестабильным после длительных периодов или в стрессовых условиях, таким образом препятствуя длительному хранению указанных составов. Такое ухудшение состава может быть обусловлено различными факторами, включая:

- физические эффекты, такие как:

неподходящее ингибирование агрегирования соответствующих белковых молекул (функция, которую предположительно выполняет Tween-80);

неподходящее ингибирование преципитации;

неподходящее ингибирование адсорбции соответствующих белковых молекул на границе контакта воды и воздуха или на контактной поверхности какого-либо упаковочного материала (функцию предположительно выполняет Tween-80);

неподходящее регулирование осмотического давления (функцию предположительно выполняет маннит);

- химические эффекты, такие как:

неподходящее регулирование окисления (функцию предположительно выполняет маннит и потенциально отрицательно влияет Tween-80, который может способствовать окислению двойных связей);

неподходящее ингибирование фотоокисления;

неподходящее ингибирование гидролиза сложноэфирных связей, что ведет к образованию кислотных, альдегидных и пероксидных продуктов, таким образом влияя на стабильность антитела;

неподходящие стабилизация и поддержание pH;

неподходящее ингибирование фрагментации белка;

неподходящее ингибирование нарушения укладки белка;

[0006] Любые, некоторые или все приведенные выше факторы могут вести или к непригодному лекарственному продукту (который может быть небезопасен для применения при медицинском воздействии) или к лекарственному продукту, эффективность которого является переменной и непредсказуемой, в частности ввиду переменных стрессов (возбуждение, тепло, свет), которому можно подвергать различные партии лекарственного продукта во время изготовления, транспортировки и хранения.

[0007] В терминах физической и химической стабилизации адалимумаба, сложный массив компонентов в указанных выше коммерческих составах, по-видимому, отвечает приведенным далее ожиданиям, в частности, ввиду большого числа компонентов. Хотя эта конкретная комбинация эксципиентов без сомнений представляет «деликатное равновесие» (учитывая взаимодействие между различными техническими факторами) и является результатом обширных исследований и разработок, ввиду риска недостаточной эффективности, вызывает сомнение оправданность такого большого числа различных эксципиентов, в частности, при условии, что это неминуемо увеличивает производственные и накладные расходы, риски токсичности и риск вредоносного взаимодействия между компонентами, которые могут подвергать состав опасности. Даже если не удастся превзойти общую эффективность коммерческих составов, альтернативный состав, обладающий сравнительной эффективностью, но содержащий меньше компонентов, будет представлять крайне желаемую замену для коммерческих составов, по меньшей мере по вышеуказанным причинам.

[0008] Для того чтобы гарантировать воспроизводимую клиническую эффективность фармацевтического препарата на основе белка, такие продукты должны оставаться в стабильной и подходящей форме с течением времени. Твердо установлено, что молекулярные изменения могут происходить во время каждого этапа процесса изготовления, в том числе во время получения конечного состава и во время хранения. Молекулярные изменения могут модифицировать показатель качества биофармацевтического препарата, что ведет к нежелательному изменению отличительных особенностей, стойкости или чистоты продукта. Некоторые такие проблемы очерчены выше.

[0009] Основная цель разработки состава состоит в том, чтобы предоставить фармацевтическую композицию, которая будет поддерживать стабильность биофармацевтического белка во время всех этапов его получения, хранения, транспортировки и применения. Разработка состава для новаторского биофармацевтического белка или биоэквивалентного моноклонального антитела (mAb) необходима для его безопасности, клинического эффекта и коммерческого успеха.

[0010] Следовательно, существует потребность предоставить альтернативные или усовершенствованные жидкие составы адалимумаба. Желательно, если какие-либо новые составы будут решать по меньшей мере одну из указанных выше проблем и/или по меньшей мере одну проблему, присущую известному уровню техники, и могут подходящим образом решать две или более из указанных проблем. Желательно, чтобы проблему(проблемы) известного уровня техники можно было решить, при этом снижая сложность состава.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0011] Согласно первому аспекту настоящего изобретения, предоставлена жидкая фармацевтическая композиция, которая содержит адалимумаб (которая подходящим образом содержит какой-либо его биоэквивалент); ацетатное буферное средство (или ацетатную буферную систему); и сахар-стабилизатор; где композиция необязательно содержит (или исключает) какой-либо один или несколько дополнительных компонентов, определенных в настоящем документе в отношении жидкой фармацевтической композиции (например, включая поверхностно-активное вещество, исключая аргинин и т. д.), необязательно в каком-либо количестве, концентрации или форме, предусмотренных в настоящем документе; и где композиция необязательно демонстрирует какой-либо один или несколько параметров или свойств, заданных в настоящем документе по отношению к жидкой фармацевтической композиции (например, pH, осмоляльность, агрегирование, фрагментация, нарушение укладки белка, мутность и т. д.).

[0012] Согласно второму аспекту настоящего изобретения предоставлена жидкая фармацевтическая композиция, которая содержит адалимумаб; ацетатное буферное средство (или ацетатную буферную систему); и сахар-стабилизатор; где композиция или (по существу или полностью) не содержит аргинин (соответственно, L-аргинин) или содержит аргинин в концентрации по большей мере 0,1 мМ.

[0013] Согласно третьему аспекту настоящего изобретения предоставлена жидкая фармацевтическая композиция, которая содержит адалимумаб; ацетатное буферное средство (или ацетатную буферную систему); и сахар-стабилизатор; где композиция или (по существу или полностью) не содержит аргинин или содержит аргинин при молярном соотношении аргинина и ацетатного буферного средства по большей мере 1:150 (т. е. меньше чем или равном одному молю аргинина на каждые 150 молей ацетатного буферного средства).

[0014] Согласно четвертому аспекту настоящего изобретения предоставлена жидкая фармацевтическая композиция, которая содержит адалимумаб; ацетатное буферное средство (или ацетатную буферную систему); и сахар-стабилизатор; где композиция или (по существу или полностью) не содержит аргинин или содержит аргинин при массовом соотношении аргинина и адалимумаба по большей мере 1:3000 (т. е. меньше чем или равном одной массовой части аргинина на каждые 3000 массовых частей адалимумаба).

[0015] Согласно пятому аспекту настоящего изобретения предоставлена упаковка (например, предварительно заполняемый шприц, ручка, внутривенный мешок или упаковка/контейнер, содержащий любое из указанного выше), которая содержит жидкую фармацевтическую композицию, как определено в настоящем документе.

[0016] Согласно шестому аспекту настоящего изобретения, предоставлено устройство доставки лекарственного средства (например, предварительно заполняемый шприц или ручка или внутривенный мешок), которое содержит жидкую фармацевтическую композицию, как определено в настоящем документе.

[0017] Согласно седьмому аспекту настоящего изобретения предоставлен набор частей, который содержит устройство доставки лекарственного средства, жидкую фармацевтическую композицию как определено в настоящем документе (необязательно содержащуюся в упаковке или контейнере), и необязательно набор инструкций с указаниями, касающимися введения (например, подкожного) жидкой фармацевтической композиции.

[0018] Согласно восьмому аспекту настоящего изобретения предоставлен способ изготовления жидкой фармацевтической композиции, способ включает смешивание вместе адалимумаба; ацетатного буферного средства (или ацетатной буферной системы); сахара-стабилизатора; и необязательно какого-либо одного или нескольких дополнительных компонентов, определяемых в настоящем документе в отношении жидкой фармацевтической композиции, необязательно в каком-либо предусмотренном количестве, концентрации или форме; и необязательно корректировку какого-либо одного или нескольких параметров, заданных в настоящем документе в отношении жидкой фармацевтической композиции (например, pH, осмоляльность).

[0019] Согласно девятому аспекту настоящего изобретения предоставлена жидкая фармацевтическая композиция, которую можно получать с помощью, которую получают с помощью или непосредственно получают с помощью способа изготовления жидкой фармацевтической композиции как определено в настоящем документе.

[0020] Согласно десятому аспекту настоящего изобретения предоставлен способ изготовления упаковки или устройства доставки лекарственного средства, способ включает размещение жидкой фармацевтической композиции, как определено в настоящем документе, внутри упаковки или устройства доставки лекарственного средства.

[0021] Согласно одиннадцатому аспекту настоящего изобретения предоставлена упаковка или устройство доставки лекарственного средства, которые можно получать с помощью, которые получают с помощью или непосредственно получают с помощью способа изготовления упаковки или устройства доставки лекарственного средства как определено в настоящем документе.

[0022] Согласно двенадцатому аспекту настоящего изобретения предоставлен способ лечения заболевания или медицинского нарушения у нуждающегося в таком лечении пациента, указанный способ включает введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества жидкой фармацевтической композиции как определено в настоящем документе.

[0023] Согласно тринадцатому аспекту настоящего изобретения предоставлена жидкая фармацевтическая композиция как определено в настоящем документе для применения в терапии.

[0024] Согласно четырнадцатому аспекту настоящего изобретения предоставлено применение жидкой фармацевтической композиции как определено в настоящем документе при изготовлении лекарственного средства для лечения заболевания или нарушения.

[0025] Согласно пятнадцатому аспекту настоящего изобретения предоставлен способ лечения аутоиммунного заболевания, связанного с фактором некроза опухоли альфа (TNF-α), у нуждающегося в таком лечении пациента, указанный способ включает введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества жидкой фармацевтической композиции как определено в настоящем документе.

[0026] Согласно шестнадцатому аспекту настоящего изобретения предоставлена жидкая фармацевтическая композиция как определено в настоящем документе для применения в лечении аутоиммунного заболевания, связанного с фактором некроза опухоли альфа (TNF-α).

[0027] Согласно семнадцатому аспекту настоящего изобретения предоставлено применение жидкой фармацевтической композиции как определено в настоящем документе при изготовлении лекарственного средства для лечения аутоиммунного заболевания, связанного с фактором некроза опухоли альфа (TNF-α).

[0028] Согласно восемнадцатому аспекту настоящего изобретения предоставлен способ лечения ревматоидного артрита, псориатического артрита, анкилозирующего спондилита, болезни Крона, язвенного колита, хронического псориаза от умеренного до тяжелого и/или ювенильного идиопатического артрита у нуждающегося в таком лечении пациента, указанный способ включает введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества жидкой фармацевтической композиции как определено в настоящем документе.

[0029] Согласно девятнадцатому аспекту настоящего изобретения предоставлена жидкая фармацевтическая композиция как определено в настоящем документе для применения в лечении ревматоидного артрита, псориатического артрита, анкилозирующего спондилита, болезни Крона, язвенного колита, хронического псориаза от умеренного до тяжелого и/или ювенильного идиопатического артрита.

[0030] Согласно двадцатому аспекту настоящего изобретения предоставлено применение жидкой фармацевтической композиции как определено в настоящем документе при изготовлении лекарственного средства для лечения ревматоидного артрита, псориатического артрита, анкилозирующего спондилита, болезни Крона, язвенного колита, хронического псориаза от умеренного до тяжелого и/или ювенильного идиопатического артрита.

[0031] В дополнительных аспектах изобретение относится к жидкой фармацевтической композиции, упаковке, устройству доставки лекарственного средства, набору частей, способу изготовления жидкой фармацевтической композиции, способу изготовления упаковки или устройства доставки лекарственного средства, способу лечения, жидкой фармацевтической композиции для применения и к применению жидкой фармацевтической композиции при изготовлении лекарственного средства, по существу как определено в настоящем документе (в том числе в любом из приведенных выше двадцати аспектов) за исключением того, что вместо конкретного «адалимумаба» (и его биоэквивалента) в изобретении взамен можно применять (и тем самым определить как связанное) какое-либо TNF-α-ингибирующее антитело (антитело против TNF-α) (или какой-либо его биоэквивалент), хотя подойдет антитело, которое ингибирует активность TNF-α человека, и лучше всего подойдет моноклональное антитело человека, которое ингибирует активность TNF-α человека. Подходящим образом, антитело против TNF-α представляет собой терапевтически эффективное лекарственное средство (по меньшей мере при введении в подходящих количествах нуждающемуся в этом пациенту) (или его биоэквивалент - см. далее определение биоэквивалента в отношении адалимумаба, которое в равной мере применимо ко всем антителам против TNF-α), подходящим образом одно из тех, которые получили одобрение FDA. По существу, в настоящем документе любое указание на «адалимумаб» можно рассматривать, пока не окажется несовместимым с ним, как указание на любое антитело против TNF-α в целях этих дополнительных аспектов изобретения (относится ли это к абсолютным или относительным количествам, концентрациям, параметрам или свойствам или относится ли это к некоторым определениям, таким как тем, которые составляют биоэквивалент).

[0032] Один из этих дополнительных аспектов настоящего изобретения предоставляет жидкую фармацевтическую композицию, которая содержит антитело против TNF-α (которое подходящим образом включает какой-либо его биоэквивалент); ацетатное буферное средство (или ацетатную буферную систему); и сахар-стабилизатор; где композиция необязательно содержит (или исключает) какой-либо один или несколько дополнительных компонентов, определяемых в настоящем документе в отношении жидкой фармацевтической композиции (например, включая поверхностно-активное вещество, исключая аргинин и т. д.), необязательно в каком-либо количестве, концентрации или форме, предусмотренных в настоящем документе; и где композиция необязательно демонстрирует какой-либо один или несколько параметров или свойств, заданных в настоящем документе в отношении жидкой фармацевтической композиции (например, pH, осмоляльность, агрегирование, фрагментация, нарушение укладки белка, мутность и т. д.).

[0033] В конкретном варианте осуществления антитело против TNF-α выбирают из группы, включающей адалимумаб, инфликсимаб, цертолизумаб пэгол, голимумаб.

[0034] Все признаки, в том числе необязательные, подходящие и предпочтительные признаки, описанные в отношении какого-либо конкретного аспекта изобретения, также могут представлять собой признаки, в том числе необязательные, подходящие и предпочтительные признаки какого-либо другого аспекта настоящего изобретения.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ФИГУР

[0035] Чтобы лучше понять изобретение и показать, как воплощать варианты его осуществления, далее в качестве примера дана ссылка на следующие схематические рисунки, на которых:

[0036] На фиг. 1 представлена гистограмма, которая показывает содержание белка (мг/мл), как определяют с помощью OD, для DoE1 составов (из примера 1), наряду с эталонными стандартами (представляющими сравнительные составы ХУМИРА®), в произвольной начальной точке (синие столбцы, время=0) и после 4 недель (красные столбцы) состава(составов), который нагревали до 40°C.

[0037] На фиг. 2 представлена гистограмма, которая показывает % агрегирования, как определяют с помощью SE-HPLC, для DoE1 составов (из примера 1), наряду с эталонными стандартами (представляющими сравнительные составы ХУМИРА®), в произвольной начальной точке (синие столбцы, время=0) и после 2 недель (зеленые столбцы) и 4 недель (оранжевые столбцы) для состава(составов), который нагревали до 40°C.

[0038] На фиг. 3 представлена гистограмма, которая показывает % фрагментации, как определяют с помощью Bioanalyzer, для DoE1 составов (из примера 1), наряду с эталонными стандартами (представляющими сравнительные составы ХУМИРА®), в произвольной начальной точке (темно-синие столбцы, время=0) и после 2 недель (розовые столбцы) и 4 недель (светло-синие столбцы) для состава(составов), который нагревали до 40°C.

[0039] На фиг. 4 представлена гистограмма, которая показывает температуру нарушения укладки (°C), как определяют с помощью DSF, для DoE1 составов (из примера 1), наряду с эталонными стандартами (представляющими сравнительные составы ХУМИРА®).

[0040] На фиг. 5 представлена гистограмма, которая показывает % агрегирования, как определяют с помощью SE-HPLC, для DoE2 составов (из примера 2), наряду с эталонными стандартами (представляющими сравнительные составы ХУМИРА®), в произвольной начальной точке (красные столбцы, время=0) и после 2 недель (зеленые столбцы) и 4 недель (пурпурные столбцы) для состава(составов), который нагревали до 40°C.

[0041] На фиг. 6 представлена гистограмма, которая показывает % фрагментации, как определяют с помощью Bioanalyzer, для DoE2 составов (из примера 2), наряду с эталонными стандартами (представляющими сравнительные составы ХУМИРА®), в произвольной начальной точке (синие столбцы, время=0) и после 2 недель (красные столбцы) и 4 недель (зеленые столбцы) для состава(составов), который нагревали до 40°C.

[0042] На фиг. 7 представлена гистограмма, которая показывает профиль изоформ основного пика, как определяют с помощью iCE280 анализа, для DoE2 составов (из примера 2) в произвольной начальной точке (синие столбцы, время=0) и после 2 недель (красные столбцы) и 4 недель (зеленые столбцы) для состава(составов), который нагревали до 40°C.

[0043] На фиг. 8 представлена гистограмма, которая показывает профиль изоформ пика(пиков) кислотного кластера, как определяют с помощью iCE280 анализа, для DoE2 составов (из примера 2) в произвольной начальной точке (синие столбцы, время=0) и после 2 недель (красные столбцы) и 4 недель (зеленые столбцы) для состава(составов), который нагревали до 40°C.

[0044] На фиг. 9 представлена гистограмма, которая показывает мутность, как определяют с помощью нефелометрии, для DoE2 составов (из примера 2) в произвольной начальной точке (синие столбцы, время=0) и после 2 недель (красные столбцы) и 4 недель (зеленые столбцы) для состава(составов), который нагревали до 40°C.

[0045] На фиг. 10 представлена гистограмма, которая показывает % агрегирования, как определяют с помощью SE-HPLC, для DoE2 составов (из примера 2) в произвольной начальной точке (синие столбцы, время=0) и после 24 часов (красные столбцы) и 48 часов (зеленые столбцы) для состава(составов), который механически перемешивали (встряхивали).

[0046] На фиг. 11 представлена гистограмма, которая показывает % фрагментации, как определяют с помощью Bioanalyzer, для DoE2 составов (из примера 2) в произвольной начальной точке (синие столбцы, время=0) и после 24 часов (красные столбцы) и 48 часов (зеленые столбцы) для состава(составов), который механически перемешивали (встряхивали).

[0047] На фиг. 12 представлена гистограмма, которая показывает мутность, как определяют с помощью нефелометрии, для DoE2 составов (из примера 2) в произвольной начальной точке (синие столбцы, время=0) и после 24 часов (красные столбцы) и 48 часов (зеленые столбцы) для состава(составов), который механически перемешивали (встряхивали).

[0048] На фиг. 13 представлена гистограмма, которая показывает % агрегирования, как определяют с помощью SE-HPLC, для DoE2 составов (из примера 2), наряду с эталонными стандартами (представляющими сравнительные составы ХУМИРА®), перед воздействием света (синие столбцы, время=0) и после 7-часового воздействия света при 765 Вт/м² (красные столбцы).

[0049] На фиг. 14 представлена гистограмма, которая показывает % фрагментации, как определяют с помощью Bioanalyzer, для DoE2 составов (из примера 2) перед воздействием света (синие столбцы, время=0) и после 7-часового воздействия света при 765 Вт/м² (красные столбцы).

[0050] На фиг. 15 представлена гистограмма, которая показывает профиль изоформ основного пика, как определяют с помощью iCE280 анализа, для DoE2 составов (из примера 2), наряду с эталонными стандартами (представляющими сравнительные составы ХУМИРА®), перед воздействием света (синие столбцы, время=0) и после 7-часового воздействия света при 765 Вт/м² (красные столбцы).

[0051] На фиг. 16 представлена гистограмма, которая показывает профиль изоформ пика(пиков) кислотного кластера, как определяют с помощью iCE280 анализа, для DoE2 составов (из примера 2), наряду с эталонными стандартами (представляющими сравнительные составы ХУМИРА®), перед воздействием света (синие столбцы, время=0) и после 7-часового воздействия света при 765 Вт/м² (красные столбцы).

[0052] На фиг. 17 представлена гистограмма, которая показывает мутность, как определяют с помощью нефелометрии, для DoE2 составов (из примера 2) перед воздействием света (синие столбцы, время=0) и после 7-часового воздействия света при 765 Вт/м² (красные столбцы).

[0053] На фиг. 18 представлена гистограмма, которая показывает профиль изоформ основного пика, как определяют с помощью iCE280 анализа, для DoE2 составов (из примера 2) до (синие столбцы, время=0) и после м²(красные столбцы) пяти циклов замораживания-оттаивания (-80°C -> комнатная температура).

[0054] На фиг. 19 представлена гистограмма, которая показывает профиль изоформ пика(пиков) кислотного кластера, как определяют с помощью iCE280 анализа, для DoE2 составов (из примера 2) до (синие столбцы, время=0) и после м²(красные столбцы) пяти циклов замораживания-оттаивания (-80°C -> комнатная температура).

[0055] На фиг. 20 представлена гистограмма, которая показывает % агрегирования, как определяют с помощью SE-HPLC, для DoE2 составов (из примера 2), наряду с эталонными стандартами (представляющими сравнительные составы ХУМИРА®) до (синие столбцы, время=0) и после м²(красные столбцы) пяти циклов замораживания-оттаивания (-80°C -> комнатная температура).

[0056] На фиг. 21 представлена гистограмма, которая показывает численную концентрацию (№/мг) невидимых частиц с размером частицы меньше чем или равным 10 мкм, как определяют с помощью анализа подсчета невидимых частиц, для DoE2 составов (из примера 2) до (синие столбцы, время=0) и после м²(красные столбцы) пяти циклов замораживания-оттаивания (-80°C -> комнатная температура).

[0057] На фиг. 22 представлена гистограмма, которая показывает численную концентрацию (№/мг) невидимых частиц с размером частицы меньше чем или равным 25 мкм, как определяют с помощью анализа подсчета невидимых частиц, для DoE2 составов (из примера 2) до (синие столбцы, время=0) и после м²(красные столбцы) пяти циклов замораживания-оттаивания (-80°C -> комнатная температура).

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Определения

[0058] Если не указано иное, следующие термины, используемые в описании и формуле изобретения, имеют следующие значения, изложенные далее.

[0059] В настоящем документе отсылки к «адалимумабу» включают исходное лекарственное вещество (которое доступно коммерчески), адалимумаб как определено в WO97/29131 (BASF) (в частности, D2E7 в нем) и в другом месте в данной области, а также их биоэквиваленты. D2E7 из WO97/29131 «имеет CDR3 домен легкой цепи, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID № 3, и CDR3 домен тяжелой цепи, который содержит аминокислотную последовательность SEQ ID № 4». Предпочтительно, антитело D2E7 имеет вариабельную область легкой цепи (LCVR), которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID № 1, и вариабельную область тяжелой цепи (HCVR), которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID № 2. В WO97/29131 приведены подробности о каждом из этих списков последовательностей. В настоящем документе отсылки к «адалимумабу» могут включать биоэквиваленты, которые, например, могут иметь идентичность последовательностей белков по меньшей мере 75%, подходящим образом по меньшей мере 80%, подходящим образом по меньшей мере 85%, подходящим образом по меньшей мере 90%, подходящим образом по меньшей мере 95%, подходящим образом по меньшей мере 96%, подходящим образом по меньшей мере 97%, подходящим образом по меньшей мере 98% или наиболее подходящим образом по меньшей мере 99% с какой-либо одно из последовательностями белков, раскрытых в WO97/29131 (в частности, в отношении D2E7) или в другом месте в отношении «адалимумаба». Альтернативно или дополнительно, в настоящем документе отсылки к «адалимумабу» могут включать биоэквиваленты, которые проявляют по меньшей мере 75%, подходящим образом по меньшей мере 80%, подходящим образом по меньшей мере 85%, подходящим образом по меньшей мере 90%, подходящим образом по меньшей мере 95%, подходящим образом по меньшей мере 96%, подходящим образом по меньшей мере 97%, подходящим образом по меньшей мере 98% или наиболее подходящим образом по меньшей мере 99% гомологию последовательностей белков с какой-либо одной из последовательностей белков, раскрытых в WO97/29131 (в частности, в отношении D2E7) или в другом месте в отношении «адалимумаба». Альтернативно или дополнительно, биоэквивалент может иметь (слегка) отличающийся профиль гликозилирования, даже если последовательность белка является по существу той же или отличающейся в той степени, которая точно определена выше.

[0060] Термин «биоэквивалент» (также известный как воспроизведенный биотехнологический препарат) хорошо известен в данной области, и специалист легко поймет, когда лекарственное вещество следует рассматривать как биоэквивалент адалимумаба. Кроме того, такие «биоэквиваленты» требуют официального одобрения в качестве «биоэквивалента» для выпуска на рынок прежде, чем указанный «биоэквивалент» будут продавать на открытом рынке. Термин «биоэквивалент» в целом используют для того, чтобы описывать последующие версии (в целом, из другого источника) «инновационных биофармацевтических препаратов» («биотехнологические препараты», лекарственное вещество которых получают с помощью живого организма или из нежизнеспособного живого организма или через рекомбинантную ДНК или способы управляемой экспрессии генов), которые предварительно получили официальное регистрационное свидетельство. Поскольку биотехнологические препараты средства обладают высокой степенью молекулярной сложности и в целом чувствительны к изменениям в производственных процессах (например, если при их получении используют другие клеточные линии), а также поскольку последующие производители воспроизведенного средства в целом не имеют доступа ни к исходному молекулярному клону, банку клеток, технологии, касающейся процесса ферментации и очистки, ни к самому активному лекарственному веществу (только инновационный коммерческий лекарственный продукт), какой-либо «биоэквивалент» маловероятно будет точно таким же, как инновационный лекарственный продукт.

[0061] В целях различных молярных вычислений (например, для молярных соотношений между адалимумабом и другим компонентом жидкой фармацевтической композиции по изобретению) молекулярную массу адалимумаба можно принимать равной 144190,3 г/моль (эталонная молекулярная масса) на основании деталей, раскрытых в базе данных CAS для CAS #331731-18-1, адалимумаба, где в качестве молекулярной формулы взято C₆₄₂₈H₉₉₁₂N₁₆₉₄O₁₉₈₇S₄₆. По существу, жидкую фармацевтическую композицию, которая содержит 50 мг/мл адалимумаба, можно считать 0,347 мМ (или 347 мкМ) раствором адалимумаба. Это не предназначено для того, чтобы накладывать каким-либо образом ограничения ни в отношении свойств любых биоэквивалентов адалимумаба, охватываемых объемом настоящего изобретения, ни в отношении уровня гликозилирования, каждое из которых может влиять на фактическую молекулярную массу. Однако, когда биоэквивалент имеет отличающуюся молекулярную массу, указанную выше эталонную молекулярную массу следует подходящим образом использовать для целей оценки того, попадает ли или нет биоэквивалент в объем какого-либо молярного определения, предусмотренного в этом описании. Так что следует вычислять число молей в известной массе указанного биоэквивалента, просто для целей данного изобретения, используя указанную выше эталонную молекулярную массу.

[0062] В настоящем документе термин «буфер» или «буферный раствор» в целом относится к водному раствору, который содержит смесь кислоты (обычно слабой кислоты, например, уксусной кислоты, лимонной кислоты, имидазолиевой формы гистидина) и его сопряженного основания (например, ацетатной или цитратной соли, например, ацетата натрия, цитрата натрия или гистидина), или альтернативно смесь основания (обычно слабого основания, например, гистидина) и его сопряженной кислоты (например, протонированной соли гистидина). pH «буферного раствора» будет меняться только очень слабо при добавлении маленького количества сильной кислоты или основания из-за «буферного эффекта», обеспечиваемого «буферным средством».

[0063] В настоящем документе, «буферная система» содержит одно или несколько буферных средств и/или его сопряженную кислоту/основание(кислоты/основания) и более подходящим образом содержит одно или несколько буферных средств и его сопряженную кислоту/основание(кислоты/основания), и наиболее подходящим образом содержит только одно буферное средство и его сопряженную кислоту/основание. Если не установлено иное, какие-либо концентрации, предусмотренные в настоящем документе по отношению к «буферной системе» (т. е. концентрация буфера) подходящим образом относится к комбинированной концентрации буферного средства(средств) и/или его сопряженной кислоты/основания (кислот/оснований). Другими словами, концентрации, предусмотренные в настоящем документе по отношению к «буферной системе», подходящим образом относятся к комбинированной концентрации всех релевантных буферных частиц (т. е. частиц в динамическом равновесии друг с другом, например, ацетат/уксусная кислота). По существу, данная концентрация ацетатной буферной системы в целом относится к комбинированной концентрации ацетата (или ацетатной соли(солей), например, ацетата натрия) и уксусной кислоты. Общий pH композиции, которая содержит релевантную буферную систему, в целом является отражением равновесной концентрации каждой из релевантных буферных частиц (т. е. к равновесию буферного средства(средств) и его сопряженной кислоты/основания (кислот/оснований)).

[0064] В настоящем документе, термин «буферное средство» относится к кислотному или основному компоненту (обычно слабая кислота или слабое основание) буфера или буферного раствора. Буферное средство помогает поддерживать pH данного раствора на предварительно определяемом значении или около него, и буферные средства в целом выбирают для того, чтобы дополнять предварительно определяемое значение. Буферное средство подходящим образом представляет собой одно соединение, которое дает начало желаемому буферному эффекту, в частности, когда указанное буферное средство смешивают с подходящим количеством (в зависимости от предварительно определяемого желаемого pH) соответствующей ему «сопряженной кислоты/основания» (с которыми оно подходящим образом способно к протонному обмену), или если необходимое количество соответствующей ему «сопряженной кислоты/основания» формируют in situ - этого можно достигать посредством добавления сильной кислоты или основания до тех пор, пока не достигают требуемого pH. В качестве примера:

- ацетатное «буферное средство» подходящим образом представляет собой ацетатную соль, например, ацетат натрия, подходящим образом смешанную с сопряженной с ней кислотой/основанием, уксусную кислоту. Такую буферную систему можно формировать посредством простого смешивания заданного количества ацетата натрия с заданным количеством уксусной кислоты. Однако альтернативно такой буфер можно формировать посредством добавления заданного количества основания, подходящим образом сильного основания (например, гидроксида натрия), в уксусную кислоту до тех пор, пока не достигают желаемого pH (и, таким образом, желаемого равновесия между ацетатом натрия и уксусной кислотой). В настоящем документе, за исключением тех мест, где указано противоположное, какие-либо концентрации, заданные по отношению к ацетатному буферу или ацетатному буферному средству, подходящим образом относятся к комбинированной концентрации буферного средства(средств) (например, ацетата натрия) и/или его сопряженной кислоты/основания(кислот/оснований) (например, уксусной кислоты). Специалист без труда может вычислять такие концентрации. Такие концентрации можно вычислять посредством обращения к комбинированным концентрациям буферного средства(средств) и сопряженной кислоты/основания(кислот/оснований), где буферную систему формируют посредством простого смешивания вместе буферного средства(средств) и сопряженной кислоты/основания (кислот/оснований). Альтернативно, где буферную систему формируют посредством смешивания или буферного средства(средств) или сопряженной кислоты/основания(кислот/оснований) с регулятором pH (например, с сильной кислотой или сильным основанием), чтобы получать смесь каждого, подходящим образом такие концентрации можно вычислять посредством обращения к начальным количествам/концентрациями буферного средства(средств) или сопряженной кислоты/основания(кислот/оснований), соответственно. Например, когда буферную систему формируют с применением известного количества/концентрации уксусной кислоты, которую смешивают с регулятором pH (например, гидроксидом натрия) до тех пор, пока не достигают желаемого pH, концентрацию буферной системы можно вычислять посредством обращения к начальному количеству уксусной кислоты.

[0065] В настоящем документе, «сопряженная кислота/основание» относится к сопряженной кислоте или сопряженному основанию (независимо от того, что из них релевантно при конкретном pH - типично к сопряженной кислоте в контексте настоящего изобретения) конкретного «буферного средства». Сопряженная кислота/основание ацетатного буферного средства (например, ацетата натрия) подходящим образом является уксусная кислота.

[0066] В настоящем документе термин «буферные частицы» относится к конкретным частицам (за исключением каких-либо ассоциированных противоанионов или противокатионов - т. е. не учитывают ионы натрия для систем с ацетатом натрия/уксусной кислотой) данной буферной системы, которые находятся в динамическом равновесии друг с другом (и осуществляют протонный обмен друг с другом). Например, ацетатные анионы и уксусная кислота вместе составляют «ацетатные буферные частицы» «ацетатной буферной системы».

[0067] Поскольку несколько затруднительно определять количества (абсолютные или относительные) буферной системы посредством обращения к массе (поскольку общая масса зависит от желаемого pH, который будет влиять на количество присутствующих противоионов), в настоящем документе массовые количества вместо этого можно определять посредством обращения к теоретической массе релевантных «буферных частиц». По меньшей мере две частицы присутствуют в каком-либо заданном наборе «буферных частиц» (в относительных количествах, которые можно определять только посредством обращения к pH), каждая имеет свою молекулярную массу (которая обычно отличается только на 1). Следовательно, чтобы сделать возможными жизнеспособные вычисления массы и обращение к ней, в целях этого описания массу какого-либо заданного набора «буферных частиц» задают в качестве теоретической массы на основании только одной из буферных частиц, а именно наиболее кислой из буферных частиц (т. е. наиболее протонированной формы при каком-либо заданном pH). Так что массу заданного набора «буферных частиц» выражают в виде массы эквивалентов кислых частиц. В качестве примера, в ацетатной буферной системе ацетатные буферные частицы могут состоять из ацетатных анионов (игнорируя противокатионы) и уксусной кислоты. Следовательно, массу «буферных частиц» вычисляют как если бы уксусная кислота была единственной частицей, присутствующей в буферной системе (даже несмотря на то, что ацетат очевидно присутствует наряду с уксусной кислотой). Таким образом, какое-либо указание массы или массового соотношения, включающего «ацетатные буферные частицы», подходящим образом относится к теоретической массе эквивалентов уксусной кислоты в буферной системе. По существу, когда композицию формируют посредством добавления регулятора pH (например, гидроксида натрия) в фиксированное количество уксусной кислоты, исходную массу уксусной кислоты можно рассматривать как массу «буферных частиц» независимо от итогового pH. Альтернативно, если известна концентрация (т. е. молярность) буферной системы, ее можно превращать в массу «буферных частиц» посредством обращения к молекулярной массе наиболее кислой формы релевантных буферных частиц (например, уксусной кислоты) и игнорирования того факта, что ацетатные анионы также имеют место.

[0068] Если не установлено иное, в настоящем документе отсылки к «аминокислоте» или «аминокислотам», будь то конкретно (например, аргинин, гистидин) или в общем (например, какая-либо аминокислота), в контексте их присутствия или иным образом в композициях (в частности, в фармацевтических жидких композициях по изобретению) относится к соответствующей свободной аминокислоте(аминокислотам) (независимо от ее/их состояния протонирования и/или солевой формы, хотя для согласованности количества подходящим образом вычисляют посредством обращения к свободной аминокислоте per se). Это может подходящим образом включать природные и/или искусственные аминокислоты. Пока не указано иное, такие указания не предназначены для того, чтобы относиться к аминокислотному остатку(остаткам), ковалентно встроенному в виде части более крупного соединения (в противоположность композиции, которая содержит множество соединений), такого как пептид или белок (где такие аминокислотные остатки связаны через пептидные связи). По существу, хотя адалимумаб в виде белка содержит аминокислотные остатки, считают, что он содержит какую-либо «свободную аминокислоту(аминокислоты)». В качестве примера, композиция, определяемая как «не содержащая аргинин», не содержит какой-либо свободный аргинин, но она все же может содержать один или несколько белков (например, адалимумаб), которые сами по себе содержат остатки аргинина.

[0069] Если не установлено иное, в настоящем документе отсылки к какой-либо одной или нескольким «аминокислотам», будь то конкретно или в общем, подходящим образом относятся к их L- стереоизомерам или рацемату, наиболее подходящим образом к L-аминокислотам.

[0070] Термин «по существу не содержит», когда используют по отношению к данному компоненту композиции (например, «жидкая фармацевтическая композиция по существу не содержит аргинин»), относится к композиции, в которую по существу не добавлен ни один указанный компонент. Как изложено выше, такие отсылки не имеют отношения к присутствию аминокислотного остатка(остатков) в структуре белка. Когда композиция «по существу не содержит» данный компонент, указанная композиция подходящим образом содержит не больше чем 0,001% масс. указанного компонента, подходящим образом не больше чем 0,0001% масс. указанного компонента, подходящим образом не больше чем 0,00001% масс., подходящим образом не больше чем 0,000001% масс., подходящим образом не больше чем 0,0000001% масс. его, наиболее подходящим образом не больше чем 0,0001 части на миллиард (по массе).

[0071] Термин «полностью не содержит», когда используют по отношению к данному компоненту композиции (например, «жидкая фармацевтическая композиция по существу не содержит аргинин»), относится к композиции, которая не содержит указанный компонент. Как изложено выше, такие отсылки не имеют отношения к присутствию аминокислотного остатка(остатков) в структуре белка.

[0072] В настоящем документе в контексте данного описания «сильная кислота» подходящим образом представляет собой ту, которая имеет pK_a -1,0 или меньше, тогда как «слабая кислота» подходящим образом представляет собой ту, которая имеет pK_a 2,0 или больше. В настоящем документе, в контексте данного описания, «сильное основание» подходящим образом представляет собой то, сопряженная кислота которого имеет pK_a 12 или выше (подходящим образом 14 или выше), тогда как «слабое основание» подходящим образом представляет собой то, сопряженная кислота которого имеет pK_a 10 или меньше.

[0073] В настоящем документе «стабилизатор» относится к компоненту, который облегчает поддержание структурной целостности биофармацевтического лекарственного средства, в частности, во время заморозки и/или лиофилизации и/или хранения (в частности, когда подвергают стрессу). Этот стабилизирующий эффект может возникать по различным причинам, хотя типично такие стабилизаторы могут действовать в качестве осмолитов, которые противодействуют денатурации белка. Типичные стабилизаторы включают аминокислоты (т. е. свободные аминокислоты, не являющиеся частью пептида или белка, например, глицин, аргинин, гистидин, аспарагиновая кислота, лизин) и сахара-стабилизаторы, такие как сахарный полиол (например, маннит, сорбит) и/или дисахарид (например, трегалоза, сахароза, мальтоза, лактоза), хотя жидкие фармацевтические композиции по изобретению содержат стабилизатор, по меньшей мере один из которых представляет собой сахар-стабилизатор (т. е. сахарный полиол или дисахарид). Наиболее подходящим образом по меньшей мере один сахар-стабилизатор представляет собой невосстанавливающий сахар (будь это сахарный полиол или дисахарид).

[0074] В настоящем документе «невосстанавливающий сахар» в целом представляет собой сахар без каких-либо альдегидных фрагментов или без способности образовывать альдегидный фрагмент (например, через изомеризацию).

[0075] В настоящем документе, «модификатор тоничности» или «регулятор тоничности» относится к реактиву, включение которого в композицию подходящим образом вносит вклад в (или увеличивает) общую осмоляльность и осмолярность композиции. Подходящим образом, регулятор тоничности, как используют в настоящем документе, включает средство, которое функционирует так, что делает раствор схожим по осмотическим характеристикам с физиологическими текучими веществами.

[0076] В настоящем документе отсылки к конкретным количествам данного компонента композиции, в частности, буферного средства, стабилизатора, аминокислоты, поверхностно-активного вещества или регулятора тоничности, подходящим образом относятся к количествам чистой безводной формы соответствующего компонента (или композиций, сформированных с применением указанных количеств чистой безводной формы), даже несмотря на то, что при формировании композиции такой компонент можно применять в не безводной форме. Количества любых соответствующих не безводных форм (например, моногидратов, дигидратов и т. д.) можно легко вычислять, просто используя подходящий множитель. Например, если не установлено иное (в соответствии с примерами, где количества относятся к дигидрату трегалозы), количества, предусмотренные в отношении трегалозы, относятся к безводной форме трегалозы (или композиций, сформированных с применением предусмотренных количеств/концентраций безводной трегалозы), которая имеет молекулярную массу 342,296 г/моль, так что для того, чтобы вычислять соответствующее количество дигидрата трегалозы, необходимое для того, чтобы формировать ту же композицию (потребуется добавить меньше воды), нужно умножить предусмотренное количество на 378,33/342,296, поскольку 378,33 представляет собой молекулярную массу дигидрата трегалозы. Специалист без труда поймет, как целесообразно корректировать количество разбавителя/воды в зависимости от используемой формы компонентов, чтобы получать целевые концентрации.

[0077] В настоящем документе термин «фармацевтическая композиция» относится к составу фармацевтического активного ингредиента, который делает биологическую активность активного ингредиента терапевтически эффективной, но который не включает другие ингредиенты, которые очевидно токсичны для субъекта, которому предполагают вводить состав.

[0078] В настоящем документе, термин «стабильный» в целом относится к физической стабильности и/или химической стабильности и/или биологической стабильности компонента, типично активного компонента или его композиции, во время консервации/хранения.

[0079] Следует принимать во внимание, что отсылки к «лечению» включают профилактику, а также облегчение установленных симптомов состояния. «Лечение» состояния или нарушения, следовательно, включает: (1) предотвращение или замедление возникновения клинических симптомов состояния или нарушения, развивающегося у человека, который может быть поражен или предрасположен к состоянию или нарушению, но еще не испытывает или не демонстрирует клинические или субклинические симптомы состояния или нарушения, (2) ингибирование состояния или нарушения, т. е., остановка, снижение или замедление развития заболевания или его обострения (в случае поддерживающего лечения) или по меньшей мере одного его клинического или субклинического симптома, или (3) облегчение или ослабление заболевания, т. е., регрессия состояния или нарушения или по меньшей мере одного из его клинических или субклинических симптомов.

[0080] В контексте настоящего изобретения «терапевтически эффективное количество» или «эффективное количество» антитела обозначает количество, которое эффективно при введении млекопитающему для лечения заболевания или нарушения, в профилактическом и терапевтическом аспекте, и антитело эффективно при лечении рассматриваемых заболеваний.

[0081] «Терапевтически эффективное количество» варьирует в зависимости от соединения, заболевания и его тяжести, а также возраста, массы тела и т. д. млекопитающего, подлежащего лечению.

[0082] Термин «TNF-α человека» относится к цитокину человека, который существует в секретируемой форме 17 кДа и форме, ассоциированной с мембраной, 26 кДа, и в биологически активной форме TNF-α можно наблюдать в виде триммера ковалентно связанной молекулы 17 кДа. Его конкретную структуру можно найти в Pennica, D. et al. (1984) Nature 312: 724-729; Davis, J. M. et al. (1987) Biochemistry 26, 1322-1326; и Jones, E. Y. et al. (1989) Nature 338:225-228.

[0083] Термин «рекомбинантное антитело человека» предназначено для того, чтобы включать антитело человека, получаемое, экспрессируемое, продуцируемое или выделяемое с применением рекомбинантного способа.

[0084] В настоящем документе предусмотрено, что количества, предусмотренные для компонентов и ингредиентов, будь они точно определены в единицах «частей», ч./млн (частей на миллион), процентных долей (%, например, % масс.) или соотношений, представляют собой количества по массе, если не установлено иное.

[0085] Где количество или концентрацию конкретного компонента данной композиции точно определяют в виде массовой доли (% масс. или %масс./масс.), указанная массовая доля относится к процентной доле указанного компонента по массе относительной общей массы композиции в целом. Специалистам в данной области будет понятно, что сумма массовых долей всех компонентов композиции (будь они точно определены или нет) должна составлять 100% масс. Однако когда перечислены не все компоненты (например, где указано, что композиции «содержат» один или несколько конкретных компонентов), баланс массовых долей необязательно можно доводить до 100% масс. с применением ингредиентов, которые не определены точно (например, разбавитель, такой как вода, или другие не необходимые, но подходящие добавки).

[0086] В настоящем документе, если не установлено иное, термин «части» (например, массовые части), когда используют по отношению к множеству ингредиентов/компонентов, относится к относительным соотношениям между указанным множеством ингредиентов/компонентов. Выражение молярных или массовых соотношений двух, трех или больше компонентов дает начало тому же эффекту (например, молярное соотношение x, y и z представляет собой x₁:y₁:z₁, соответственно, или диапазон x₁-x₂:y₁-y₂:z₁-z₂). Хотя во многих вариантах осуществления количества индивидуальных компонентов в композиции можно приводить в виде значения «% масс.», в альтернативных вариантах осуществления какие-либо или все такие значения % масс. можно переводить в массовые части (или относительные соотношения), чтобы определять многокомпонентную композицию. Это так, поскольку относительные соотношения между компонентами часто более важны, чем их абсолютные концентрации в жидких фармацевтических композициях по изобретению. Когда композиция, которая содержит множество ингредиентов, описана только в единицах массовых частей (т. е. указаны только относительные соотношения ингредиентов), нет необходимости определять абсолютные количества или концентрации указанных ингредиентов (будь то in toto или индивидуально), поскольку преимущества по изобретению могут происходить из относительных соотношений соответствующих ингредиентов вместо их абсолютных количеств или концентраций. Однако в определенных вариантах осуществления такие композиции состоят по существу из или состоят из предусмотренных ингредиентов и разбавителей (например, воды).

[0087] Когда указано, что композиция содержит множество предусмотренных ингредиентов (необязательно в предусмотренных количествах или концентрациях), указанная композиция может необязательно содержать дополнительные ингредиенты, отличные от тех, что предусмотрены. Однако в определенных вариантах осуществления, если указано, что композиция содержит множество предусмотренных ингредиентов, то фактически она может состоять по существу из или состоять из всех предусмотренных ингредиентов.

[0088] В настоящем документе, где указано, что композиция «состоит по существу из» конкретного компонента, указанная композиция подходящим образом содержит по меньшей мере 70% масс. указанного компонента, подходящим образом по меньшей мере 90% масс. оного, подходящим образом по меньшей мере 95% масс. оного, наиболее подходящим образом по меньшей мере 99% масс. оного. Подходящим образом, если указано, что композиция «состоит по существу из» конкретного компонента, то она состоит из указанного компонента, за исключением одной или нескольких следовых загрязнений.

[0089] В настоящем документе, термин «размер частицы» или «размер поры», соответственно, относится к длине самого длинного измерения данной частицы или поры. Оба размера можно измерять с применением лазерного анализатора размера частиц и/или электронных микроскопов (например, туннельного электронного микроскопа, TEM, или сканирующего электронного микроскопа, SEM). Количество частиц (для какого-либо заданного размера) можно получать, используя протоколы и оборудование, описанные в примерах, которые относятся к количеству частиц для невидимых частиц.

Жидкая фармацевтическая композиция

[0090] Настоящее изобретение предоставляет жидкую фармацевтическую композицию, как подходящим образом определено в настоящем документе. Композиция подходящим образом содержит моноклональное антитело человека, подходящим образом то, которое ингибирует активность TNF-α человека, подходящим образом с тем, чтобы предотвращать активацию им рецепторов TNF. Наиболее подходящим образом жидкая фармацевтическая композиция содержит адалимумаб, который сам по себе подходящим образом включает какой-либо его биоэквивалент. Композиция подходящим образом содержит ацетатное буферное средство (или ацетатную буферную систему). Композиция подходящим образом содержит сахар-стабилизатор. Композиция подходящим образом (по существу или полностью) не содержит аргинин или содержит аргинин или в концентрации по большей мере 0,1 мМ, или при молярном соотношении аргинина и ацетатного буферного средства (или ацетатной буферной системы) по большей мере 1:150 или при массовом соотношении аргинина и адалимумаба по большей мере 1:3000 (т. е. меньше чем или равном одной массовой части аргинина на каждые 3000 массовых частей ацетатного буферного средства). Альтернативно или кроме того, композиция может подходящим образом содержать какой-либо один или несколько дополнительных компонентов, которые определены в настоящем документе в отношении жидкой фармацевтической композиции (например, в том числе поверхностно-активное вещество, за исключением аргинина и т. д.), необязательно в каком-либо количестве, концентрации или форме, предусмотренных в настоящем документе; и где композиция необязательно демонстрирует какой-либо один или несколько параметров или свойств, заданных в настоящем документе в отношении жидкой фармацевтической композиции (например, pH, осмоляльность).

[0091] Благоприятно, настоящее изобретение предусматривает альтернативные и усовершенствованные жидкие фармацевтические композиции, которые в целом демонстрируют более хорошую стабильность и эффективность, чем таковые известного уровня техники. Как проиллюстрировано в настоящем документе (см. примеры), жидкие фармацевтические составы по настоящему изобретению имеют сравнимые или усовершенствованные характеристики по сравнению со стандартными составами адалимумаба, например, с коммерчески доступным составом Хумира®, при воздействии различных стрессовых условий (тепловых, механических и световых). Их эффективность также в целом сравнима или превышает многие другие сравниваемые составы, которые подвергали тем же стрессовым тестам. Поскольку эти стрессовые условия высоко репрезентативны для стресса определенного типа, которому подвергают такие составы во время изготовления, транспортировки и хранения, они предоставляют превосходное указание на преимущества изобретения. Такую хорошую эффективность стабильности, которую можно достичь с применением менее сложных составов с меньшим числом эксципиентов, сочли удивительной ввиду общих положений известного уровня техники.

Адалимумаб

[0092] Адалимумаб, который коммерчески доступен в составах ХУМИРА®, и способ его изготовления описаны WO97/29131 (BASF) как D2E7, и в другом месте в данной области. Он описан как имеющий «CDR3 домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID № 3, и CDR3 домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID № 4» (WO97/29131). Кроме того, антитело D2E7 описано как имеющее вариабельную область легкой цепи (LCVR), содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID № 1, и вариабельную область тяжелой цепи (HCVR), содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID № 2 (WO97/29131).

[0093] Медицинские показания и функция адалимумаба разъяснены ранее в настоящем документе.

[0094] В контексте изобретения «адалимумаб» включает биоэквиваленты, как определено в настоящем документе ранее, и специалист без труда поймет объем термина «адалимумаб» в контексте изобретения.

[0095] В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит адалимумаб в концентрации приблизительно от 5 приблизительно до 150 мг/мл, подходящим образом приблизительно от 25 приблизительно до 75 мг/мл. Например, адалимумаб может присутствовать в составе в концентрации приблизительно 25, приблизительно 30, приблизительно 35, приблизительно 40, приблизительно 45, приблизительно 50, приблизительно 55, приблизительно 60, приблизительно 65, приблизительно 70 или приблизительно 75 мг/мл. В одном из вариантов осуществления адалимумаб присутствует в концентрации приблизительно от 45 приблизительно до 55 мг/мл. В одном из вариантов осуществления адалимумаб присутствует в концентрации приблизительно 50 мг/мл.

Буфер, буферное средство и pH

[0096] Подходящим образом, жидкая фармацевтическая композиция представляет собой буферный раствор, pH которого стабилизируют с помощью буферного средства (или буферной системы), подходящим образом в комбинации с сопряженной кислотой/основанием буферного средства. По существу, жидкая фармацевтическая композиция подходящим образом содержит буферное средство как определено в настоящем документе. Предпочтительно, жидкая фармацевтическая композиция дополнительно содержит сопряженную кислоту/основание, где указанная сопряженная кислота/основание соответствует сопряженной кислоте или сопряженному основанию буферного средства, в зависимости от того, является ли само буферное средство основанием или кислотой, соответственно. В совокупности, буферное средство и его сопряженная кислота/основание можно рассматривать как «буферную систему». Таким образом, жидкая фармацевтическая композиция подходящим образом содержит «буферную систему» (подходящим образом содержит буферное средство(средства) и его сопряженную кислоту/основание(кислоты/основания)), а какие-либо концентрации, предусмотренные по отношению к буферной системе, в целом относятся к комбинированным концентрациям буферного средства(средств) и какой-либо его сопряженной кислоты/основания (кислот/оснований). Любая «буферная система» подходящим образом содержит слабую кислоту и слабое основание (см. определения выше).

[0097] Подходящим образом, буферное средство представляет собой ацетатное буферное средство. Подходящим образом, ацетатное буферное средство представляет собой ацетатную соль, подходящим образом содержащую анионный ацетат (т. е. AcO^-) и один или несколько фармацевтически приемлемых противокатионов. Подходящая ацетатная соль может включать ацетатную соль металла (например, ацетат щелочного металла или ацетат щелочноземельного металла), или ацетатную соль неметалла (например, ацетат аммония, ацетат триэтиламмония). В конкретном варианте осуществления буферное средство (и ацетатная соль) представляет собой ацетат натрия.

[0098] Подходящим образом, жидкая фармацевтическая композиция содержит сопряженную кислоту/основание буферного средства, наиболее подходящим образом уксусную кислоту в качестве сопряженной кислоты ацетатной соли. Комбинация буферного средства и его сопряженной кислоты/основания составляет буферную систему. Подходящим образом, жидкая фармацевтическая композиция содержит буферное средство и соответствующую ему сопряженную кислоту/основание, подходящим образом так, что вместе буферное средство и его сопряженная кислота/основания присутствуют на определенном уровне (т. е. абсолютное количество или концентрация) и в относительном количестве (или концентрации), достаточном для того, чтобы обеспечивать желаемый pH для композиции. Буферную систему можно формировать посредством простого смешивания буферного средства с его сопряженной кислотой/основанием или можно альтернативно формировать посредством смешивания кислоты или основания или с буферным средством или с его сопряженной кислотой/основанием для того, чтобы формировать in situ желаемую смесь буферного средства и сопряженной кислоты/основания. Например, буферную систему можно формировать посредством простого смешивания ацетатного буферного средства (например, ацетата натрия) с его сопряженной кислотой/основанием (т. е. уксусной кислотой), подходящим образом в соотношении, подходящем для обеспечения желаемого pH. Альтернативно, буферную систему можно формировать посредством добавления основания (например, гидроксида натрия) к сопряженной кислоте/основанию (т. е. уксусной кислоте) ацетатного буферного средства, подходящим образом в количестве, подходящем для того, чтобы обеспечивать желаемый pH и смесь буферного средства (например, ацетата натрия) и соответствующей сопряженной кислоты/основания (т. е. уксусной кислоты). Альтернативно, можно применять любой способ формирования буферной системы, и pH можно целесообразно корректировать посредством или добавления дополнительной кислоты (подходящим образом сильной кислоты, такой как HCl) или дополнительного основания (подходящим образом сильного основания, такого как гидроксид натрия).

[0099] Наиболее подходящим образом, буферная система представляет собой ацетатную буферную систему, подходящим образом содержащую ацетатную соль и уксусную кислоту.

[00100] Подходящим образом, жидкая фармацевтическая композиция содержит по большей мере одно буферное средство. Подходящим образом, жидкая фармацевтическая композиция содержит по большей мере одну буферную систему.

[00101] Подходящим образом, жидкая фармацевтическая композиция имеет pH больше чем или равный 5,0. Подходящим образом, жидкая фармацевтическая композиция имеет pH меньше чем или равный 6,7.

[00102] В конкретном варианте осуществления, в частности, когда буферным средством является ацетатное буферное средство, жидкая фармацевтическая композиция имеет pH между 5,0 и 5,5. В конкретном варианте осуществления жидкая фармацевтическая композиция имеет pH между 5,1 и 5,3. В конкретном варианте осуществления жидкая фармацевтическая композиция имеет pH приблизительно 5,2.

[00103] Подходящим образом, жидкая фармацевтическая композиция содержит буферную систему (подходящим образом ацетатную буферную систему, которая содержит ацетатное буферное средство) в концентрации приблизительно от 2 приблизительно до 50 мМ. В одном из вариантов осуществления буферная система присутствует в концентрации между 5 и 14 мМ, наиболее подходящим образом приблизительно 10 мМ. В одном из вариантов осуществления буферная система присутствует в концентрации 10 мМ. В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит буферную систему из ацетата натрия/уксусной кислоты в концентрации 10 мМ. Это включает то, когда «буферное средство(средства)» (например, ацетат натрия) формируют посредством добавления сильного основания (например, гидроксида натрия) к сопряженной кислоте буферного средства(средств) (например, уксусной кислоте).

[00104] Подходящим образом, жидкая фармацевтическая композиция содержит буферные частицы (подходящим образом ацетатные буферные частицы) в концентрации приблизительно от 0,120 мг/мл приблизительно до 3,0 мг/мл. В одном из вариантов осуществления буферные частицы присутствуют в концентрации между 0,30 мг/мл и 0,84 мг/мл, наиболее подходящим образом приблизительно 0,60 мг/мл. Это включает то, когда «буферное средство» (например, ацетат натрия) формируют посредством добавления сильного основания (например, гидроксида натрия) к сопряженной кислоте буферного средства (например, уксусной кислоте).

[00105] Подходящим образом, жидкая фармацевтическая композиция содержит буферную систему (подходящим образом ацетатную буферную систему) при молярном соотношении буферной системы и адалимумаба приблизительно от 5:1 приблизительно до 145:1. В одном из вариантов осуществления буферная система присутствует при молярном соотношении буферной системы и адалимумаба приблизительно от 14:1 приблизительно до 40:1, наиболее подходящим образом приблизительно 29:1. В одном из вариантов осуществления буферная система присутствует в концентрации 29:1. Это включает то, когда «буферное средство(средства)» (например, ацетат натрия) формируют посредством добавления сильного основания (например, гидроксида натрия) к сопряженной кислоте буферного средства (например, уксусной кислоте).

[00106] Как проиллюстрировано в разделе с примерами, жидкие фармацевтические композиции по изобретению, содержащие ацетатную буферную систему, действуют особенно хорошо в стрессовых тестах, в частности, в отношении фрагментации и нарушения укладки белка, которые могут быть важными индикаторами стабильности и жизнеспособности лекарственного продукта. Кроме того, жидкие фармацевтические композиции, ацетатная буферная система которых поддерживает постоянный pH 5,2, действуют особенно хорошо.

Сахар-стабилизатор

[00107] Подходящим образом, жидкая фармацевтическая композиция содержит стабилизатор, наиболее подходящим образом сахар-стабилизатор. Подходящим образом, такой компонент облегчает поддержание структурной целостности биофармацевтического лекарственного средства, в частности, во время заморозки и/или лиофилизации и/или хранении (в частности, под воздействием стресса).

[00108] Жидкая фармацевтическая композиция может содержать один или несколько сахаров-стабилизаторов, хотя в предпочтительных вариантах осуществления присутствует только один сахар-стабилизатор.

[00109] Подходящим образом, сахар-стабилизатор представляет собой сахарный полиол (в том числе сахароспирты) и/или дисахарид.

[00110] Сахар-стабилизатор подходящим образом выбирают из группы, которая включает трегалозу, маннит, сахарозу, сорбит, мальтозу, лактозу, ксилит, арабит, эритрит, лактит, мальтит, инозитол.

[00111] В конкретном варианте осуществления сахар-стабилизатор выбирают из группы, которая включает трегалозу, маннит, сахарозу, мальтозу, лактозу, ксилит, арабит, эритрит, лактит, мальтит, инозитол.

[00112] В конкретном варианте осуществления сахар-стабилизатор представляет собой невосстанавливающий сахар, необязательно невосстанавливающий сахар, перечисленные в любом месте в настоящем документе.

[00113] В конкретном варианте осуществления сахар-стабилизатор выбирают из группы, содержащей трегалозу и маннит.

[00114] В конкретном варианте осуществления сахар-стабилизатор представляет собой трегалозу. Трегалоза представляет собой особенно благоприятный сахар-стабилизатор для применения вместе с ацетатным буферным средством/буферной системой в жидких составах адалимумаба.

[00115] Подходящим образом, жидкая фармацевтическая композиция содержит по большей мере один сахар-стабилизатор, подходящим образом по большей мере один сахарный полиол и/или дисахарид. Подходящим образом, жидкая фармацевтическая композиция содержит трегалозу в виде единственного сахара-стабилизатора.

[00116] Подходящим образом трегалоза, используемая для того, чтобы формировать жидкую фармацевтическую композицию, представляет собой дигидрат трегалозы, хотя любые количества, предусмотренные в отношении трегалозы (если не установлено иное - как сделано в примерах), подходящим образом относятся к чистой безводной трегалозе. Такие количества можно превращать в количество дигидрата трегалозы посредством применения подходящего множителя. Кроме того, для целей оценки того, попадает ли данный состав в объем какого-либо из определений количества трегалозы, заданных в настоящем документе, количество дигидрата трегалозы можно без труда превращать в соответствующее количество чистой безводной трегалозы (с равным числом молей) через применения указанного множителя наоборот. Этот принцип можно применять для любого компонента сахара-стабилизатора. Концентрации, когда приведены в виде молярной концентрации, конечно, будут одними и теми же, независимо от состояния гидратации сахара-стабилизатора.

[00117] Подходящим образом, жидкая фармацевтическая композиция содержит сахар-стабилизатор(сахара-стабилизаторы) (наиболее подходящим образом трегалозу) в концентрации приблизительно от 50 приблизительно до 400 мМ, более подходящим образом приблизительно от 100 приблизительно до 300 мМ, более подходящим образом приблизительно от 150 приблизительно до 250 мМ. В одном из вариантов осуществления сахар-стабилизатор(сахара-стабилизаторы) присутствует в концентрации между 190 и 210 мМ, наиболее подходящим образом приблизительно 200 мМ. В одном из вариантов осуществления трегалоза присутствует в концентрации 200 мМ.

[00118] Подходящим образом жидкая фармацевтическая композиция содержит сахар-стабилизатор(сахара-стабилизаторы) (наиболее подходящим образом трегалозу) в концентрации приблизительно от 15 мг/мл приблизительно до 140 мг/мл, более подходящим образом приблизительно от 35 мг/мл приблизительно до 100 мг/мл, более подходящим образом приблизительно от 45 мг/мл приблизительно до 80 мг/мл. В одном из вариантов осуществления сахар-стабилизатор(сахара-стабилизаторы) присутствует в концентрации между 65 мг/мл и 72 мг/мл, наиболее подходящим образом приблизительно 68 мг/мл. В конкретном варианте осуществления трегалоза присутствует в концентрации приблизительно 68 мг/мл (что равно приблизительно 75,7 мг/мл дигидрат трегалозы).

[00119] Подходящим образом, жидкая фармацевтическая композиция содержит сахар-стабилизатор(сахара-стабилизаторы) (наиболее подходящим образом трегалозу) при молярном соотношении сахара-стабилизатора(сахаров-стабилизаторов) и адалимумаба приблизительно от 145:1 приблизительно до 1150:1, более подходящим образом приблизительно от 290:1 приблизительно до 860:1, более подходящим образом приблизительно от 430:1 приблизительно до 720:1. В одном из вариантов осуществления сахар-стабилизатор(сахара-стабилизаторы) присутствует при молярном соотношении сахара-стабилизатора(сахаров-стабилизаторов) и адалимумаба приблизительно от 550:1 приблизительно до 605:1, наиболее подходящим образом приблизительно 576:1. В одном из вариантов осуществления трегалоза присутствует при молярном соотношении трегалозы и адалимумаба приблизительно 576:1.

[00120] Как проиллюстрировано в разделе с примерами, жидкие фармацевтические композиции по изобретению, содержащие сахар-стабилизатор как определено в настоящем документе, действуют особенно хорошо в стрессовых тестах, в частности в отношении агрегирования, фрагментации и нарушения укладки белка, которые могут быть важными индикаторами стабильности и жизнеспособности лекарственного продукта. Кроме того, жидкие фармацевтические композиции, содержащие трегалозу в качестве сахара-стабилизатора, действуют особенно хорошо.

Разбавитель

[00121] Жидкие фармацевтические композиции по изобретению могу содержать какой-либо один или несколько фармацевтически приемлемых разбавителей или их смесь. Однако наиболее подходящим образом жидкая фармацевтическая композиция представляет собой водную фармацевтическую композицию. Наиболее подходящим образом разбавителем является вода и подходящим образом только вода. Вода подходящим образом представляет собой воду для инъекций (WFI).

[00122] Подходящим образом разбавитель может образовывать равновесие ингредиентов в любой жидкой фармацевтической композиции, например, с тем, чтобы массовые доли доходили до 100%. Подходящим образом какие-либо концентрации, заданные в настоящем документе по отношению к какому-либо компоненту жидкой фармацевтической композиции, представляют концентрации указанного компонента в (и подходящим образом растворены в) разбавителе в смеси с какими-либо другими компонентами.

[00123] Жидкая фармацевтическая композиция по изобретению подходящим образом представляет собой раствор и подходящим образом (по существу или полностью) не содержит твердые частицы или преципитаты.

Отсутствующие компоненты или компоненты на низком уровне

Низкое содержание аргинина/без аргинина

[00124] Подходящим образом жидкая фармацевтическая композиция или (по существу или полностью) не содержит аргинин (соответственно, L-аргинин) или содержит аргинин в концентрации по большей мере 0,1 мМ, более подходящим образом по большей мере 0,01 мМ, наиболее подходящим образом по большей мере 0,001 мМ.

[00125] Подходящим образом жидкая фармацевтическая композиция или (по существу или полностью) не содержит аргинин или содержит аргинин при молярном соотношении аргинина и буферной системы по большей мере 1:150 (т. е. меньше чем или равном одному молю аргинина на каждые 150 молей буферной системы), более подходящим образом по большей мере 1:1500, наиболее подходящим образом по большей мере 1:15000.

[00126] Подходящим образом жидкая фармацевтическая композиция или (по существу или полностью) не содержит аргинин или содержит аргинин при массовом соотношении аргинина и адалимумаба по большей мере 1:3000 (т. е. меньше чем или равном одной массовой части аргинина на каждые 3000 массовых частей адалимумаба), более подходящим образом по большей мере 1:30000, наиболее подходящим образом по большей мере 1:300000.

[00127] Подходящим образом жидкая фармацевтическая композиция или (по существу или полностью) не содержит аргинин или содержит аргинин при молярном соотношении аргинина и адалимумаба по большей мере 1:3,75 (т. е. меньше чем или равном одному молю аргинина на каждые 3,75 моля адалимумаба), более подходящим образом по большей мере 1:37,5, наиболее подходящим образом по большей мере 1:375.

[00128] Как изложено в настоящем документе, такие отсылки к «аргинину» в контексте его присутствия или иного в жидких фармацевтических композициях относится к соответствующей свободной аминокислоте(аминокислотам) и не к аминокислотному остатку (остаткам), ковалентно встроенному в качестве части более крупного соединения, такого как пептид или белок.

[00129] Как проиллюстрировано в разделе с примерами, жидкие фармацевтические композиции по изобретению, которые (по существу или полностью) не содержат аргинин, действуют особенно хорошо в стрессовых тестах, в частности в отношении агрегирования, фрагментации и нарушения укладки белка.

Низкое содержание аминокислот/без аминокислот

[00130] Подходящим образом жидкая фармацевтическая композиция или (по существу или полностью) не содержит аминокислоты или содержит одну или несколько аминокислоты в (совокупной) концентрации по большей мере 0,1 мМ, более подходящим образом по большей мере 0,01 мМ, наиболее подходящим образом по большей мере 0,001 мМ.

[00131] Подходящим образом жидкая фармацевтическая композиция или (по существу или полностью) не содержит аминокислоты или содержит одну или несколько аминокислоты при (совокупном) молярном соотношении аминокислоты(аминокислот) и буферной системы по большей мере 1:150 (т. е. меньше чем или равном одному молю аминокислоты(аминокислот) на каждые 150 молей буферной системы), более подходящим образом по большей мере 1:1500, наиболее подходящим образом по большей мере 1:15000.

[00132] Подходящим образом жидкая фармацевтическая композиция или (по существу или полностью) не содержит аминокислоты или содержит одну или несколько аминокислоты при (совокупном) массовом соотношении аминокислоты(аминокислот) и адалимумаба по большей мере 1:3000 (т. е. меньше чем или равном одной массовой части аминокислоты(аминокислот) на каждые 3000 массовых частей адалимумаба), более подходящим образом по большей мере 1:30000, наиболее подходящим образом по большей мере 1:300000.

[00133] Подходящим образом жидкая фармацевтическая композиция или (по существу или полностью) не содержит аминокислоты или содержит одну или несколько аминокислот при (совокупном) молярном соотношении аминокислоты(аминокислот) и адалимумаба по большей мере 1:3,75 (т. е. меньше чем или равном одному молю аминокислоты(аминокислот) на каждые 3,75 моля адалимумаба), более подходящим образом по большей мере 1:37,5, наиболее подходящим образом по большей мере 1:375.

[00134] Как изложено в настоящем документе, такие отсылки к «аминокислотам» в контексте их присутствия или иного в жидких фармацевтических композициях относится к соответствующей свободной аминокислоте(аминокислотам), а не к аминокислотному остатку(остаткам), ковалентно встроенному в качестве части более крупного соединения, такого как пептид или белок.

[00135] Подходящим образом, аминокислоты, к которым отсылают в этом разделе (и которые полагают или отсутствующими или присутствующими в низких количествах), могут представлять собой природные и/или искусственные аминокислоты, хотя предпочтительно они представляют собой природные аминокислоты. В частности, жидкие фармацевтические композиции или (по существу или полностью) не содержат какие-либо аминокислоты, выбранные из группы, которая включает: аргинин, лизин, аспарагиновую кислоту и гистидин; или содержат одну или несколько из вышеуказанных аминокислот в количестве, концентрации, молярном соотношении или массовом соотношении, как определено в настоящем документе ранее в отношении «аминокислоты(аминокислот)».

[00136] Как проиллюстрировано в разделе с примерами, жидкие фармацевтические композиции по изобретению, которые (по существу или полностью) не содержат аминокислоты или определенные аминокислоты, как определено выше, действуют особенно хорошо в стрессовых тестах, в частности в отношении агрегирования, фрагментации и нарушения укладки белка.

Низкое содержание поверхностно-активных веществ/без поверхностно-активных веществ

[00137] Подходящим образом жидкая фармацевтическая композиция или (по существу или полностью) не содержит поверхностно-активные вещества (катионные, анионные, амфотерные или неионные), необязательно за исключением полисорбата 80 (полиоксиэтилен (20) сорбитан моноолеат), или содержит одно или несколько указанных поверхностно-активных веществ (необязательно за исключением полисорбата 80) в (совокупной) концентрации по большей мере 1 мМ, более подходящим образом по большей мере 0,1 мМ, более подходящим образом по большей мере 0,01 мМ, более подходящим образом по большей мере 0,001 мМ, наиболее подходящим образом по большей мере 0,0001 мМ. Жидкая фармацевтическая композиция может, в таких условиях, необязательно содержать полисорбат 80 как определено в настоящем документе.

[00138] Подходящим образом жидкая фармацевтическая композиция или (по существу или полностью) не содержит поверхностно-активные вещества (катионные, анионные, амфотерные или неионные), необязательно за исключением полисорбата 80 (полиоксиэтилен (20) сорбитан моноолеат), или содержит одно или несколько указанных поверхностно-активных веществ (необязательно за исключением полисорбата 80) при (совокупном) молярном соотношении поверхностно-активного вещества(веществ) и буферной системы по большей мере 1:10, более подходящим образом по большей мере 1:100, наиболее подходящим образом по большей мере 1:1000, более подходящим образом по большей мере 1:10000, подходящим образом по большей мере 1:100000. Жидкая фармацевтическая композиция может, в таких условиях, необязательно содержать полисорбат 80 как определено в настоящем документе.

[00139] Подходящим образом жидкая фармацевтическая композиция или (по существу или полностью) не содержит поверхностно-активные вещества (катионные, анионные, амфотерные или неионные), необязательно за исключением полисорбата 80 (полиоксиэтилен (20) сорбитан моноолеат), или содержит одно или несколько из указанных поверхностно-активных веществ (необязательно за исключением полисорбата 80) при (совокупном) массовом соотношении поверхностно-активного вещества(веществ) и адалимумаба по большей мере 1:50 (т. е. меньше чем или равном одной массовой части поверхностно-активного вещества(веществ) на каждые 50 массовых частей адалимумаб), более подходящим образом по большей мере 1:500, более подходящим образом по большей мере 1:5000, более подходящим образом по большей мере 1:50000, подходящим образом по большей мере 1:500000. Жидкая фармацевтическая композиция может, в таких условиях, необязательно содержать полисорбат 80 как определено в настоящем документе.

[00140] Подходящим образом жидкая фармацевтическая композиция или (по существу или полностью) не содержит поверхностно-активные вещества (катионные, анионные, амфотерные или неионные), необязательно за исключением полисорбата 80 (полиоксиэтилен (20) сорбитан моноолеат), или содержит одно или несколько из указанных поверхностно-активных веществ (необязательно за исключением полисорбата 80) при (совокупном) молярном соотношении поверхностно-активного вещества(веществ) и адалимумаба по большей мере 3:1, более подходящим образом по большей мере 0,3:1, более подходящим образом 0,003:1, более подходящим образом 0,0003:1, подходящим образом 0,00003:1. Жидкая фармацевтическая композиция может, в таких условиях, необязательно содержать полисорбат 80 как определено в настоящем документе.

[00141] Подходящим образом, поверхностно-активные вещества, которые упоминают в этом разделе (и считают или отсутствующими или присутствующими в низких количествах) могут быть катионными, анионными, амфотерными или неионными поверхностно-активными веществами. Подходящим образом, поверхностно-активные вещества, которые упоминают в этом разделе (и считают или отсутствующими или присутствующими в низких количествах) включают катионные, анионные и амфотерные поверхностно-активные вещества, но необязательно могут не включать неионные поверхностно-активные вещества (например, полисорбаты или спаны) или по меньшей мере могут необязательно не содержать полисорбат 80. По существу, жидкая фармацевтическая композиция или (по существу или полностью) не содержит катионные, анионные или амфотерные поверхностно-активные вещества или содержит одно или несколько из указанных поверхностно-активных вещества в количестве, концентрации, молярном соотношении или массовом соотношении, самом большем, которое предусмотрено в каком-либо из предшествующих параграфов этого подраздела в отношении «поверхностно-активного вещества(веществ)» в более общем смысле.

[00142] Жидкая фармацевтическая композиция или (по существу или полностью) не содержит неионные поверхностно-активные вещества, необязательно за исключением полисорбата 80, или содержит одно или несколько из указанных поверхностно-активных веществ в количестве, концентрации, молярном соотношении или массовом соотношении самом большем, которое предусмотрено в каком-либо из предшествующих абзацев этого подраздела в отношении «поверхностно-активного вещества(веществ)» в более общем смысле.

[00143] Жидкая фармацевтическая композиция или (по существу или полностью) не содержит полисорбатные поверхностно-активные вещества, необязательно за исключением полисорбата 80, или содержит одно или несколько из указанных поверхностно-активных веществ в количестве, концентрации, молярном соотношении или массовом соотношении, самом большем, которое предусмотрено в каком-либо из предшествующих абзацев этого подраздела в отношении «поверхностно-активного вещества(веществ)» в более общем смысле. Жидкая фармацевтическая композиция может, в таких условиях, необязательно содержать полисорбат 80 как определено в настоящем документе.

[00144] Жидкая фармацевтическая композиция или (по существу или полностью) не содержит поверхностно-активные вещества полисорбата 20 (также известного как Tween 20 - полиоксиэтилен (20) сорбитан монолаурат) или содержит одно или несколько из указанных поверхностно-активных веществ в количестве, концентрации, молярном соотношении или массовом соотношении самом большем, которое предусмотрено в каком-либо из предшествующих абзацев этого подраздела в отношении «поверхностно-активного вещества(веществ)» в более общем смысле.

[00145] Жидкая фармацевтическая композиция может подходящим образом или не содержать (по существу или полностью) поверхностно-активные вещества полисорбата 80 или содержать указанное поверхностно-активное вещество(вещества) в количестве, концентрации, молярном соотношении или массовом соотношении как определено ранее в настоящем документе в отношении «поверхностно-активного вещества(веществ)». Жидкая фармацевтическая композиция или (по существу или полностью) не содержит поверхностно-активные вещества полисорбата 80 или содержит одно или несколько из указанных поверхностно-активных веществ в количестве, концентрации, молярном соотношении или массовом соотношении самом большем, которое предусмотрено в каком-либо из предшествующих абзацев этого подраздела в отношении «поверхностно-активного вещества(веществ)» в более общем смысле.

[00146] Как проиллюстрировано в разделе с примерами, жидкие фармацевтические композиции по изобретению, которые (по существу или полностью) не содержат поверхностно-активные вещества или определенные поверхностно-активные вещества, как определено выше, действуют особенно хорошо в стрессовых тестах, в частности, в отношении агрегирования, фрагментации и нарушения укладки белка.

Низкое содержание фосфата/без фосфата

[00147] Подходящим образом жидкая фармацевтическая композиция или (по существу или полностью) не содержит фосфатные буферные средства (например, первичный кислый фосфат натрия, вторичный кислый фосфат натрия) или содержит фосфатную буферную систему в концентрации по большей мере 0,1 мМ, более подходящим образом по большей мере 0,01 мМ, наиболее подходящим образом по большей мере 0,001 мМ.

[00148] Подходящим образом жидкая фармацевтическая композиция или (по существу или полностью) не содержит фосфатные буферные средства (например, первичный кислый фосфат натрия, вторичный кислый фосфат натрия) или содержит фосфатную буферную систему при молярном соотношении фосфатной буферной системы и каких-либо присутствующих нефосфатных буферных систем по большей мере 1:150 (т. е. меньше чем или равном одному молю фосфатного буферного средства на каждые 150 молей присутствующей нефосфатной буферной системы), более подходящим образом по большей мере 1:1500, наиболее подходящим образом по большей мере 1:15000.

[00149] Подходящим образом жидкая фармацевтическая композиция или (по существу или полностью) не содержит фосфатные буферные средства или содержит фосфатную буферную систему при молярном соотношении фосфатной буферной системы и адалимумаба по большей мере 1:3,75 (т. е. меньше чем или равном одному молю фосфатной буферной системы на каждые 3,75 моля адалимумаба), более подходящим образом по большей мере 1:37,5, наиболее подходящим образом по большей мере 1:375.

[00150] Отсылки к «фосфатным буферным средствам» в контексте их присутствия или иного в жидких фармацевтических композициях относится к любым фосфатным солям в любой форме или состоянии протонирования, включая фосфат, моногидрофосфат и дигидрофосфат. Однако это подходящим образом не включает какие-либо фосфатные фрагменты или остатки, которые могут быть ковалентно встроены в качестве части более крупного соединения, такого как фосфорилированный или гликозилированный пептид или белок.

[00151] Как проиллюстрировано в разделе с примерами, жидкие фармацевтические композиции по изобретению, которые (по существу или полностью) не содержат фосфатные буферные средства, действуют особенно хорошо в стрессовых тестах, в частности в отношении агрегирования, фрагментации и нарушения укладки белка.

Необязательные дополнительные компоненты

Регулятор тоничности

[00152] Жидкая фармацевтическая композиция по изобретению подходящим образом содержит «модификатор тоничности» (или «регулятор тоничности») или один или несколько регуляторов тоничности, как подходящим образом определено в настоящем документе.

[00153] Включение регулятора тоничности подходящим образом вносит вклад в (или увеличивает) общую осмоляльность и осмолярность композиции. Подходящим образом регулятор тоничности присутствует в композиции в количестве или концентрации, достаточных для того, чтобы композиция была (по существу) изотонической с текучими веществами организма. Подходящим образом регулятор тоничности присутствует в композиции в количестве или концентрации, достаточных для того, чтобы композиция имела осмолярность или осмоляльность в пределах диапазона, определяемого в настоящем документе.

[00154] Можно применять любой подходящий регулятор тоничности. Однако подходящим образом регулятор тоничности выбирают из группы, включающей водорастворимые соли металлов (например, хлорид натрия, хлорид калия, хлорид магния, хлорид кальция), водорастворимые изменяющие тоничность сахара/сахароспирты (например, глюкоза, сахароза, маннит) и/или другие водорастворимые полиолы. Подходящим образом регулятор(регуляторы) тоничности являются небуферными (т. е. дают начало небольшому или нулевому буферному эффекту). По существу, регуляторы тоничности из каких-либо солей металлов подходящим образом являются небуферными средствами.

[00155] Жидкая фармацевтическая композиция может содержать один или несколько регуляторов тоничности, хотя предпочтительно только один «регулятор тоничности» по существу присутствует (безотносительно каких-либо изменяющих тоничность эффектов, привносимых в композицию компонентами, предназначенными для того, чтобы выполнять другую функцию, как определено в настоящем документе).

[00156] Наиболее предпочтительно регулятор тоничности представляет собой или содержит соль металла (предпочтительно небуферную водорастворимую соль металла). Подходящим образом указанная соль металла представляет собой или содержит галогенид металла, подходящим образом галогенид щелочного или щелочноземельного металла, подходящим образом хлорид щелочного металла.

[00157] В конкретном варианте осуществления регулятор тоничности представляет собой или содержит хлорид натрия. В конкретном варианте осуществления регулятор тоничности представляет собой хлорид натрия. Хлорид натрия представляет собой особенно благоприятный стабилизатор для применения совместно с ацетатным буферным средством/буферной системой в жидких составах адалимумаба.

[00158] Подходящим образом, жидкая фармацевтическая композиция содержит регулятор(регуляторы) тоничности (наиболее подходящим образом хлорид натрия) в концентрации приблизительно от 10 приблизительно до 200 мМ, более подходящим образом приблизительно от 20 приблизительно до 100 мМ, более подходящим образом приблизительно от 25 приблизительно до 75 мМ. В одном из вариантов осуществления регулятор(регуляторы) тоничности присутствует в концентрации между 40 и 60 мМ, наиболее подходящим образом приблизительно 50 мМ. В одном из вариантов осуществления хлорид натрия присутствует в концентрации 50 мМ.

[00159] Подходящим образом жидкая фармацевтическая композиция содержит регулятор(регуляторы) тоничности (наиболее подходящим образом хлорид натрия) в концентрации приблизительно от 0,5 мг/мл приблизительно до 12 мг/мл, более подходящим образом приблизительно от 1,2 мг/мл приблизительно до 5 мг/мл, более подходящим образом приблизительно от 1,5 мг/мл приблизительно до 4,4 мг/мл. В одном из вариантов осуществления регулятор(регуляторы) тоничности присутствует в концентрации между 2,7 мг/мл и 3,1 мг/мл, наиболее подходящим образом приблизительно 2,9 мг/мл. В конкретном варианте осуществления хлорид натрия присутствует в концентрации приблизительно 2,9 мг/мл.

[00160] Подходящим образом, жидкая фармацевтическая композиция содержит регулятор(регуляторы) тоничности (наиболее подходящим образом хлорид натрия) при молярном соотношении регулятора тоничности и адалимумаба приблизительно от 30:1 приблизительно до 580:1, более подходящим образом приблизительно от 60:1 приблизительно до 290:1, более подходящим образом приблизительно от 70:1 приблизительно до 220:1. В одном из вариантов осуществления регулятор(регуляторы) тоничности присутствует при молярном соотношении регулятора тоничности и адалимумаба приблизительно от 115:1 приблизительно до 175:1, наиболее подходящим образом приблизительно 145:1. В одном из вариантов осуществления хлорид натрия присутствует при молярном соотношении хлорида натрия и адалимумаба приблизительно 145:1.

[00161] Как проиллюстрировано в разделе с примерами, жидкие фармацевтические композиции по изобретению, содержащие регулятор тоничности как определено в настоящем документе, действуют особенно хорошо в стрессовых тестах, в частности в отношении агрегирования, фрагментации и нарушения укладки белка, которые могут быть важными индикаторами стабильности и жизнеспособности лекарственного продукта. Кроме того, жидкие фармацевтические композиции, содержащие хлорид натрия, в частности, в диапазоне количеств, как предусмотрено, действуют особенно хорошо.

Поверхностно-активное вещество

[00162] Жидкая фармацевтическая композиция по изобретению подходящим образом содержит поверхностно-активное вещество или одно или несколько поверхностно-активных веществ, как подходящим образом определено в настоящем документе.

[00163] Включение поверхностно-активного вещества подходящим образом вносит вклад в стабилизацию белка адалимумаба.

[00164] Можно применять любое подходящее поверхностно-активное вещество. Однако подходящим образом поверхностно-активное вещество представляет собой неионное поверхностно-активное вещество, наиболее подходящим образом поверхностно-активное вещество полисорбат (сложные сорбитаналкиловые эфиры полиоксиэтиленгликоля) или спан (сложные сорбитаналкиловые эфиры).

[00165] Хотя одно или несколько поверхностно-активных веществ могут быть включены в жидкую фармацевтическую композицию по изобретению, наиболее подходящим образом присутствует только одно поверхностно-активное вещество, наиболее подходящим образом одно неионное поверхностно-активное вещество (как подходящим образом определено в настоящем документе).

[00166] Поверхностно-активное вещество(вещества) подходящим образом выбирают из полисорбата 20 (полиоксиэтилен (20) сорбитан монолаурат), полисорбата 40 (полиоксиэтилен (20) сорбитан монопальмитат), полисорбата 60 (полиоксиэтилен (20) сорбитан моностеарат), полисорбата 80 (полиоксиэтилен (20) сорбитан моноолеат), сорбитан монолаурата, сорбитан монопальмитата, сорбитан моностеарата, сорбитан тристеарата и/или сорбитан моноолеата.

[00167] В конкретном варианте осуществления поверхностно-активное вещество(вещества) выбирают из полисорбата 20, полисорбата 40, полисорбата 60 и/или полисорбата 80. В конкретном варианте осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит одно поверхностно-активное вещество, выбранное из полисорбата 20, полисорбата 40, полисорбата 60 и полисорбата 80.

[00168] В конкретном варианте осуществления поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат 80 или полисорбат 20. В конкретном варианте осуществления поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат 80.

[00169] Подходящим образом, жидкая фармацевтическая композиция содержит поверхностно-активное вещество(вещества) (наиболее подходящим образом полисорбат 80) в концентрации приблизительно от 0,0001 приблизительно до 5 мМ (т. е. от 0,1 мкМ до 5 мМ), более подходящим образом приблизительно от 0,001 приблизительно до 2 мМ, более подходящим образом приблизительно от 0,01 приблизительно до 1,0 мМ. В одном из вариантов осуществления поверхностно-активное вещество(вещества) присутствует в концентрации между 0,72 и 0,80 мМ, наиболее подходящим образом приблизительно 0,76 мМ. В одном из вариантов осуществления полисорбат 80 присутствует в концентрации 0,76 мМ.

[00170] Подходящим образом, жидкая фармацевтическая композиция содержит поверхностно-активное вещество(вещества) (наиболее подходящим образом полисорбат 80) в концентрации приблизительно от 0,001 мг/мл приблизительно до 5 мг/мл, более подходящим образом приблизительно от 0,01 мг/мл приблизительно до 2 мг/мл, более подходящим образом приблизительно от 0,05 мг/мл приблизительно до 1,5 мг/мл. В одном из вариантов осуществления поверхностно-активное вещество(вещества) присутствует в концентрации между 0,9 мг/мл и 1,1 мг/мл, наиболее подходящим образом приблизительно 1,0 мг/мл. В конкретном варианте осуществления полисорбат 80 присутствует в концентрации приблизительно 1,0 мг/мл.

[00171] Подходящим образом, жидкая фармацевтическая композиция содержит поверхностно-активное вещество(вещества) (наиболее подходящим образом полисорбат 80) при молярном соотношении поверхностно-активного вещества(веществ) и адалимумаба приблизительно от 1:3500 приблизительно до 15:1, более подходящим образом приблизительно от 1:350 приблизительно до 6:1, более подходящим образом приблизительно от 1:35 приблизительно до 3:1. В одном из вариантов осуществления поверхностно-активное вещество(вещества) присутствует при молярном соотношении поверхностно-активного вещества(веществ) и адалимумаба приблизительно от 2,1:1 приблизительно до 2,3:1, наиболее подходящим образом приблизительно 2,2:1. В одном из вариантов осуществления полисорбат 80 присутствует при молярном соотношении полисорбата 80 и адалимумаба приблизительно 2,2:1.

[00172] Как проиллюстрировано в разделе с примерами, жидкие фармацевтические композиции по изобретению, содержащие поверхностно-активное вещество как определено в настоящем документе, действуют особенно хорошо в стрессовых тестах, в частности в отношении агрегирования, фрагментации и нарушения укладки белка, которые могут быть важными индикаторами стабильности и жизнеспособности лекарственного продукта. Кроме того, жидкие фармацевтические композиции, содержащие полисорбат, в частности, в диапазоне количеств, как предусмотрено, действуют особенно хорошо.

Другие параметры, относящиеся к изобретению

Осмоляльность

[00173] Подходящим образом, осмоляльность жидкой фармацевтической композиции составляет между 200 и 400 мОсм/кг, более подходящим образом между 220 и 390 мОсм/кг, более подходящим образом между 230 и 350 мОсм/кг, более подходящим образом между 240 и 340 мОсм/кг, более подходящим образом между 260 и 320 мОсм/кг, наиболее подходящим образом между 280 и 310 мОсм/кг. Подходящим образом относительные количества и концентрации различных компонентов композиции можно целесообразно настраивать для достижения желаемой осмоляльности, и конкретная новая комбинация компонентов позволяет достигать этого главным образом без нарушения других важных параметров. Однако относительные количества и концентрации различных компонентов композиции можно выбирать подходящим образом с тем, чтобы оптимизировать другие параметры - настоящее раскрытие, включая примеры и протоколы изложенные в нем, позволяет специалисту достигать этой цели и реализовать определенные, некоторые или все из эффектов настоящего изобретения.

Температура нарушения укладки белка

[00174] Подходящим образом, температура нарушения укладки белка (как подходящим образом измеряют по DSF протоколам, которые определены в настоящем документе) адалимумаба в жидкой фармацевтической композиции по изобретению больше чем или равна 65°C, более подходящим образом больше чем или равна 70°C. Новая комбинация компонентов, присутствующих в композиции по изобретению, позволяет специалисту достигать высоких температур нарушения укладки, которые можно считать желаемыми с точки зрения тепловой стабильности.

Параметры при воздействии теплового стресса

[00175] Подходящим образом количество (или концентрация) агрегатов (получаемые подходящим образом из адалимумаба и как подходящим образом определяют посредством SE-HPLC протоколов, как определено в настоящем документе), присутствующих в жидкой фармацевтической композиции, возрастает не больше чем в 4 раза (т. е. 4-кратное количество относительно произвольного начального времени), когда композицию подвергают термическому стрессу при 40°C (т. е. композицию поддерживают при температуре 40°C) в течение периода в 28 суток, подходящим образом не больше чем в 3 раза, подходящим образом не больше чем в 2,5 раза, подходящим образом не больше чем в 2,2 раза.

[00176] Подходящим образом количество (или концентрация) фрагментов (получаемых подходящим образом из адалимумаба и измеряемых подходящим образом через протоколы биоанализатора, которые определены в настоящем документе), присутствующих в жидкой фармацевтической композиции, возрастает не больше чем в 4 раза (т. е. 4-кратное количество относительно произвольного начального времени) когда композицию подвергают термическому стрессу 40°C (т. е. композицию поддерживают при температуре 40°C) в течение периода в 28 суток, подходящим образом не больше чем в 3 раза, подходящим образом не больше чем в 2,5 раза, подходящим образом не больше чем в 2,2 раза.

[00177] Подходящим образом мутность (как подходящим образом измеряют через нефелометрию в соответствии с протоколами, изложенными в настоящем документе) жидкой фармацевтической композиции возрастает не больше чем в раза 2 (т. е. 2-кратное количество относительно произвольного начального времени) когда композицию подвергают термическому стрессу 40°C (т. е. композицию поддерживают при температуре 40°C) в течение периода в 28 суток, подходящим образом не больше чем в 1,5 раза, подходящим образом не больше чем в 1,2 раза и подходящим образом мутность не возрастает вовсе.

[00178] Подходящим образом pH жидкой фармацевтической композиции меняется (через увеличение или уменьшение, хотя в целом через уменьшение pH) не больше чем на 0,5 единицы pH, когда композицию подвергают термическому стрессу 40°C (т. е. композицию поддерживают при температуре 40°C) в течение периода в 28 суток, подходящим образом не больше чем на 0,2 единицы pH, подходящим образом не больше чем на 0,1 единицы pH, наиболее подходящим образом pH не меняется вовсе (до одного десятичного разряда).

Параметры при воздействии механического стресса

[00179] Подходящим образом количество (или концентрация) агрегатов (получаемые подходящим образом из адалимумаба и как подходящим образом определяют с помощью SE-HPLC протоколов, как определено в настоящем документе), присутствующих в жидкой фармацевтической композиции, возрастает не больше чем в раза 2 (т. е. 2-кратное количество относительно произвольного начального времени), когда композицию подвергают механическому стрессу (т. е. встряхиванию в соответствии с протоколами, описанными в настоящем документе) в течение периода 48 часов, подходящим образом не больше чем в 1,5 раза, подходящим образом не больше чем в 1,2 раза, подходящим образом не больше чем в раза 1,1.

[00180] Подходящим образом количество (или концентрация) фрагментов (получаемых подходящим образом из адалимумаба и измеряемых подходящим образом по протоколам биоанализатора, которые определены в настоящем документе), присутствующих в жидкой фармацевтической композиции, возрастает не больше чем в раза 2 (т. е. 2-кратное количество относительно произвольного начального времени), когда композицию подвергают механическому стрессу (т. е. встряхивают в соответствии с протоколами, описанными в настоящем документе) в течение периода 48 часов, подходящим образом не больше чем в 1,5 раза, подходящим образом не больше чем в 1,2 раза, подходящим образом не больше чем в раза 1,1.

[00181] Подходящим образом мутность (как подходящим образом измеряют через нефелометрию в соответствии с протоколами, изложенными в настоящем документе) жидкой фармацевтической композиции возрастает не больше чем в раза 2 (т. е. 2-кратное количество относительно произвольного начального времени), когда композицию подвергают механическому стрессу (т. е. встряхивают в соответствии с протоколами, описанными в настоящем документе) в течение периода 48 часов, подходящим образом не больше чем в 1,5 раза, подходящим образом не больше чем в 1,2 раза, подходящим образом не больше чем в раза 1,1 и подходящим образом мутность не возрастает вовсе.

[00182] Подходящим образом pH жидкой фармацевтической композиции изменяется (через увеличение или уменьшение, хотя в целом через уменьшение pH) не больше чем на 0,5 единицы pH, когда композицию подвергают механическому стрессу (т. е. встряхивают в соответствии с протоколами, описанными в настоящем документе) в течение периода 48 часов, подходящим образом не более чем на 0,2 единицы pH, подходящим образом не больше чем на 0,1 единицы pH, наиболее подходящим образом pH не меняется вовсе (до одного десятичного разряда).

Параметры при воздействии светового стресса

[00183] Подходящим образом количество (или концентрация) агрегатов (получаемые подходящим образом из адалимумаба, и как подходящим образом определяют с помощью SE-HPLC протоколов как определено в настоящем документе), присутствующих в жидкой фармацевтической композиции, возрастает не больше чем в 50 раз (т. е. 50-кратное количество относительно произвольного начального времени), когда композицию подвергают световому стрессу (т. е. композицию подвергают воздействию света в соответствии с протоколами, описанными в настоящем документе, т. е. 7 часов при 765 Вт/м²), подходящим образом не больше чем в 45 раз, подходящим образом не больше чем в 35 раз, подходящим образом не больше чем в 30 раз.

[00184] Подходящим образом количество (или концентрация) фрагментов (получаемых подходящим образом из адалимумаба и подходящим образом измеряемых по протоколам биоанализатора, которые определены в настоящем документе), присутствующих в жидкой фармацевтической композиции, возрастает не больше чем в 4 раза (т. е. 4-кратное количество относительно произвольного начального времени), когда композицию подвергают световому стрессу (т. е. композицию подвергают воздействию света в соответствии с протоколами, описанными в настоящем документе, т. е. 7 часов при 765 Вт/м²), подходящим образом не больше чем в 3 раза, подходящим образом не больше чем в 2,5 раза, подходящим образом не больше чем в раза 2.

[00185] Подходящим образом мутность (как подходящим образом измеряют через нефелометрию в соответствии с протоколами, изложенными в настоящем документе) жидкой фармацевтической композиции возрастает не больше чем в раза 2 (т. е. 2-кратное количество относительно произвольного начального времени) когда композицию подвергают световому стрессу (т. е. композицию подвергают воздействию света в соответствии с протоколами, описанными в настоящем документе, т. е. 7 часов при 765 Вт/м²), подходящим образом не больше чем в 1,5 раза, подходящим образом не больше чем в 1,2 раза и подходящим образом мутность не возрастает вовсе.

[00186] Подходящим образом pH жидкой фармацевтической композиции меняется (через увеличение или уменьшение, хотя в целом через уменьшение pH) не больше чем на 0,5 единицы pH, когда композицию подвергают световому стрессу (т. е. композицию подвергают воздействию света в соответствии с протоколами, описанными в настоящем документе, т. е. 7 часов при 765 Вт/м²), подходящим образом не больше чем на 0,2 единицы pH, подходящим образом не больше чем на 0,1 единицы pH, наиболее подходящим образом pH не меняется вовсе (до одного десятичного разряда).

[00187] Подходящим образом профиль изоформ адалимумаба, в частности интегрированная площадь «основного пика», в жидкой фармацевтической композиции (измеряемый подходящим образом через изоэлектрическое фокусирование, подходящим образом cIEF, подходящим образом с применением iCE280, подходящим образом с применением протокола как указано в настоящем документе), является обоснованно стабильной, когда композицию подвергают световому стрессу (т. е. композицию подвергают воздействию света в соответствии с протоколами, описанными в настоящем документе, т. е. 7 часов при 765 Вт/м²). Подходящим образом, воздействие световым стрессом осуществляют в соответствии с существующим руководством ICH Q1B из European Medicines Agency (в отношении тестирования фотостабильности новых активных веществ и медицинских продуктов), подходящим образом как проиллюстрировано в документе CPMP/ICH/279/95. Подходящим образом профиль изоформ адалимумаба в композиции, как измеряют посредством обращения к интегрированной площади «основного пика», связанного с адалимумабом, на электроферограмме, получаемой с помощью изоэлектрического фокусирования (подходящим образом капиллярное изоэлектрическое фокусирование как описано в настоящем документе или необязательно другие стандартные протоколы изоэлектрического фокусирования, хорошо известные в данной области), меняется не больше чем на 20% при воздействии светового стресса (подходящим образом 7 часов воздействия светом при 765 Вт/м², подходящим образом в соответствии с существующим руководством ICH Q1B из European Medicines Agency, подходящим образом документом CPMP/ICH/279/95), в частности где применяют биоэквивалент адалимумаба. Подходящим образом, профиль изоформ адалимумаба в композиции (подходящим образом измеряемый через обращение к интегрированной площади «основного пика», связанного с адалимумабом) не изменяется больше чем на 15% (увеличение или уменьшение площади пика), когда подвергают световому стрессу таким образом (в частности, когда применяют биоэквивалент адалимумаба), подходящим образом не больше чем на 10%, подходящим образом не больше чем на 5%, подходящим образом не больше чем на 4%, подходящим образом не больше чем на 3%. Композиции адалимумаба известного уровня техники демонстрируют сниженную стабильность профиля изоформ из-за феномена фотоокисления, который должным образом ингибируют через применение ацетатного буфера в конкретных жидких фармацевтических композициях по изобретению. По существу, в жидких фармацевтических композициях по изобретению адалимумаб демонстрирует повышенную фотостабильность. В конкретном варианте осуществления адалимумаб обладает большей фотостабильностью в жидкой фармацевтической композиции по изобретению, чем коммерческие составы ХУМИРА®, как определено в настоящем документе (как подходящим образом показывают с помощью относительных профилей изоформ, в частности относительно основного пика адалимумаба), даже когда подходящим образом применяют биоэквиваленты адалимумаба. Понятно, что «основной пик», соответствующий адалимумабу, относится к основному пику адалимумаба на электроферограмме (т. е. тому, который имеет наибольшую интегрированную площадь пика) в результате измерений изоэлектрического фокусирования, которое подходящим образом выполняют как определено в настоящем документе. Подходящим образом электроферограмму получают при 280 нм, подходящим образом в течение времени предварительного фокусирования и фокусирования в 1 и 6 минут, соответственно, подходящим образом при напряжении 1500 В (предварительное фокусирование) и 3000 В (фокусирование). Подходящим образом пики представляют собой пики поглощения, подходящим образом при 280 нм. Разделения различных изоформ подходящим образом достигают с применением 100 мМ гидроксида натрия (в 0,1% метилцеллюлозе) в качестве катодного раствора и подходящим образом 80 мМ о-фосфорной кислоты (в 0,1% метилцеллюлозе) в качестве анодного раствора. Подходящим образом образцы для измерений изоэлектрического фокусирования получают в соответствии с протоколом, который определен в настоящем документе или в другом месте в данной области, но в частности может подходящим образом включать одно или несколько или все из: i) очистки; ii) удаления солей (например, с применением центрифугирования, подходящим образом с порогом 10 кДа); iii) предварительного разведения, чтобы получить содержание белка приблизительно 5,0 мг/мл, подходящим образом приблизительно 1,0 мг/мл, где разбавитель может необязательно содержать метилцеллюлозу, Pharmalyte 5-8 (GE Healthcare), Pharmalyte 8-10,5 (GE Healthcare), маркер для низкого pI 7,05 (Protein Simple), маркер для высокого pI 9,50 (Protein Simple) и очищенную воду; iv) одной или нескольких дополнительных стадий центрифугирования (например, 3 мин на 10000 об./мин, после чего подходящим образом следует 2 мин на 7000 об./мин, подходящим образом на образце 150 мкл). Изоэлектрическое фокусирование подходящим образом представляет собой капиллярное изоэлектрическое фокусирование (cIEF), и его подходящим образом выполняют с применением системы iCE280 из Protein Simple.

Параметры при воздействии циклов замораживания/оттаивания

[00188] Подходящим образом количество (или концентрация) агрегатов (получаемые подходящим образом из адалимумаб и как подходящим образом определяют с помощью SE-HPLC протоколов, как определено в настоящем документе), присутствующих в жидкой фармацевтической композиции, возрастает не больше чем в 1,5 раза (т. е. 1,5-кратное количество относительно произвольного начального времени), когда композицию подвергают пяти циклам замораживания/оттаивания (т. е. композицию замораживают и оттаивают пять раз в соответствии с протоколами, описанными в настоящем документе, т. е. от -80°C до 20°C пять раз), подходящим образом не больше чем в 1,2 раза, подходящим образом не больше чем в раза 1,1, подходящим образом увеличение количества (или концентрации) агрегатов (по существу) отсутствует вовсе.

[00189] Подходящим образом количество (или концентрация) невидимых частиц или преципитатов, с размером частицы меньше чем или равным 25 мкм, присутствующих в жидкой фармацевтической композиции, возрастает не больше чем в 4 раза (т. е. 4-кратное количество относительно произвольного начального времени), когда композицию подвергают пяти циклам замораживания/оттаивания (т. е. композицию замораживают и оттаивают пять раз в соответствии с протоколами, описанными в настоящем документе, т. е. от -80°C до 20°C пять раз), подходящим образом не больше чем в 3 раза, подходящим образом не больше чем в 2,5 раза, подходящим образом не больше чем в 2,2 раза. Подходящим образом количество (или концентрация) невидимых частиц или преципитатов, с размером частицы меньше чем или равным 10 мкм, присутствующих в жидкой фармацевтической композиции, возрастает не больше чем в 4 раза (т. е. 4-кратное количество относительно произвольного начального времени), когда композицию подвергают пяти циклам замораживания/оттаивания (т. е. композицию замораживают и оттаивают пять раз в соответствии с протоколами, описанными в настоящем документе, т. е. от -80°C до 20°C пять раз), подходящим образом не больше чем в 3 раза, подходящим образом не больше чем в 2,5 раза, подходящим образом не больше чем в 2,2 раза.

[00190] Подходящим образом количество (или концентрация) невидимых частиц или преципитатов, с размером частицы меньше чем или равным 25 мкм, присутствующих в жидкой фармацевтической композиции, возрастает не больше чем в 4 раза (т. е. 4-кратное количество относительно произвольного начального времени), когда композицию подвергают 5 циклам замораживания/оттаивания, подходящим образом не больше чем в 3 раза, подходящим образом не больше чем в 2,5 раза, подходящим образом не больше чем в 2,2 раза. Подходящим образом количество (или концентрация) невидимых частиц или преципитатов, с размером частицы меньше чем или равным 10 мкм, присутствующих в жидкой фармацевтической композиции, возрастает не больше чем в 4 раза (т. е. 4-кратное количество относительно произвольного начального времени), когда композицию подвергают 5 циклам замораживания/оттаивания, подходящим образом не больше чем в 3 раза, подходящим образом не больше чем в 2,5 раза, подходящим образом не больше чем в 2,2 раза.

Способы стабилизации антитела

[00191] Ввиду указанных выше моментов в этом подразделе и данных, представленных в примерах, настоящее изобретение также относится к способу стабилизации жидких композиций адалимумаба (химически и/или физически необязательно в отношении какого-либо одного или нескольких указанных выше параметров/свойств), который включает смешивание с адалимумабом с какими-либо релевантными компонентами, необходимыми для того, чтобы формировать жидкую фармацевтическую композицию как определено в настоящем документе. Различные варианты осуществления будут подходящим образом требовать различных комбинаций компонентов, подлежащих смешиванию, потенциально в различных количествах, и специалист без труда сможет вывести такие комбинации и количества, обратившись к приведенному выше раскрытию, связанному с жидкой фармацевтической композицией. Такие различные комбинации компонентов могут стабилизировать жидкие композиции адалимумаба в различных отношениях. Например, смешивание адалимумаба с указанными выше компонентами для того, чтобы формировать жидкую фармацевтическую композицию как определено в настоящем документе, может стабилизировать адалимумаб посредством:

i) увеличения температуры нарушения укладки белка адалимумаба;

ii) ингибирования формирования агрегатов;

iii) ингибирования формирования фрагментов;

iv) ингибирования формирования невидимых частиц (≤25 мкм или ≤10 мкм);

v) ингибирования турбидификации;

vi) ингибирования изменений pH;

vii) ингибирования фотоокисления; и/или

viii) снижения нестабильности в циклах замораживания/оттаивания.

[00192] По существу, настоящее изобретение предусматривает способ достижения одного, некоторых или всех из следующих эффектов:

i) увеличенные температуры нарушения укладки белка для адалимумаба;

ii) ингибирование формирования агрегатов;

iii) ингибирование формирования фрагментов;

iv) ингибирование формирования невидимых частиц (≤25 мкм или ≤10 мкм);

v) ингибирование турбидификации;

vi) ингибирование изменений pH;

vii) ингибирование фотоокисления;

viii) сниженная нестабильность в циклах замораживания/оттаивания; и/или

ix) стабилизация профиля изоформ (в частности, в отношении «основного пика», как определено в настоящем документе);

способ включает изготовление жидкой фармацевтической композиции адалимумаба как определено в настоящем документе.

[00193] Подходящим образом жидкие фармацевтические композиции по изобретению имеют срок хранения по меньшей мере 6 месяцев, подходящим образом по меньшей мере 12 месяцев, подходящим образом по меньшей мере 18 месяцев, более подходящим образом по меньшей мере 24 месяца. Подходящим образом, жидкие фармацевтические композиции по изобретению имеют срок хранения по меньшей мере 6 месяцев, подходящим образом по меньшей мере 12 месяцев, подходящим образом по меньшей мере 18 месяцев, более подходящим образом по меньшей мере 24 месяца, при температуре 2-8°C.

Предоставление специалисту возможности оптимизировать ключевые свойства стабильности

[00194] Новая раскрытая комбинация компонентов для применения в жидких фармацевтических композиция по изобретению позволяет специалисту получать (и целесообразно тонко настраивать) композиции, которые демонстрируют сравнимые или улучшенные свойства относительно композиций известного уровня техники. В частности, теперь настоящее раскрытие предоставляет специалисту все необходимые инструменты для оптимизации стабильности состава и, в частности, для оптимизации одного или нескольких из: ингибирования агрегирования, фрагментации, нарушения укладки белка, преципитации, смещения pH и окисления (в частности фотоокисления). Кроме того, специалисту дано руководство о том, как достигать такой оптимизации (через целесообразное изменение композиций) и как в этом процессе минимизировать какие-либо вредоносные побочные эффекты. Настоящее раскрытие позволять специалисту работать во всем объеме изобретения, чтобы получать множество конкретных композиций, которые демонстрируют сравнимые или усовершенствованные свойства относительно композиций известного уровня техники, и этого можно достичь с применением меньшего числа компонентов.

Конкретные варианты осуществления

[00195] В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит:

- адалимумаб;

- ацетатное буферное средство (например, ацетат натрия) (или ацетатную буферную систему);

- сахар-стабилизатор (например, трегалозу); и

- поверхностно-активное вещество (например, полисорбат 80).

[00196] В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит:

- адалимумаб;

- ацетатное буферное средство (например, ацетат натрия) (или ацетатную буферную систему);

- сахар-стабилизатор (например, трегалозу);

- регулятор тоничности (например, хлорид натрия); и

- необязательно поверхностно-активное вещество (например, полисорбат 80).

[00197] В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит адалимумаб, ацетатную буферную систему и сахар-стабилизатор при молярном соотношении 1:14-40:288-865 соответственно. В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит адалимумаб, ацетатную буферную систему, сахар-стабилизатор и регулятор тоничности при молярном соотношении 1:14-40:288-865:28-576, соответственно. В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит адалимумаб, ацетатную буферную систему, сахар-стабилизатор, регулятор тоничности и поверхностно-активное вещество при молярном соотношении 1:14-40:288-865:28-576:0,1-3,2, соответственно.

[00198] В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит адалимумаб, ацетатную буферную систему и сахар-стабилизатор при молярном соотношении 1:14-40:548-605 соответственно. В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит адалимумаб, ацетатную буферную систему, сахар-стабилизатор и регулятор тоничности при молярном соотношении 1:14-40:548-605:115-173, соответственно. В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит адалимумаб, ацетатную буферную систему, сахар-стабилизатор, регулятор тоничности и поверхностно-активное вещество при молярном соотношении 1:14-40:548-605:115-173:2-2,4, соответственно.

[00199] В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит адалимумаб, буферную систему из ацетата натрия/уксусной кислоты и трегалозу при молярном соотношении 1:5,7-145:288-865, соответственно. В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит адалимумаб, буферную систему из ацетата натрия/уксусной кислоты, трегалозу и хлорид натрия при молярном соотношении 1:5,7-145:288-865:28-576, соответственно. В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит адалимумаб, буферную систему из ацетата натрия/уксусной кислоты, трегалозу, хлорид натрия и полисорбат 80 при молярном соотношении 1:5,7-145:288-865:28-576:0,002-11, соответственно.

[00200] В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит адалимумаб, буферную систему из ацетата натрия/уксусной кислоты и трегалозу при молярном соотношении 1:14-40:548-605, соответственно. В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит адалимумаб, буферную систему из ацетата натрия/уксусной кислоты, трегалозу и хлорид натрия при молярном соотношении 1:14-40:548-605:115-173, соответственно. В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит адалимумаб, буферную систему из ацетата натрия/уксусной кислоты, трегалозу, хлорид натрия и полисорбат 80 при молярном соотношении 1:14-40:548-605:115-173:2-2,4, соответственно.

[00201] В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит адалимумаб, буферную систему из ацетата натрия/уксусной кислоты и трегалозу при молярном соотношении 1:28,8:576, соответственно. В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит адалимумаб, буферную систему из ацетата натрия/уксусной кислоты, трегалозу и хлорид натрия при молярном соотношении 1:28,8:576:144, соответственно. В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит адалимумаб, буферную систему из ацетата натрия/уксусной кислоты, трегалозу, хлорид натрия и полисорбат 80 при молярном соотношении 1:28,8:576:144:2,2, соответственно.

[00202] В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит адалимумаб, ацетатные буферные частицы и трегалозу при массовом соотношении 25-75:0,12-3,0:15-140, соответственно. В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит адалимумаб, ацетатные буферные частицы, трегалозу и хлорид натрия при массовом соотношении 25-75:0,12-3,0:15-140:0,5-12, соответственно. В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит адалимумаб, ацетатные буферные частицы, трегалозу, хлорид натрия и полисорбат 80 при массовом соотношении 25-75:0,12-3,0:15-140:0,5-12:0,01-2, соответственно.

[00203] В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит адалимумаб, ацетатные буферные частицы и трегалозу при массовом соотношении 45-55:0,30-0,84:65-72, соответственно. В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит адалимумаб, ацетатные буферные частицы, трегалозу и хлорид натрия при массовом соотношении 45-55:0,30-0,84:65-72:2,7-3,1, соответственно. В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит адалимумаб, ацетатные буферные частицы, трегалозу, хлорид натрия и полисорбат 80 при массовом соотношении 45-55:0,30-0,84:65-72:2,7-3,1:0,9-1,1, соответственно.

[00204] В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит адалимумаб, ацетатные буферные частицы и трегалозу при массовом соотношении 50:0,6:68, соответственно. В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит адалимумаб, ацетатные буферные частицы, трегалозу и хлорид натрия при массовом соотношении 50:0,6:68:2,9, соответственно. В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит адалимумаб, ацетатные буферные частицы, трегалозу, хлорид натрия и полисорбат 80 при массовом соотношении 50:0,6:68:2,9:1, соответственно.

[00205] Любой из указанных выше вариантов осуществления, относящихся к молярным и/или массовым соотношениям различных компонентов, дополнительно можно определять посредством отсылки к (существенному или полному) отсутствию или низким уровням компонента(компонентов), такого как аргинин, аминокислоты, поверхностно-активные вещества (необязательно за исключением полисорбата 80) и/или фосфатные буферные средства/системы, как определено где-либо в настоящем документе.

[00206] Следует принимать во внимание, что буферное средство (например, ацетат натрия) или буферную систему (например, ацетат натрия/уксусная кислота) по любому из указанных выше вариантов осуществления можно непосредственно встраивать в композиции или можно получать in situ, например, через кислотно-основную реакцию, посредством подходящей реакции сопряженной кислоты буферного средства (например, уксусной кислоты) с основанием (например, гидроксидом натрия). Независимо от способа, используемого для того, чтобы предоставлять или получать буферное средство или буферную систему, получаемая подходящим образом композиция в конечном итоге содержит подходящий баланс буферного средства и какой-либо сопряженной кислоты/основания для того, чтобы обеспечивать желаемый pH. Специалист без труда сможет вычислять или экспериментально определять, без чрезмерных усилий, подходящий баланс буферного средства и сопряженной кислоты/основания и/или количество основания, которое нужно добавлять в сопряженную кислоту для того, чтобы получать подходящее количество буферного средства и обеспечивать желаемый pH.

[00207] В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит:

- адалимумаб;

- ацетатное буферное средство (например, ацетат натрия) (или ацетатную буферную систему);

- сахар-стабилизатор (например, трегалозу);

- регулятор тоничности (например, хлорид натрия);

- необязательно поверхностно-активное вещество (например, полисорбат 80); и

- воду (для инъекций);

- где композиция:

не содержит (по существу или полностью) аргинин (соответственно, L-аргинин); содержит аргинин в концентрации по большей мере 0,1 мМ;

не содержит (по существу или полностью) аминокислоты или содержит одну или несколько аминокислот в (совокупной) концентрации по большей мере 0,1 мМ;

не содержит (по существу или полностью) поверхностно-активные вещества, необязательно за исключением полисорбата 80, или содержит одно или несколько из указанных поверхностно-активных веществ (необязательно за исключением полисорбата 80) в (совокупной) концентрации по большей мере 1 мМ; и/или

не содержит (по существу или полностью) фосфатные буферные средства (например, первичный кислый фосфат натрия, вторичный кислый фосфат натрия) или содержит фосфатную буферную систему в концентрации по большей мере 0,1 мМ.

[00208] В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит:

- адалимумаб (подходящим образом в концентрации как определено в настоящем документе);

- от 5 до 14 мМ ацетатной буферной системы (например, ацетата натрия/уксусной кислоты);

- от 100 приблизительно до 300 мМ сахара-стабилизатора (например, трегалозы);

- от 10 приблизительно до 200 мМ регулятора тоничности (например, хлорида натрия);

- (необязательно) от 0,05 мг/мл приблизительно до 1,5 мг/мл поверхностно-активного вещества (например, полисорбата 80); и

- воду (для инъекций);

- где композиция:

имеет pH между 5,0 и 6,7 (например, pH 5,2)

[00209] В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит:

- от 25 приблизительно до 75 мг/мл адалимумаба;

- от 2 приблизительно до 50 мМ буферной системы из ацетата натрия/уксусной кислоты;

- от 100 приблизительно до 300 мМ трегалозы;

- от 10 приблизительно до 200 мМ хлорида натрия;

- от 0,001 мг/мл приблизительно до 5 мг/мл полисорбата 80; и

- воду (для инъекций);

- где композиция:

имеет pH между 5,0 и 5,5;

не содержит (по существу или полностью) аргинин (соответственно, L-аргинин) или содержит аргинин в концентрации по большей мере 0,1 мМ;

не содержит (по существу или полностью) поверхностно-активные вещества, за исключением полисорбата 80, или содержит одно или несколько из указанных поверхностно-активных веществ (за исключением полисорбата 80) в (совокупной) концентрации по большей мере 1 мМ; и/или

[00210] В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит:

- от 45 приблизительно до 55 мг/мл адалимумаба;

- от 5 до 14 мМ буферной системы из ацетата натрия/уксусной кислоты;

- от 190 до 210 мМ трегалозы;

- от 40 до 60 мМ хлорида натрия;

- 0,9 мг/мл и 1,1 мг/мл полисорбата 80; и

- воду (для инъекций);

- где композиция:

имеет pH между 5,1 и 5,3;

не содержит (по существу или полностью) аргинин (соответственно, L-аргинин) или содержит аргинин в концентрации по большей мере 0,001 мМ;

не содержит (по существу или полностью) аминокислоты или содержит одну или несколько аминокислот в (совокупной) концентрации по большей мере 0,001 мМ.

[00211] В одном из вариантов осуществления жидкая фармацевтическая композиция содержит:

- 50 мг/мл адалимумаба;

- 10 мМ буферной системы из ацетата натрия/уксусной кислоты;

- 200 мМ трегалозы;

- 50 мМ хлорида натрия;

- 1,0 мг/мл полисорбата 80; и

- воду (для инъекций);

- где композиция:

имеет pH 5,2;

не содержит аргинин;

не содержит аминокислоты;

не содержит поверхностно-активные вещества, за исключением полисорбата 80; и

не содержит фосфатные буферные средства/системы.

[00212] Предпочтительно жидкая фармацевтическая композиция состоит по существу из:

- от 25 приблизительно до 75 мг/мл адалимумаба;

- от 2 приблизительно до 50 мМ буферной системы из ацетата натрия/уксусной кислоты;

- от 100 приблизительно до 300 мМ трегалозы;

- от 10 приблизительно до 200 мМ хлорида натрия;

- от 0,001 мг/мл приблизительно до 5 мг/мл полисорбата 80; и

- воды (для инъекций);

- где композиция имеет pH между 5,0 и 5,5.

[00213] Более предпочтительно жидкая фармацевтическая композиция состоит по существу из:

- от 40 приблизительно до 60 мг/мл адалимумаба;

- от 5 приблизительно до 15 мМ буферной системы из ацетата натрия/уксусной кислоты;

- от 175 приблизительно до 225 мМ трегалозы;

- от 25 приблизительно до 75 мМ хлорида натрия;

- от 0,5 мг/мл приблизительно до 1,5 мг/мл полисорбата 80; и

- воды (для инъекций);

- где композиция имеет pH между 5,1 и 5,3.

[00214] Идеально жидкая фармацевтическая композиция состоит по существу из:

- 50 мг/мл адалимумаба;

- 10 мМ буферной системы из ацетата натрия/уксусной кислоты;

- 200 мМ трегалозы;

- 50 мМ хлорида натрия;

- 1 мг/мл полисорбата 80; и

- воды (для инъекций);

где композиция имеет pH 5,2.

[00215] Подходящим образом, жидкая фармацевтическая композиция может представлять собой то, что изложено в каком-либо из предшествующих вариантов осуществления, за исключением того, что отсутствие или низкие уровни компонента(компонентов), такого как аргинин, аминокислоты, поверхностно-активные вещества (необязательно за исключением полисорбата 80) и фосфатные буферные средства/система, хотя и определены посредством отсылки к концентрации(концентрациям) (т. е. молярности), взамен могут быть определены посредством отсылки к соответствующим молярным соотношениям компонента буферной системы; соответствующим массовым соотношениям компонента и адалимумаба; или соответствующим молярным соотношениям компонента и адалимумаба. Специалист без труда выведет, что каждый компонент, из соответствующего раздела этого описания, относящегося к этому конкретному компоненту, какие молярные и массовые соотношения соответствуют тем или иным концентрациям, поскольку в настоящем документе соответствующие молярные и массовые соотношения перечислены так, чтобы соответствовать заданным концентрациям. Например, в случае аргинина, необязательные концентрации «по большей мере 0,1 мМ, более подходящим образом по большей мере 0,01 мМ, наиболее подходящим образом по большей мере 0,001 мМ», соответственно, отвечают молярному соотношению аргинина и буферной системы «по большей мере 1:150... более подходящим образом по большей мере 1:1500, наиболее подходящим образом по большей мере 1:15000»; «массовому соотношению аргинина и адалимумаба самое большее 1:3000... более подходящим образом по большей мере 1:30000, наиболее подходящим образом по большей мере 1:300000»; и молярному соотношению аргинина и адалимумаба по большей мере 1:3,75... более подходящим образом по большей мере 1:37,5, наиболее подходящим образом по большей мере 1:375». Те же соответствия применимы к аминокислотам, поверхностно-активным веществам и фосфатным буферным средствам/системам.

Способ изготовления жидкой фармацевтической композиции

[00216] Настоящее изобретение предусматривает способ изготовления жидкой фармацевтической композиции, как подходящим образом определено в настоящем документе. Способ подходящим образом включает смешивание вместе, в каком-либо конкретном порядке, который сочтут подходящим, каких-либо релевантных компонентов, необходимых для того, чтобы формировать жидкую фармацевтическую композицию как определено в настоящем документе. Специалист может обратиться к примерам или способам, хорошо известным в данной области, для формирования жидких фармацевтических композиций (в частности, тех, которые предназначены для инъекций через шприц). Различные варианты осуществления подходящим образом требуют различных комбинаций компонентов, подлежащих смешиванию, потенциально в различных количествах. Специалист без труда сможет вывести такие комбинации и количества, обратившись к приведенному выше раскрытию, относящемуся к жидкой фармацевтической композиции.

[00217] Подходящим образом способ включает смешивание вместе релевантных компонентов подходящим образом, в разбавителе (например, воде), подходящим образом с тем, чтобы растворить (по существу или полностью) все компоненты в разбавителе.

[00218] Способ может включать сначала получение предварительной смеси (или предварительного раствора) некоторых или всех компонентов (необязательно с применением части или всего разбавителя), за исключением адалимумаба, и затем сам адалимумаб (необязательно с или предварительно растворенным в части разбавителя) можно смешивать с предварительной смесью (или предварительным раствором), чтобы получать жидкую фармацевтическую композицию или композицию, к которой затем добавляют финальные компоненты для того, чтобы предоставлять конечную жидкую фармацевтическую композицию. Наиболее подходящим образом, предварительная смесь содержит все компоненты, за исключением адалимумаба и необязательно также части разбавителя (который можно применять для предварительного растворения адалимумаба), подходящим образом с тем, чтобы добавлять адалимумаб в смесь, что дает оптимальную стабилизацию адалимумаба. Подходящим образом указанную выше предварительную смесь получают с желаемым pH для конечного жидкого фармацевтического состава.

[00219] Подходящим образом способ включает формирование буферной системы, подходящим образом буферной системы, которая содержит буферное средство как определено в настоящем документе. Буферную систему подходящим образом формируют в предварительной смеси перед добавлением адалимумаба, хотя буферную систему необязательно можно формировать в присутствии адалимумаба. Буферную систему можно формировать через простое смешивание буферного средства (поставляют заранее изготовленным) с его сопряженной кислотой/основанием (подходящим образом в подходящих относительных количествах, чтобы обеспечивать желаемый pH - это может определять специалист или теоретически или экспериментально). В случае ацетатной буферной системы это обозначает смешивание ацетата натрия с уксусной кислотой. Альтернативно буферную систему можно формировать через добавление сильной кислоты (например, HCl) к буферному средству (например, ацетату натрия) для того, чтобы формировать сопряженную кислоту/основание in situ (например, уксусную кислоту) (также подходящим образом в подходящих относительных количествах, чтобы обеспечивать желаемый pH). Альтернативно, буферную систему можно формировать через добавление сильного основания (например, гидроксида натрия) к сопряженной кислоте/основанию (например, уксусной кислоте) буферного средства (например, ацетата натрия) для того, чтобы формировать буферное средство in situ (также подходящим образом в подходящих относительных количествах для того, чтобы обеспечивать желаемый pH). pH или предварительной смеси или конечной жидкой фармацевтической композиции можно целесообразно корректировать посредством добавления необходимого количества сильного основания или сильной кислоты или даже определенного количества буферного средства или сопряженной кислоты/основания.

[00220] В определенных вариантах осуществления буферное средство и/или буферную систему предварительно формируют в виде отдельной смеси и буферную систему переносят в предшественник жидкой фармацевтической композиции (содержащий некоторые или все компоненты, за исключением буферного средства и/или буферной системы, подходящим образом содержащий адалимумаб и потенциально только адалимумаб) через замену буфера (например, с применением диафильтрования до тех пор, пока не достигают релевантных концентраций или осмоляльности). Дополнительные эксципиенты можно добавлять после этого в случае необходимости для того, чтобы получать конечную жидкую фармацевтическую композицию. pH можно корректировать один раз или до того, как присутствуют все компоненты.

[00221] Любые, некоторые или все компоненты можно предварительно растворять или предварительно смешивать с разбавителем перед смешиванием с другими компонентами.

[00222] Конечную жидкую фармацевтическую композицию можно фильтровать подходящим образом для того, чтобы удалять вещество твердых частиц. Подходящим образом фильтрование происходит через фильтры с размером, равным или меньше 1 мкм, подходящим образом 0,22 мкм. Подходящим образом, фильтрование происходит через PES фильтры или PVDF фильтры, подходящим образом с применением 0,22 мкм PES фильтров.

[00223] Настоящее изобретение также относится к жидкой фармацевтической композиции, которую можно получать с помощью, получают с помощью или непосредственно получают с помощью способа изготовления, описанного в настоящем документе.

Устройство доставки лекарственного средства

[00224] Настоящее изобретение предусматривает устройство доставки лекарственного средства, которое содержит жидкую фармацевтическую композицию как определено в настоящем документе. Подходящим образом устройство доставки лекарственного средства содержит камеру, в которой находится фармацевтическая композиция. Подходящим образом устройство доставки лекарственного средства стерильно.

[00225] Устройство доставки лекарственного средства может представлять собой сосуд, ампулу, шприц, инъекционную ручку (например, по существу содержащую шприц) или внутривенный мешок. Наиболее подходящим образом устройство доставки лекарственного средства представляет собой шприц, подходящим образом инъекционную ручку. Подходящим образом шприц представляет собой стеклянный шприц. Подходящим образом шприц содержит иглу, подходящим образом иглу 29G 1/2ʺ.

[00226] Настоящее изобретение предусматривает способ изготовления устройства доставки лекарственного средства, как подходящим образом определено в настоящем документе, способ включает размещение жидкой фармацевтической композиции как определено в настоящем документе внутри устройства доставки лекарственного средства. Такое изготовление типично включает зарядку шприца жидкой фармацевтической композицией как определено в настоящем документе, подходящим образом через иглу, прикрепленную к нему. После этого эту можно удалять, заменять или оставлять.

[00227] Согласно одиннадцатому аспекту настоящего изобретения предусмотрено устройство доставки лекарственного средства, которое можно получать с помощью, получают с помощью или непосредственно получают с помощью способа изготовления, который определен в настоящем документе.

Упаковка

[00228] Настоящее изобретение предусматривает упаковку, которая содержит жидкую фармацевтическую композицию как определено в настоящем документе. Подходящим образом упаковка содержит устройство доставки лекарственного средства как определено в настоящем документе, подходящим образом множество устройств доставки лекарственного средства. Упаковка может содержать любой подходящий контейнер, чтобы вмещать одно или несколько устройств доставки лекарственного средства.

[00229] Настоящее изобретение предусматривает способ изготовления упаковки, способ включает размещение жидкой фармацевтической композиции как определено в настоящем документе внутри упаковки. Подходящим образом этого достигают посредством размещения указанной жидкой фармацевтической композиции внутри одного или нескольких устройств доставки лекарственного средства, и после этого размещения одного или нескольких предварительно заполняемых устройств доставки лекарственного средства в контейнере, присутствующем внутри упаковки.

[00230] Настоящее изобретение предусматривает упаковку, которую можно получать с помощью, получают с помощью или непосредственно получают с помощью способа изготовления, который определен в настоящем документе.

Набор частей

[00231] Настоящее изобретение предусматривает набор частей, который содержит устройство доставки лекарственного средства (без жидкой фармацевтической композиции, расположенной в нем), жидкую фармацевтическую композицию как определено в настоящем документе (необязательно содержащуюся в отдельной упаковке или контейнере) и необязательно набор инструкций с указаниями, касающимися введения (например, подкожного) жидкой фармацевтической композиции. Тогда пользователь может заполнять устройство доставки лекарственного средства жидкой фармацевтической композицией (которую можно предоставлять в сосуде или ампуле или т. п.) перед введением.

Применение фармацевтической жидкой композиции и способы лечения

[00232] Согласно двенадцатому аспекту настоящего изобретения предусмотрен способ лечения заболевания или медицинского нарушения; жидкая фармацевтическая композиция для применения в терапии; применение жидкой фармацевтической композиции при изготовлении лекарственного средства для лечения заболевания или нарушения; способ лечения аутоиммунного заболевания, связанного с фактором некроза опухоли альфа (TNF-α); жидкая фармацевтическая композиция для применения в лечении аутоиммунного заболевания, связанного с фактором некроза опухоли альфа (TNF-α); применение жидкой фармацевтической композиции при изготовлении лекарственного средства для лечения аутоиммунного заболевания, связанного с фактором некроза опухоли альфа (TNF-α); способ лечения ревматоидного артрита, псориатического артрита, анкилозирующего спондилита, болезни Крона, язвенного колита, хронического псориаза от умеренного до тяжелого и/или ювенильного идиопатического артрита; жидкая фармацевтическая композиция для применения в лечении ревматоидного артрита, псориатического артрита, анкилозирующего спондилита, болезни Крона, язвенного колита, хронического псориаза от умеренного до тяжелого и/или ювенильного идиопатического артрита; и применение жидкой фармацевтической композиции при изготовлении лекарственного средства для лечения ревматоидного артрита, псориатического артрита, анкилозирующего спондилита, болезни Крона, язвенного колита, хронического псориаза от умеренного до тяжелого и/или ювенильного идиопатического артрита; как определено в настоящем документе.

[00233] Жидкие фармацевтические композиции, которые определены в настоящем документе, можно применять для лечения какого-либо одного или нескольких указанных выше заболеваний или медицинских нарушений. В конкретном варианте осуществления жидкие фармацевтические композиции используют для лечения ревматоидного артрита, болезни Крона и псориаза.

[00234] Жидкие фармацевтические композиции подходящим образом вводят парентерально, подходящим образом через подкожную инъекцию.

ПРИМЕРЫ

Материалы и оборудование

[00235] Следующие материалы применяли при получении составов, описанных в нижеследующих примерах:

Ингредиент

Уксусная кислота (ледяная) 100%

Адалимумаб DS

Моногидрохлорид аргинина

Аспарагиновая кислота

Моногидрат лимонной кислоты

Двухосновный дигидрат фосфата натрия

Гидрохлорид лизина

Маннит

Одноосновный дигидрат фосфата натрия

Полоксамер 188

полисорбат 80

Хлорид натрия

Цитрат натрия

Гидроксид натрия, раствор 30%

Дигидрат трегалозы

WFI

[00236] Следующее одноразовое оборудование и материалы применяли в нижеследующих примерах и скрининговых экспериментах.

Наименование	Код	Поставщик
Пробирки Eppendorf (0,5 мл, 1,5 мл, 2,0 мл)	Нет	Eppendorf
Falcon	Полипропиленовые пробирки 352096 (15 мл), 352070 (50 мл)	Becton Dickinson
Фильтровальный блок с PES мембраной (0,22 мкм)	Мембрана MillexGP Express PES REF SLGP033RS	Millipore
PETG бутылки	3420-1000, 3420-0500, 2019-0250, 3420-0125, 3420-0060, 2019-0030	Nalgene

[00237] Следующую упаковку применяли в нижеследующих примерах и скрининговых экспериментах.

Наименование	Код	Поставщик
Стеклянный сосуд DIN2R Type I	0212060.6112 11200000A	Nuova Ompi
Пробка 1 мл	S2-F451 RSV; D 21-7S RB2-40	Daikyo Seiko, LTD
13 мм обжимной колпачок	12000350	MS-A

[00238] Следующее оборудование применяли в нижеследующих примерах и скрининговых экспериментах.

Наименование	Мод.	Производитель
Аналитические весы	AX205, PG2002-S	Mettler Toledo
Настольный ксеноновый прибор	Suntest CPS+	Atlas
Калиброванные пипетки	P20, P100, P200, P1000	Gilson
HPLC	Alliance	Waters
iCE280	Анализатор Fast IEF	Convergent Bioscience
Осмометр	Osmomat 030/D	Gonotec
ПЦР	7500 Fast Real-Time	AB Applied Biosystem
Измерители pH	Seven Multi	Mettler Toledo
Холодильники	+2-8°C	Angelantoni
Программное обеспечение Design Expert	версия 7.1.5	Stat-Ease, Inc.
Термостатные шкафы	+25°C, +40°C	Angelantoni
Турбидиметр	2100AN IS	Hach Lange
УФ спектрофотометр	Lambda 35	Perkin Elmer

Аналитические способы и протоколы

[00239] Следующие аналитические способы и протоколы применяли в нижеследующих примерах и скрининговых экспериментах, по причинам, которые изложены далее в таблице:

Способ №	Аналитический способ	Предмет теста
1	Bioanalyzer	Чистота
2	DSF	Температура нарушения укладки
3	iCE280	Профиль изоформ
4	OD	Содержание белка
5	SE-HPLC	Определение агрегатов
6	Нефелометрия	Мутность
7	Осмоляльность	Осмоляльность раствора
8	pH	Определение pH
9	Невидимые частицы	Количество частиц

[00240] Индивидуальные протоколы для каждого и приведенных выше аналитических способов описаны в свою очередь далее, и в примерах и скрининговых экспериментах ссылки на какие-либо такие аналитические способы подразумевают эти протоколы.

1. Чистота - Bioanalyzer

[00241] Применяли 2100 Bioanalyzer. Протоколы можно найти в релевантном руководстве. Однако протоколы дополнительно уточнены следующим образом.

Растворы:

Gel-Dye Mix (окрашивающий раствор):

[00242] Добавить 25 мкл концентрата красителя 230plus в пробирку с гелевой матрицей 230plus для белка. Хорошо перемешать на вортексе и прокрутить пробирку в течение 15 с. Перенести на центробежный фильтр и центрифугировать на 2500 об./мин в течение по меньшей мере 20 мин. Раствор готов для применения. Хранить раствор при +5±3°C в течение не больше чем 4 недель.

Обесцвечивающий раствор:

[00243] Пипетировать 650 мкл гелевой матрицы в центробежный фильтр. Центрифугировать на 2500 об./мин в течение по меньшей мере 25 мин. Хранить раствор при +5±3°C в течение не больше чем 4 недель.

Буфер для образцов:

[00244] Рекомендовано разделить 200 мкл буфера для образцов на аликвоты по 25 мкл и размораживать аликвоты для каждого чипа. Хранить стоковый раствор буферу для образцов и аликвоты при -20°C, не дольше, чем до истечения срока годности, предоставленного поставщиком.

Стоковый раствор малеимида:

[00245] Растворить 23,4 мг малеимида в 1 мл воды Milli Q (0,24 M). Хорошо перемешать раствор на вортексе. Впоследствии разбавить раствор водой Milli Q 1:4 (например, 50 мкл стокового раствора+150 мкл Milli Q). Конечная концентрация разбавленного раствора малеимида составляет 60 мМ. (поскольку еще не доступны данные о стабильности этого раствора, его следует готовить свежим перед началом каждого аналитического сеанса).

Раствор OTf:

[00246] Для анализа образцов адалимумаба следует получать восстанавливающий раствор с применением 1M DTT, растворяя для этого 154,0 мг DTT в 1 мл воды Milli Q.

Невосстанавливающий раствор:

[00247] Добавить 1 мкл воды Milli Q в аликвоту буфера для образцов (25 мкл) и перемешивать на вортексе в течение 5 секунд. Применять невосстанавливающий раствор в пределах дня его получения.

Восстанавливающий раствор:

[00248] Добавить 1 мкл соответствующего раствора DTf в аликвоту буфера для образцов (25 мкл) и перемешивать на вортексе в течение 5 секунд. Применять восстанавливающий раствор в пределах дня его получения.

Получение образцов:

- образцы анализируют в концентрации, находящейся в диапазоне между 2,4 и 3 мг/мл.

- если необходимо, образцы можно разбавлять до целевой концентрации с применением воды Milli Q.

[00249] Образцы получают в соответствии с Reactive Kit Guide, используя восстанавливающий и невосстанавливающий буфер для образцов в соответствии с инструкцией в Reactive Kit Guide и также указано выше. Строго рекомендовано применять, в отличие от руководства, увеличенные объемы, чтобы достигать воспроизводимых и точных результаты. Далее приведен пример того, как получать лесенку и образцы:

Раствор для получения образцов в восстанавливающих и невосстанавливающих условиях.

Реактив	Объем, мкл	Общий объем, мкл
Образец, разведенный до 3 мг/мл	3 мкл	6 мкл
Буфер для образцов (восстанавливающий или невосстанавливающий	2 мкл	6 мкл
Раствор малеимида	1 мкл
Образцы следует хорошо смешивать (на вортексе) и прокручивать Все образцы и лесенку нагревают 5 минут при 70°C
Вода Milli Q	84 мкл	90 мкл
Хорошо перемешать на вортексе и прокрутить Загрузка 6 мкл все образцы и лесенка

[00250] Примечание 1: для IPC, концентрация которых составляет между 2,4 мг/мл и 3,0 мг/мл, при получении образцов придерживаются приведенной выше таблицы, но объем воды Milli Q, добавляемой после нагрева образца, вычисляют для того, чтобы достигать конечной концентрации белка 0,1 мг/мл.

[00251] Пример получения образцов для образца, имеющего концентрацию между 2,4 и 3,0 мг/мл, приведен здесь далее:

Раствор для получения образцов в восстанавливающих и невосстанавливающих условиях

Реактив	Объем, мкл	Общий объем, мкл
Образец (2,6 мкл/мл)	3 мкл	6 мкл
Буфер для образцов (восстанавливающий или невосстанавливающий)	2 мкл	6 мкл
Раствор малеимида	1 мкл
Образцы следует хорошо смешивать (на вортексе) и прокручивать Все образцы и лесенку нагревают 5 минут при 70°C
Вода Milli Q	72 мкл	78 мкл
Хорошо перемешать на вортексе и прокрутить Загрузка 6 мкл все образцы и лесенка

[00252] Примечание 2: следует загружать все лунки. Если число образцов ниже, чем число доступных лунок, пустые лунки можно применять для дополнительных дубликатов или пустых образцов.

Подготовка системы и чипа:

- чтобы очищать систему как до, так и после анализа, заполнить «Electrode Cleaner» водой 600IIL Milli Q и поместить его в Agilent 2100 Bioanalyzer, закрыть крышку и позволить системе остановиться. Дополнительные действия не требуются.

- настроить опорную пластину станции подготовки чипа в положении «A» и зажим шприца в его среднем положении.

Подготовка чипа

Подготовка системы

Вставить новый Protein Chip в станцию подготовки

Пипетировать 12 мкл Gel-Dye Mix в лунку с пометкой G (вверху справа)

Установить плунжер на 1 мл и закрыть станцию подготовки чипа

Давить на плунжер, пока его удерживает чип

Ждать 60 секунд и затем освободить чип

Ждать 5 секунд и медленно отвести плунжер назад к отметке 1 мл

Открыть станцию подготовки чипа

Удалить раствор в этой лунке

Пипетировать 12 мкл Gel-Dye Mix в лунку с пометкой G (вверху справа) и во всех остальных лунках с пометкой G

Пипетировать 12 мкл обессоливающего раствора в лунку с пометкой DS

Загрузка лесенки и образца:

- перенести 6 мкл каждого образца в лунку для образца, а также 6 мкл лесенки в специализированную лунку, которая четко помечена символом лесенки.

[00253] Поместить чип в Agilent 2100 Bioanalyzer и начать анализ в течение 5 мин.

Пример набора образцов

Лунка	Образец	Количество, мкл
1	Пустой	6
2	Пустой	6
3	Неизвестный образец 1 повтор 1	6
4	Неизвестный образец 1 повтор 2	6
5	Неизвестный образец 2 повтор 1	6
6	Неизвестный образец 2 повтор 2	6
7	Неизвестный образец 3 повтор 1	6
8	Неизвестный образец 3 повтор 2	6
9	Текущий эталонный материал повтор 1	6
10	Текущий эталонный материал повтор 2	6
Лесенка	Лесенка	6

Анализ данных и оценка результатов

[00254] Для получения результатов следует исполнять следующие минимальные операции

- Поместить чип в конкретное место и закрыть крышку.

- В контексте прибора выбрать Assay - Electrophoresis - Protein - Protein 230 Plus.

- Нажать START, чтобы начать анализ, который будет выполнен в течение 30 минут.

- Исходные данные показывают посредством щелчка на «Data Analysis», где перечислены все эксперименты, выполненные за день. Нажать на эксперимент, представляющий интерес, и выбрать его.

- Гель, сгенерированный из выбранного эксперимента, открывается автоматически.

- Данные можно показывать в виде электроферограммы или изображения, похожего на гель.

[00255] Подробная информация относительно интегрирования пиков на электроферограмме (для получения данных о чистоте) включена в руководство к программному обеспечению. Чистоту образца автоматически задает система посредством автоматического интегрирования, но если необходимо, можно применять ручное интегрирование.

Результаты

[00256] В невосстанавливающих условиях результаты приведены в виде % чистоты и %LMW (сумма пиков перед мономером).

[00257] В восстанавливающих условиях результаты показаны в виде % чистоты, как сумма тяжелой цепи и легкой цепи.

[00258] Характерные значения молекулярной массы приведены далее в таблице.

Характерная молекулярная масса адалимумаба

Условия	Результаты	KDa
Невосстанавливающие	Мономер	151
Восстанавливающие	LC	27
HC	58

2. Температура нарушения укладки - DSF

[00259] DSF (дифференциальную сканирующую флуориметрию) осуществляли следующим образом:

[00260] 2 мкл Sypro Orange (оранжевый краситель для белковых гелей, код S6650, Life Technologies), который предварительно разводили 500-кратно в воде для инъекций, добавляли в 20 мкл раствора лекарственного продукта. После добавления Sypro Orange, DP растворы (в трех экземплярах) вносили в 96-луночные планшеты (MicroAmp Fast 96-W Reaction Plate 0,1 мл, код 4346907). Затем планшеты запечатывали защитным прозрачным покрытием (MicroAmp Optical Adhesive Film, код 4311971) и затем подвергали центрифугированию для того, чтобы удалять пузырьки воздуха. Затем планшеты вставляли в систему 7500 Fast Real-Time AB Applied Biosystem PCR и сканировали профили испускания при температурах от комнатная температуры до 90-100°C. Зависимость интенсивности испускания флуоресценции от температуры представляет собой кривую, которая типично показывает точку инверсии/нарушение непрерывности при температуре денатурации, параметре, используемом для того, чтобы сравнивать различные композиции.

3. Профиль изоформ - iCE280

[00261] cIEF с применением iCE280 (профиль изоформ): после очистки и удаления солей с применением центрифугирования на центробежных устройствах Amicon Ultra-4 (порог 10 кДа), образцы предварительно разводили до концентрации 5,0 мг/мл очищенной водой. Затем выполняли второе разведение до 1,0 мг/мл с применением раствора, состоящего из: метилцеллюлозы, Pharmalyte 5-8 (GE Healthcare), Pharmalyte 8-10,5 (GE Healthcare), маркера для низкого pI 7,05 (Protein Simple), маркера для высокого pI 9,50 (Protein Simple) и очищенной воды. После разведения образцы центрифугировали на 10000 об./мин в течение 3 минут. Затем проводили дополнительную стадию центрифугирования (2 минуты на 7000 об./мин) на 150 мкл каждого образца, перенесенного в стеклянные вставки. cIEF (капиллярное изоэлектрическое фокусирование) осуществляли с применением системы iCE280 из Protein Simple, используя капиллярные картриджи Fc с 100 мкм ID покрытия и общей длиной 50 нм (№ по каталогу 101700/101701 из Protein Simple). Разделение различных изоформ осуществляли с применением 100 мМ гидроксида натрия (в 0,1% метилцеллюлозе) в качестве катодного раствора и 80 мМ о-фосфорной кислоты (в 0,1% метилцеллюлозе) в качестве анодного раствора. Электроферограмму получали на 280 нм в течение времени предварительного фокусирования и фокусирования 1 и 6 минут, соответственно, при напряжении 1500 В (предварительное фокусирование) и 3000 В (фокусирование).

4. Содержание белка - OD

[00262] Измерения OD (содержание белка) выполняли на образцах, которые изначально разводили гравиметрически (выполняли независимые разведения в трех повторениях) с применением релевантного буфера или плацебо от начальной концентрации приблизительно до 10 мг/мл. Разведенные растворы тестировали на поглощение при 280 и 320 нм в кварцевых кюветах с длиной пути 0,1 см при комнатной температуре с применением двухлучевого спектрофотометра (Lambda35 из Perkin Elmer). Значение 1,35 применяли в качестве молярного коэффициента экстинкции адалимумаба.

5. Определение агрегатов - SE-HPLC

[00263] Образцы разводили в DPBS 1× до концентрации 0,5 мл и инъецировали (объем инъекции 20 мкл) в колонку TSK gel Super SW3000 4,6 мм ID × 30,0 см код 18675 из Tosoh, поддерживая изократические условия (подвижная фаза: 50 мМ фосфат натрия+0,4 M перхлорат натрия, pH 6,3 ± 0,1). УФ обнаружение выполняли при 214 нм и скорости потока 0,35 мл. Длительность каждого аналитического цикла составляла 15 минут. Перед анализом образцы поддерживали при 2-8°C в автоматическом пробозаборник в системах Waters Alliance HPLC, используемых для этого теста.

6. Мутность - нефелометрия

[00264] Мутность оценивали через нефелометрические измерения (эффект, основанный на эффекте рассеяния света, обусловленном частицами с размерами типично < 1 мкм), которые проводили с применением турбидиметра 2100AN IS Turbidimeter из Hach при комнатной температуре. Минимальные количества 3 мл раствора помещали в стеклянные кюветы уменьшенного размера и тестировали эффект рассеяния после до калибровки прибора с помощью серии стандартных растворов (0,1-7500 NTU).

7. Определение осмоляльности - осмоляльность

[00265] Осмоляльность измеряли на основании криоскопической характеристики растворов. Тесты проводили с применением Osmomat 030-D из Gonotech, подвергая 50 мкл образца заморозке. Температура заморозки зависит от осмоляльности раствора (т. е. от присутствия растворенных средств, таких как соли, сахара, другие ионные и неионные частицы и т. п.).

8. Определение pH - pH

[00266] pH определяли с применением потенциометрических измерений, которые проводили при комнатной температуре с применением измерителей pH Mettler Toledo Seven Multi.

9. Количество частиц - невидимые частицы

[00267] Образцы 5-кратно разводили очищенной водой до конечного объема 25 мл. Число частиц определяли при комнатной температуре с помощью PAMAS SVSS из Aminetruments, собирая четыре независимых прогона и усредняя результаты для каждой соответствующей фракции размеров, представляющей интерес.

Пример 1 - Составы для первого скрининга составов

[00268] Следующий первый набор составов (часто упоминаемый в настоящем документе как DoE1 составы) приведен далее в таблице 1.

Таблица 1: список DoE1 составы для последующих скрининговых экспериментов 1

№ формы	Концентрация соли (NaCl) (мМ)	Тип буфера (10 мМ)	pH	Стабилизатор
1	25	Ацетат	4,6	Гидрохлорид лизина (100 мМ)
2	100	Ацетат	4,6	Моногидрохлорид аргинина+аспарагиновая кислота (80 мМ+20 мМ)
3	50	Ацетат	4,8	Моногидрохлорид аргинина+аспарагиновая кислота (80 мМ+20 мМ)
4	25	Ацетат	4,8	Маннит (200 мМ)
5	75	Ацетат	4,8	Маннит (200 мМ)
6	50	Ацетат	5,0	Гидрохлорид лизина (100 мМ)
7	100	Ацетат	5,0	Дигидрат трегалозы (200 мМ)
8	25	Ацетат	5,2	Дигидрат трегалозы (200 мМ)
9	75	Ацетат	5,2	Моногидрохлорид аргинина+аспарагиновая кислота (80 мМ+20 мМ)
10	75	Ацетат	5,2	Дигидрат трегалозы (200 мМ)

[00269] Составы из таблицы 1 изготавливали, начиная с предварительно сформулированного DS материала, не содержащего поверхностно-активные вещества.

[00270] Аликвоту DS диафильтровали с 10 мМ буфером из ацетата натрия/уксусной кислоты при pH 5,0 до тех пор, пока не достигали трехкратной объемной замены буфера. Затем необходимые эксципиенты добавляли в DS материалы после замены буфера и pH корректировали до целевого посредством добавления разбавленного раствора гидроксида натрия. Каждый состав фильтровали через 0,22 мкм PES фильтры.

[00271] В таблице 2 приведены результаты в отношении возвращения материалов и осмоляльности для трех DS материалов после замены буфера.

Таблица 2: Возвращение и осмоляльность DS материалов после замены буфера

	После замены
Буфер	Начальный DS объем (мл)	Начальная DS концентрация (мг/мл)	Обработанный белок (мг)	Конечный объем (мл)	Конечная концентрация (мг/мл)	Возвращенный белок (мг)	Возвращение (%)	Осмолярность (мОсм/кг)
Ацетат	200	63,3	12660	180	65,2	11736	93	30

[00272] Имело место хорошее возвращение для натрий-ацетатного буфера (>90%). Значения осмоляльности указывают на достижение удовлетворительной степени замены буфера, при минимальном остатке частиц, происходящих из исходного DS.

Пример 2 - Составы для второго скрининга составов

[00273] Следующий второй набор составов (часто упоминаемый в настоящем документе как DoE2 составы) приведен далее в таблице 3 (как получено из таблицы 4 под ней).

Таблица 3: список DoE2 составов для последующих скрининговых экспериментов 2 (составов, полученных из того, что представлено в таблице 4, с дополнительным указанным поверхностно-активным веществом)

Составы	Концентрация полисорбата 80 (мг/мл)
0	0,5	1
Форма 1 (получена из формы A, таблица 4)	x	-	-
Форма 2 (получена из формы A, таблица 4)	-	x	-
Форма 3 (получена из формы A, таблица 4)	-	-	X

Таблица 4: прототип состава, полученный из скрининга DoE1

Форма	Соль (NaCl) мМ	Тип буфера (10 мМ)	pH	Стабилизатор
A	75	Ацетат	5,2	Дигидрат трегалозы (200 мМ)

[00274] DoE2 составы (таблица 3) изготавливали, начиная с предварительно сформулированного DS материала, не содержащего поверхностно-активные вещества.

[00275] Как и ранее, аликвоты DS диафильтровали до тех пор, пока не достигали трехкратной объемной замены. Затем необходимые эксципиенты добавляли в DS материалы после замены буфера и pH корректировали до целевого посредством добавления разбавленного раствора гидроксида натрия. Каждый состав фильтровали через 0,22 мкм PES фильтры.

[00276] В таблице 5 представлены результаты в отношении осмоляльности и мутности для DS материалов после замены буфера.

[00277] Значения осмоляльности (≤ 40 мОсм/кг) указывают на достижение удовлетворительной степени замены буфера, при минимальном остатке частиц, происходящих из исходного DS.

Таблица 5: Осмоляльность и мутность DS материалов после замены буфера

Буфер	Мутность (NTU)	Осмоляльность (мОсм/кг)
Ацетат	19	29

Пример 3 - Сравниваемые составы для первого и второго скрининга

[00278] В целях сравнения и контроля получали или готовили три эталонных состава, включая Ref-1 (композиция Хумира® производства заявителя); Ref-2 (RMP US - коммерческий лекарственный продукт Хумира® из USA); и Ref-3 (RMP EU - коммерческий лекарственный продукт Хумира® из EU). Все эти эталонные составы имели композицию, представленную в таблице 6.

Таблица 6: Композиция Хумира DP

Ингредиент	Количество на контейнер (мг) (заполняемый объем=0,8 мл)	Количество (мг/мл)
Адалимумаб	40	50
Моногидрат лимонной кислоты	1,04	1,3
Двухосновный дигидрат фосфата натрия	1,22	1,53
Маннит	9,6	12
Одноосновный дигидрат фосфата натрия	0,69	0,86
Полисорбат 80	0,8	1
Хлорид натрия	4,93	6,16
Цитрат натрия	0,24	0,3
WFI и гидроксид натрия	q.b., чтобы корректировать pH до 5,2	q.b., чтобы корректировать pH до 5,2

Скрининг

[00279] Первый скрининг составов (DoE1) привел к идентификации различных факторов (например, pH, присутствие NaCl, тип эксципиента), отвечающих за стабильность белка, и в конечном итоге к выбору составов для применения во втором скрининге (DoE2), в котором стремились точно настроить составы и оценить, как поверхностно-активные вещества, такие как полисорбат 80, могут влиять на стабильность белка.

[00280] Каждый из двух скринингов включал различные аналитические тесты, как определено в настоящем документе ранее и упомянуто далее в настоящем документе, для спектра различных составов, которые подвергали различным уровням теплового, механического и светового стресса в течение длительных периодов (например, 1 месяц). Эти скрининги составов позволили собрать значительное количество данных, которые обеспечили удивительные и полезные озарения, делающие возможной разработку новых благоприятных составов.

[00281] Результаты двух скринингов составов представлены далее.

Скрининговый эксперимент 1 - Анализ и скрининг составов из примера 1 против сравниваемых составов из примера 3

[00282] В предварительном DoE скрининге (стадия 1) оценивали эффект, который ионная сила (обеспечиваемая с помощью NaCl), pH и различные стабилизаторы оказывают на белок в ходе краткосрочных исследований стабильности.

[00283] Применяли D-оптимальный статистический план на поверхности отклика. Учитывали три фактора:

- ионная сила (зависящая от концентрации NaCl, которая варьировала в диапазоне от 25 мМ до 100 мМ и которую задавали в качестве численного множителя);

- pH (диапазон 4,6-6,4, забуференный ацетатом, изучали;

- стабилизатор/эксципиент (категорический фактор, который содержит несколько уровней: гидрохлорид лизина, аргинин+аспарагиновая кислота, маннит, дигидрат трегалозы).

[00284] Эти составы изготавливали, как описано выше в примере 1, начиная с DS без полисорбата 80, и, следовательно без поверхностно-активных веществ.

[00285] Далее в таблице 7 сведены составы, которые тестировали в этом скрининге. В дополнение к предложенным 10 составам, также анализировали два контроля в качестве сравниваемого:

- коммерческий лекарственный продукт Хумира «DP» (сформулированный в соответствии с приведенным выше примером 3)

- MS лекарственное вещество «DS», сформулированное как коммерческий Хумира DP (сформулирован в соответствии с приведенным выше примером 3)

Таблица 7: Список DoE1 составов (стадия 1), скрининг которых осуществляли в условиях теплового стресса (стабильность при 40°C) и высокопропускном определении температуры нарушения укладки белка (DSF).

№ формы	Концентрация соли (NaCl) (мМ)	Тип буфера (10 мМ)	pH	Стабилизатор
1	25	Ацетат	4,6	Гидрохлорид лизина (100 мМ)
2	100	Ацетат	4,6	Моногидрохлорид аргинина+аспарагиновая кислота (80 мМ+20 мМ)
3	50	Ацетат	4,8	Моногидрохлорид аргинина+аспарагиновая кислота (80 мМ+20 мМ)
4	25	Ацетат	4,8	Маннит (200 мМ)
5	75	Ацетат	4,8	Маннит (200 мМ)
6	50	Ацетат	5,0	Гидрохлорид лизина (100 мМ)
7	100	Ацетат	5,0	Дигидрат трегалозы (200 мМ)
8	25	Ацетат	5,2	Дигидрат трегалозы (200 мМ)
9	75	Ацетат	5,2	Моногидрохлорид аргинина+аспарагиновая кислота (80 мМ+20 мМ)
10	75	Ацетат	5,2	Дигидрат трегалозы (200 мМ)
Ref-1 (MS)	Композиция Хумира (состав, изготовленный с применением лекарственного вещества MS) -пример 3
Ref-2 (RMP US)	Коммерческий Хумира DP (USA) - пример 3
Ref-3 (RMP EU)	Коммерческий Хумира DP (EU) - пример 3

[00286] Составы тестировали в соответствии с планом, приведенным в таблице 8. Рассматривали тепловой стресс вплоть до 1 месяца при 40°C. Высокопропускную оценку, которую выполняли с применением способа DSF (направлен на быстрый скрининг на основании определения температуры нарушения укладки белка), осуществляли в T0.

Таблица 8: Панель аналитических тестов, которые осуществляли для предварительных DoE составов (стадия 1): тепловой стресс в условиях 1 месяц при 40°C.

Ускоренный (40°C)	Время стабильности (недели)
Способы	Тест	0	2 нед.	4 нед.
OD	Содержание	x	-	x
SE-HPLC	Агрегаты	x	x	x
Bionalyzer	Чистота	x	x	x
pH	pH	x	x	x
Осмоляльность	Осмоляльность	x	-	-
DSF	Температура нарушения укладки	x	-	-

1.1 Скрининг осмоляльности

[00287] Осмоляльность DoE1 составов, которые формулировали, начиная с DS материалов после замены буфера (пар. 5.1.1), приведена в таблице 9.

[00288] Обнаружено, что большинство составов находится в диапазоне осмоляльности 250-400 мОсм/кг, хотя слегка более высокие значения наблюдали при наивысших концентрациях хлорида натрия.

Таблица 9: Осмоляльность (мОсм/кг), которую регистрировали во момент времени 0 для скрининга DoE1 составов

№ формы	Концентрация соли (NaCl) (мМ)	Тип буфера (10 мМ)	pH	Стабилизатор	Время 0
1	25	Ацетат	4,6	Гидрохлорид лизина (100 мМ)	0,302
2	100	Ацетат	4,6	Моногидрохлорид аргинина+аспарагиновая кислота (80 мМ+20 мМ)	0,407
3	50	Ацетат	4,8	Моногидрохлорид аргинина+аспарагиновая кислота (80 мМ+20 мМ)	0,339
4	25	Ацетат	4,8	Маннит (200 мМ)	0,322
5	75	Ацетат	4,8	Маннит (200 мМ)	0,423
6	50	Ацетат	5,0	Гидрохлорид лизина (100 мМ)	0,342
7	100	Ацетат	5,0	Дигидрат трегалозы (200 мМ)	0,506
8	25	Ацетат	5,2	Дигидрат трегалозы (200 мМ)	0,341
9	75	Ацетат	5,2	Моногидрохлорид аргинина+аспарагиновая кислота (80 мМ+20 мМ)	0,366
10	75	Ацетат	5,2	Дигидрат трегалозы (200 мМ)	0,441
Эталон собственного производства (композиция Хумира, Merck Serono DS)	0,374
RMP (USA) Хумира	н/д
RMP (EU) Хумира	0,310

1.2 Содержание белка (OD)

[00289] Содержание белка в DoE1 составах определяли в момент времени 0 и после 1 месяца при 40°C.

[00290] На фиг. 1 представлена гистограмма, которая показывает содержание белка (мг/мл) в DoE1 составах (из примера 1), наряду с эталонными стандартами (представляющими сравнительные составы ХУМИРА®) в произвольной начальной точке (синие столбцы, время=0) и после 4 недель (красные столбцы) состава(составов), который нагревали до 40°C.

[00291] Результаты, представленные на фиг. 1, не указывают на значительные изменения, возникающие с течением времени. Все концентрации найдены на одной линии с целевой 50 мг/мл.

1.3 Агрегирование (SE-HPLC)

[00292] На фиг. 2 представлена гистограмма, которая показывает % агрегирования, как определяют с помощью SE-HPLC, DoE1 составов (из примера 1), наряду с эталонными стандартами (представляющими сравнительные составы ХУМИРА®), в произвольной начальной точке (синие столбцы, время=0) и после 2 недель (зеленые столбцы) и 4 недель (оранжевые столбцы) состава(составов), который нагревали до 40°C. Суммарные агрегаты, которые наблюдали с помощью SE-HPLC через стабильность при 40°C, графически представлены на фиг. 2. Минимальные увеличения агрегирования наблюдали во всех составах. Однако даже после 1 месяца все уровни агрегирования количественно составляли меньше чем 1%.

1.4 Фрагментация (Bioanalyzer)

[00293] На фиг. 3 представлена гистограмма, которая показывает % фрагментации, как определяют с помощью Bioanalyzer, DoE1 составов (из примера 1), наряду с эталонными стандартами (представляющими сравнительные составы ХУМИРА®), в произвольной начальной точке (темно-синие столбцы, время=0) и после 2 недель (розовые столбцы) и 4 недель (светло-синие столбцы) состава(составов), который нагревали до 40°C.

[00294] На фиг. 3 представлены вариации фрагментов с течением времени, как определяют посредством Bioanalyzer. Составы при более кислом pH (типично ниже чем или равном 5,0, как в составах 1-7) склонны подвергаться более высоким скоростям фрагментации. Кроме того, присутствие аминокислот в этом диапазоне pH может значительно ухудшать профиль стабильности (составы 1-2-3). Вредоносный эффект частиц аминокислот также подтверждали при pH 5,2-5,4 (состав 9).

[00295] При pH > 5,0 и в присутствии сахара/полиолов, все формулы, включая эталонные, сравнимы (фрагментация ниже чем 1% после 1 месяца при 40°C).

[00296] Данные анализировали с помощью ANOVA, который подтверждал статистическую значимость фактора pH (p-значение < 0,001), также показывая, что следует нацеливаться на значения pH > 5,0 для того, чтобы минимизировать фрагментацию.

[00297] Не обнаружено, что хлорид натрия является фактором, критичным для стабильности в диапазоне 25-100 мМ.

1.5 Скрининг pH

[00298] В таблице 10 представлен pH для DoE1 составов (из примера 1), наряду с эталонными стандартами (представляющими сравнительные составы ХУМИРА®), в произвольной начальной точке (time=0) и после 2 недель и 4 недель состава(составов), который нагревали до 40°C.

[00299] Как можно видеть в таблице 10, не наблюдали отклонений от целевого pH.

Таблица 10: pH при скрининге DoE1 составов, который определяли через стабильность при 40°C

	Время стабильности
№ формы	Конц. соли (NaCl) (мМ)	Тип буфера (10 мМ)	pH	Стабилизатор	Время 0	2 недели 40°C	4 недели 40°C
1	25	Ацетат	4,6	Гидрохлорид лизина (100 мМ)	4,6	4,7	4,7
2	100	Ацетат	4,6	Моногидрохлорид аргинина+аспарагиновая кислота (80 мМ+20 мМ)	4,7	4,6	4,7
3	50	Ацетат	4,8	Моногидрохлорид аргинина+аспарагиновая кислота (80 мМ+20 мМ)	4,8	4,8	4,8
4	25	Ацетат	4,8	Маннит (200 мМ)	4,8	4,8	4,8
5	75	Ацетат	4,8	Маннит (200 мМ)	4,8	4,8	4,8
6	50	Ацетат	5,0	Гидрохлорид лизина (100 мМ)	5,0	5,0	5,0
7	100	Ацетат	5,0	Дигидрат трегалозы (200 мМ)	5,0	5,0	5,0
8	25	Ацетат	5,2	Дигидрат трегалозы (200 мМ)	5,2	5,2	5,2
9	75	Ацетат	5,2	Моногидрохлорид аргинина+аспарагиновая кислота (80 мМ+20 мМ)	5,1	5,2	5,2
10	75	Ацетат	5,2	Дигидрат трегалозы (200 мМ)	5,2	5,2	5,2
Эталон собственного производства (композиция Хумира, Merck Serono DS)	5,2	5,2	5,2
RMP (USA) Хумира	5,3	5,3	5,3
RMP (EU) Хумира	5,3	5,3	5,3

1.6 Температура нарушения укладки (DSF)

[00300] DSF представляет собой высокопропускной способ, который нацелен на определение температуры нарушения укладки белков посредством увеличения взаимодействия с флуоресцентными зондами, когда к образцам применяют повышение температуры. Когда начинается нарушение укладки белка, он все больше и больше обнажает гидрофобные участки для растворителя, привлекая флуоресцентные зонды, которые будут переходить из свободного состояния в растворе (не флуоресцентного) в связанное с белком состояние (через гидрофобные взаимодействия), таким образом увеличивая степень флуоресцентного сигнала.

[00301] По оценке сигнал флуоресценции возможно определять срединную точку сигмовидных кривых, которая показывает точку перехода каждого состава. Допускают, что чем выше точка перехода, тем выше устойчивость формулы к тепловому стрессу.

[00302] Результаты оценки, которую проводили при скрининге DoE1 составов, представлены на фиг. 4. На фиг. 4 представлена гистограмма, которая показывает температуру нарушения укладки (°C), как определяют с помощью DSF, DoE1 составов (из примера 1) наряду с эталонными стандартами (представляющими сравнительные составы ХУМИРА®).

[00303] Температура нарушения укладки трех эталонных составов составляет 71-72°C. Обнаружены некоторые составы, помимо эталонных, имеющие температуры нарушения укладки выше чем 70°C, которые включают:

- Составы 8 и 10 (составы в натрий-ацетатном буфере pH 5,2+дигидрат трегалозы при различных концентрациях хлорида натрия)

[00304] Следовательно, этот тест подтверждал результаты, предварительно полученные для фрагментации с помощью Bioanalyzer: полиолы/сахара могут положительно влиять на тепловую стабильность белка, в частности при pH > 5,0, тогда как хлорид натрия не выглядит значительно влияющим на их поведение.

[00305] Модель ANOVA для поверхности отклика идентифицировала pH (p-значение < 0,01) и эксципиент (0,01 < p-значение < 0,05) в качестве значимых факторов, влияющих на стабильность белка.

1.7 Изменение профиля изоформ в сравнении с RMP

[00306] Профиль изоформ для скрининга DoE формулы 10 тестировали после 10-11 недель при 40°C и сравнивали с эталонными образцами.

[00307] Данные, в отношении вариаций основного пика и кислотного кластера, приведены в таблице 11.

[00308] Сравнимые вариации получали для пяти протестированных образцов.

Таблица 11: Профиль изоформ с применением iCE280 для большинства перспективных составов из скрининга DoE 1 и эталонов.

Основной

ID	Время 0	10 недель (40°C)	11 недель (40°C)
DoE1-10	56,7	40,1	-
Ref-1 (MS)	55,8	38,5	-
Ref-3 RMP (EU)	56,5	40,7	-
Ref-2 RMP (US)	56,8	40,6	-

Кислотный кластер

ID	Время 0	10 недель (40°C)	11 недель (40°C)
DoE1-10	19,3	39,3	-
Ref-1 (MS)	19,8	40,5	-
Ref-3 RMP (EU)	19,5	38,9	-
Ref-2 RMP (US)	20,2	39,8	-

Выводы для скринингового эксперимента 1

[00309] Результаты, полученные от Bioanalyzer и в тестировании DSF комбинированно оценивали с помощью модели ANOVA для поверхностей отклика для того, чтобы определять лучшие композиции, которые возможно могут гарантировать наивысшую тепловую стабильность белка.

[00310] Список рекомендованных композиций представлен в таблице 12, в которой также сравнивают эффективности получаемых прототипов составов с хумира RMP, в отношении температуры нарушения укладки и изменения фрагментации через 1 месяц при 40°C.

[00311] Состав соответствует DoE1 составу 10 и приведены реальные данные.

[00312] Сравнивая эти формулы с RMP, можно заключить, что поведение этих прототипов составов в ответ на тепловой стресс сравнимо с тем, что наблюдали для RMP.

Таблица 12: итог экспериментов с DoE1: рекомендованные композиции для второго скрининга

Форма	Соль (NaCl) мМ	Тип буфера (10 мМ)	pH	Стабилизатор
A	75	Ацетат	5,2	Дигидрат трегалозы (200 мМ)

[00313] Несколько неожиданно составы, содержащие дигидрат трегалозы в качестве единственного стабилизатора, работали чрезвычайно хорошо, в частности в отношении ингибирования фрагментации, ингибирования нарушения укладки и поддержания pH. Такие составы на основе трегалозы также демонстрировали хорошую эффективность в отношении агрегирования и преципитации. То, что трегалоза является таким сильным кандидатом в качестве стабилизатора, в частности, сама по себе, чрезвычайно перспективно ввиду ее антиоксидантных свойств, которые будут придавать дополнительную долгосрочную химическую стабильность (в частности в отношении окисления и/или фотоокисления) составам адалимумаба. Кроме того, то, что трегалозу можно применять отдельно и все еще демонстрировать превосходную эффективность, сочли особенно обнадеживающим и указывающим путь к менее сложным составам, в которых используют меньшее число компонентов, - это, в свою очередь, снижает производственные и накладные расходы, связанные получением релевантного лекарственного продукта адалимумаба. По существу, эти составы на основе трегалозы брали во второй раунд скрининговых экспериментов для того, чтобы тонко настроить составы.

Скрининговый эксперимент 2 - Анализ и скрининг составов из примера 2 против сравниваемых составов из примера 3

[00314] Идентифицирован прототип состава из предыдущего скрининга (таблица 12). Поскольку предыдущую стадию проводили без добавления поверхностно-активных веществ, вторая стадия направлена на скрининг серии уровней поверхностно-активного вещества полисорбат 80, введенного в состав, (диапазон от 0 до 1 мг/мл), чтобы оценивать, требуется ли добавление поверхностно-активного вещества для того, чтобы содействовать стабильности белка.

[00315] В таблице 3 (пример 2) резюмирована постановка этой второй стадии исследования и перечислены составы (DoE2 составы), которые исследовали в этом втором скрининговом исследовании.

[00316] Типично наблюдают, что поверхностно-активные вещества контрастируют вызванное механическим стрессом агрегирование и, следовательно, проводили тесты на стрессовое встряхивание с тем, чтобы оценивать, как полисорбат 80 влияет на стабильность белка и реакцию на встряхивание.

[00317] Как и в случае стадии 1, эталонные композиции, описанные в примере 3, также оценивали с тем, чтобы обеспечивать базовый уровень для разработки нового состава.

[00318] Полный список анализов, проведенных на этом блоке составов, представлен в таблице 13. В этом втором скрининге соответствующие составы подвергали стрессам трех различных типов, тепловому, механическому и световому.

Таблица 13: Панель аналитических тестов, которые проводили на DoE2 составах (стадия 2): условия теплового стресса 1 месяц при 40°C (A), стрессовое встряхивание при 200 об./мин (B) и воздействие света в соответствии с ICH Q1B (C).

A. Тепловой стресс при 40°C

Ускоренный (40°C)	Время стабильности (недели)
Способы	Тест	0	2 нед.	4 нед.
OD	Содержание	x	-	x
iCE280	Изоформы	x	x	x
SE-HPLC	Агрегаты	x	x	x
Bionalyzer	Чистота	x	x	x
pH	pH	x	x	x
Осмоляльность	Осмоляльность	x	-	-
Нефелометрия	Мутность	x	x	x
DSF	Температура нарушения укладки	x	-	-

B. Условия стрессового встряхивания

Стрессовое встряхивание (200 об./мин)	Время стабильности (часы)
Способы	Тест	0	24 h	48 h
OD	Содержание	x	-	-
SE-HPLC	Агрегаты	x	x	x
Bioanalyzer	Чистоты	x	x	x
pH	pH	x	x	x
Нефелометрия	Мутность	x	x	x

C. Воздействие света, 7-часовое воздействие при 765Вт/м² (ICH Q1B).

Воздействие света	Образец
Способы	Тест	Время 0	После воздействия
OD	Содержание	x	-
iCE280	Изоформы	x	x
SE-HPLC	Агрегаты	x	x
Bioanalyzer	Чистота	x	x
pH	pH	x	x
Нефелометрия	Мутность	x	x

[00319] Тепловые стрессовые тесты осуществляли посредством простого нагревания образца релевантных составов при предусмотренной температуре в течение предусмотренного количества времени (типично 2 недели или 4 недели/1 месяц).

[00320] Тесты на механический стресс осуществляли посредством простого механического встряхивания образца релевантных составов при комнатной температуре на 200 об./мин в течение предусмотренного периода времени (типично 24 часа или 48 часов).

[00321] Тесты на световой стресс осуществляли посредством простого воздействия на образец релевантных составов светом по 765Вт/м² (в соответствии с руководством ICH Q1B из European Medicines Agency в отношении тестирования фотостабильности новых активных веществ и медицинских продуктов) в течение 7 часов.

2.1 Осмоляльность

[00322] Осмоляльность при скрининге DoE2 составов приведена в таблице 14. Значения, находящиеся в диапазоне 378-401 мОсм/кг, вероятно завышены из-за присутствия дигидрата трегалозы, который может вести к некоторому повышению вязкости, влияющему на криоскопическую точку растворов и, таким образом, осмоляльность. Это подтверждали посредством измерений в отношении других тестовых составов, которые 3-кратно разводили в WFI перед тестом на осмоляльность для того, чтобы снижать вязкость: реальная осмоляльность всех этих формул составляет < 350 мОсм/кг.

Таблица 14: Осмоляльность при скрининге DoE2 составов (тестировали неразведенными)

№ формы	Концентрация соли (NaCl) (мМ)	Тип буфера (10 мМ)	pH	Стабилизатор	Концентрация поверхностно-активного вещества (полисорбат 80) (мг/мл)	Время 0
DoE2-1	50	Ацетат	5,2	Дигидрат трегалозы (200 мМ)	0	390
DoE2-2	50	Ацетат	5,2	Дигидрат трегалозы (200 мМ)	0,5	386
DoE2-3	50	Ацетат	5,2	Дигидрат трегалозы (200 мМ)	1	388

2.2 Содержание белка (OD)

[00323] Содержание белка во всех DoE2 составах в момент времени 0 было на одной линии с целевой концентрацией белка 50 мг/мл (таблица 15).

Таблица 15: Содержание белка (OD) при скрининге DoE2 составов (тестировали неразведенными)

№ формы	Концентрация соли (NaCl) (мМ)	Тип буфера (10 мМ)	pH	Стабилизатор	Концентрация поверхностно-активного вещества (полисорбат 80) (мг/мл)	Время 0
DoE2-1	50	Ацетат	5,2	Дигидрат трегалозы (200 мМ)	0	50,6
DoE2-2	50	Ацетат	5,2	Дигидрат трегалозы (200 мМ)	0,5	52,0
DoE2-3	50	Ацетат	5,2	Дигидрат трегалозы (200 мМ)	1	51,3

2.3 Агрегаты при тепловом стрессе (SE-HPLC)

[00324] Вариации суммарных агрегатов по SE-HPLC представлены на фиг. 5, где представлена гистограмма, которая показывает % агрегирования, как определяют с помощью SE-HPLC, DoE2 составов (из примера 2), наряду с эталонными стандартами (представляющими сравнительные составы ХУМИРА®), в произвольной начальной точке (красные столбцы, время=0) и после 2 недель (зеленые столбцы) и 4 недель (пурпурные столбцы) состава(составов), который нагревали до 40°C.

[00325] Минимальные изменения наблюдали для всех составов, где суммарное количество агрегатов после 1 месяца при 40°C составляло ниже 1%.

[00326] Эффективности DoE2 составов из скрининга сравнимы/слегка лучше, чем таковые у RMP материалов.

2.4 Фрагментация при тепловом стрессе (Bioanalyzer)

[00327] Вариации во фрагментах по Bioanalyzer представлены на фиг. 6. На фиг. 6 представлена гистограмма, которая показывает % фрагментации, как определяют с помощью Bioanalyzer, DoE2 составов (из примера 2), наряду с эталонными стандартами (представляющими сравнительные составы ХУМИРА®), в произвольной начальной точке (синие столбцы, время=0) и после 2 недель (красные столбцы) и 4 недель (зеленые столбцы) для состава(составов), который нагревали до 40°C.

[00328] В ацетате натрия присутствие полисорбата 80 по 1 мг/мл, похоже, слегка улучшает стабильность (cfr. DoE2-3 против DoE2-1 и DoE2-2), обеспечивая эффективности, сравнимые с тем, что наблюдают в RMP.

2.5 Профиль изоформ при тепловом стрессе (iCE280)

[00329] Изменения основного пика и кислотного кластера трех составов через 1 месяц при 40°C представлены на фиг. 7 и 8, соответственно

[00330] На фиг. 7 представлена гистограмма, которая показывает профиль изоформ основного пика, как определяют с помощью iCE280 анализа, DoE2 составов (из примера 2) в произвольной начальной точке (синие столбцы, время=0) и после 2 недель (красные столбцы) и 4 недель (зеленые столбцы) для состава(составов), который нагревали до 40°C.

[00331] На фиг. 8 представлена гистограмма, которая показывает профиль изоформ пика(пиков) кислотного кластера, как определяют с помощью iCE280 анализа, DoE2 составов (из примера 2) в произвольной начальной точке (синие столбцы, время=0) и после 2 недель (красные столбцы) и 4 недель (зеленые столбцы) для состава(составов), который нагревали до 40°C.

[00332] Эти результаты подтверждают уже отмеченные экспериментальные свидетельства с помощью iCE280 на прототипах составов (которые являются результатом первого скрининга).

[00333] Результаты, в отношении кислого кластера, стоят в одну линию с наблюдениями, выполненными для основного пика.

2.6 Скрининг pH при тепловом стрессе

[00334] Вариации pH в DoE2 составах (из примера 2) после периода времени, в течение которого составы нагревают при 40°C, представлен в таблице 16.

[00335] pH был полностью стабилен в течение тестового периода.

Таблица 16: Скрининг DoE2: pH (тепловой стресс при 40°C)

№ формы	Концентрация соли (NaCl) (мМ)	Тип буфера (10 мМ)	pH	Стабилизатор	Концентрация поверхностно-активного вещества (полисорбат 80) (мг/мл)	Время 0	2 недели (40°C)	4 недели (40°C)
DoE2-1	50	Ацетат	5,2	Дигидрат трегалозы (200 мМ)	0	5,2	5,2	5,2
DoE2-2	50	Ацетат	5,2	Дигидрат трегалозы (200 мМ)	0,5	5,2	5,3	5,3
DoE2-3	50	Ацетат	5,2	Дигидрат трегалозы (200 мМ)	1	5,2	5,3	5,3

2.7 Мутность при тепловом стрессе (нефелометрия)

[00336] На фиг. 9 представлена гистограмма, которая показывает мутность, как определяют с помощью нефелометрии, DoE2 составов (из примера 2) в произвольной начальной точке (синие столбцы, время=0) и после 2 недель (красные столбцы) и 4 недель (зеленые столбцы) для состава(составов), который нагревали до 40°C.

[00337] Мутность трех составов, время 0, находится в диапазоне типично опалесцирующих растворов (6-18 NTU). В отношении исходных DS материалов с типичной мутностью 19-52 NTU, DP растворы после асептического фильтрования значительно очищаются.

[00338] Важно, что значения мутности Хумира RMP обычно составляют приблизительно 10 NTU, на одной линии с формулами авторов изобретения.

2.8 Агрегаты при механическом стрессе (SE-HPLC)

[00339] На фиг. 10 представлена гистограмма, которая показывает % агрегирования, как определяют с помощью SE-HPLC, DoE2 составов (из примера 2) в произвольной начальной точке (синие столбцы, время=0) и после 24 часов (красные столбцы) и 48 часов (зеленые столбцы) для состава(составов), который механически перемешивали (встряхивали).

[00340] Вариации суммарных агрегатов по SE-HPLC представлены на фиг. 10.

[00341] Удивительно, что изменения не наблюдали (DoE2-1 и DoE2-3) или наблюдали максимальное изменение +0,1% (DoE2-2).

2.9 Фрагментация при механическом стрессе (Bioanalyzer)

[00342] На фиг. 11 представлена гистограмма, которая показывает % фрагментации, как определяют с помощью Bioanalyzer, DoE2 составов (из примера 2) в произвольной начальной точке (синие столбцы, время=0) и после 24 часов (красные столбцы) и 48 часов (зеленые столбцы) для состава(составов), который механически перемешивали (встряхивали).

[00343] Вариации во фрагментах по Bioanalyzer представлены на фиг. 11. Наблюдали минимальные изменения, все они представляют собой зарегистрированные значения, которые равны или ниже чем 0,5%.

[00344] После 48 часов встряхивания при комнатной температуре все образцы показывали фрагментацию в диапазоне 0,2-0,4%. При механическом встряхивании не отмечено никакой тенденции в направлении увеличения фрагментации.

2.10 Скрининг pH при механическом стрессе

[00345] Вариации в pH у DoE2 составов (из примера 2) после периода времени, в течение которого составы механически перемешивали (встряхивали), представлены в таблице 17. Изменения не наблюдали.

Таблица 17: Скрининг DoE2: pH (механическое встряхивание)

№ формы	Концентрация соли (NaCl) (мМ)	Тип буфера (10 мМ)	pH	Стабилизатор	Концентрация поверхностно-активного вещества (полисорбат 80) (мг/мл)	Время 0	24 часа	48 часов
DoE2-1	50	Ацетат	5,2	Дигидрат трегалозы (200 мМ)	0	5,2	5,2	5,2
DoE2-2	50	Ацетат	5,2	Дигидрат трегалозы (200 мМ)	0,5	5,2	5,3	5,3
DoE2-3	50	Ацетат	5,2	Дигидрат трегалозы (200 мМ)	1	5,2	5,3	5,3

2.11 Мутность при механическом стрессе (нефелометрия)

[00346] На фиг. 12 представлена гистограмма, которая показывает мутность, как определяют с помощью нефелометрии, DoE2 составов (из примера 2) в произвольной начальной точке (синие столбцы, время=0) и после 24 часов (красные столбцы) и 48 часов (зеленые столбцы) для состава(составов), который механически перемешивали (встряхивали). Изменения не наблюдали.

2.12 Агрегаты при световом стрессе (SE-HPLC)

[00347] На фиг. 13 представлена гистограмма, которая показывает % агрегирования, как определяют с помощью SE-HPLC, DoE2 составов (из примера 2), наряду с эталонными стандартами (представляющими сравнительные составы ХУМИРА®), перед воздействием света (синие столбцы, время=0) и после 7-часового воздействия света при 765 Вт/м² (красные столбцы).

[00348] Также выполняли сравнение с образцами Хумира (из US и EU), которые обрабатывали при тех же условиях. В RMP агрегирование возрастает вплоть до 9-15% при воздействии света (в момент времени 0 агрегаты составляют ниже 1%). Все DoE2 составы демонстрируют более низкое или сравнимое повышение и, следовательно, более хорошую/схожую устойчивость к тепловому стрессу. Более подробно:

- составы в ацетатном буфере: 4,3 -> 6,8% суммарных агрегатов при воздействии света.

2.13 Фрагментация при световом стрессе (Bioanalyzer)

[00349] На фиг. 14 представлена гистограмма, которая показывает % фрагментации, как определяют с помощью Bioanalyzer, DoE2 составов (из примера 2), наряду с эталонными стандартами (представляющими сравнительные составы ХУМИРА®), перед воздействием света (синие столбцы, время=0) и после 7-часового воздействия света при 765 Вт/м² (красные столбцы).

[00350] Отмечены минимальные увеличения (+0,3% по большей мере, после воздействия). Все количества фрагментации значительно ниже 1% после 7-часового воздействия (фиг. 14).

2.14 Профиль изоформ при световом стрессе (iCE2280)

[00351] На фиг. 15 представлена гистограмма, которая показывает профиль изоформ основного пика, как определяют с помощью iCE280 анализа, DoE2 составов (из примера 2), наряду с эталонными стандартами (представляющими сравнительные составы ХУМИРА®), перед воздействием света (синие столбцы, время=0) и после 7-часового воздействия света при 765 Вт/м² (красные столбцы).

[00352] На фиг. 16 представлена гистограмма, которая показывает профиль изоформ пика(пиков) кислотного кластера, как определяют с помощью iCE280 анализа, DoE2 составов (из примера 2), наряду с эталонными стандартами (представляющими сравнительные составы ХУМИРА®), перед воздействием света (синие столбцы, время=0) и после 7-часового воздействия света при 765 Вт/м² (красные столбцы).

[00353] В RMP Хумира воздействие света определяет достоверные эффекты: наблюдали наиболее релевантно снижение относительного содержания основного пика (приблизительно -9%) и сопутствующее увеличение в кислом кластере (вплоть до +15%), связанное с феноменами фотоокисления.

[00354] Ацетатные формулы могут значительно улучшать устойчивость белка к феноменам разрушения: снижается относительное содержание основного пика приблизительно -3,5% или ниже, увеличивается кислый кластер, оцениваемый максимум +4%.

2.15 Мутность при световом стрессе (нефелометрия)

[00355] На фиг. 17 представлена гистограмма, которая показывает мутность, как определяют с помощью нефелометрии, DoE2 составов (из примера 2) перед воздействием света (синие столбцы, время=0) и после 7-часового воздействия света при 765 Вт/м² (красные столбцы). Изменения по существу не наблюдали.

2.16 Скрининг pH при световом стрессе

[00356] Вариации pH для DoE2 составов (из примера 2) после периода времени, в течение которого на составы воздействовали в течение 7 часов светом при 765 Вт/м², показаны в таблице 18. Изменения не наблюдали.

Таблица 18: Скрининг DoE2: pH (воздействие света)

№ формы	Концентрация соли (NaCl) (мМ)	Тип буфера (10 мМ)	pH	Стабилизатор	Концентрация поверхностно-активного вещества (полисорбат 80) (мг/мл)	Время 0	После воздействия
DoE2-1	50	Ацетат	5,2	Дигидрат трегалозы (200 мМ)	0	5,2	5,2
DoE2-2	50	Ацетат	5,2	Дигидрат трегалозы (200 мМ)	0,5	5,2	5,3
DoE2-3	50	Ацетат	5,2	Дигидрат трегалозы (200 мМ)	1	5,2	5,3

2.17 Эффект поверхностно-активного вещества, оказываемый на циклы замораживания-оттаивания

[00357] Профили изоформ, агрегаты и невидимые частицы в трех DoE2 составах определяли до и после пяти циклов замораживания-оттаивания (-80°C -> комнатная температура) для того, чтобы оценивать, оказывает ли поверхностно-активное вещество какое-либо влияние.

[00358] На фиг. 18 представлена гистограмма, которая показывает профиль изоформ основного пика, как определяют с помощью iCE280 анализа, DoE2 составов (из примера 2) до (синие столбцы, время=0) и после м²(красные столбцы) пяти циклов замораживания-оттаивания (-80°C -> комнатная температура).

[00359] На фиг. 19 представлена гистограмма, которая показывает профиль изоформ пика(пиков) кислотного кластера, как определяют с помощью iCE280 анализа, DoE2 составов (из примера 2) до (синие столбцы, время=0) и после м²(красные столбцы) пяти циклов замораживания-оттаивания (-80°C -> комнатная температура).

[00360] На фиг. 20 представлена гистограмма, которая показывает % агрегирования, как определяют с помощью SE-HPLC, DoE2 составов (из примера 2), наряду с эталонными стандартами (представляющими сравнительные составы ХУМИРА®) до (синие столбцы, время=0) и после м²(красные столбцы) пяти циклов замораживания-оттаивания (-80°C -> комнатная температура).

[00361] На фиг. 21 представлена гистограмма, которая показывает численную концентрацию (№/мг) невидимых частиц с размером частицы меньше чем или равным 10 мкм, как определяют с помощью анализа подсчета невидимых частиц, DoE2 составов (из примера 2) до (синие столбцы, время=0) и после м²(красные столбцы) пяти циклов замораживания-оттаивания (-80°C -> комнатная температура).

[00362] На фиг. 22 представлена гистограмма, которая показывает численную концентрацию (№/мг) невидимых частиц с размером частицы меньше чем или равным 25 мкм, как определяют с помощью анализа подсчета невидимых частиц, DoE2 составов (из примера 2) до (синие столбцы, время=0) и после м²(красные столбцы) пяти циклов замораживания-оттаивания (-80°C -> комнатная температура).

[00363] Не наблюдали изменение в изоформах и агрегатах (фиг. 18-20) после замораживания-оттаивания, хотя отмечали минимальные, но критические изменения (фиг. 21-22) в невидимых частицах и обнаружили, что они не связаны с присутствием поверхностно-активного вещества.

Заключение о скрининговом эксперименте 2

[00364] На основании собранных данных, релевантных для теплового, механического и светового стресса, можно сделать следующее заключение.

Составы в 10 мМ буфере из ацетата натрия/уксусной кислоты при pH 5,2 (DoE2-1, DoE2-2, DoE2-3):

- при тепловом стрессе отмечали эффективности, сравнимые или более хорошие (более низкое увеличение агрегирования), чем Хумира. Полезное влияние происходит из более высоких концентраций полисорбата 80.

- Не меняются показатели качества при механическом встряхивании.

- Усовершенствованные эффективности относительно Хумира при воздействии непрерывным (7 часов) облучением.

[00365] На основании скрининговой работы, которую проводили на различных составах, различающихся буфером/pH, стабилизатором, количеством регулирующего изотоничность средства (NaCl) и уровнем поверхностно-активного вещества (полисорбат 80), лучшая композиция, демонстрирующая сравнимые или даже усовершенствованные характеристики относительно Хумира при различных стрессовых условиях (тепловые, механические, световые) идентифицирована как следующее:

Ингредиент	Количество (мг/мл)
Адалимумаб	50
Ледяная уксусная кислота 100%	0,60 *
Дигидрат трегалозы	75,67 **
полисорбат 80	1,00
Хлорид натрия	2,92 ***
WFI и гидроксид натрия	q.b., чтобы корректировать pH до 5,2

* соответствует 10 мМ буферу из ацетата натрия/уксусной кислоты; ** соответствует 200 мМ; *** соответствует 50 мМ

[00366] Такие составы можно без труда помещать внутрь предварительно заполняемых стеклянных шприцов с иглами 29G ½ʺ).

СОКРАЩЕНИЯ

DoE Постановка эксперимента

DP Лекарственный продукт

DS Лекарственное вещество

DSF Дифференциальная сканирующая флуориметрия

OD Оптическая плотность

PES Полиэфирсульфон

об./мин обороты в минуту

RT Комнатная температура

SE-HPLC эксклюзионная высокоэффективная жидкостная хроматография

SMI Краткие производственные инструкции

SOP Стандартная рабочая процедура

WI Рабочая инструкция

1. Водная фармацевтическая композиция, содержащая:

(a) 45-55 мг/мл адалимумаба;

(b) 2-50 мМ ацетатной буферной системы;

(c) 190-300 мМ сахара-стабилизатора, представляющего собой невосстанавливающий дисахарид, выбранный из группы, состоящей из трегалозы и сахарозы; и

(d) 0,9-1,1 мг/мл полисорбата 80;

где композиция:

имеет pH между pH 5,1 и 5,3;

не содержит аргинин;

не содержит фосфатные буферные средства;

не содержит аминокислоты;

не содержит поверхностно-активные вещества, за исключением полисорбата 80; и

содержит по большей мере один сахар-стабилизатор.

2. Водная фармацевтическая композиция по п. 1, в которой осмоляльность композиции составляет между 240 и 340 мОсм/кг.

3. Водная фармацевтическая композиция по п. 1, в которой сахар-стабилизатор представляет собой сахарозу.

4. Водная фармацевтическая композиция по п. 1, в которой сахар-стабилизатор представляет собой трегалозу.

5. Водная фармацевтическая композиция по п. 1, где композиция содержит трегалозу в качестве сахара-стабилизатора в концентрации 190-250 мМ.

6. Водная фармацевтическая композиция по п. 1, где композиция содержит сахарозу в качестве сахара-стабилизатора в концентрации 250-300 мМ.

7. Водная фармацевтическая композиция по п. 1 или 5, где композиция содержит ацетатную буферную систему в концентрации 14-50 мМ.

8. Водная фармацевтическая композиция по п. 1 или 6, где композиция содержит ацетатную буферную систему в концентрации от 5 до 14 мМ.

9. Водная фармацевтическая композиция по п. 1, где композиция состоит из:

(a) 45-55 мг/мл адалимумаба;

(b) 2-50 мМ ацетатной буферной системы;

(c) 190-300 мМ сахара-стабилизатора, представляющего собой невосстанавливающий дисахарид, выбранный из группы, состоящей из трегалозы и сахарозы;

(d) 0,9-1,1 мг/мл полисорбата 80; и

(e) воды;

где композиция имеет pH между pH 5,1 и 5,3.

10. Водная фармацевтическая композиция по п. 1, где композиция состоит из:

(a) 45-55 мг/мл адалимумаба;

(b) 2-50 мМ ацетатной буферной системы;

(d) 0,9-1,1 мг/мл полисорбата 80; и

(e) воды;

где композиция имеет pH между pH 5,1 и 5,3 и осмоляльность между 240 и 340 мОсм/кг.

11. Водная фармацевтическая композиция по п. 1, где композиция состоит из:

(a) 45-55 мг/мл адалимумаба;

(b) 2-50 мМ ацетатной буферной системы;

(d) 0,9-1,1 мг/мл полисорбата 80; и

(e) воды;

где композиция имеет pH между pH 5,1 и 5,3.

12. Водная фармацевтическая композиция по п. 1, где композиция состоит из:

(a) 45-55 мг/мл адалимумаба;

(b) 5-14 мМ ацетатной буферной системы;

(d) 0,9-1,1 мг/мл полисорбата 80; и

(e) воды;

где композиция имеет pH между pH 5,1 и 5,3.

13. Водная фармацевтическая композиция по п. 1, где композиция состоит из:

(a) адалимумаба;

(b) ацетатной буферной системы;

(d) полисорбата 80; и

(e) воды;

где композиция имеет pH между pH 5,1 и 5,3.

14. Предварительно заполняемый шприц или ручка, содержащий(ая) водную фармацевтическую композицию по п. 1.

15. Водная фармацевтическая композиция по п. 1 для применения в лечении ревматоидного артрита, псориатического артрита, анкилозирующего спондилита, болезни Крона, язвенного колита, хронического псориаза от умеренного до тяжелого и/или ювенильного идиопатического артрита.

16. Водная фармацевтическая композиция по п. 1 для применения в лечении псориатического артрита, анкилозирующего спондилита, болезни Крона, язвенного колита, хронического псориаза от умеренного до тяжелого и/или ювенильного идиопатического артрита.

Похожие патенты: