Способ расчета риска развития прогрессии плоскоклеточного рака гортани

Авторы патента:

Гукасян Ирина Михаеловна (RU)

Каганов Олег Игоревич (RU)

Яннаева Юлия Геннадьевна (RU)

Каганова Мария Александровна (RU)

Орлов Андрей Евгеньевич (RU)

Махонин Александр Александрович (RU)

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

G01N33/00 - Исследование или анализ материалов особыми способами, не отнесенными к предыдущим группам

Владельцы патента RU 2732976:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к медицине, в частности к онкологии, может быть использовано для оценки риска развития прогрессии заболевания при лечении пациентов с плоскоклеточным раком гортани. Способ оценки риска развития прогрессии плоскоклеточного рака гортани включает в себя оценку экспрессии белка р53 и пролиферативного маркера Ki67 в биопсийном материале, определение степени дифференцировки опухоли, уровня антигена плоскоклеточного рака SCC и вычисление риска прогрессии заболевания Р по формуле: Р=1/1+e^{-(B1×X1+B2×X2+B3×X3+B4×X4),}где В1 - коэффициент регрессии опухоли; В2 - коэффициент регрессии белка р53; B3 - коэффициент регрессии антигена плоскоклеточного рака SCC; B4 - коэффициент регрессии антигена Ki67; X1 - числовое значение, соответствующее степени дифференцировки опухоли; Х2 - значение, равное 0 при отсутствии экспрессии белка р53 и равное 1 при его наличии; Х3 - значение, равное 0 при нормальном уровне SCC в крови и равное 1 при его повышении; Х4 - экспрессия антигена Ki67 (%); при значении Р меньше или равном 0,5 риск прогрессии заболевания оценивают как низкий; при значении Р больше 0,5 – высокий. Изобретение позволяет оценить риск развития прогрессии плоскоклеточного рака гортани. 4 пр.

Согласно клиническим рекомендациям Ассоциации онкологов России, выделены неблагоприятные гистологические признаки риска развития прогрессии плоскоклеточного рака гортани: наличие периневральной инвазии, опухолевых эмболов в сосудах (1).

Данный метод не дает полной оценки риска развития рецидива, отсутствует учет данных иммунологических маркеров крови, не учитывается наличие генных мутаций, степень дифференцировки опухоли.

Известен способ исследования биопсийного материала при плоскоклеточном раке гортани и определении прогностически значимых маркеров пролиферативной активности: экспрессии белка р53 и пролиферативного маркера Ki67 (2,3).

Метод учитывает значимые прогностические маркеры для плоскоклеточного рака гортани, но не дает полной оценки риска развития рецидива. Данный способ взят за прототип.

Целью изобретения является создание способа оценки риска развития прогрессии плоскоклеточного рака гортани.

Эта цель достигается тем, что дополнительно определяют степень дифференцировки опухоли, уровень антигена плоскоклеточного рака SCC и вычисляют риск прогрессии заболевания Р по формуле:

P=1/1+e^{-(B1×X1+B2×X2+B3×X3+B4×X4)}, где

В1 - коэффициент регрессии опухоли, равный 0 при низкодифференцированной опухоли; -4,59 при умеренно дифференцированной опухоли; -3,18 при высокодифференцированной опухоли;

B2 - постоянный коэффициент регрессии белка р53, равный 4,47;

B3 - постоянный коэффициент регрессии антигена плоскоклеточного рака SCC, равный 3,57;

B4 - постоянный коэффициент регрессии антигена Ki67, равный 0,15;

X1 - числовое значение, соответствующее степени дифференцировки опухоли, равное 0 при низкодифференцированной опухоли, 1 при умеренно дифференцированной опухоли, 2 при высокодифференцированной опухоли; Х2 - значение, равное 0 при отсутствии экспрессии белка р53 и равное 1 при его наличии; Х3 - значение, равное 0 при нормальном уровне SCC в крови и равное 1 при его повышении; Х4 - экспрессия антигена Ki67 (%); при значении Р меньше или равном 0,5 риск профессии заболевания оценивают как низкий; при значении Р больше 0,5 - высокий.

Для реализации способа расчета риска развития прогрессии плоскоклеточного рака гортани нами была создана математическая модель. В модель в качестве предикторов изначально были включены: возраст, пол пациентов, стадия заболевания, степень дифференцировки опухоли, наличие химио-лучевой терапии в послеоперационном периоде, экспрессия белка р53, уровень антигена плоскоклеточного рака SCC, экспрессия маркера пролиферативной активности опухолевой клетки (антиген Ki67). Математическую модель строили в модуле логистической регрессии по алгоритму Вальда, с пошаговым исключением в программе SPSS. В результате пошагового исключения на 4 шаге в модели остались 4 предиктора: степень дифференцировки опухоли, экспрессия белка р53, уровень антигена плоскоклеточного рака SCC, экспрессия антигена Ki67. При помощи компьютерной программы SPSS рассчитывали значения чувствительности (se) и специфичности (sp) для каждого предсказанного значения (Р), которое программой принималось за порог отсечения. Была рассчитана чуствительность (Se), специфичность (Sp) и точность данной математической модели при точке отсечения 0,5. При точке отсечения 0,5 для модели в целом были правильно распознаны 97,1% от всех обследованных - точность, и 89,7% тех, у кого в течение года действительно возникла прогрессия - чувствительность.

Предлагаемый способ позволяет оценить риск развития прогрессии плоскоклеточного рака гортани.

Способ осуществляется следующим образом:

Пациенту после операции по поводу плоскоклеточного рака гортани определяют степень дифференцировки опухоли по данным послеоперационного материала (гистологическое заключение), экспрессию белка р53 и экспрессию маркера пролиферативной активности опухолевой клетки Ki67 по данным биопсийного материала, уровень антигена плоскоклеточного рака SCC и вычисляют риск прогрессии заболевания Р по формуле:

P=1/1+e^{-(B1×X1+B2×X2+B3×X3+B4×X4)}, где

B1 - коэффициент регрессии опухоли, равный 0 при низкодифференцированной опухоли; -4,59 при умеренно дифференцированной опухоли; -3,18 при высокодифференцированной опухоли;

B2 - постоянный коэффициент регрессии белка р53, равный 4,47;

B3 - постоянный коэффициент регрессии антигена плоскоклеточного рака SCC, равный 3,57;

B4 - постоянный коэффициент регрессии антигена Ki67, равный 0,15;

X1 - числовое значение, соответствующее степени дифференцировки опухоли, равное 0 при низкодифференцированной опухоли, 1 при умеренно дифференцированной опухоли, 2 при высокодифференцированной опухоли; Х2 - значение, равное 0 при отсутствии экспрессии белка р53 и равное 1 при его наличии; Х3 - значение, равное 0 при нормальном уровне SCC в крови и равное 1 при его повышении; Х4 - экспрессия антигена Ki67 (%); при значении Р меньше или равном 0,5 риск прогрессии заболевания оценивают как низкий; при значении Р больше 0,5 - высокий. Заявленное изобретение поясняется следующими клиническими примерами.

Пример 1: Пациент В. Диагноз: Рак гортани CT3N1M0G3 3ст. 2кл.гр. Проведено хирургическое лечение по поводу плоскоклеточного рака гортани в объеме ларингэктомии с шейной лимфодиссекией и резекцией щитовидной железы на стороне поражения. Выполнено гистологическое исследование хирургически удаленного опухолевого препарата, определена степень дифференцировки по данным послеоперационного материала, исследована экспрессия белка р53 и экспрессия маркера пролиферативной активности опухолевой клетки Ki67, уровень антигена плоскоклеточного рака SCC. Получены следующие результаты: низкодифференцированная опухоль (X1=0); р53 - экспрессия отсутствует (Х2=0); SCC- повышенный (Х3=1); Ki67 56% (Х4=56); коэффициент регрессии низкодифференцированной опухоли (В1=0); коэффициент регрессии белка р53 (В2=4,47); коэффициент регрессии антигена плоскоклеточного рака SCC (В3=3,57); коэффициент регрессии антигена Ki67 (В4=0,15), риск развития прогрессии составит:

Р=0,99.

Р>0,5 следовательно, риск прогрессии заболевания высокий.

В послеоперационном периоде рекомендовано динамическое наблюдение. При контрольном обследовании через 9 месяцев выявленна прогрессия заболевания (метастаз в лимфатические узлы шеи).

Пример 2: Пациент Д. Диагноз: Рак гортани cT3N0M0 G1 3ст. 2кл.гр. Проведено хирургическое лечение по поводу плоскоклеточного рака гортани в объеме ларингэктомии с односторонней шейной лимфодиссекией и резекцией щитовидной железы на стороне поражения. Выполнено гистологическое исследование хирургически удаленного опухолевого препарата, определена степень дифференцировки по данным послеоперационного материала, исследована экспрессия белка р53 и экспрессия маркера пролиферативной активности опухолевой клетки Ki67, уровень антигена плоскоклеточного рака SCC.

Получены следующие результаты: высокодифференцированная опухоль (X1=2); р53 - экспрессия отсутствует (Х2=0); SCC - нормальный уровень (Х3=0); Ki67 56% (Х4=56); коэффициент регрессии высокодифференцированной опухоли (В1=-3,18); коэффициент регрессии белка р53 (В2=4,47); коэффициент регрессии антигена плоскоклеточного рака SCC (В3=3,57); коэффициент регрессии антигена Ki67 (В4=0,15), вероятность развития прогрессии составит: Р=0,19.

Р<0,5 следовательно, риск развития прогрессии заболевания низкий.

В послеоперационном периоде рекомендовано динамическое наблюдение.

В течение 3х лет рецидива заболевания не было.

Пример 3: Пациент Г. Диагноз: Рак гортани CT3N1M0G2 3ст. 2кл.гр. Проведено хирургическое лечение по поводу плоскоклеточного рака гортани в объеме ларингэктомии с шейной лимфодиссекией и резекцией щитовидной железы на стороне поражения. Выполнено гистологическое исследование хирургически удаленного опухолевого препарата, определена степень дифференцировки по данным послеоперационного материала, исследована экспрессия белка р53 и экспрессия онтигена Ki67, уровень антигена плоскоклеточного рака SCC.

Получены следующие результаты: умереннодифференцированная опухоль (X1=1); р53 - наличие экспрессии (Х2=1); SCC - повышенный (Х3=1); Ki67 56% (Х4=56); коэффициент регрессии умереннодифференцированной опухоли (В1=-4,59); коэффициент регрессии белка р53 (В2=4,47); коэффициент регрессии антигена плоскоклеточного рака SCC (В3=3,57); коэффициент регрессии антигена Ki67 (В4=0,15), вероятность развития прогрессии составит: Р=1,2.

Р>0,5 следовательно, риск развития прогрессии заболевания высокий. В послеоперационном периоде рекомендовано динамическое наблюдение. При контрольном обследовании через 6 месяцев выявленна прогрессия заболевания (метастаз в лимфатические узлы шеи).

Пример 4: Пациент Е. Диагноз: Рак гортани cT3N0M0 G1 3ст. 2кл.гр. Проведено хирургическое лечение по поводу плоскоклеточного рака гортани в объеме ларингэктомии с односторонней шейной лимфодиссекией и резекцией щитовидной железы на стороне поражения. Выполнено гистологическое исследование хирургически удаленного опухолевого препарата, определена степень дифференцировки по данным послеоперационного материала, исследована экспрессия белка р53 и экспрессия антигена Ki67, уровень антигена плоскоклеточного рака SCC. Получены следующие результаты: высокодифференцированная опухоль (X1=2); р53 - экспрессия отсутствует (Х2=0); SCC - нормальный уровень (Х3=0); Ki67 38% (Х4=38); коэффициент регрессии высокодифференцированной опухоли (В1=-3,18); коэффициент регрессии белка р53 (В2=4,47); коэффициент регрессии антигена плоскоклеточного рака SCC (В3=3,57); коэффициент регрессии антигена Ki67 (В4=0,15), вероятность развития прогрессии составит: Р=0,12.

Р<0,5 следовательно, риск развития прогрессии заболевания низкий.

В послеоперационном периоде рекомендовано динамическое наблюдение.

В течение 3х лет рецидива не было.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет оценить риск развития прогрессии заболевания у больных с плоскоклеточным раком гортани. Изобретение целесообразно использовать в клинической практике лечения плоскоклеточного рака гортани для выработки тактики лечения в послеоперационном периоде.

Источники информации

1. Клинические рекомендации Ассоциации онкологов России. «Рак гортани» 2018. С 12-13

2. Н.А. Горбань, А.Г. Кудайберегенова, В.А. Панкратов. «Прогностическое значение маркеров пролиферативной активности и регуляции апоптоза при плоскоклеточном раке гортани». Архив патологии, 1, 2013. С. 3-9

3. О.Б. Абдурахманов. «Изучение прогностической значимости маркера апоптоза гена р53 и васкулоэндотелиального фактора роста при оценке клинического течения ангиофибромы носоглотки». Опухоли головы и шеи. 2015. Том 5. №2. С. 25-29

Способ оценки риска развития прогрессии плоскоклеточного рака гортани, включающий в себя оценку экспрессии белка р53 и пролиферативного маркера Ki67 в биопсийном материале, отличающийся тем, что дополнительно определяют степень дифференцировки опухоли, уровень антигена плоскоклеточного рака SCC и вычисляют риск прогрессии заболевания Р по формуле:

P=1/1+e^{-(В1×Х1+В2×Х2+В3×Х3+В4×X4)},

где В1 - коэффициент регрессии опухоли, равный 0 при низкодифференцированной опухоли; -4,59 при умеренно дифференцированной опухоли; -3,18 при высокодифференцированной опухоли; В2 - постоянный коэффициент регрессии белка р53, равный 4,47; В3 - постоянный коэффициент регрессии антигена плоскоклеточного рака SCC, равный 3,57; В4 - постоянный коэффициент регрессии антигена Ki67, равный 0,15; X1 - числовое значение, соответствующее степени дифференцировки опухоли, равное 0 при низкодифференцированной опухоли, 1 при умеренно дифференцированной опухоли, 2 при высокодифференцированной опухоли; Х2 - значение, равное 0 при отсутствии экспрессии белка р53 и равное 1 при его наличии; Х3 - значение, равное 0 при нормальном уровне SCC в крови и равное 1 при его повышении; Х4 - экспрессия антигена Ki67 (%); при значении Р меньше или равном 0,5 риск прогрессии заболевания оценивают как низкий; при значении Р больше 0,5 - высокий.

Изобретение относится к области медицины. Способ иммунофлуоресцентной детекции локальной распространенности опухолевого процесса при немелкоклеточном раке легкого (НМРЛ) включает приготовление одноклеточной суспензии из образца ткани НМРЛ, фиксацию в 4% растворе формалина, отмывку с помощью фосфатного буфера рН=7,4, инкубацию с красителем ДНК Hoechst 33258, двойную отмывку от антител с помощью 0,05% раствора БСА в фосфатном буфере рН=7,4, проведение анализа флуоресценции на проточном цитофлуориметре, при этом инкубацию проводят одновременно с двумя типами первичных антител – кроличьи антитела к TUBB3 и мышиные антитела к цитокератинам, при этом первичные антитела к TUBB3 и цитокератину добавляют одновременно и инкубируют в течение ночи при температуре +4°С, и одновременно с двумя типами вторичных антител - антикроличьи антитела, конъюгированные с красителем DyLight 650, и антимышиные антитела, конъюгированные с DyLight 488, строят точечные гистограммы, сравнивают уровни экспрессии TUBB3 в эпителиальных клетках опухоли и окружающей нормальной ткани, где повышенная экспрессия TUBB3 характеризует локальную распространенность опухолевого процесса при НМРЛ.

Способ прогнозирования высокого риска рецидива у пациенток с ib стадией рака шейки матки, получивших комбинированное лечение // 2732769

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для прогнозирования высокого риска рецидива у пациенток с IB стадией рака шейки матки, получивших комбинированное лечение.

Способ коррекции реперфузионно-ишемического повреждения при резекции почки по поводу локализованного рака в условиях тепловой ишемии // 2732765

Изобретение относится к области медицины, в частности к онкологии, а именно к коррекции реперфузионно-ишемического повреждения при резекции почки по поводу локализованного рака в условиях тепловой ишемии.

Способ оценки метастатического поражения сигнального лимфатического узла при ранних формах плоскоклеточного рака полости рта // 2732700

Изобретение относится к способам патоморфологической оценки метастатического поражения. Способ оценки метастатического поражения сигнального лимфатического узла при ранних формах плоскоклеточного рака полости рта включает выполнение серийно-ступенчатых срезов сигнального лимфатического узла с последующим иммуногистохимическим исследованием.

Способ диагностики локального иммунодефицита слизистых оболочек // 2732681

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для диагностики локального иммунодефицита слизистых оболочек. Способ включает определение адгезии микроорганизмов на эпителиальных клетках в мазках или соскобах со слизистых оболочек.

Ноотропная композиция на основе полипептидных комплексов, выделенных из глиальных прогениторных клеток в условиях теплового шока, и способ её получения // 2732599

Изобретение относится к получению ноотропной композиции на основе полипептидных комплексов, выделенных из глиальных прогениторных клеток в условиях теплового шока.

Способ и устройство для измерения продолжительности жизни эритроцитов // 2732573

Группа изобретений относится к технической области медицинской диагностики. Раскрыты способы (варианты) измерения продолжительности жизни эритроцитов, включающие управление воздушным насосом и цилиндропоршневым узлом, обеспечивающие подачу газа легочных альвеол, фонового газа, очищающего газа в камеры для СО и СО2, определение концентрации СО и СО2 в газе легочных альвеол, коррекцию влияния воздуха, подмешанного во время отбора пробы газа легочных альвеол, на концентрацию эндогенного CO в газе легочных альвеол в соответствии с измеренной концентрацией CO2 и вычисление продолжительности жизни эритроцитов на основе точного значения концентрации эндогенного CO в газе легочных альвеол.

Способ экспресс-диагностики escherichia coli и бактерий группы кишечной палочки в ротовой полости // 2732412

Изобретение относится к способу экспресс-диагностики Escherichia coli и бактерий группы кишечной палочки (БГКП) в ротовой полости. Способ включает забор биологического материала из ротовой полости пациента для культивирования Е.

Способ определения концентрации клеток в суспензии микроводорослей // 2732203

Изобретение относится к области анализа материалов путем определения их физических свойств с помощью оптических средств. Способ определения концентрации клеток в суспензии микроводорослей включает пропускание через слой суспензии светового потока с длиной волны от 510 до 580 нм, фиксацию величины светового потока после прохождения этого слоя и определение концентрации клеток в суспензии микроводорослей по калибровочной кривой.

Способ определения концентрации клеток в суспензии микроводорослей // 2732203

Способ дифференциальной диагностики заболеваний поджелудочной железы // 2732974

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, хирургии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики заболеваний поджелудочной железы. На этапе обследования в крови больного с заболеванием поджелудочной железы методом иммунофенотипирования определяют содержание дегидроэпиандростерона-сульфата - ДГЭА-S и 17-оксипрогестерона - 17-ОНР.