Способы лечения солидных опухолей

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии и может быть использовано при лечении солидной опухоли. Способ включает введение субъекту с солидной опухолью эффективного количества композиции, содержащей частицы таксана. При этом композицию вводят напрямую в опухоль путём инъекции, где частицы таксана содержат по меньшей мере 95% паклитаксела или доцетаксела или их фармацевтически приемлемых солей, при этом частицы таксана имеют удельную площадь поверхности (УПП) от10 м²/г до 50 м²/г, при этом частицы таксана имеют среднюю насыпную плотность от 0,050±0,0025 г/см³ до 0,12±0,006 г/см³ и при этом частицы таксана включают агломерированные частицы таксана и неагломерированные частицы таксана. Использование изобретения позволяет достичь подавления роста опухоли за счет накопления частиц в опухоли в значительном количестве в течение длительного периода времени при незначительном их выделении в нежелательные участки, увеличения скорости растворения частиц и более быстрого высвобождения из них химиотерапевтического агента. 18 з.п. ф-лы, 14 табл., 10 пр., 4 ил.

 

Перекрестная ссылка на родственные заявки

По настоящей заявке испрашен приоритет на основании предварительных заявок на патент США №62/318014, поданной 4 апреля 2016 года, и 62/378543, поданной 23 августа 2016 года, содержание которых включено в настоящую заявку во всей полноте посредством ссылок.

Уровень техники

Ежегодно по всему миру миллионам пациентов ставят диагноз рак, более того, каждый год миллионы людей умирают от рака или осложнений, связанных с раком. Риск рака значительно увеличивается с возрастом, многие раковые заболевания распространены в развитых странах, и заболеваемость раком в странах развитого мира увеличивается с ростом средней продолжительности жизни. Существующие способы терапии включают системное лечение, такое как внутривенная (в.в.) инъекция инфузионных препаратов химиотерапевтических агентов. Указанные способы терапии, тем не менее, в общем случае, вызывают значительные нежелательные побочные эффекты у пациента в связи с системной токсичностью. Предпринимались попытки вводить химиотерапевтические агенты в опухоли напрямую путем инъекции, тем не менее, химиотерапевтические агенты часто «вытекают» из опухоли, особенно, если химиотерапевтические агенты присутствуют в солюбилизированной форме. Таким образом, необходимы усовершенствованные способы лечения пациентов, имеющих рак.

Краткое описание изобретения

Согласно одному из аспектов изобретения описан способ лечения солидной опухоли, включающий введение субъекту с солидной опухолью эффективного количества композиции, содержащей частицы химиотерапевтического агента, для лечения опухоли, где композицию вводят в опухоль напрямую путем инъекции.

Согласно другому аспекту изобретения описан способ подавления метастазов опухоли, включающий введение субъекту с опухолью эффективного количества композиции, содержащей частицы химиотерапевтического агента, для подавления метастазов опухоли.

Согласно другому аспекту изобретения описана суспензия, содержащая частицы химиотерапевтического агента, фармацевтически приемлемый носитель и полисорбат.

Согласно другому аспекту изобретения описан набор, содержащий первую емкость, содержащую частицы химиотерапевтического агента; вторую емкость, содержащую полисорбат; и инструкции по перерастворению частиц химиотерапевтического агента в суспензии и по разбавлению суспензии раствором разбавителя перед введением пациенту.

В контексте настоящего изобретения также описаны следующие варианты реализации 1-77:

Вариант реализации 1 представляет собой способ лечения солидной опухоли, включающий введение субъекту с солидной опухолью эффективного количества композиции, содержащей частицы химиотерапевтического агента, для лечения опухоли, где композицию вводят в опухоль, такую как злокачественная опухоль, напрямую путем инъекции.

Вариант реализации 2 представляет собой способ согласно варианту реализации 1, где композиция состоит из частиц химиотерапевтического агента и фармацевтически приемлемого носителя, такого как жидкий носитель.

Вариант реализации 3 представляет собой способ согласно любому из вариантов реализации 1-2, где введение приводит к перемещению частиц химиотерапевтического агента в лимфатическую систему субъекта.

Вариант реализации 4 представляет собой способ подавления метастазов опухоли, включающий введение субъекту со злокачественной опухолью эффективного количества композиции, содержащей частицы химиотерапевтического агента, для подавления метастазов опухоли.

Вариант реализации 5 представляет собой способ согласно варианту реализации 4, где композицию вводят в опухоль напрямую путем инъекции или перитуморальной инъекции.

Вариант реализации 6 представляет собой способ согласно любому из вариантов реализации 4-5, где композиция состоит из частиц химиотерапевтического агента и носителя (такого как жидкий, полутвердый или твердый носитель).

Вариант реализации 7 представляет собой способ согласно любому из вариантов реализации 1-3 и 6, где носитель представляет собой жидкий носитель на водной основе.

Вариант реализации 8 представляет собой способ согласно варианту реализации 7, где жидкий носитель на водной основе представляет собой солевой раствор, такой как физиологический раствор.

Вариант реализации 9 представляет собой способ согласно любому из вариантов реализации 1-8, где композиция представляет собой суспензию.

Вариант реализации 10 представляет собой способ согласно любому из вариантов реализации 1-9, где частицы (i) не содержат покрытие; (ii) не включены, не содержатся, не заключены или не инкапсулированы в твердое вспомогательное вещество; и (iii) не являются микросферами, липосомами или микрокапсулами, содержащими химиотерапевтический агент и вспомогательное вещество.

Вариант реализации 11 представляет собой способ согласно любому из вариантов реализации 1-10, где химиотерапевтический агент выбран из группы, состоящей из паклитаксела; производных паклитаксела, доцетаксела, кабазитаксела, таксанов; эпотилонов, алкалоидов винка, таких как винбластин, винкристин, виндезин, винорелбин; аналогов камптотецина; эпиподофиллотоксинов, таких как цисплатин, карбоплатин, оксалиплатин, этопозид и тенипозид; доксорубицина, антрациклинов, 5-фторурацила, топотекана, гемцитабина, лигандов рецепторов, активируемых пролифераторами пероксисом (PPAR), и антиангиогенных средств или их фармацевтически приемлемых солей.

Вариант реализации 12 представляет собой способ согласно любому из вариантов реализации 1-11, где химиотерапевтический агент представляет собой таксан или его фармацевтически приемлемую соль.

Вариант реализации 13 представляет собой способ согласно любому из вариантов реализации 1-12, где химиотерапевтический агент представляет собой паклитаксел или его фармацевтически приемлемую соль.

Вариант реализации 14 представляет собой способ согласно любому из вариантов реализации 1-13, где опухоль выбрана из группы, состоящей из сарком, карцином и лимфом, опухолей груди, опухолей простаты, опухолей головы и шеи, глиобластом, опухолей мочевого пузыря, опухолей поджелудочной железы, опухолей печени, опухолей яичников, колоректальных опухолей, кожных, лимфоидных опухолей и опухолей желудочно-кишечного тракта.

Вариант реализации 15 представляет собой способ согласно варианту реализации 13, где опухоль выбрана из группы, состоящей из опухолей яичников, мочевого пузыря, груди, простаты, легких, поджелудочной железы, кожи, лимфоидных опухолей и опухолей желудочно-кишечного тракта.

Вариант реализации 16 представляет собой способ согласно варианту реализации 13, где опухоль выбрана из группы, состоящей из опухолей яичников и мочевого пузыря.

Вариант реализации 17 представляет собой способ согласно любому из вариантов реализации 1-12, где химиотерапевтический агент представляет собой доцетаксел или его фармацевтически приемлемую соль.

Вариант реализации 18 представляет собой способ согласно варианту реализации 17, где опухоль выбрана из группы, состоящей из опухолей яичников, мочевого пузыря, груди и простаты.

Вариант реализации 19 представляет собой способ согласно варианту реализации 17, где опухоль выбрана из группы, состоящей из опухолей груди и простаты.

Вариант реализации 20 представляет собой способ согласно любому из вариантов реализации 1-19, где частицы химиотерапевтического агента содержат по меньшей мере 95% химиотерапевтического агента, и частицы имеют удельную площадь поверхности (УПП) по меньшей мере 10 м²/г или по меньшей мере 12 м²/г, 14 м²/г, 16 м²/г, 18 м²/г, 20 м²/г, 25 м²/г, 30 м²/г, 32 м²/г, 34 м²/г или 35 м²/г.

Вариант реализации 21 представляет собой способ согласно варианту реализации 20, где частицы химиотерапевтического агента имеют УПП от примерно 10 м²/г до примерно 50 м²/г.

Вариант реализации 22 представляет собой способ согласно любому из вариантов реализации 20-21, где частицы химиотерапевтического агента имеют УПП:

(a) от 16 м²/г до 31 м²/г или от 32 м²/г до 50 м²/г;

(b) от 16 м²/г до 30 м²/г или от 32 м²/г до 50 м²/г;

(c) от 16 м²/г до 29 м²/г или от 32 м²/г до 50 м²/г;

(d) от 17 м²/г до 31 м²/г или от 32 м²/г до 50 м²/г;

(e) от 17 м²/г до 30 м²/г или от 32 м²/г до 50 м²/г;

(f) от 17 м²/г до 29 м²/г или от 32 м²/г до 50 м²/г;

(g) от 16 м²/г до 31 м²/г или от 33 м²/г до 50 м²/г;

(h) от 16 м²/г до 30 м²/г или от 33 м²/г до 50 м²/г;

(i) от 16 м²/г до 29 м²/г или от 33 м²/г до 50 м²/г;

(j) от 17 м²/г до 31 м²/г или от 33 м²/г до 50 м²/г;

(k) от 17 м²/г до 30 м²/г или от 33 м²/г до 50 м²/г;

(l) от 17 м²/г до 29 м²/г или от 33 м²/г до 50 м²/г;

(m) от 16 м²/г до 31 м²/г или ≥32 м²/г;

(h) от 17 м²/г до 31 м²/г или ≥32 м²/г;

(i) от 16 м²/г до 30 м²/г или ≥32 м²/г;

(j) от 17 м²/г до 30 м²/г или ≥32 м²/г;

(k) от 16 м²/г до 29 м²/г или ≥32 м²/г;

(l) от 17 м²/г до 29 м²/г или ≥32 м²/г;

(m) от 16 м²/г до 31 м²/г или ≥33 м²/г;

(n) от 17 м²/г до 31 м²/г или ≥33 м²/г;

(о) от 16 м²/г до 30 м²/г или ≥33 м²/г;

(р) от 17 м²/г до 30 м²/г или ≥33 м²/г;

(q) от 16 м²/г до 29 м²/г или ≥33 м²/г; или

(r) от 17 м²/г до 29 м²/г или ≥33 м²/г.

Вариант реализации 23 представляет собой способ согласно любому из вариантов реализации 20-22, где химиотерапевтический агент представляет собой паклитаксел или его фармацевтически приемлемую соль.

Вариант реализации 24 представляет собой способ согласно любому из вариантов реализации 20-22, где химиотерапевтический агент представляет собой доцетаксел или его фармацевтически приемлемую соль.

Вариант реализации 25 представляет собой способ согласно любому из вариантов реализации 1-24, где частицы химиотерапевтического агента включают по меньшей мере 95% по массе таксана или его фармацевтически приемлемой соли, где частицы имеют одну или обе из приведенных далее характеристик:

(i) среднюю насыпную плотность от примерно 0,050 г/см³ до примерно 0,15 г/см³, и/или

(ii) удельную площадь поверхности (УПП) по меньшей мере 18 м²/г, 20 м²/г, 25 м²/г, 30 м²/г, 32 м²/г, 34 м²/г или 35 м²/г.

Вариант реализации 26 представляет собой способ согласно варианту реализации 25, где таксан выбран из группы, состоящей из паклитаксела, доцетаксела, кабазитаксела, таксадиена, баккатина III, таксхинина А, бревифолиола и таксуспина D или их фармацевтически приемлемых солей.

Вариант реализации 27 представляет собой способ согласно варианту реализации 25, где таксан выбран из группы, состоящей из паклитаксела, доцетаксела и кабазитаксела или их фармацевтически приемлемых солей.

Вариант реализации 28 представляет собой способ согласно варианту реализации 27, где таксан представляет собой паклитаксел или его фармацевтически приемлемую соль, и частицы имеют среднюю насыпную плотность от примерно 0,050 г/см³ до примерно 0,12 г/см³ или от примерно 0,060 г/см³ до примерно 0,11 г/см³.

Вариант реализации 29 представляет собой способ согласно варианту реализации 27 или 28, где таксан представляет собой паклитаксел или его фармацевтически приемлемую соль, и частицы паклитаксела имеют удельную площадь поверхности (УПП) по меньшей мере 18 м²/г, 20 м²/г, 25 м²/г, 30 м²/г, 32 м²/г, 34 м²/г или 35 м²/г.

Вариант реализации 30 представляет собой способ согласно любому из вариантов реализации 27-29, где таксан представляет собой паклитаксел или его фармацевтически приемлемую соль, и частицы паклитаксела имеют УПП от примерно 22 м²/г до примерно 40 м²/г, от 25 м²/г до примерно 40 м²/г, от 30 м²/г до примерно 40 м²/г или от примерно 35 м²/г до примерно 40 м²/г.

Вариант реализации 31 представляет собой способ согласно любому из вариантов реализации 28-30, где частицы паклитаксела имеют насыпную плотность от примерно 0,060 г/см³ до примерно 0,11 г/см³ и УПП от примерно 22 м²/г до примерно 40 м²/г.

Вариант реализации 32 представляет собой способ согласно любому из вариантов реализации 28-31, где по меньшей мере 40% (масс./масс.) паклитаксела растворяется в течение 30 минут или менее в растворе 50% метанола/50% воды (об./об.) при 37°С и рН 7,0 в аппарате с лопастной мешалкой USP II, работающем при 75 об/мин.

Вариант реализации 33 представляет собой способ согласно варианту реализации 27, где таксан представляет собой доцетаксел или его фармацевтически приемлемую соль, и частицы имеют среднюю насыпную плотность от примерно 0,050 г/см³ до примерно 0,12 г/см³ или от примерно 0,06 г/см³ до примерно 0,1 г/см³.

Вариант реализации 34 представляет собой способ согласно варианту реализации 27 или 33, где таксан представляет собой доцетаксел или его фармацевтически приемлемую соль, и частицы доцетаксела имеют УПП по меньшей мере 18 м²/г, 20 м²/г, 25 м²/г, 30 м²/г, 35 м²/г, 40 м²/г или 42 м²/г.

Вариант реализации 35 представляет собой способ согласно варианту реализации 27 или 33-34, где таксан представляет собой доцетаксел или его фармацевтически приемлемую соль, и частицы доцетаксела имеют УПП от примерно 40 м²/г до примерно 50 м²/г или от примерно 43 м²/г до примерно 46 м²/г.

Вариант реализации 36 представляет собой способ согласно любому из вариантов реализации 33-35, где частицы доцетаксела имеют насыпную плотность от примерно 0,06 г/см³ до примерно 0,1 г/см³ и УПП от примерно 40 м²/г до примерно 50 м²/г.

Вариант реализации 37 представляет собой способ согласно любому из вариантов реализации 33-36, где по меньшей мере 20% (масс./масс.) доцетаксела растворяется в течение 30 минут или менее в растворе 15% метанола/85% воды (об./об.) при 37°С и рН 7,0 в аппарате с лопастной мешалкой USP II, работающем при 75 об/мин.

Вариант реализации 38 представляет собой способ согласно любому из вариантов реализации 1-22, где частицы химиотерапевтического агента включают по меньшей мере 95% по массе паклитаксела или его фармацевтически приемлемой соли, где частицы имеют удельную площадь поверхности (УПП) по меньшей мере 12 м²/г.

Вариант реализации 39 представляет собой способ согласно варианту реализации 38, где частицы паклитаксела имеют УПП по меньшей мере 12 м²/г, 15 м²/г, 20 м²/г, 25 м²/г, 30 м²/г, 32 м²/г, 34 м²/г или 35 м²/г.

Вариант реализации 40 представляет собой способ согласно любому из вариантов реализации 38-39, где по меньшей мере 40% (масс./масс.) паклитаксела растворяется в течение 30 минут или менее в растворе 50% метанола/50% воды (об./об.) при 37°С и рН 7,0 в аппарате с лопастной мешалкой USP II, работающем при 75 об/мин.

Вариант реализации 41 представляет собой способ согласно любому из вариантов реализации 1-22, где частицы химиотерапевтического агента включают по меньшей мере 95% по массе паклитаксела, где по меньшей мере 40% (масс./масс.) паклитаксела растворяется в течение 30 минут или менее в растворе 50% метанола/50% воды (об./об.) при 37°С и рН 7.0 в аппарате с лопастной мешалкой USP II, работающем при 75 об/мин.

Вариант реализации 42 представляет собой способ согласно любому из вариантов реализации 1-22, где частицы химиотерапевтического агента включают по меньшей мере 95% по массе доцетаксела, где по меньшей мере 20% (масс./масс.) доцетаксела растворяется в течение 30 минут или менее в растворе 15% метанола/85%) воды (об./об.) при 37°С и рН 7,0 в аппарате с лопастной мешалкой USP II, работающем при 75 об/мин.

Вариант реализации 43 представляет собой способ согласно любому из вариантов реализации 1-42, где частицы имеют среднечисловой размер от примерно 0,4 мкм до примерно 1,2 мкм или от примерно 0,6 мкм до примерно 1,0 мкм.

Вариант реализации 44 представляет собой способ согласно любому из вариантов реализации 1-43, где частицы не содержат покрытие, и композиция не содержит полимеры, белки, полиэтоксилированное касторовое масло и/или глицериды полиэтиленгликоля, содержащие моно-, ди- и триглицериды и сложные моно- и диэфиры полиэтиленгликоля.

Вариант реализации 45 представляет собой способ согласно любому из вариантов реализации 1-42, где частица химиотерапевтического агента содержится в суспензии, дополнительно содержащей фармацевтически приемлемый водный носитель.

Вариант реализации 46 представляет собой способ согласно любому из вариантов реализации 1-45, где частицы содержат по меньшей мере 96%, 97%, 98%, 99% или 100% соединения.

Вариант реализации 47 представляет собой способ согласно любому из вариантов реализации 1-46, где частица химиотерапевтического агента содержится в суспензии, дополнительно содержащей полисорбат, такой как полисорбат 80, где полисорбат содержится в суспензии в концентрации от примерно 0,01% (об./об.) до примерно 1,5% (об./об.) или от примерно 0,01% (об./об.) до примерно 1% (об./об.), от примерно 0,01% (об./об.) до примерно 0,5% (об./об.), от примерно 0,01% (об./об.) до примерно 0,4% (об./об.), от примерно 0,01% (об./об.) до примерно 0,25% (об./об.), от примерно 0,05% (об./об.) до примерно 0,5% (об./об.), от примерно 0,05% (об./об.) до примерно 0,25% (об./об.), от примерно 0,1% (об./об.) до примерно 0,5% (об./об.), от примерно 0,1% (об./об.) до примерно 0,25% (об./об.), примерно 0,1% (об./об.), примерно 0,16% (об./об.) или примерно 0,25% (об./об.).

Вариант реализации 48 представляет собой способ согласно варианту реализации 47, где химиотерапевтический агент содержится в суспензии в концентрации от примерно 1 мг/мл до примерно 40 мг/мл или от примерно 6 мг/мл до примерно 20 мг/мл.

Вариант реализации 49 представляет собой способ согласно варианту реализации 48, где частица химиотерапевтического агента содержит паклитаксел или его фармацевтически приемлемую соль, где паклитаксел содержится в суспензии в концентрации от примерно 1 мг/мл до примерно 40 мг/мл или от примерно 6 мг/мл до примерно 20 мг/мл.

Вариант реализации 50 представляет собой способ согласно варианту реализации 48, где частица химиотерапевтического агента содержит доцетаксел или его фармацевтически приемлемую соль, где паклитаксел содержится в суспензии в концентрации от примерно 1 мг/мл до примерно 40 мг/мл или от примерно 6 мг/мл до примерно 20 мг/мл.

Вариант реализации 51 представляет собой суспензию, содержащую:

(a) частицы химиотерапевтического агента;

(b) фармацевтически приемлемый носитель; и

(c) полисорбат, где полисорбат содержится в суспензии в концентрации от примерно 0,01% (об./об.) до примерно 1,5% (об./об.) или от примерно 0,01% (об./об.) до примерно 1% (об./об.), от примерно 0,01% (об./об.) до примерно 0,5% (об./об.), от примерно 0,01% (об./об.) до примерно 0,4% (об./об.), от примерно 0,01% (об./об.) до примерно 0,25% (об./об.), от примерно 0,05% (об./об.) до примерно 0,5% (об./об.), от примерно 0,05% (об./об.) до примерно 0,25% (об./об.), от примерно 0,1% (об./об.) до примерно 0,5% (об./об.), от примерно 0,1% (об./об.) до примерно 0,25% (об./об.), примерно 0,1% (об./об.), примерно 0,16% (об./об.) или примерно 0,25% (об./об.).

Вариант реализации 52 представляет собой набор, содержащий:

(a) первую емкость, содержащую частицы химиотерапевтического агента;

(b) вторую емкость, содержащую полисорбат и фармацевтически приемлемый носитель;

(c) инструкции по перерастворению частиц химиотерапевтического агента в суспензии путем объединения содержимого первой емкости и второй емкости и по разбавлению суспензию раствором разбавителя, таким как 0,9% солевой раствор, перед введением пациенту.

Вариант реализации 53 представляет собой суспензию согласно варианту реализации 51 или набор согласно варианту реализации 52, где частицы химиотерапевтического агента выбраны из группы, состоящей из паклитаксела; производных паклитаксела, доцетаксела, кабазитаксела, таксанов; эпотилонов, алкалоидов винка, таких как винбластин, винкристин, виндезин, винорелбин; аналогов камптотецина; эпиподофиллотоксинов, таких как цисплатин, карбоплатин, оксалиплатин, этопозид и тенипозид; доксорубицина, антрациклинов, 5-фторурацила, топотекана, гемцитабина, лигандов рецепторов, активируемых пролифераторами пероксисом (PPAR), и антиангиогенных средств или их фармацевтически приемлемых солей.

Вариант реализации 54 представляет собой суспензию или набор согласно любому из вариантов реализации 51-53, где химиотерапевтический агент представляет собой таксан или его фармацевтически приемлемую соль.

Вариант реализации 55 представляет собой суспензию или набор согласно любому из вариантов реализации 51-54, где химиотерапевтический агент представляет собой паклитаксел или его фармацевтически приемлемую соль.

Вариант реализации 56 представляет собой суспензию или набор согласно любому из вариантов реализации 51-54, где химиотерапевтический агент представляет собой доцетаксел или его фармацевтически приемлемую соль.

Вариант реализации 57 представляет собой суспензию согласно любому из вариантов реализации 51 и 53-56, где химиотерапевтический агент содержится в суспензии в концентрации от примерно 1 мг/мл до примерно 40 мг/мл или от примерно 6 мг/мл до примерно 20 мг/мл.

Вариант реализации 58 представляет собой суспензию или набор согласно любому из вариантов реализации 51-57, где частицы химиотерапевтического агента содержат по меньшей мере 95% химиотерапевтического агента, и частицы имеют удельную площадь поверхности (УПП) по меньшей мере 10 м²/г или по меньшей мере 12 м²/г, 14 м²/г, 16 м²/г, 18 м²/г, 20 м²/г, 25 м²/г, 30 м²/г, 32 м²/г, 34 м²/г или 35 м²/г.

Вариант реализации 59 представляет собой суспензию или набор согласно любому из вариантов реализации 51-58, где частицы химиотерапевтического агента имеют УПП от примерно 10 м²/г до примерно 50 м²/г.

Вариант реализации 60 представляет собой суспензию или набор согласно любому из вариантов реализации 51-59, где частицы химиотерапевтического агента имеют УПП:

(a) от 16 м²/г до 31 м²/г или от 32 м²/г до 50 м²/г;

(b) от 16 м²/г до 30 м²/г или от 32 м²/г до 50 м²/г;

(c) от 16 м²/г до 29 м²/г или от 32 м²/г до 50 м²/г;

(d) от 17 м²/г до 31 м²/г или от 32 м²/г до 50 м²/г;

(e) от 17 м²/г до 30 м²/г или от 32 м²/г до 50 м²/г;

(f) от 17 м²/г до 29 м²/г или от 32 м²/г до 50 м²/г;

(g) от 16 м²/г до 31 м²/г или от 33 м²/г до 50 м²/г;

(h) от 16 м²/г до 30 м²/г или от 33 м²/г до 50 м²/г;

(i) от 16 м²/г до 29 м²/г или от 33 м²/г до 50 м²/г;

(j) от 17 м²/г до 31 м²/г или от 33 м²/г до 50 м²/г;

(k) от 17 м²/г до 30 м²/г или от 33 м²/г до 50 м²/г;

(l) от 17 м²/г до 29 м²/г или от 33 м²/г до 50 м²/г;

(m) от 16 м²/г до 31 м²/г или ≥32 м²/г;

(h) от 17 м²/г до 31 м²/г или ≥32 м²/г;

(i) от 16 м²/г до 30 м²/г или ≥32 м²/г;

(j) от 17 м²/г до 30 м²/г или ≥32 м²/г;

(k) от 16 м²/г до 29 м²/г или ≥32 м²/г;

(l) от 17 м²/г до 29 м²/г или ≥32 м²/г;

(m) от 16 м²/г до 31 м²/г или ≥33 м²/г;

(n) от 17 м²/г до 31 м²/г или ≥33 м²/г;

(o) от 16 м²/г до 30 м²/г или ≥33 м²/г;

(р) от 17 м²/г до 30 м²/г или ≥33 м²/г;

(q) от 16 м²/г до 29 м²/г или ≥33 м²/г; или

(r) от 17 м²/г до 29 м²/г или ≥33 м²/г.

Вариант реализации 61 представляет собой суспензию или набор согласно любому из вариантов реализации 51-60, где частицы химиотерапевтического агента включают по меньшей мере 95% по массе таксана или его фармацевтически приемлемой соли, где частицы имеют одну или обе из приведенных далее характеристик:

(i) среднюю насыпную плотность от примерно 0,050 г/см³ до примерно 0,15 г/см³, и/или

(ii) удельную площадь поверхности (УПП) по меньшей мере 18 м²/г, 20 м²/г, 25 м²/г, 30 м²/г, 32 м²/г, 34 м²/г или 35 м²/г.

Вариант реализации 62 представляет собой суспензию или набор согласно любому из вариантов реализации 51-55 и 57-61, где таксан представляет собой паклитаксел или его фармацевтически приемлемую соль, и частицы имеют среднюю насыпную плотность от примерно 0,050 г/см³ до примерно 0,12 г/см³ или от примерно 0,060 г/см³ до примерно 0,11 г/см³.

Вариант реализации 63 представляет собой суспензию или набор согласно любому из вариантов реализации 51-55 и 57-62, где таксан представляет собой паклитаксел или его фармацевтически приемлемую соль, и частицы паклитаксела имеют удельную плотность поверхности (УПП) по меньшей мере 12 м²/г, 18 м²/г, 20 м²/г, 25 м²/г, 30 м²/г, 32 м²/г, 34 м²/г или 35 м²/г.

Вариант реализации 64 представляет собой суспензию или набор согласно любому из вариантов реализации 51-55 и 57-63, где таксан представляет собой паклитаксел или его фармацевтически приемлемую соль, и частицы паклитаксела имеют УПП от примерно 22 м²/г до примерно 40 м²/г, от 25 м²/г до примерно 40 м²/г, от 30 м²/г до примерно 40 м²/г или от примерно 35 м²/г до примерно 40 м²/г.

Вариант реализации 65 представляет собой суспензию или набор согласно любому из вариантов реализации 51-55 и 57-64, где частицы паклитаксела имеют насыпную плотность от примерно 0,060 г/см³ до примерно 0,11 г/см³ и УПП от примерно 22 м²/г до примерно 40 м²/г.

Вариант реализации 66 представляет собой суспензию или набор согласно любому из вариантов реализации 51-55 и 57-65, где по меньшей мере 40% (масс./масс.) паклитаксела растворяется в течение 30 минут или менее в растворе 50% метанола/50% воды (об./об.) при 37°С и рН 7,0 в аппарате с лопастной мешалкой USP II, работающем при 75 об/мин.

Вариант реализации 67 представляет собой суспензию или набор согласно любому из вариантов реализации 51-54 и 56-61, где таксан представляет собой доцетаксел или его фармацевтически приемлемую соль, и частицы имеют среднюю насыпную плотность от примерно 0,050 г/см³ до примерно 0,12 г/см³ или от примерно 0,06 г/см³ до примерно 0,1 г/см³.

Вариант реализации 68 представляет собой суспензию или набор согласно любому из вариантов реализации 51-54, 56-61 и 67, где таксан представляет собой доцетаксел или его фармацевтически приемлемую соль, и частицы доцетаксела имеют УПП по меньшей мере 18 м²/г, 20 м²/г, 25 м²/г, 30 м²/г, 35 м²/г, 40 м²/г или 42 м²/г.

Вариант реализации 69 представляет собой суспензию или набор согласно любому из вариантов реализации 51-54, 56-61 и 67-68, где таксан представляет собой доцетаксел или его фармацевтически приемлемую соль, и частицы доцетаксела имеют УПП от примерно 40 м²/г до примерно 50 м²/г или от примерно 43 м²/г до примерно 46 м²/г.

Вариант реализации 70 представляет собой суспензию или набор согласно любому из вариантов реализации 51-54, 56-61 и 67-69, где частицы доцетаксела имеют насыпную плотность от примерно 0,06 г/см³ до примерно 0,1 г/см³ и УПП от примерно 40 м²/г до примерно 50 м²/г.

Вариант реализации 71 представляет собой суспензию или набор согласно любому из вариантов реализации 51-54, 56-61 и 67-70, где по меньшей мере 20% (масс./масс.) доцетаксела растворяется в течение 30 минут или менее в растворе 15% метанола/85% воды (об./об.) при 37°С и рН 7,0 в аппарате с лопастной мешалкой USP II, работающем при 75 об/мин.

Вариант реализации 72 представляет собой суспензию или набор согласно любому из вариантов реализации 51-71, где частицы имеют среднечисловой размер от примерно 0,4 мкм до примерно 1,2 мкм или от примерно 0,6 мкм до примерно 1,0 мкм.

Вариант реализации 73 представляет собой суспензию или набор согласно любому из вариантов реализации 51-72, где частицы не содержат покрытие, и суспензия или набор не содержит полимеры, белки, полиэтоксилированное касторовое масло и/или глицериды полиэтиленгликоля, содержащие моно-, ди- и триглицериды и сложные моно- и диэфиры полиэтиленгликоля.

Вариант реализации 74 представляет собой суспензию или набор согласно любому из вариантов реализации 51-73, где фармацевтически приемлемый носитель представляет собой солевой раствор, такой как 0,9% раствор хлорида натрия.

Вариант реализации 75 представляет собой суспензию или набор согласно любому из вариантов реализации 51-74, где полисорбат представляет собой полисорбат 80.

Вариант реализации 76 представляет собой набор согласно любому из вариантов реализации 52-75, где содержимое первой и второй пробирок является стерильным.

Вариант реализации 77 представляет собой способ, суспензию или набор согласно любому из вариантов реализации 1-76, где частицы химиотерапевтического агента представляют собой неагломерированные отдельные частицы.

Описание фигур

Фигура 1. Медианный объем опухоли карциномы простаты человека РС3 у мышей, которым носитель и частицы паклитаксела вводили напрямую в опухоль путем инъекции (ITU) (исследование Р-PPr-01-2015).

Фигура 2. Медианный объем опухоли ксенотрансплантатов опухоли простаты РС-3 у мышей, которым вводили IT носитель, NanoDoce™, NanoPac™ и в.в. доцетаксел (исследование PD-PPr-02-2016).

Фигура 3. Средний объем опухоли ксенотрансплантатов MDA-MB-231 у мышей, которым вводили IT носитель, NanoDoce™, NanoPac™ и в.в. доцетаксел или паклитаксел (исследование PD-PB-04-2016).

Фигура 4. Средний объем опухоли ксенотрансплантатов МХ-1 у мышей, которым вводили IT носитель, NanoDoce™, NanoPac™ и в.в. доцетаксел или паклитаксел (исследование Р-РВ-03-2016).

Подробное описание изобретения

При использовании в настоящем описании формы единственного числа включают ссылки на множество объектов, если из контекста явно не следует иное. «И» используют в настоящем описании взаимозаменяемо с «или», если явным образом не указано иное.

При использовании в настоящем описании «примерно» обозначает +/- пять процентов (5%) от указанной измеренной величины.

Все варианты реализации любого аспекта изобретения можно применять в комбинации, если из контекста явно не следует иное.

Если в контексте явным образом не подразумевается иное, то в описании и формуле изобретения слова «содержит», «содержащий» и т.д. следует рассматривать как открытые, но не исключающие или исчерпывающие, то есть как «включая, но не ограничиваясь ими». Слова, используемые в единственном или множественном числе, также включают множественное и единственное число, соответственно. Кроме того, слова «в настоящем описании», «выше» и «далее» и схожие по смыслу слова при использовании в настоящем описании относятся к настоящей заявке в целом, но не к какому-либо конкретному фрагменту заявки. Композиции и способы их применения могут «включать», «состоять по существу из» или «состоять из» любых ингредиентов или стадий, описанных в заявке. Что касается фразы «состоящий по существу из», то основное и новое свойство композиций согласно настоящему изобретению заключается в их способности излечивать солидные опухоли путем прямой инъекции частиц химиотерапевтического агента без покрытия (чистых частиц), что может быть обеспечено без использования покрытий, инкапсулирования и других вспомогательных средств доставки лекарственных веществ.

Предполагается, что описание вариантов реализации изобретения не является исчерпывающим или не ограничивает изобретение точной описанной формой. Несмотря на то, что в настоящей заявке для иллюстрации описаны конкретные варианты реализации и примеры изобретения, возможно проводить эквивалентные модификации в рамках объема изобретения, которые будут понятны специалистам в соответствующей области техники.

Согласно одному из аспектов в изобретении предложены способы лечения солидной опухоли, включающие введение субъекту с солидной опухолью эффективного количества композиции, содержащей частицы химиотерапевтического агента, для излечения опухоли, где композицию вводят в опухоль напрямую путем инъекции. Авторы изобретения неожиданно обнаружили, что частицы химиотерапевтического агента при введении в соответствии со способами согласно настоящему изобретению могут накапливаться в очень больших количествах в опухоли в течение продолжительного периода времени при незначительном выделении частиц химиотерапевтического агента в нежелательные участки. Специалистам в данной области техники будет понятно, что свободное лекарственное средство при введении напрямую в опухоль удерживается в ней недостаточно эффективно, чтобы проникать в опухолевые клетки и обеспечивать оптимальное терапевтическое действие. Таким образом, способы согласно настоящему изобретению обеспечивают значительное улучшение по сравнению со способами, известными из уровня техники. Частицы химиотерапевтического агента имеют значительно более высокую площадь поверхности по сравнению с частицами химиотерапевтического агента, полученными стандартными способами. Благодаря этому, частицы, вводимые в опухоль, являются слишком крупными, чтобы они могли быть выведены с системным кровотоком, но при этом они высвобождают химиотерапевтический агент значительно быстрее по сравнению с традиционными частицами.

При использовании в настоящем описании «частицы химиотерапевтического агента» представляют собой частицы, состоящие по существу из химиотерапевтического агента (т.е.: по меньшей мере из 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% химиотерапевтического агента), имеющие диаметр от 0,1 мкм до 5 мкм. Частицы химиотерапевтического агента отличаются от «частиц, содержащих химиотерапевтический агент», которые содержат химиотерапевтический агент и по меньшей мере одно добавленное вспомогательное вещество. Частицы химиотерапевтического агента согласно настоящему изобретения не содержат покрытие и не включены, не содержатся, не заключены или не инкапсулированы в твердое вспомогательное вещество. Частицы химиотерапевтического агента согласно настоящему изобретению, тем не менее, могут содержать примеси и побочные продукты, как правило, образующиеся при получении химиотерапевтических агентов. Но даже с учетом этого, частицы химиотерапевтического агента содержат по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% или 100% химиотерапевтического агента, то есть частицы химиотерапевтического агента состоят или состоят по существу из по существу чистого химиотерапевтического агента.

В других вариантах реализации частицы химиотерапевтического агента имеют диаметр более 0,2 мкм или 0,3 мкм. В другом варианте реализации частицы химиотерапевтического агента имеют диаметр по меньшей мере 0,4 мкм. В дополнительных вариантах реализации частицы химиотерапевтического агента имеют диаметр от 0,4 мкм до 2 мкм или от 0,5 мкм до 1,5 мкм или от 0,2 мкм до 1 мкм или от 0,2 мкм до менее чем 1 мкм. В дополнительных вариантах реализации частицы химиотерапевтического агента имеют среднечисловой размер в диапазоне от примерно 0,4 мкм до примерно 5 мкм, от примерно 0,4 до примерно 3 мкм, от примерно 0,5 мкм до примерно 1,4 мкм, от примерно 0,4 мкм до примерно 0,8 мкм, от примерно 0,4 мкм до примерно 0,7 мкм или от примерно 0,5 мкм до примерно 0,7 мкм. В дополнительном варианте реализации частицы химиотерапевтического агента или паклитаксела имеют среднечисловой размер от примерно 0,4 мкм до примерно 1,2 мкм или от примерно 0,6 мкм до примерно 1,0 мкм. В другом варианте реализации частицы химиотерапевтического агента или паклитаксела имеют среднечисловой размер от 0,6 мкм до 0,861 мкм или от примерно 0,5 мкм до примерно 0,7 мкм или от примерно 0,2 мкм до примерно 1 мкм или от примерно 0,2 мкм до менее чем 1 мкм или от примерно 0,3 мкм до примерно 1 мкм или от примерно 0,3 мкм до менее чем 1 мкм или от примерно 0,4 мкм до примерно 1 мкм или от примерно 0,4 мкм до менее чем 1 мкм.

В патентах США №5833891 6113795, 8221779 и WO 2016/197091, содержание которых включено в настоящую заявку во всей полноте посредством ссылок, описаны различные способы получения частиц соединений с размером от 0,1 до 5 мкм.

При использовании в настоящем описании «солидная опухоль» представляет собой аномальное тканевое образование, которое обычно не содержит кисты или области с физиологическими жидкостями. Солидные опухоли могут быть доброкачественными (нераковые) или злокачественными (раковые). Различные типы солидных опухолей называют по типу клеток, которые их образуют. Примерами солидных опухолей являются саркомы, карциномы и лимфомы. В одном конкретном варианте реализации солидная опухоль представляет собой злокачественную солидную опухоль.

При использовании в настоящем описании «вводят в опухоль напрямую путем инъекции» означает, что некоторую часть композиции, такой как суспензия, или композицию в целом вводят в опухолевую массу путем инъекции. Специалистам в данной области техники будет понятно, что указанная прямая инъекция может включать инъекцию некоторой части композиции, такой как суспензия, например, лекарственного средства на границу солидной опухоли («перитуморальное введение»), если количество композиции или суспензии является слишком большим, чтобы ее можно было полностью ввести напрямую в солидную опухолевую массу. В одном из вариантов реализации композицию или суспензию полностью вводят в солидную опухолевую массу путем инъекции. При использовании в настоящем описании опухоль включает опухолевую массу и метастазы опухоли, включая, но не ограничиваясь ими, метастазы в кости и мягкой ткани.

При использовании в настоящем описании «лечить» или «лечение» обозначает совершение одного или более из: (а) уменьшения объема опухоли; (b) замедления роста опухоли; (с) уменьшения или ограничения развития и/или распространения метастазов; (d) уменьшения или ограничения развития одного или более побочных эффектов химиотерапии.

Побочные эффекты химиотерапии включают, но не ограничиваются ими, анемию, нейтропению, тромбоцитопению, неврологическую токсичность, снижение аппетита, запоры, диарею, выпадение волос, усталость, тошноту/рвоту и боль.

В одном из вариантов реализации способ лечения опухоли включает подавление метастазов опухоли. «Подавление» метастазов опухолевых клеток может включать любой уровень подавления по сравнению с ситуацией, где лечение не проводят. В различных неограничивающих вариантах реализации способы могут включать подавление развития метастазов опухолевых клеток или уменьшение существующих метастазов на 5%, 10%, 25%, 50%; 100% или более по сравнению с контролем (например, в отсутствие лечения).

Согласно другому аспекту в изобретении предложены способы подавления метастазов опухоли, включающие введение субъекту с опухолью эффективного количества композиции, содержащей частицы химиотерапевтического агента, для подавления метастазов опухоли.

Авторы изобретения неожиданно обнаружили, что химиотерапевтические агенты, описанные в настоящей заявке, при введении субъекту перемещаются в лимфатическую систему субъекта и удерживаются в ней. Специалистам в данной области техники будет понятно, что в опухоли происходит обильное кровообращение, и свободное лекарственное средство при введении в опухоль напрямую удерживается в ней недостаточно эффективно, чтобы поступать в опухолевые клетки и обеспечивать оптимальное терапевтическое действие. Злокачественные клетки в опухоли распространяются через кровеносную систему, через лимфатическую систему в лимфатические узлы, за счет перемещения раковых клеток с физиологическими жидкостями в брюшную полость и в удаленные участки в процессе, известном как метастаз. Таким образом, способы согласно настоящему изобретению можно применять для подавления метастазов. Согласно указанному аспекту частицы химиотерапевтического агента можно вводить путем прямой инъекции, интраперитонеальной инъекции, перитуморальной инъекции или при помощи другого подходящего способа введения.

«Подавление» метастазов опухоли может включать любой уровень подавления по сравнению с ситуацией, где лечение не проводят. В различных неограничивающих вариантах реализации способы могут включать подавление развития метастазов опухолевых клеток или уменьшение существующих метастазов на 5%, 10%, 25%, 50%; 100% или более по сравнению с контролем (например, в отсутствие лечения).

В различных вариантах реализации химиотерапевтический агент выбран из группы, состоящей из таксанов (паклитаксел, производные паклитаксела, доцетаксел, кабазитаксел и т.д.), эпотилонов, алкалоидов винка, таких как винбластин, винкристин, виндезин, винорелбин; аналогов камптотецина; эпиподофиллотоксинов, таких как цисплатин, карбоплатин, оксалиплатин, этопозид и тенипозид; доксорубицина, антрациклинов, 5-фторурацила, топотекана, гемцитабина, лигандов рецепторов, активируемых пролифераторами пероксисом (PPAR) и антиангиогенных средств.

В различных вариантах реализации солидная опухоль выбрана из группы, состоящей из сарком, карцином и лимфом, опухолей груди, опухолей простаты, опухолей головы и шеи, глиобластом, опухолей мочевого пузыря, опухолей поджелудочной железы, опухолей печени, опухолей яичников, колоректальных опухолей, опухолей легких, кожи, лимфоидных опухолей и опухолей желудочно-кишечного тракта. В конкретном варианте реализации солидная опухоль представляет собой опухоль простаты, и частицы химиотерапевтического агента представляют собой частицы паклитаксела или доцетаксела. В другом конкретном варианте реализации солидная опухоль представляет собой опухоль яичников, и частицы химиотерапевтического агента представляют собой частицы паклитаксела или доцетаксела. В другом конкретном варианте реализации солидная опухоль представляет собой опухоль груди, и частицы химиотерапевтического агента представляют собой частицы доцетаксела. В другом конкретном варианте реализации солидная опухоль представляет собой опухоль поджелудочной железы, и частицы химиотерапевтического агента представляют собой частицы паклитаксела или доцетаксела. В любом из указанных вариантов реализации опухоль может представлять собой, например, аденокарциному.

Авторы настоящего изобретения неожиданно смогли получить частицы химиотерапевтического агента, такие как частицы таксана, которые имеют среднюю насыпную плотность от примерно 0,050 г/см³ до примерно 0,15 г/см³ и/или удельную площадь поверхности (УПП) по меньшей мере 18 м²/г, при помощи новых способов получения частиц, таких как описано ниже. Как показано в последующих примерах, увеличение удельной площади поверхности и уменьшение насыпной плотности частиц таксана приводят к значительному увеличению скорости растворения по сравнению с необработанным таксаном и измельченными продуктами таксанов, используемыми для сравнения. Растворение происходит только на границе твердое вещество/жидкость. Таким образом, увеличение удельной площади поверхности приводит к увеличению скорости растворения за счет того, что большее количество молекул на поверхности частицы вступают в контакт с растворяющей средой. Насыпная плотность определяется макроструктурой и расстояниями между частицами в порошке. Параметры, которые влияют на насыпную плотность, включают распределение частиц по размерам, форму частиц и аффинность частиц друг к другу (т.е. агломерацию). Чем ниже насыпная плотность порошка, тем быстрее происходит растворение. Это происходит благодаря тому, что растворяющая среда может быстрее проникать в интерстициальное пространство или пространство между частицами и более эффективно вступать в контакт с поверхностью частиц. Таким образом, как увеличение удельной площади поверхности, так и уменьшение насыпной плотности, приводят к значительному увеличению скорости растворения частиц таксана согласно настоящему изобретению по сравнению с необработанным или исходным материалом и измельченным продуктом таксанов, используемым для сравнения. Это обеспечивает значительное усовершенствование применения частиц таксанов согласно настоящему изобретению, например, при лечении опухоли.

Таким образом, в другом варианте реализации частицы химиотерапевтического агента имеют удельную площадь поверхности (УПП) по меньшей мере 10 м²/г или по меньшей мере 12 м²/г, 14 м²/г, 16 м²/г, 18 м²/г, 20 м²/г, 25 м²/г, 30 м²/г, 32 м²/г, 34 м²/г или 35 м²/г. В одном из вариантов реализации частицы химиотерапевтического агента имеют УПП от примерно 10 м²/г до примерно 50 м²/г.

В указанных вариантах реализации частицы химиотерапевтического агента предпочтительно представляют собой частицы таксана. Таксаны представляют собой класс дитерпеноидов, содержащих ядро таксадиена, которые очень плохо растворяются в воде. Частицы таксана согласно настоящему изобретению могут представлять собой любой подходящий таксан, включая, но не ограничиваясь ими, паклитаксел, доцетаксел, кабазитаксел, таксадиен, баккатин III, таксхинин А, бревифолиол и таксуспин D, их комбинации или фармацевтически приемлемые соли. В одном из вариантов реализации таксан выбран из группы, состоящей из паклитаксела, доцетаксела и кабазитаксела или их фармацевтически приемлемых солей. В различных вариантах реализации настоящего изобретения частицы таксана представляют собой отдельные частицы без покрытия (чистые частицы); частицы таксана не связаны или не конъюгированы с каким-либо веществом; никакие вещества не абсорбированы или не адсорбированы на поверхности частиц таксана; частицы таксана не инкапсулированы в каком-либо веществе; частицы таксана не содержат покрытие какого-либо вещества; частицы таксана не являются микроэмульсиями, наноэмульсиями, микросферами или липосомами таксана; и/или частицы таксана не связаны, не присоединены, не инкапсулированы или не содержат покрытие мономера, полимера (или биосовместимого полимера), белка, поверхностно-активного вещества или альбумина. В некоторых вариантах реализации мономер, полимер (или биосовместимый полимер), сополимер, белок, поверхностно-активное вещество или альбумин не абсорбирован или не адсорбирован на поверхности частиц таксана. В некоторых вариантах реализации в композиции отсутствует / композиции не включают или не содержат полимер/сополимер или биосовместимый полимер/сополимер. В некоторых вариантах реализации в композициях отсутствует / композиции не включают или не содержат белок. Согласно некоторым аспектам изобретения в композициях отсутствует / композиции не включают или не содержат альбумин. Согласно некоторым аспектам изобретения в композициях отсутствует / композиции не включают или не содержат гиалуроновую кислоту. Согласно некоторым аспектам изобретения в композициях отсутствует / композиции не включают или не содержат конъюгат гиалуроновой кислоты и таксана. Согласно некоторым аспектам изобретения в композициях отсутствует / композиции не включают или не содержат конъюгат гиалуроновой кислоты и паклитаксела. Согласно некоторым аспектам изобретения в композициях отсутствуют / композиции не включают или не содержат полоксамеры, полианионы, поликатионы, модифицированные полианионы, модифицированные поликатионы, хитозан, производные хитозана, ионы металлов, нановекторы, поли-гамма-глутаминовую кислоту (PGA), полиакриловую кислоту (РАА), альгиновую кислоту (ALG), витамин E-TPGS, диметилизосорбид (DMI), метокси-ПЭГ 350, лимонную кислоту, антитело к VEGF, этилцеллюлозу, полистирол, полиангидриды, полигидрокси-кислоты, полифосфазены, сложные полиортоэфиры, сложные полиэфиры, полиамиды, полисахариды, полипротеины, стирол-изобутилен-стирол (SIBS), полиангидридный сополимер, поликапролактон, полиэтиленгликоль (ПЭГ), поли(бис(Р-карбоксифенокси)пропан-себациновую кислоту, поли(d,l-молочную кислоту) (PLA), поли(d,l-молочную кислоту-гликолевую кислоту) (PLAGA) и/или поли(D,L-молочную-гликолевую кислоту) (PLGA).

В одном из указанных вариантов реализации частицы химиотерапевтического агента включают по меньшей мере 95% по массе таксана или его фармацевтически приемлемой соли, где частицы имеют одну или обе из приведенных далее характеристик:

(i) среднюю насыпную плотность от примерно 0,050 г/см³ до примерно 0,15 г/см³, и/или

(ii) удельную площадь поверхности (УПП) по меньшей мере 18 м²/г, 20 м²/г, 25 м²/г, 30 м²/г, 32 м²/г, 34 м²/г или 35 м²/г.

При использовании в настоящем описании «удельная площадь поверхности» представляет собой общую площадь поверхности частицы таксана, отнесенную к массе частицы таксана, измеренную по изотерме Брунауэра-Эмметта-Теллера («БЭТ») (т.е. УПП БЭТ). Специалистам в данной области техники будет понятно, что «частицы таксана» могут включать агломерированные частицы таксана и неагломерированные частицы таксана; УПП определяют в пересчете на граммы, тем самым учитывают как агломерированные, так и неагломерированные частицы таксана в композиции. Способ измерения удельной площади поверхности по методу БЭТ представляет собой нормативный способ, включенный в Фармакопею США и Европейскую фармакопею.

При использовании в настоящем описании насыпная плотность частиц таксана представляет собой массу совокупности частиц в композиции, деленную на общий объем, который они занимают при высыпании в мерный цилиндр без усадки в мерном цилиндре. Общий объем включает объем частицы, свободный объем между частицами и объем внутренних пор.

В одном из вариантов реализации таксан представляет собой паклитаксел или его фармацевтически приемлемую соль, и частицы имеют среднюю насыпную плотность от примерно 0,050 г/см³ до примерно 0,12 г/см³. В другом варианте реализации частицы паклитаксела имеют среднюю насыпную плотность от примерно 0,060 г/см³ до примерно 0,11 г/см³. В некоторых вариантах реализации частицы химиотерапевтического агента и таксана представляют собой неагломерированные отдельные частицы и не являются кластерами нескольких частиц химиотерапевтического агента.

В дополнительном варианте реализации таксан представляет собой паклитаксел или его фармацевтически приемлемую соль, и частицы паклитаксела имеют удельную площадь поверхности (УПП) по меньшей мере 12 м²/г. В различных вариантах реализации частицы паклитаксела имеют УПП по меньшей мере 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39 или по меньшей мере 40 м²/г. В различных дополнительных вариантах реализации частицы паклитаксела имеют УПП от примерно 12 м²/г до примерно 40 м²/г, от примерно 14 м²/г до примерно 40 м²/г, от примерно 15 м²/г до примерно 40 м²/г, от примерно 16 м²/г до примерно 40 м²/г, от примерно 17 м²/г до примерно 40 м²/г, от примерно 18 м²/г до примерно 40 м²/г, от примерно 19 м²/г до примерно 40 м²/г, от примерно 20 м²/г до примерно 40 м²/г, от примерно 22 м²/г до примерно 40 м²/г, от примерно 25 м²/г до примерно 40 м²/г, от примерно 26 м²/г до примерно 40 м²/г, от примерно 30 м²/г до примерно 40 м²/г, от примерно 35 м²/г до примерно 40 м²/г, от примерно 20 м²/г до примерно 29 м²/г, от примерно 20 м²/г до примерно 28 м²/г, от примерно 20 м²/г до примерно 26,2 м²/г, от примерно 22 м²/г до примерно 29 м²/г, от примерно 22 м²/г до примерно 28 м²/г, от примерно 22 м²/г до примерно 26,2 м²/г, от примерно 32 м²/г до примерно 40 м²/г, от примерно 32 м²/г до примерно 38 м²/г или от примерно 32 м²/г до примерно 36 м²/г.

В одном предпочтительном варианте реализации частицы паклитаксела имеют среднюю насыпную плотность от примерно 0,050 г/см³ до примерно 0,12 г/см³ и УПП по меньшей мере 30 м²/г. В другом предпочтительном варианте реализации частицы паклитаксела имеют среднюю насыпную плотность от примерно 0,050 г/см³ до примерно 0,12 г/см³ и УПП по меньшей мере 35 м²/г. В одном из вариантов реализации частицы паклитаксела имеют среднюю насыпную плотность от примерно 0,050 г/см³ до примерно 0,12 г/см³ и УПП от примерно 30 м²/г до примерно 40 м²/г. В другом предпочтительном варианте реализации частицы паклитаксела имеют среднюю насыпную плотность от примерно 0,060 г/см³ до примерно 0,11 г/см³ и УПП от примерно 30 м²/г до примерно 40 м²/г. В другом предпочтительном варианте реализации частицы паклитаксела имеют среднюю насыпную плотность от примерно 0,060 г/см³ до примерно 0,11 г/см³ и УПП по меньшей мере 30 м²/г. В дополнительном варианте реализации частицы паклитаксела имеют среднюю насыпную плотность от примерно 0,060 г/см³ до примерно 0,11 г/см³ и УПП по меньшей мере 35 м²/г. Указанные различные варианты реализации предложены в последующих примерах.

В любом из указанных различных вариантов реализации частицы паклитаксела могут включать по меньшей мере 4,16×10^-13 грамма паклитаксела или его фармацевтически приемлемой соли в одной частице паклитаксела.

В другом варианте реализации по меньшей мере 40% (масс./масс.) паклитаксела в частицах паклитаксела, входящих в состав композиции, растворяется в течение 30 минут или менее в растворе 50% метанола/50% воды (об./об.) в аппарате с лопастной мешалкой USP II, работающем при 75 об/мин. Использовали раствор с рН 7, причем рН не влияет на растворимость таксанов. В другом варианте реализации исследования растворения проводят при 37°С.

В другом варианте реализации таксан представляет собой доцетаксел или его фармацевтически приемлемую соль, и частицы доцетаксела имеют среднюю насыпную плотность от примерно 0,050 г/см³ до примерно 0,12 г/см³. В дополнительном варианте реализации средняя насыпная плотность частиц доцетаксела составляет от примерно 0,06 г/см³ до примерно 0,1 г/см³.

В другом варианте реализации таксан представляет собой доцетаксел или его фармацевтически приемлемую соль, и частицы доцетаксела имеют УПП по меньшей мере 18 м²/г. В различных дополнительных вариантах реализации частицы доцетаксела имеют УПП по меньшей мере 20 м²/г, 25 м²/г, 30 м²/г, 35 м²/г, 40 м²/г или 42 м²/г. В дополнительном варианте реализации частицы доцетаксела имеют УПП от примерно 40 м²/г до примерно 50 м²/г. В другом варианте реализации частицы доцетаксела имеют УПП от примерно 43 м²/г до примерно 46 м²/г.

В одном предпочтительном варианте реализации частицы доцетаксела имеют среднюю насыпную плотность от примерно 0,050 г/см³ до примерно 0,12 г/см³ и УПП по меньшей мере 30 м²/г. В другом предпочтительном варианте реализации частицы доцетаксела имеют среднюю насыпную плотность от примерно 0,050 г/см³ до примерно 0,12 г/см³ и УПП по меньшей мере 35 м²/г. В дополнительном предпочтительном варианте реализации частицы доцетаксела имеют среднюю насыпную плотность от примерно 0,050 г/см³ до примерно 0,12 г/см³ и УПП по меньшей мере 40 м²/г. В одном предпочтительном варианте реализации частицы доцетаксела имеют среднюю насыпную плотность от примерно 0,050 г/см³ до примерно 0,12 г/см³ и УПП от примерно 40 м²/г до примерно 50 м²/г. В другом предпочтительном варианте реализации средняя насыпная плотность частиц доцетаксела составляет от примерно 0,06 г/см³ до примерно 0,1 г/см³ и УПП составляет от примерно 40 м²/г до примерно 50 м²/г. Указанные различные варианты реализации предложены в последующих примерах.

В любом из указанных различных вариантов реализации частицы доцетаксела могут включать по меньшей мере 4,16×10^-13 грамма доцетаксела или его фармацевтически приемлемой соли в одной частице доцетаксела.

В другом варианте реализации по меньшей мере 20% (масс./масс.) доцетаксела растворяется в течение 30 минут или менее в растворе 15% метанола/85% воды (об./об.) в аппарате с лопастной мешалкой USP II, работающем при 75 об/мин. Использовали раствор с нейтральным рН, причем рН не влияет на растворимость таксанов. В другом варианте реализации исследования растворения проводят при 37°С.

В дополнительном варианте реализации частицы химиотерапевтического агента включают по меньшей мере 95% по массе паклитаксела или его фармацевтически приемлемой соли, где частицы имеют удельную площадь поверхности (УПП):

(a) от 16 м²/г до 31 м²/г или от 32 м²/г до 40 м²/г;

(b) от 16 м²/г до 30 м²/г или от 32 м²/г до 40 м²/г;

(c) от 16 м²/г до 29 м²/г или от 32 м²/г до 40 м²/г;

(d) от 17 м²/г до 31 м²/г или от 32 м²/г до 40 м²/г;

(e) от 17 м²/г до 30 м²/г или от 32 м²/г до 40 м²/г;

(f) от 17 м²/г до 29 м²/г или от 32 м²/г до 40 м²/г;

(g) от 16 м²/г до 31 м²/г или от 33 м²/г до 40 м²/г;

(h) от 16 м²/г до 30 м²/г или от 33 м²/г до 40 м²/г;

(i) от 16 м²/г до 29 м²/г или от 33 м²/г до 40 м²/г;

(j) от 17 м²/г до 31 м²/г или от 33 м²/г до 40 м²/г;

(k) от 17 м²/г до 30 м²/г или от 33 м²/г до 40 м²/г;

(l) от 17 м²/г до 29 м²/г или от 33 м²/г до 40 м²/г;

(m) от 16 м²/г до 31 м²/г или ≥32 м²/г;

(h) от 17 м²/г до 31 м²/г или ≥32 м²/г;

(i) от 16 м²/г до 30 м²/г или ≥32 м²/г;

(j) от 17 м²/г до 30 м²/г или ≥32 м²/г;

(k) от 16 м²/г до 29 м²/г или ≥32 м²/г;

(l) от 17 м²/г до 29 м²/г или ≥32 м²/г;

(m) от 16 м²/г до 31 м²/г или ≥33 м²/г;

(m) от 17 м²/г до 31 м²/г или ≥33 м²/г;

(о) от 16 м²/г до 30 м²/г или ≥33 м²/г;

(р) от 17 м²/г до 30 м²/г или ≥33 м²/г;

(q) от 16 м²/г до 29 м²/г или ≥33 м²/г; или

(г) от 17 м²/г до 29 м²/г или ≥33 м²/г.

В другом варианте реализации по меньшей мере 40% (масс./масс.) паклитаксела или его фармацевтически приемлемой соли в частицах паклитаксела, входящих в состав композиции, растворяется в течение 30 минут или менее в растворе 50% метанола/50% воды (об./об.) в аппарате с лопастной мешалкой USP II, работающем при 75 об/мин. Использовали раствор с рН 7, причем рН не влияет на растворимости таксанов. В другом варианте реализации исследования растворения проводят при 37°С.

В дополнительном варианте реализации частицы химиотерапевтического агента включают по меньшей мере 95% по массе паклитаксела или его фармацевтически приемлемой соли, где по меньшей мере 40% (масс./масс.) паклитаксела растворяется в течение 30 минут или менее в растворе 50% метанола/50% воды (об./об.) в аппарате с лопастной мешалкой USP II, работающем при 75 об/мин. Использовали раствор с рН 7, причем рН не влияет на растворимость таксанов. В другом варианте реализации исследования растворения проводят при 37°С.

В дополнительном варианте реализации частицы химиотерапевтического агента включают по меньшей мере 95% по массе доцетаксела или его фармацевтически приемлемой соли, где по меньшей мере 20% (масс./масс.) доцетаксела растворяется в течение 30 минут или менее в растворе 15% метанола/85% воды (об./об.) в аппарате с лопастной мешалкой USP И, работающем при 75 об/мин. Использовали раствор с рН 7, причем рН не влияет на растворимость таксанов. В другом варианте реализации исследования растворения проводят при 37°С.

В одном из вариантов реализации частицы химиотерапевтического агента содержат лекарственную форму химиотерапевтического агента в суспензии (т.е. совместно с фармацевтически приемлемым носителем и любыми другими компонентами) в количестве от примерно 0,1 мг/мл до примерно 100 мг/мл химиотерапевтического агента. В различных дополнительных вариантах реализации лекарственная форма может включать от примерно 0,5 мг/мл до примерно 100 мг/мл, от примерно 1 мг/мл до примерно 100 мг/мл, от примерно 2 мг/мл до примерно 100 мг/мл, от примерно 5 мг/мл до примерно 100 мг/мл, от примерно 10 мг/мл до примерно 100 мг/мл, от примерно 25 мг/мл до примерно 100 мг/мл, от примерно 0,1 мг/мл до примерно 75 мг/мл, от примерно 0,5 мг/мл до примерно 75 мг/мл, от примерно 1 мг/мл до примерно 75 мг/мл, от примерно 2 мг/мл до примерно 75 мг/мл, от примерно 5 мг/мл до примерно 75 мг/мл, от примерно 10 мг/мл до примерно 75 мг/мл, от примерно 25 мг/мл до примерно 75 мг/мл, от примерно 0,1 мг/мл до примерно 50 мг/мл, от примерно 0,5 мг/мл до примерно 50 мг/мл, от примерно 1 мг/мл до примерно 50 мг/мл, от примерно 2 мг/мл до примерно 50 мг/мл, от примерно 5 мг/мл до примерно 50 мг/мл, от примерно 10 мг/мл до примерно 50 мг/мл, от примерно 25 мг/мл до примерно 50 мг/мл, от примерно 0,1 мг/мл до примерно 25 мг/мл, от примерно 0,5 мг/мл до примерно 25 мг/мл, от примерно 1 мг/мл до примерно 40 мг/мл, от примерно 1 мг/мл до примерно 25 мг/мл, от примерно 2 мг/мл до примерно 25 мг/мл, от примерно 5 мг/мл до примерно 25 мг/мл, от примерно 10 мг/мл до примерно 25 мг/мл, от примерно 0,1 мг/мл до примерно 15 мг/мл, от примерно 0,5 мг/мл до примерно 15 мг/мл, от примерно 1 мг/мл до примерно 15 мг/мл, от примерно 2 мг/мл до примерно 15 мг/мл, от примерно 5 мг/мл до примерно 15 мг/мл, от примерно 10 мг/мл до примерно 15 мг/мл, от примерно 0,1 мг/мл до примерно 10 мг/мл, от примерно 0,5 мг/мл до примерно 10 мг/мл, от примерно 1 мг/мл до примерно 10 мг/мл, от примерно 2 мг/мл до примерно 10 мг/мл, от примерно 5 мг/мл до примерно 10 мг/мл, от примерно 0,1 мг/мл до примерно 5 мг/мл, от примерно 0,5 мг/мл до примерно 5 мг/мл, от примерно 1 мг/мл до примерно 5 мг/мл, от примерно 2 мг/мл до примерно 5 мг/мл, от примерно 0,1 мг/мл до примерно 2 мг/мл, от примерно 0,5 мг/мл до примерно 2 мг/мл, от примерно 1 мг/мл до примерно 2 мг/мл, от примерно 0,1 мг/мл до примерно 1 мг/мл, от примерно 0,5 мг/мл до примерно 1 мг/мл, от примерно 0,1 мг/мл до примерно 0,5 мг/мл, от примерно 0,1 мг/мл до примерно 15 мг/мл, от примерно 0,5 мг/мл до примерно 15 мг/мл, от примерно 1 мг/мл до примерно 15 мг/мл, от примерно 2 мг/мл до примерно 15 мг/мл, от примерно 5 мг/мл до примерно 15 мг/мл, от примерно 3 мг/мл до примерно 8 мг/мл или от примерно 4 мг/мл до примерно 6 мг/мл паклитаксела или по меньшей мере примерно 0,1, 0,5, 1,10, 20, 25, 50, 75 или 100 мг/мл химиотерапевтического агента.

Согласно всем аспектам и вариантам реализации изобретения композиция может быть обеспечена в подходящем фармацевтически приемлемом носителе, который является уместным с точки зрения лечащего медицинского персонала. В одном из вариантов реализации состав имеет небольшой объем (т.е.: 10 мкл-40 мл; в других вариантах реализации 10 мкл-35 мл, 10 мкл-30 мл, 10 мкл-25 мл, 10 мкл-20 мл, 10 мкл-15 мл, 10 мкл-10 мл, 10 мкл-7,5 мл, 10 мкл-5 мл, 10 мкл-4 мл, 10 мкл-3 мл, 50 мкл-40 мл, 50 мкл-35 мл, 50 мкл-30 мл, 50 мкл-25 мл, 50 мкл-20 мл, 50 мкл-15 мл, 50 мкл-10 мл, 50 мкл-7,5 мл 50 мкл-5 мл, 50 мкл-4 мл, 50 мкл-3 мл, 100 мкл-40 мл, 100 мкл-35 мл, 100 мкл-30 мл, 100 мкл-25 мл, 100 мкл-20 мл, 100 мкл-15 мл, 100 мкл-10 мл, 100 мкл-7,5 мл 100 мкл-5 мл, 100 мкл-5 мл, 100 мкл-4 мл, 100 мкл-3 мл, 500 мкл-40 мл, 500 мкл-35 мл, 500 мкл-30 мл, 500 мкл-25 мл, 500 мкл-20 мл, 500 мкл-15 мл, 500 мкл-10 мл, 500 мкл-7,5 мл, 500 мкл-5 мл, 500 мкл-4 мл, 500 мкл-3 мл, 1 мл-40 мл, 1 мл-35 мл, 1 мл-30 мл, 1 мл-25 мл, 1 мл-20 мл, 1 мл-15 мл, 1 мл-10 мл, 1 мл-7,5 мл 1 мл-5 мл, 1 мл-4 мл или 1 мл-3 мл). Таким образом, согласно другому аспекту в изобретении предложены фармацевтические композиции, содержащие частицы химиотерапевтического агента и фармацевтически приемлемый носитель, где общий объем композиции составляет от 1 мл до 40 мл, от 1 до 35 мл, от 1 мл до 30 мл, от 1 мл до 25 мл, от 1 мл до 20 мл, от 1 мл до 15 мл, от 1 мл до 10 мл, от 1 мл до 7,5 мл, от 1 мл до 5 мл, от 1 мл до 4 мл или от 1 мл до 3 мл. В одном из вариантов реализации композиция состоит из частиц химиотерапевтического агента и фармацевтически приемлемого носителя, такого как жидкий, полутвердый или твердый носитель.

В одном из вариантов реализации композиция содержит или состоит из частиц химиотерапевтического агента и жидкого носителя. Можно применять любой подходящий жидкий носитель, такой как водный жидкий носитель. Можно применять любой подходящий водный жидкий носитель, включая, но не ограничиваясь им, 0,9% солевой раствор (физиологический раствор), такой как 0,9% хлорид натрия для инъекций USP. В другом варианте реализации композиция содержит суспензию. В некоторых вариантах реализации суспензия включает водный носитель. Носитель может содержать буферный агент, соль для регулирования осмотического давления и/или поверхностно-активное вещество в воде и другие агенты для регулирования рН, изотоничности и вязкости. В одном из вариантов реализации, в которых применяют водный носитель, концентрация поверхностно-активного вещества составляет менее 1% в пересчете на масс./масс. или масс./об.; в других вариантах реализации менее 0,5%, менее 0,25% или примерно 0,1%. В других вариантах реализации водный носитель может не содержать поверхностно-активные вещества GELUCIRE® (глицериды полиэтиленгликоля, содержащие моно-, ди- и триглицериды и сложные моно- и диэфиры полиэтиленгликоля) и/или CREMOPHOR® (полиэтоксилированное касторовое масло). В некоторых вариантах реализации композиция или суспензия не содержит полимеры, белки (такие как альбумин), полиэтоксилированное касторовое масло и/или глицериды полиэтиленгликоля, содержащие моно-, ди- и триглицериды и сложные моно- и диэфиры полиэтиленгликоля.

Суспензию можно вводить в исходном виде или разбавлять разбавителем, например, соленой водой (0,9% солевой раствор), необязательно содержащей буферный агент и одно или более других вспомогательных веществ, перед введением. Разбавитель может представлять собой любую жидкость, подходящую для введения пациенту путем инъекции. Например, объемное отношение суспензии к разбавителю может находиться в диапазоне 1:1 - 1:100 (об./об.) или представлять собой другое подходящее отношение.

В некоторых вариантах реализации суспензия может содержать воду и необязательно одно или более вспомогательных веществ, выбранных из группы, состоящей из буфера, агента, регулирующего тоничность, консерванта, агента, снимающего раздражение, модификатора вязкости, агента, регулирующего осмотическое давление, поверхностно-активного вещества, антиоксиданта, подщелачивающего агента, подкисляющего агента, противопенного агента и красителя. Например, суспензия может содержать частицы химиотерапевтического агента, воду, буфер и соль. Необязательно композиция дополнительно содержит поверхностно-активное вещество. В некоторых вариантах реализации суспензия состоит по существу или состоит из воды, частиц паклитаксела, суспендированных в воде, и буфера. Суспензия может дополнительно содержать соль для регулирования осмотического давления.

Суспензия может содержать одно или более поверхностно-активных веществ. Подходящие поверхностно-активные вещества включают в качестве примера без ограничений полисорбаты, лаурилсульфаты, ацетилированные моноглицериды, диацетилированные моноглицериды и полоксамеры. Полисорбаты представляют собой сложные эфиры жирных кислот полиэтиленсорбитана, которые представляют собой ряд неполных сложных эфиров жирных кислот и сорбита и его ангидридов, сополимеризованных примерно с 20, 5 или 4 молями этиленоксида на каждую молекулу сорбита и его ангидридов. Неограничивающими примерами полисорбатов являются полисорбат 20, полисорбат 21, полисорбат 40, полисорбат 60, полисорбат 61, полисорбат 65, полисорбат 80, полисорбат 81, полисорбат 85 и полисорбат 120. Полисорбаты, содержащие примерно 20 молей этиленоксида, представляют собой гидрофильные неионные поверхностно-активные вещества. Примеры полисорбатов, содержащих примерно 20 молей этиленоксида, включают полисорбат 20, полисорбат 40, полисорбат 60, полисорбат 65, полисорбат 80, полисорбат 85 и полисорбат 120. Полисорбаты коммерчески доступны в Croda под торговой маркой TWEEN™. Числовое обозначение полисорбата соответствует числовому обозначению TWEEN, например, полисорбат 20 представляет собой TWEEN 20, полисорбат 40 представляет собой TWEEN 40, полисорбат 60 представляет собой TWEEN 60, полисорбат 80 представляет собой TWEEN 80 и т.д. Полисорбаты класса USP/NF включают полисорбат 20 NF, полисорбат 40 NF, полисорбат 60 NF и полисорбат 80 NF. Полисорбаты также доступны в категориях PhEur (Европейская фармакопея), BP и JP. Термин «полисорбат» является непатентованным названием. Полисорбат 20 имеет химическое название полиоксиэтилена 20 сорбитана монолаурат. Полисорбат 40 имеет химическое название полиоксиэтилена 20 сорбитана монопальмитат. Полисорбат 60 имеет химическое название полиоксиэтилена 20 сорбитана моностеарат. Полисорбат 80 имеет химическое название полиоксиэтилена 20 сорбитана моноолеат. В некоторых вариантах реализации суспензия может содержать смеси полисорбатов. В некоторых вариантах реализации суспензия содержит полисорбат 20, полисорбат 40, полисорбат 60, полисорбат 65, полисорбат 80, полисорбат 85 и/или полисорбат 120. В других вариантах реализации суспензия содержит полисорбат 20, полисорбат 40, полисорбат 60 и/или полисорбат 80. В одном из вариантов реализации суспензия содержит полисорбат 80.

Суспензия может содержать один или более агентов, регулирующих тоничность. Подходящие агенты, регулирующие тоничность, включают в качестве примера без ограничений одну или более неорганических солей, электролитов, хлорид натрия, хлорид калия, фосфат натрия, фосфат калия, сульфаты натрия и калия, бикарбонаты натрия и калия и соли щелочно-земельных металлов, такие как неорганические соли щелочно-земельных металлов, например, соли кальция и соли магния, маннит, декстрозу, глицерин, пропиленгликоль и их смеси.

Суспензия может содержать один или более буферных агентов. Подходящие буферные агенты включают в качестве примера без ограничений двухосновный фосфат натрия, одноосновный фосфат натрия, лимонную кислоту, цитрат натрия, хлороводородную кислоту, гидроксид натрия, трис(гидроксиметил)аминометан, бис(2-гидроксиэтил)имино-трис(гидроксиметил)метан и гидрокарбонат натрия и прочие, известные специалистам в данной области техники. Буферы обычно применяют для регулирования рН в диапазоне, желательном для интраперитонеального применения. Как правило, желательным является рН от примерно 5 до 9, от 5 до 8, от 6 до 7,4, от 6,5 до 7,5 или от 6,9 до 7,4.

Суспензия может содержать один или более агентов, снимающих раздражение. Агент, снимающий раздражение, представляет собой агент, который образует смягчающую пленку поверх слизистой мембраны, такой как мембраны, выстилающие брюшную полость и находящиеся в ней органы. Агент, снимающий раздражение, может облегчать небольшую боль и воспаление, и иногда его называют мукопротектором. Подходящие агенты, снимающие раздражение, включают производные целлюлозы в количестве от примерно 0,2 до примерно 2,5%, такие как карбоксиметилцеллюлоза натрия, гидроксиэтилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза и метилцеллюлоза; желатин в количестве примерно 0,01%; многоатомные спирты в количестве от примерно 0,05 до примерно 1%, также включая от примерно 0,05 до примерно 1%, например, глицерин, полиэтиленгликоль 300, полиэтиленгликоль 400 и пропиленгликоль; поливиниловый спирт в количестве от примерно 0,1 до примерно 4%; повидон в количестве от примерно 0,1 до примерно 2%; и декстран 70 в количестве примерно 0,1% при использовании совместно с другим полимерным агентом, снимающим раздражение, описанным в настоящей заявке.

Суспензия может содержать один или более подщелачивающих агентов для регулирования рН. При использовании в настоящем описании термин «подщелачивающий агент» обозначает соединение, применяемое для обеспечения щелочной среды. Указанные соединения включают в качестве примеров без ограничений раствор аммиака, карбонат аммония, гидроксид калия, карбонат натрия, бикарбонат натрия и гидроксид натрия и другие агенты, известные специалистам в данной области техники.

Суспензия может содержать один или более подкисляющих агентов для регулирования рН. При использовании в настоящем описании термин «подкисляющий агент» обозначает соединение, применяемое для обеспечения кислотной среды. Указанные соединения включают в качестве примеров без ограничений уксусную кислоту, аминокислоту, лимонную кислоту, азотную кислоту, фумаровую кислоту и другие альфа-гидроксикислоты, хлороводородную кислоту, аскорбиновую кислоту и азотную кислоту и другие кислоты, известные специалистам в данной области техники.

Суспензия может содержать один или более противопенных агентов. При использовании в настоящем описании термин «противопенный агент» обозначает соединение или соединения, которое(-ые) предотвращает или снижает образование пены на поверхности наполняемой композиции. Подходящие противопенные агенты включают в качестве примеров без ограничений диметикон, SIMETHICONE, октоксинол и другие агенты, известные специалистам в данной области техники.

Суспензия может содержать один или более модификаторов вязкости, которые увеличивают или уменьшают вязкость суспензии. Подходящие модификаторы вязкости включают метилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, маннит и поливинилпирролидон.

В некоторых вариантах реализации частица химиотерапевтического агента содержится в суспензии, дополнительно содержащей полисорбат. В одном конкретном варианте реализации частица химиотерапевтического агента содержится в суспензии, дополнительно содержащей полисорбат, где полисорбат представляет собой полисорбат 80. В других вариантах реализации полисорбат или полисорбат 80 содержится в суспензии в концентрации от примерно 0,01% (об./об.) до примерно 1,5% (об./об.). Авторы изобретения неожиданно обнаружили, что указанные крайне малые количества полисорбата 80 уменьшают поверхностное натяжение на границе раздела частиц химиотерапевтического агента и водного носителя в суспензии (такого как солевой раствор). Указанные варианты реализации, как правило, обеспечиваются примерно за время применения композиции. В указанных вариантах реализации частицы не содержат покрытие полисорбата или полисорбата 80. В различных других вариантах реализации полисорбат или полисорбат 80 содержится в суспензии в концентрации от примерно 0,01% (об./об.) до примерно 1% (об./об.), от примерно 0,01% (об./об.) до примерно 0,5% (об./об.), от примерно 0,01% (об./об.) до примерно 0,4% (об./об.), от примерно 0,01% (об./об.) до примерно 0,25% (об./об.), от примерно 0,05% (об./об.) до примерно 0,5% (об./об.), от примерно 0,05% (об./об.) до примерно 0,25% (об./об.), от примерно 0,1% (об./об.) до примерно 0,5% (об./об.), от примерно 0,1% (об./об.) до примерно 0,25% (об./об.), примерно 0,1% (об./об.), примерно 0,16% (об./об.) или примерно 0,25% (об./об.). В дополнительных вариантах реализации химиотерапевтический агент, такой как паклитаксел, содержится в суспензии в концентрации от примерно 1 мг/мл до примерно 40 мг/мл или от примерно 6 мг/мл до примерно 20 мг/мл. В различных дополнительных вариантах реализации химиотерапевтический агент содержится в суспензии в концентрации от примерно 6 мг/мл до примерно 15 мг/мл, от примерно 6 мг/мл до примерно 10 мг/мл, от примерно 10 мг/мл до примерно 20 мг/мл, от примерно 10 мг/мл до примерно 15 мг/мл, примерно 6 мг/мл, примерно 10 мг/мл или примерно 15 мг/мл. В различных дополнительных вариантах реализации водный носитель в композиции может представлять собой солевой раствор, такой как примерно 0,9% хлорид натрия.

В настоящем изобретении также предложена суспензия, содержащая:

(a) частицы химиотерапевтического агента;

(b) фармацевтически приемлемый носитель; и

(c) полисорбат, где полисорбат содержится в суспензии в концентрации от примерно 0,01% (об./об.) до примерно 1,5% (об./об.) или от примерно 0,01% (об./об.) до примерно 1% (об./об.), от примерно 0,01% (об./об.) до примерно 0,5% (об./об.), от примерно 0,01% (об./об.) до примерно 0,4% (об./об.), от примерно 0,01% (об./об.) до примерно 0,25% (об./об.), от примерно 0,05% (об./об.) до примерно 0,5% (об./об.), от примерно 0,05% (об./об.) до примерно 0,25% (об./об.), от примерно 0,1% (об./об.) до примерно 0,5% (об./об.), от примерно 0,1% (об./об.) до примерно 0,25% (об./об.), примерно 0,1% (об./об.), примерно 0,16% (об./об.) или примерно 0,25% (об./об.).

В одном из вариантов реализации полисорбат представляет собой полисорбат 80. В одном из вариантов реализации фармацевтически приемлемый носитель представляет собой 0,9% солевой раствор. В другом варианте реализации частицы химиотерапевтического агента представляют собой частицы таксана.

В настоящем изобретении также предложены наборы, содержащие:

(a) первую емкость, содержащую частицы химиотерапевтического агента;

(b) вторую емкость, содержащую полисорбат и фармацевтически приемлемый носитель; и

(c) инструкции по перерастворению частиц химиотерапевтического агента в суспензии путем объединения содержимого первой емкости и второй емкости и по разбавлению суспензии раствором разбавителя, таким как 0,9% солевой раствор, перед введением пациенту.

В одном из вариантов реализации полисорбат представляет собой полисорбат 80. В одном из вариантов реализации фармацевтически приемлемый носитель представляет собой 0,9% солевой раствор. В одном из вариантов реализации содержимое первой и второй пробирок является стерильным. При разбавлении суспензии частиц химиотерапевтического агента и полисорбата раствором разбавителя предотвращается избыточное растворение частиц химиотерапевтического агента.

Композиции, суспензии и наборы согласно указанному аспекту изобретения могут включать любой вариант реализации или комбинацию вариантов реализации частиц химиотерапевтического агента, описанных в настоящей заявке, и любой вариант реализации концентраций полисорбата или полисорбата 80, описанных в настоящей заявке. В различных дополнительных вариантах реализации водный носитель в композиции может представлять собой солевой раствор, такой как примерно 0,9% хлорид натрия. В композициях, суспензиях и наборах могут отсутствовать полимеры, белки (такие как альбумин), полиэтоксилированное касторовое масло и/или глицериды полиэтиленгликоля, содержащие моно-, ди- и триглицериды и сложные моно- и диэфиры полиэтиленгликоля.

Композиции и наборы могут дополнительно содержать другие компоненты, подходящие для частицы данного химиотерапевтического агента. В одном из вариантов реализации частица доцетаксела может дополнительно содержать этанол в качестве растворителя; можно использовать любое подходящее количество этанола, например, от примерно 0,13% до 3,2% дегидратированного спирта (этанола), 200 крепости, неденатурированный, USP.

Субъект может представлять собой любого подходящего субъекта, у которого лечение может оказывать благоприятное действие, включая, но не ограничиваясь ими, млекопитающих (таких как человек и другие приматы, собаки, кошки, лошади, крупный рогатый скот, свиньи, овцы, козы и т.д.).

«Эффективное количество» частицы химиотерапевтического агента может быть определено лечащим врачом с учетом всех важных факторов. Частицы химиотерапевтического агента можно вводить в качестве единственного химиотерапевтического агента или совместно с другими терапевтическими средствами, которые лечащий врач рассматривает как уместные с учетом всех обстоятельств. В одном из вариантов реализации способы дополнительно включают лечение субъекта с использованием стандарта здравоохранения для опухоли, подвергающейся лечению, такого как внутривенная химиотерапия, лучевая терапия, хирургическое удаление и т.д. Например, способы лечения рака простаты можно объединять с одним или более из спасительной простатэктомии, фокальной брахитерапии или брахитерапии железы в целом, криотерапии, высокоинтенсивного сфокусированного ультразвука (HIFU) и гипофракционной стереотаксической лучевой терапии (SBRT).

Прямую инъекцию частиц химиотерапевтического агента в опухоль можно проводить любыми подходящими средствами. В неограничивающих вариантах реализации инъекцию можно проводить, руководствуясь данными комбинированной визуализации магнитного резонанса-трансректального ультразвукового исследования (MR-TRUS), (например, для инъекции в опухоли простаты) или путем тонкоигольной инъекции под контролем эндоскопического ультразвукового исследования (EUS-FNI).

Пример 1. Получение частиц паклитаксела и доцетаксела

Материалы и способы

Исходные паклитаксел и доцетаксел приобретали в Phyton Biotech (British Columbia, Canada), номера партий FP2-15004 и DT7-14025, соответственно. Оба агента были охарактеризованы в исходной форме. Измельчение обоих лекарственных средств проводили на мельнице Deco-PBM-V-0.41 (Deco). Условия измельчения обоих соединений приведены далее:

Размер дроби = 5 мм

об/мин = 600

Время обработки = 60 мин

Комнатная температура.

Получение частиц паклитаксела

Готовили 65 мг/мл раствор паклитаксела в ацетоне. В кристаллизационной камере размещали форсунку для мелкокапельного распыления A BETE Micro Whirl^® (BETE Fog Nozzle, Inc) и ультразвуковой зонд (Qsonica, номер модели Q700) на расстоянии примерно 8 мм друг от друга. Ячеистый фильтр из нержавеющей стали с порами примерно 100 нм прикрепляли к кристаллизационной камере для сбора осажденных наночастиц паклитаксела. Сверхкритический диоксид углерода вводили в кристаллизационную камеру технологического оборудования и доводили давление примерно до 1200 psi (8,3 МПа) примерно при 38°С с расходом 24 кг/час. Ультразвуковой зонд устанавливали на 60% от общей выходной мощности с частотой 20 кГц. Раствор паклитаксела в ацетоне закачивали через форсунку с расходом 4,5 мл/минута в течение примерно 36 часов. Полученные наночастицы паклитаксела имели среднечисловой размер 0,81 мкм, стандартное отклонение составляло 0,74 мкм для трех отдельных циклов.

Получение частиц доцетаксела

Готовили 79,32 мг/мл раствор доцетаксела в этаноле. Форсунку и ультразвуковой зон размещали в стойкой к давлению камере на расстоянии примерно 9 мм друг от друга. Ячеистый фильтр из нержавеющей стали с порами примерно 100 нм прикрепляли к стойкой к давлению камере для сбора осажденных наночастиц доцетаксела. Сверхкритический диоксид углерода вводили в кристаллизационную камеру технологического оборудования и доводили давление примерно до 1200 psi (8,3 МПа) примерно при 38°С с расходом 68 ст.л/мин. Ультразвуковой зонд устанавливали на 60% от общей выходной мощности с частотой 20 кГц. Раствор доцетаксела в этаноле закачивали через форсунку с расходом 2 мл/минута в течение примерно 95 минут. Затем собирали осажденные агломераты и частицы доцетаксела из сверхкритического диоксида углерода по мере того, как смеси прокачивали через ячеистый фильтр из нержавеющей стали. Открывали фильтр, содержащий наночастицы доцетаксела, и собирали полученный продукт из фильтра.

Полученные наночастицы доцетаксела имели среднечисловой размер 0,82 мкм, среднее стандартное отклонение составляло 0,66 мкм для трех отдельных циклов в этаноле.

Анализ размера частиц

Размер частиц анализировали способами с использованием светотени и лазерной дифракции. Систему классификации частиц по размерам Particle Sizing Systems AccuSizer 780 SIS использовали в способе анализа светотени и Shimadzu SALD-7101 использовали в способе лазерной дифракции. Наночастицы паклитаксела анализировали с использованием 0,10% (масс./об.) додецилсульфата натрия (ДСН) в воде в качестве диспергирующего агента. Наночастицы доцетаксела анализировали с использованием изопара G в качестве диспергирующего агента.

Суспензии паклитаксела получали путем добавления примерно 7 мл отфильтрованного диспергирующего агента в стеклянную пробирку, содержащую примерно 4 мг частиц паклитаксела. Пробирки перемешивали на вортексе в течение примерно 10 секунд и затем обрабатывали ультразвуком на ультразвуковой бане в течение примерно 1 минуты. Если образец уже имел форму суспензии, то готовили суспензию 1:1 раствора паклитаксела и 0,1% раствора ДСН, перемешивали на вортексе в течение 10 секунд и обрабатывали ультразвуком на ультразвуковой бане в течение 1 минуты.

Суспензии доцетаксела получали путем добавления примерно 7 мл отфильтрованного диспергирующего агента в пластиковую пробирку, содержащую примерно 4 мг частиц доцетаксела. Пробирку перемешивали на вортексе в течение примерно 10 секунд и затем обрабатывали ультразвуком на ультразвуковой бане в течение примерно 2 минут. Полученную суспензию использовали для анализа лазерной дифракции. Неиспользованную суспензию выливали в 125 мл пластиковую бутыль, не содержащую частицы, которую затем заполняли примерно до 100 мл отфильтрованным диспергирующим агентом. Суспензию перемешивали на вортексе в течение примерно 10 секунд и затем обрабатывали ультразвуком на ультразвуковой бане в течение примерно 2 минут. Полученную разбавленную суспензию использовали в анализе светотени.

Перед анализом частиц проводили исследование фона на AccuSizer 780 SIS. Новую пластиковую бутыль, не содержащую частицы, заполняли пустой суспензией путем закачивания из резервуара с использованием перистальтического насоса через 0,22 мкм фильтр Millipore в бутыль. Анализ фона проводили для того, чтобы подтвердить, что количество частиц/мл составляло менее 100 частиц/мл. Небольшое количество суспензии паклитаксела, 5-100 мкл в зависимости от концентрации раствора, при помощи пипетки переносили в пластиковую бутыль вместо раствора для исследования фона и заполняли ~100 мл диспергирующего агента и начинали анализ. Изучали количество частиц и добавляли раствор паклитаксела до достижения и/или поддержания 6000-8000 частиц/мл на протяжении всего анализа. После завершения анализа вычитали данные фона и отбрасывали любые измеренные величины, составляющие менее четырех единиц.

Анализ частиц на SALD-7101 с использованием кюветы для периодических измерений начинали, выбирая режим Ручного измерения. Устанавливали показатель преломления от 1,5 до 1,7. Кювету для периодических измерений заполняли отфильтрованным диспергирующим агентом непосредственно до вытравленной линии. Проводили холостой опыт. При помощи пипетки переносили небольшое количество суспензии АФИ (паклитаксела или доцетаксела), как правило <1 мл, в зависимости от концентрации раствора, не более 100 мкл, в кювету для периодических измерений до достижения приемлемого поглощения от 0,15 до 0,2 единиц оптической плотности. Проводили измерения, выбирали график с наивысшим уровнем достоверности; фон учитывался автоматически.

Анализ БЭТ

Анализируемый образец с измеренной массой от 200 до 300 мг помещали в 30 мл пробирку для образца. Затем помещали наполненную пробирку в SORPTOMETER^®, модели ВЕТ-202А производства Porous Materials Inc. Затем проводили автоматизированное исследование при помощи пакета программного обеспечения BETWIN^®, после чего вычисляли площадь поверхности каждого образца.

Образец для анализа насыпной плотности

Препараты частиц паклитаксела или доцетаксела добавляли в 10 мл взвешенные мерные цилиндры через пластиковую взвешенную воронку при комнатной температуре. Измеряли массу лекарственного средства, округленную до 0,1 мг, определяли объем, округленный до 0,1 мл, и вычисляли плотность.

Исследования растворения

Паклитаксел

Примерно 50 мг вещества (т.е. исходного паклитаксела, измельченного паклитаксела или частиц паклитаксела) наносили примерно на 1,5 грамма 1 мм стеклянной дроби путем перемешивания материала и дроби в пробирке в течение примерно 1 часа. Дробь переносили в ячеистый контейнер из нержавеющей стали и помещали в баню с растворителем, содержащую смесь метанол/вода 50/50 (об./об.), при 37°С, рН 7, в устройстве USP Apparatus II (лопастная мешалка), работающем при 75 об/мин. Через 10, 20, 30, 60 и 90 минут отбирали 5 мл аликвоты, фильтровали через 0,22 мкм фильтр и анализировали на спектрофотометре УФ/видимой области спектра при 227 нм. Проводили сравнение значений поглощения образцов со стандартными растворами, полученными в растворяющей среде, для определения количества растворенного вещества.

Доцетаксел

Примерно 50 мг вещества (т.е.: исходного доцетаксела, измельченного доцетаксела или частиц доцетаксела) помещали непосредственно в баню с растворителем, содержащую смесь метанол/вода 15/85 (об./об.), при 37°С, рН 7, в устройстве USP Apparatus II (лопастная мешалка), работающем при 75 об/мин. Через 5, 15, 30, 60, 120 и 225 минут отбирали 5 мл аликвоты, фильтровали через 0,22 мкм фильтр и анализировали на спектрофотометре в УФ/видимой области спектра при 232 нм. Проводили сравнение значений поглощения образцов со стандартными растворами, полученными в растворяющей среде, для определения количества растворенного вещества.

Результаты

Площадь поверхности БЭТ частиц, полученный при помощи описанного выше протокола и его измененных вариантов (т.е. при модификации форсунок, фильтров, источников энергии ультразвука, расхода и т.д.), находилась в диапазоне от 22 до 39 м²/г. Для сравнения измеренная площадь поверхности БЭТ исходного паклитаксела составляла 7,25 м²/г (фигура 2), при этом частицы паклитаксела, полученные согласно способам, описанным в патентах США №5833891 и 5874029, имели площадь поверхности в диапазоне от 11,3 до 15,58 м²/г. Типовые размеры частиц, полученных при помощи способов согласно настоящему изобретению, показаны в таблице 1.

Данные сравнительных исследований насыпной плотности, УПП и скорости растворения (которые проводили, как отмечено выше) исходного лекарственного средства, измельченных частиц лекарственного средства и частиц, лекарственного средства, полученных способами согласно настоящему изобретению, приведены ниже в таблицах 2 и 3. Полные профили растворения материалов на основе паклитаксела и доцетаксела со временем приведены в таблицах 4 и 5, соответственно.

Пример 2. Фармакокинетика и распределение в тканях частиц паклитаксела после интраперитонеальной инъекции мышам

Задача: Настоящее исследование проводили для определения уровня всасывания паклитаксела из брюшной полости в системный кровоток после интраперитонеальной доставки суспензии частиц паклитаксела. Также проводили оценку распределения в тканях паклитаксела, содержащегося в суспензии частиц паклитаксела, после интраперитонеального введения.

Описание эксперимента: Самкам мышей C57BL6 инокулировали клетки рака яичников ID8 и оставляли для роста опухоли на 45 дней. Мышам вводили суспензию частиц паклитаксела (36 мг/кг) в 0,9% солевом растворе интраперитонеально в общем объеме 4 мл. Собирали образцы плазмы и перитонеальной жидкости в момент времени ноль (перед введением дозы), через 1, 6, 24 и 48 часов (по меньшей мере у четырех мышей для каждого временного интервала) и измеряли уровень паклитаксела в плазме и перитонеальной жидкости путем ЖХМСМС. Кроме того, собирали образцы тканей в момент времени ноль (перед введением дозы), через 1, 6, 24 и 48 часов после интраперитонеального введения частиц паклитаксела. Образцы паховых лимфатических узлов, брюшной стенки, яичников, печени, сердца, почки, легкого, мозга и опухолевых тканей у мышей, которым вводили частицы паклитаксела, анализировали путем ЖХ/МС/МС.

Результаты и значимость: Результаты измерения уровня паклитаксела в плазме, перитонеальной жидкости и образцах тканей и органов, показаны в следующей таблице. Уровень остаточного паклитаксела в плазме был очень низким через 48 часов. Уровень паклитаксела в перитонеальной жидкости был значительно более высоким и имел значительную погрешность. Предел количественного обнаружения в способе анализа паклитаксела составлял 0,01 мкг/г. Уровень паклитаксела в тканях брюшной полости был устойчиво высоким, что было продемонстрировано результатами для опухоли яичников, яичников, паховых лимфатических узлов и перитонеальной мембраны. В противоположность этому, уровень паклитаксела в тканях вне брюшной полости был устойчиво более низким, что подтверждается для тканей печени, сердца, легкого и мозга. Указанные результаты показаны в таблице 6.

Полученные данные являются важными, так как высокий уровень паклитаксела в тканях, находящихся в контакте с перитонеальной жидкостью (опухоли яичников, яичники, паховые лимфатические узлы и перитонеальная мембрана) и низкий уровень паклитаксела в тканях, не находящихся в контакте с перитонеальной жидкостью, являются крайне неожиданными. Согласно данным указанных и других исследований высвобождение паклитаксела из частиц паклитаксела продолжается несколько недель и, как можно ожидать, обеспечивает постоянное высокое количество паклитаксела, это означает, что паклитаксел может накапливаться в очень высоких количествах при введении в опухоль напрямую путем инъекции.

Пример 3. Исследование глиобластомы

В указанном исследовании проводили оценку эффективности частиц паклитаксела в отношении глиобластом (GB). В мозг бестимусных мышей вводили инъекцию клеток GB для выращивания первичных опухолей, в которые через две недели вводили инъекции частиц паклитаксела. Отслеживали увеличение выживаемости по сравнению с контрольной группой, в которой вводили инъекции только солевого раствора, и контрольной группой, в которой вводили инъекции Taxol™ (в виде состава в кремофоре). Проводили доставку дозы 100 мг/м² в растущую опухоль путем прямой инъекции. Ниже в таблице показаны четыре различных размера опухоли и соответствующая доза частиц паклитаксела согласно настоящему изобретению, где предполагается, что опухоль имеет сферическую форму. В качестве контрольного эксперимента использовали Taxol™ в виде состава в кремофоре, разбавленный в солевом растворе до нужной концентрации.

*В дозе 100 мг/м **5 мкл инъекция; маточный раствор Nanotax: 3150 нг/мкл

В максимальной дозе 5 мкг паклитаксела на инъекцию токсичность не наблюдали. После инъекции мышей выдерживали в течение 8-9 дней, никакие неврологические симптомы не наблюдали. Через 9 дней мышей умерщвляли и собирали образцы мозга; делали срезы мозга по вдоль канала от инъекции и проводили анализ. В группах, в которых вводили частицы паклитаксела или Taxol™, не наблюдали некроз или очаги поражения. Дополнительную подготовку срезов мозга перед анализом не проводили, использовали три различные технологии визуализации для создания составного изображения (данные не показаны):

(a) генерация 2-й гармоники (SHG): изображения имеют синюю окраску, главным образом коллаген и сосуды и частицы паклитаксела.

(b) флуоресценция двухфотонного возбуждения (TPEF): изображения имеют зеленую окраску, главным образом, реактивные клетки, микроглии, макрофаги, некоторые нервные тельца.

(c) когерентное антистоксово рамановское рассеяние (CARS): изображения имеют красную окраску, настроены на вибрации -СН2 для визуализации липидов - главным образом, миелина в ЦНС, но также клетки, содержащие липидные капли, называемые пенистыми клетками, дают положительный сигнал. Также показаны дегенерирующие клетки и макрофаги с липидными вакуолями.

Вследствие нелинейных оптических свойств кристаллов частиц паклитаксела их можно увидеть непосредственно при помощи технологии визуализации методом генерации второй гармоники. Кластеры частиц паклитаксела были отчетливо видны в месте инъекции (т.е.: накапливались в опухоли) через 9 дней после инъекции у мыши, которой вводили инъекцию 5 мкг частиц паклитаксела, неврологические симптомы не наблюдали (данные не показаны).

Пример 4. Исследования рака простаты

Проводили два неклинических исследования фармакологии in vivo для определения влияния внутриопухолевой (ITU) доставки частиц паклитаксела в модели ксенотрансплантата солидной карциномы простаты человека РС-3 у бестимусных мышей. В исследовании № P-PPr-01-2015 мышам вводили частицы паклитаксела (также называемые NanoPac™) в дозе 37,5 мг/кг, qwk (раз в неделю)×1 (т.е. одну дозу); 12,5 мг/кг, qwk x 3 (т.е. одну дозу три раза в неделю); или 37,5 мг/кг, qwk x 3; паклитаксел (30 мг/кг, qwk x 3) или носитель (0,1% (масс./об.) полисорбата 80 в солевом растворе, qwk x 3). Введение частиц паклитаксела и носителя проводили путем ITU инъекции. Через тридцать пять дней после имплантации клеток в день D1 исследования животных с объемом опухоли от 108 до 196 мм³ разбивали на пять групп (n=10), где средний объем опухоли в группе находился в диапазоне 150-153 мм³. Все способы лечения начинали в день D1 исследования. Паклитаксел вводили путем в.в. инфузии. Все экспериментальные способы лечения исследовали в группах из 10 мышей. Размеры опухолей измеряли два раза в неделю. Промежуточный результат лечения определяли по подавлению роста опухоли в процентах (%TGI), которое определяли как разницу в процентах медианного объема опухоли у мышей, котором проводили лечение и вводили носитель в качестве контроля, на 32-й день. Эксперимент завершали, когда объем опухоли достигал 2000 мм³ или через 60 дней в зависимости от того, что происходило раньше.

Частицы паклитаксела обладали значительной активностью в модели карциномы простаты РС-3 (фигура 1). Введение животным одной дозы или трех доз частиц паклитаксела в неделю обеспечивало идентичное продление выживаемости и повышение количества животных, выживших в исследовании/случаев обращения вспять заболевания по сравнению с контрольными животными, которым вводили носитель. Зависимость ответа от дозы отсутствовала, так как введение частиц паклитаксела в дозах 12,5 или 37,5 мг/кг qwk x 3 обеспечивало максимальное продление выживаемости, достигаемое в исследовании. Результаты у всех животных, которым вводили частицы паклитаксела, намного превышали пороговое значение 60% TGI, это указывает на вероятную терапевтическую активность. В.в. введение паклитаксела обеспечивало значительное TGI и существенное продление выживаемости в данном исследовании. Все способы лечения хорошо переносились.

Исследование № PD-PPr-02-2016 включало использование частиц доцетаксела (также называемых NanoDoce™), полученных так, как описано выше, а также частиц паклитаксела. Мышам с ксенотрансплантатами карциномы простаты РС-3 путем ITU инъекции вводили частицы доцетаксела в дозе 100 мг/кг, qwk x 1; 37,5 мг/кг, qwk x 3; или 100 мг/кг, qwk x 3; частицы паклитаксела в дозе 37,5 мг/кг, qwk x 3; или носитель (0,1% (масс./об.) полисорбата 80 в солевом растворе, qwk x 3) путем IT инъекции; или внутривенно вводили доцетаксел (30 мг/кг, qwk x 3). Через двадцать шесть дней после имплантации клеток в день D1 исследования животных с объемом опухоли от 108 до 172 мм³ разбивали на пять групп (n=10), где средний объем опухоли в группе находился в диапазоне 136-141 мм³. Все способы лечения начинали в день D1 исследования. Все экспериментальные способы лечения исследовали в группах из 10 мышей. Размеры опухолей измеряли два раза в неделю. Эксперимент завершали, когда объем опухоли достигал 2000 мм³ или через 60 дней в зависимости от того, что происходило раньше. Было определено, что максимальная возможная задержка роста опухоли (TGD) в указанном исследовании составляла 41%.

Частицы паклитаксела и частицы доцетаксела имели высокую активность в модели карциномы простаты РС-3. Все режимы, независимо от дозы/схемы введения, обеспечивали значительное продление выживаемости и во всех случаях максимальную возможную TGD, достижимую в этом исследовании. Результаты у животных, которым вводили частицы паклитаксела, частицы доцетаксела и доцетаксел, свидетельствовали о схожей эффективности. Все режимы лечения хорошо переносились. На фигуре 2 показан средний объем опухоли в модели ксенотрансплантата опухоли простаты РС-3 у мышей, которым вводили IT носитель, NanoDoce, NanoPac и в.в. доцетаксел.

Пример 5. Исследования рака груди MDA-MB-231

Задачей настоящего исследования было определение ответа имплантированных подкожно (п.к.) ксенотрансплантатов рака груди человека MDA-MB-231 на введение частиц паклитаксела («NanoPac™») и частиц доцетаксела («NanoDoce™»). Исследуемые изделия показаны в таблице 8.

*Для мыши с массой тела 25 г

Дозируемые составы

NanoPac™: 0,75 мл 1% раствора полисорбата 80 («Т80») для перерастворения добавляли в пробирку с NanoPac™ (306 мг/пробирка). Получали раствор для перерастворения, стерильно фильтровали через фильтр 0,22 микрон в день получения и хранили в холодильнике (от 2 до 8°С) не более 7 дней. Пробирку интенсивно встряхивали вручную, переворачивая, в течение 1 минуты. Непосредственно после встряхивания в пробирку добавляли 6,9 мл 0,9% хлорида натрия для инъекций USP для получения 40 мг/мл суспензии (7,65 мл) и встряхивали пробирку вручную еще 1 минуту. После перемешивания оставляли суспензию отстаиваться на 5 минут для понижения количества захваченного воздуха и уровня пены.

Проведение процедуры: комнатная температура.

Стабильность: Составы выдерживали при комнатной температуре, считали, что стабильность сохранялась 8 часов.

NanoDoce™: 1,33 мл 1% Т80/10% этанола/0,9% солевого раствора для перерастворения добавляли в пробирку с частицами NanoDoce (200 мг/пробирка). Получали раствор для перерастворения, стерильно фильтровали через фильтр 0,22 микрон в день получения и хранили в холодильнике (от 2 до 8°С) не более 7 дней. Пробирку интенсивно встряхивали вручную, переворачивая, в течение 1 минуты. Непосредственно после встряхивания в пробирку добавляли 2 мл 0,9% хлорида натрия для инъекций USP и встряхивали вручную еще 1 минуту. В пробирку дополнительно добавляли 1,67 мл 0,9% хлорида натрия для инъекций USP и перемешивали вручную, переворачивая, еще 1 минуту. Конечный объем составлял 5 мл 40 мг/мл суспензии. После перемешивания суспензию оставляли отстаиваться по меньшей мере на 5 минут для уменьшения количества захваченного воздуха и уровня пены.

Проведение процедуры: комнатная температура.

Стабильность: Составы выдерживали при комнатной температуре, считали, что стабильность сохранялась 8 часов.

Паклитаксел: Сыпучий паклитаксел добавляли в клинический состав паклитаксела (6 мг/мл в смеси 50% этанола : 50% кремофора EL) для получения 12 мг/мл раствора и перемешивали на вортексе при необходимости. Добавляли хлорид натрия для инъекций USP (0,9%) для получения 3 мг/мл раствора паклитаксела и перемешивали на вортексе для смешения.

Проведение процедуры: теплая вода.

Стабильность: вводили путем инъекции через 20 минут после получения состава.

Доцетаксел: Добавляли хлорид натрия для инъекций USP (0,9%) для получения 3 мг/мл раствора доцетаксела (20 мг/мл в смеси 50% этанола : 50% Т80) и перемешивали на вортексе для смешения

Проведение процедуры: комнатная температура.

Стабильность: Составы выдерживали при комнатной температуре, считали, что стабильность сохранялась 8 часов.

Система исследования:

Вид и род: Мышь; NCr-nu/nu

Поставщик: Charles River Laboratories

Количество в исследовании: Самки - 50

Дизайн исследования: Всего 88 самкам мышей NCr-nu/nu подкожно (п.к.) имплантировали в правый бок фрагменты опухоли груди MDA-MB-231, пассированной in vivo. День имплантации опухолевых клеток (4 августа 2016 года) обозначали как день 0. У 50 животных опухоли вырастали до массы 100-221 мг (размер 100-221 мм³) в день 13 после имплантации опухолевых клеток (17 августа 2016 года), который определяли как день начала лечения/новой стадии (SD). Пятьдесят животных определяли в группы 1-5 таким образом, чтобы средняя масса опухоли во всех пяти группах в день 13 составляла 147,4-149,6 мг (медианная масса опухоли составляла 135-149 мг).

*IT=внутриопухолевое введение

**Общая доза указана для мыши с массой тела 25 г.

NanoPac™ и NanoDoce™ представляли собой суспензии. Перед заполнением каждого шприца и между инъекциями каждому животному исследуемое изделие осторожно взбалтывали/переворачивали. Внутриопухолевое введение исследуемого вещества предусматривало использование шести каналов для иглы на каждую опухоль (игла 27 калибра дюйма). Одну шестую объема дозы вводили в виде медленного болюса в каждый канал с ~15-секундными паузами перед медленным удалением иглы и переходили к следующему участку инъекции, расположенному на поверхности опухоли. Животных наблюдали один раз в день для выявления смертности и состояния агонии. Мышей взвешивали и проводили измерения опухоли два раза в неделю, начиная с первого дня лечения. Измеряли длину и ширину каждой опухоли. Объем опухоли определяли по формуле для эллипсоида:

Длина × Ширина²/2 = Объем (мм³)

Эту формулу также использовали для вычисления массы опухоли, предполагая единичную плотность (1 мм³ = 1 мг). Предел обнаружения опухоли составлял 32 мг (4×4 мм). Эксперимент продолжался 61 день со дня имплантации опухоли. Животным, чья масса тела уменьшалась более чем на 30% по сравнению с массой в первый день лечения, или у которых масса опухоли достигала 4000 мг, у которых происходило язвообразование или сходила кожа, проводили эвтаназию перед завершением исследования. Сравнение среднего объема опухоли после введения исследуемых изделий доцетаксела и NanoDoce™ и паклитаксела и NanoPac™ приведено на фигуре 3. Более 50% животных из групп 1-2 завершили исследование досрочно из-за язвообразования в опухоли, смерти или слишком крупного размера опухоли к 21 дню, таким образом, средние данные для этих групп не представлены.

Результаты

Ксенотрансплантаты рака груди человека MDA-MB-231 в контрольной группе, в которой вводили носитель (группа 1), выросли у всех 10 мышей, средняя масса опухоли достигала 1929 мг в день 29 (n=9; первое измерение после последнего дня лечения, 1 животное было удалено в день 22 из-за язвообразования). Гибель животных или уменьшение средней массы тела не наблюдали. Подавление опухоли сравнивали с контролем только до дня 33, когда в контрольной группе осталось 6 животных.

Было зафиксировано три случая гибели животных (день 20 и 27) при трехкратном IT введении (в неделю) NanoPac™ в дозе 100 мг/кг (группа 2), средняя масса тела не уменьшалась. Гибель животных происходила в дни IT инъекций. Повторное введение NanoPac™ не приводило к значительному подавлению роста ксенотрансплантатов рака груди MDA-MB-231 [средняя масса опухоли 1031 мг в день 29 (n=7), что соответствует разнице в -46,6% по сравнению с контролем, в котором вводили носитель (р>0,05)]. Пороговый уровень ответа наблюдали в день 26, где разница составляла -51,8%, что значительно отличалось от контрольной группы, в которой вводили носитель (р<0,05); результаты в день 19 также значительно отличались от контрольной группы, в которой вводили носитель (р<0,05). В двух случаях происходило полное обращение вспять опухоли, где опухоли не появлялись до завершения исследования.

Было зафиксировано два случая гибели животных (день 20 и 27) при трехкратном IT введении (в неделю) NanoDoce™ в дозе 100 мг/кг (группа 3), средняя масса тела не уменьшалась. Гибель животных происходила в дни IT инъекций. Повторное введение NanoDoce™ значительно подавляло рост ксенотрансплантатов рака груди MDA-MB-231 [средняя масса опухоли 143 мг в день 29 (n=8), что соответствует разнице -92,6% по сравнению с контролем, в котором вводили носитель (р<0,05)]. Подавление роста опухоли достигало порогового значения в день 33, где разница составляла -94,2% (р<0,05); средний объем опухоли уменьшался до 0 в день 40. Разница в % были значительной, начиная с дня 19 и до тех пор, когда проведение сравнения стало невозможным. У восьми выживших животных опухоли отсутствовали после завершения исследования в день 61.

Случаи гибели животных после трехкратного в.в. введения (в неделю) доцетаксела в дозе 30 мг/кг (группа 4) зафиксированы не были, средняя потеря массы тела составляла 19,6% (4,78 г, день 33). Повторное введение доцетаксела значительно подавляло рост ксенотрансплантатов рака груди MDA-MB-231 [средняя масса опухоли 16 мг в день 29 (n=10), что соответствует разнице -99,2% по сравнению с контролем, в котором вводили носитель (р<0,001)]. Подавление роста опухоли достигало порогового значения в день 33, разница составляла -99,8% (р<0,05); средний объем опухоли уменьшался до 0 в день 40. Разница в % была значительной, начиная с дня 19 и до тех пор, когда проведение сравнения стало невозможным. Полное подавление опухоли наблюдали в день 40, когда у всех 10 животных происходило полное обращение вспять опухоли, и опухоли отсутствовали до завершения исследования. Профиль подавления роста опухоли у животных, которым вводили доцетаксел, значительно отличался от животных, которым вводили NanoDoce™, только в дни 22-33.

Трехкратное в.в. введение (в неделю) паклитаксела в дозе 30 мг/кг (группа 5) переносилось, случаи гибели животных не были отмечены, средняя масса тела не уменьшалась. Введение паклитаксела значительно подавляло рост ксенотрансплантатов рака груди MDA-MB-231 [средняя масса опухоли 118 мг в день 29 (n=10), что соответствует разнице -93,9% по сравнению с контролем, в котором вводили носитель (р<0,05)]. Пороговое значение ответа наблюдали в день 33, где разница составляла -97,4%. Разница в % была значительной, начиная с дня 19 и до тех пор, когда проведение сравнения стало невозможным. Наблюдали шесть случаев полного обращения опухоли вспять, по завершении исследования у трех животных опухоли отсутствовали. Профиль подавления роста опухоли у животных, которым вводили паклитаксел, значительно отличался от животных, которым вводили NanoPac™, в дни 15 и 22-36.

Обсуждение

В группах, которым вводили IT NanoPac™ или NanoDoce™, происходило три или два случая гибели животных, соответственно. Случаи гибели животных происходили рано, и их не рассматривали как связанные с лечением. В контрольной группе и в группах, в которых вводили паклитаксел или доцетаксел, животные переносили введение, случаи гибели отсутствовали. Рост ксенотрансплантатов рака груди человека MDA-MB-231 значительно подавлялся при введении NanoDoce™, после которого выживало восемь животных, у которых опухоль отсутствовала. Рост ксенотрансплантатов рака груди человека MDA-MB-231 подавлялся при введении доцетаксела, после которого у 10 животных отсутствовала опухоль, но профиль подавления значительно отличался от введения NanoDoce™ в дни 22-33. Подавление роста ксенотрансплантов рака груди человека MDA-MB-231 было незначительным при введении NanoPac™ в день оценки, но значительная разница появлялась в дни 19 и 21. Кроме того, у двух животных к дню 49 опухоли отсутствовали (данные не показаны). Рост ксенотрансплантатов рака груди человека MDA-MB-231 значительно подавлялся при введении паклитаксела, которое было более эффективным по сравнению с введением NanoPac™ в дни 15 и 22-36. В день 49 опухоль отсутствовала у трех животных из группы, в которой вводили в.в. паклитаксел, и у двух животных из группы, в которой вводили IT NanoPac™. Рост ксенотрансплантатов рака груди человека MDA-MB-231 значительно подавлялся при введении доцетаксела и NanoDoce™. В день 49 опухоль отсутствовала у десяти животных из группы, в которой вводили в.в. доцетаксел, и у восьми животных из группы, в которой вводили IT NanoDoce™.

Пример 6. Исследования ксенотрансплантата рака груди человека МХ-1

Задачей настоящего исследования было определение ответа имплантированных подкожно (п.к.) ксенотрансплантатов рака груди человека МХ-1 на введение частиц паклитаксела (называемых NanoPac™) и частиц доцетаксела (называемых NanoDoce™). Исследуемые изделия показаны в таблице 10:

*Для мыши с массой тела 25 г

** Из-за ошибки в вычислениях состав носителя для NanoDoce был неверно описан в протоколе (приложение А) как 0,267% Т80/2,67% этанол/23,71% ФБР/73,33% солевой раствор (0,9%).

Дозируемые составы:

NanoPac™: 1) В пробирку с NanoPac (306 мг/пробирка) добавляли 0,75 мл 1% раствора Т80 для перерастворения. 2) Интенсивно встряхивали вручную, переворачивая, в течение 1 минуты. 3) Непосредственно после встряхивания в пробирку добавляли 6,9 мл 0,9% хлорида натрия для инъекций USP для получения 40 мг/мл суспензии (7,65 мл) и встряхивали пробирку вручную еще 1 минуту. После перемешивания оставляли суспензию отстаиваться на 5 минут для уменьшения количества захваченного воздуха и уровня пены.

Проведение процедуры: комнатная температура.

Стабильность: Составы выдерживали при комнатной температуре, считали, что стабильность сохранялась 8 часов.

NanoDoce™: 1) В пробирку с частицами NanoDoce (200 мг/пробирка) добавляли 1,0 мл раствора 1% Т80/10% этанол/89% ФБР для перерастворения. 2) Интенсивно встряхивали пробирку вручную, переворачивая, в течение 1 минуты. 3) Непосредственно после встряхивания в пробирку добавляли 2 мл 0,9% хлорида натрия для инъекций USP (0,9%) и встряхивали пробирку вручную еще 1 минуту. 4) В пробирку добавляли еще 2 мл хлорида натрия для инъекций USP (0,9%) и продолжали перемешивать вручную, переворачивая, в течение 1 минуты. Конечный объем 40 мг/мл суспензии NanoDoce составлял 5 мл. После перемешивания оставляли суспензию отстаиваться по меньшей мере на 5 минут для уменьшения количества захваченного воздуха и уровня пены.

Проведение процедуры: комнатная температура.

Стабильность: Составы выдерживали при комнатной температуре, считали, что стабильность сохранялась 8 часов.

Паклитаксел: 1) Добавляли сыпучий паклитаксел в клинический состав паклитаксела (6 мг/мл в растворе 50% этанола : 50% кремофора EL) для получения 12 мг/мл раствора. Перемешивали на вортексе при необходимости. 2) Добавляли хлорид натрия для инъекций USP (0,9%) для получения 3 мг/мл раствора паклитаксела. Перемешивали на вортексе для смешения.

Проведение операции: теплая вода.

Стабильность: Вводили через 20 минут после получения состава.

Доцетаксел: 1) Добавляли хлорид натрия для инъекций USP (0,9%) для получения 3 мг/мл раствора доцетаксела (20 мг/мл в растворе 50% этанол : 50% Т80). Перемешивали на вортексе для смешения.

Система исследования:

Вид и род: Мышь; NCr-nu/nu

Поставщик: Charles River Laboratories

Количество в исследовании: Самки - 50

Модель опухоли: Всего 88 самкам мышей NCr-nu/nu подкожно (п.к.) имплантировали в правый бок фрагменты опухоли груди МХ-1, пассированной in vivo. День имплантации опухолевых клеток обозначали как день 0. У 50 животных опухоли вырастали до массы 100-198 мг (размер 100-198 мм³) в день 10 после имплантации опухолевых клеток, который определяли как день начала лечения/новой стадии (SD). Пятьдесят животных определяли в группы 1-5 таким образом, чтобы средняя масса опухоли во всех пяти группах в день 10 составляла от 139,9 до 141,9 мг (медианная масса опухоли составляла 135 или 144 мг).

*ΙΤ = внутриопухолевое введение: использовали шести каналов для иглы на одну опухоль (игла 27 калибра дюйма), вводили одну шестую объема в виде медленного болюса в каждый канал, ожидали ~15 секунд, затем медленно удаляли иглу, каналы были распределены по поверхности опухоли.

NanoPac™ и NanoDoce™ представляли собой суспензии. Перед заполнением каждого шприца и между инъекциями каждому животному исследуемое изделие осторожно взбалтывали/переворачивали. Животных наблюдали один раз в день для выявления смертности и состояния агонии. Нежелательные признаки отмечали только в качестве исключения. Массу тела измеряли два раза в неделю, начиная с SD. Измерения опухоли проводили два раза в неделю, начиная с SD, при помощи цифрового штангенциркуля. Измеряли длину и ширину каждой опухоли. Объем опухоли определяли по формуле для эллипсоида: Длина × Ширина²/2 = Объем (мм³). Эту формулу также использовали для вычисления массы опухоли, предполагая единичную плотность (1 мм³ = 1 мг). Предел обнаружения опухоли составлял 32 мг (4×4 мм). Эксперимент продолжался 63 дня со дня имплантации опухоли. Животным, чья масса тела уменьшалась более чем на 30% по сравнению с массой в первый день лечения, или у которых масса опухоли достигала 4000 мг, у которых происходило язвообразование или сходила кожа, проводили эвтаназию перед завершением исследования. Средние объемы опухоли для каждой группы лечения показаны на фигуре 4. Более 50% животных из групп 1-2 завершили исследования досрочно из-за язвообразования в опухоли, смерти или слишком крупного размера опухоли к 26 дню, таким образом, средние данные для этих групп не представлены.

Результаты

Ксенотрансплантаты рака груди человека МХ-1 в контрольной группе, в которой вводили носитель (группа 1), выросли у всех 10 мышей, средняя масса опухоли составляла 1153 мг в день 24 (n=9; последний день лечения). Была зафиксирована одна смерть (день 21), и одно животное в состоянии агонии подвергли эвтаназии (день 25), уменьшение средней массы тела составляло 1,06% (0,26 г, день 14). Сравнение подавление опухоли проводили только до дня 38, когда в контрольной группе осталось 6 животных.

Было зафиксировано два случая гибели животных (дни 17 и 28) при трехкратном IT введении (в неделю) NanoPac™ в дозе 100 мг/кг (т.е. в группе 2), уменьшение средней массы тела составляло <1%. Гибель животного в день 17 происходила после IT инъекции. Повторное введение NanoPac™ не подавляло значительно рост ксенотрансплантатов рака груди МХ-1 [средняя масса опухоли 1096 мг в день 24 (n=9), что соответствует разнице -4,9% по сравнению с контролем, в котором вводили носитель (р>0,05)]. Пороговое значение ответа наблюдали в день 38, где разница составляла -14,1%, что незначительно отличалось от контрольной группы, в которой вводили носитель (р>0,05).

Было зафиксировано два случая гибели животных (дни 17 и 24) при трехкратном IT введении (в неделю) NanoDoce™ в дозе 100 мг/кг (т.е. в группе 3), средняя масса тела не уменьшалась. Гибель животных в дни 17 и 24 происходила после IT инъекции. Повторное введение NanoDoce™ значительно подавляло рост ксенотрансплантатов рака груди МХ-1 [средняя масса опухоли 449 мг в день 24 (n=9), что соответствует разнице -61,0% по сравнению с контролем, в котором вводили носитель (р<0,01)]. Подавление роста опухоли достигало порогового значения в день 38, где разница составляла -90,1% (р<0,001); средний объем опухоли продолжал уменьшаться до дня 56. Разница в % была значительной, начиная со дня 17 и до тех пор, когда проведение сравнения стало невозможным. Наблюдали четыре случая полного обращения вспять опухоли, где опухоли у животных отсутствовали до завершения исследования.

Двух животных подвергали эвтаназии из-за уменьшения массы тела >30% (дни 24 и 31) после трехкратного в.в. введения (в неделю) доцетаксела в дозе 30 мг/кг (т.е. в группе 4), уменьшение средней массы тела составляло 24,9% (5,90 г, день 31). Повторное введение доцетаксела значительно подавляло рост ксенотрансплантатов рака груди МХ-1 [средняя масса опухоли 0,9 мг в день 28 (n=9), что соответствует разнице -99,9% по сравнению с контролем, в котором вводили носитель (р<0,001)]. Разница в % была значительной, начиная со дня 14 и до тех пор, когда проведение сравнения стало невозможным. Полное подавление опухоли наблюдали в день 31, когда у всех девяти животных опухоли полностью обратились вспять. У восьми выживших животных опухоли отсутствовали после завершения исследования в день 63. Профиль подавления роста опухоли у животных, которым вводили доцетаксел, значительно отличался от животных, которым вводили NanoDoce™, в дни 14-52, но при этом разница была незначительной в дни 56-63.

Животные переносили трехкратное в.в. введение (в неделю) паклитаксела в дозе 30 мг/кг (т.е. в группе 5), случаи смерти отмечены не были, уменьшение средней массы тела составляло 2,44% (0,59 г, день 14). Введение паклитаксела значительно подавляло рост ксенотрансплантатов рака груди МХ-1 [средняя масса опухоли 309 мг в день 24 (n=10), что соответствует разнице -73,2% по сравнению с контролем, в котором вводили носитель (р<0,001)]. Пороговый ответ наблюдали в день 31, где разница составляла -86,0%. Разница в % была значительной, начиная со дня 14 и до тех пор, когда проведение сравнения стало невозможным. Профиль подавления роста опухоли у животных, которыми вводили паклитаксел, значительно отличался от животных, которым вводили NanoPac™, в дни 14-38 (последний день, когда в группе, в которой вводили NanoPac™, оставались мыши).

Обсуждение:

Было зафиксировано по два случая гибели, агонии или эвтаназии животных из-за уменьшения массы тела в каждой группе за исключением введения паклитаксела. Введение паклитаксела переносилось животными без смертельных случаев. Рост ксенотрансплантатов рака груди человека МХ-1 значительно подавлялся при IT введении NanoDoce™, в этой группе выжили четыре животных, не имевших опухоль. Рост ксенотрансплантатов рака груди человека МХ-1 подавлялся при в.в. введении доцетаксела, которое обеспечивало восемь выживших животных, не имевших опухоль, но которое значительно отличалось от введения NanoDoce™ за исключением завершения исследования (дни 56-63). Подавление роста ксенотрансплантатов рака груди человека МХ-1 было незначительным при введении NanoPac™. Рост ксенотрансплантатов рака груди человека МХ-1 значительно подавлялся при введении паклитаксела, которое было более эффективным по сравнению с введением NanoPac™.

Пример 7. Исследования ксенотрансплантатов рака груди человека JIMT-1

Задачей настоящего исследования было определение ответа имплантированных подкожно (п.к.) ксенотрансплантатов рака груди человека JIMT-1 на введение частиц паклитаксела (называемых Nanotax™). Использовали следующие исследуемые изделия:

Процедуры:

• 100 самкам мышей СВ.17 SCID с CR (полная устойчивость) вводили инъекцию 1x10 опухолевых клеток JIMT-1 в 50% матригеле п. к. в бок.

• Объем инъекции клеток составлял 0,1 мл/мыши.

• Возраст в начале: от 8 до 12 недель.

• Когда средний размер опухолей достигал 100-150 мм³, создавали пары соответствия и начинали лечение. Исследуемые изделия показаны в таблице 12:

# Контрольная группа

паклитаксел = паклитаксел, 5% этанола : 5% кремофора EL в D5W

Nanotax = Nanotax в 0,1% (масс./об.) полисорбате 80 в солевом растворе

носитель = 0,1% (масс./об.) полисорбат 80 в солевом растворе

Вводимый объем = 2,5 мл/кг (0,050 мл/мышь с массой тела 20 г). Объем регулировали в соответствии с массой тела. В группе 5, в.в. паклитаксел, вводимый объем составлял 10 мл/кг (0,20 мл/мышь с массой тела 20 г).

• Масса тела: 5/2 (измерение 5 дней, перерыв на 2 дня), затем два раза в неделю (biwk) до завершения исследования.

• Любому животному, у которого хотя бы раз наблюдали уменьшение массы тела >30%, или у которого по результатам трех последовательных измерений уменьшение массы тела составляло >25%, проводили эвтаназию.

• Конечная точка TGD. Животных исследовали по отдельности. Эксперимент завершали, когда объем опухоли достигал 1000 мм³ или через 60 дней, в зависимости от того, что происходило раньше. По достижения конечной точки животным проводили эвтаназию.

Оценку подавления роста опухоли проводили в день D29 (последний день введения животным, которым вводили 5 доз, группы G1, 3, 4) при граничном значении объема опухоли 1000 мм³, исследование завершали в день D50, когда для анализа общей выживаемости использовали пересмотренное граничное значение объема опухоли в 600 мм³.

Затем в день 50 у 3 мышей с наилучшим ответом из каждой группы собирали образцы опухолей для проведения анализа и определения концентрации паклитаксела в опухолевой ткани. Время проведения анализа в каждой группе относительно времени введения последней дозы лекарственного средства показано далее:

через 21 день после введения последней дозы в группах 1, 3 и 4;

через 49 дней в группе 2; и

через 35 дней в группе 5.

В указанных исследованиях было показано, что Nanotax (NanoPac) не имел значительной активности в модели карциномы груди JIMT-1. Введение животным пяти доз Nanotax (NanoPac) приводило к небольшому продлению выживаемости и увеличению числа выживших животных по сравнению с контрольными группами, в которых вводили носитель. Результаты у всех животных, которым вводили Nanotax (NanoPac), были значительно ниже порогового значения 60% TGI, это указывает на возможную терапевтическую активность. Паклитаксел обеспечивал значительное TGI и существенно продлевал выживаемость в указанном исследовании. Все способы лечения хорошо переносились.

Обработку тканей проводили следующим образом:

1. Взвешивали контрольную опухолевую ткань и образцы опухолевой ткани и добавляли по три объема воды для получения образцов, разбавленных в 4 раза.

2. Гомогенизировали опухолевые ткани в гомогенизаторе FastPrep®-24 со скоростью 4,0 м/с в течение 100 с.

3. По 50 мкл гомогената контрольной опухолевой ткани добавляли в отдельные лунки 96-луночного планшета в качестве стандартов (STD), образцов для контроля качества (QC) и для холостых опытов.

4. В гомогенаты контрольной опухолевой ткани добавляли по 50 мкл соответствующего раствора в образцы STD и QC (в холостые пробы добавляли 50 мкл разбавителя).

5. В случае образцов гомогенатов исследуемой опухолевой ткани по 50 мкл каждого образца добавляли в отдельные лунки 96-луночного планшета и 50 мкл аликвоту разбавителя добавляли в каждый образец ткани.

6. Во все образцы добавляли 200 мкл раствора внутреннего стандарта (200 нг/мл варфарин) в ACN.

7. Планшет интенсивно перемешивали на вортексе в течение 10 минут и затем центрифугировали в течение 10 минут при 4000 об/мин (центрифуга Sorvall Legend X1R, Thermo Scientific) при 15°C.

8. После центрифугирования 100 мкл аликвоты надосадочной жидкости переносили в новый 96-луночный планшет, содержащий по 100 мкл воды в каждой лунке.

9. Планшет перемешивали на вортексе примерно 1 минуту и затем отбирали аликвоты для анализа ЖХ/МС/МС.

Результаты показаны в таблице 13:

НПО: ниже предела количественного обнаружения в 1 нг/г перед разбавлением.

Группа 1: носитель (IT, qwk x3)

Группа 2: Nanotax (37,5 мг/кг, IT, qwk x1)

Группа 3: Nanotax (12,5 мг/кг, IT, qwk x3)

Группа 4: Nanotax (37,5 мг/кг, IT, qwk x3)

Группа 5: паклитаксел (30 мг/кг, в.в., qwk x3)

Полученные данные неожиданно демонстрируют, что частицы паклитаксела (группы 2, 3 и 4) удерживались в течение очень продолжительного времени в опухоли.

Пример 8

Самкам бестимусных мышей (NCr-nu/nu) с имплантированными в правый бок ксенотрансплантатами опухоли груди MDA-MB-231 (PD-PB-04-2016; см. выше) вводили 100 мг/кг дозы NanoDoce® в виде внутриопухолевых инъекций в дни 13, 20 и 27 после имплантации опухоли. В день 61 после имплантации опухоли умерщвляли четырех животных из группы 3 (100 мг/кг NanoDoce IT qwk x 3) и собирали образцы кожи и подкожных тканей в участке имплантации опухоли. Гомогенизировали ткани в воде. Аликвоты гомогената экстрагировали ацетонитрилом и анализировали экстракты путем ЖХ/УФ/МС. Синтезированный стандарт доцетаксела использовали для сравнения времени удерживания (T_R), УФ и профиля фрагментации с неизвестным соединением, присутствующим в образцах тканей. Анализ экстрактов тканей из участка опухоли показал, что доцетаксел содержался в двух образцах (животные 3-7 и 3-8) среди четырех исследуемых тканей. В анализе ЖХ/УФ/МС было показано, что время удерживания (T_R=16,6 мин) и спектры МС² пика с m/z 807,7-808,7 на экстрагированной ионной хроматограмме (XIC), полученного из экстрактов тканей, были схожими с исходным стандартным образцом доцетаксела (T_R=16,16 мин).

В целом, с учетом схожести времени удерживания и данных масс-спектрометрии с исходным сравнительным стандартом было подтверждено, что у двух из четырех мышей, используемых в модели ксенотрансплантата опухоли груди (MDA-MB-231), которым внутрь опухоли вводили NanoDoce^®, соединение, выделенное из образцов ткани из участка имплантации опухоли, представляло собой доцетаксел.

Пример 9. Исследование фазы Па с увеличением дозы фокальной терапии рака простаты с использованием частиц паклитаксела (NanoPac™) у субъектов, которым проводят радикальную простатэктомию

ОБЩЕЕ ОПИСАНИЕ ПРОТОКОЛА

В указанном открытом исследовании фазы IIa с увеличением дозы с расширенной группой, в которой вводят частицы паклитаксела, такие как описано в настоящей заявке, для которых были определены наилучшая переносимость и профиль безопасности, субъектам с раком простаты, у которых назначено проведение простатэктомии, планируется вводить частицы паклитаксела путем инъекции при визуализационном контроле непосредственно в наиболее пораженную долю предстательной железы за четыре недели до простатэктомии. Планируется, что исследование будет включать фазу с увеличением дозы и фазу с подтверждением дозы.

На фазе увеличения дозы планируется исследовать частицы паклитаксела в концентрации 6, 10 и 15 мг/мл, где объем инъекции составляет до 20% от объема наиболее пораженной доли предстательной железы, в группах из трех пациентов, где участников групп отбирают последовательно, начиная с наименьшей концентрации. После изучения данных, полученных в группах, советом по мониторингу данных безопасности (DSMB) можно начинать отбор в следующую группу, и еще трех участников можно отбирать для существующей дозы, или если первая доза не обеспечивает достаточную безопасность и переносимость, то исследование может быть остановлено. Для введения дозы, которая была определена как наиболее подходящая для дальнейшей оценки и соответствует максимальной дозе с приемлемым профилем безопасности и переносимости, определенной DSMB, планируется набрать дополнительных субъектов для получения группы из 12 субъектов для указанной дозировки.

Перед инъекцией частиц паклитаксела будет определен объем опухоли и уровень простатспецифического антигена (ПСА) в сыворотке. Планируется собирать образцы для фармакокинетики, ПСА и эякулята в интервале между введением инъекции и проведением простатэктомии. Планируется проводить визуализацию путем многопараметровой МРТ (мпМРТ) за две или три недели перед инъекцией частиц паклитаксела (также называемых NanoPac™) и перед простатэктомией. Планируется проводить оценку лимфатических узлов предстательной железы и таза, удаленных во время простатэктомии.

Конечные критерии оценки:

Первичный критерий оценки: Безопасность и переносимость, определяемые на основании нежелательных явлений (НЯ), изменений измеряемых лабораторных показателей, данных медицинского осмотра и основных показателей жизнедеятельности.

Вторичные критерии оценки:

• Концентрация паклитаксела в системной кровотоке после инъекции и перед проведением простатэктомии;

• Наличие паклитаксела в опухоли внутри предстательной железы, ипсилатеральной доли предстательной железы, контралатеральной доли предстательной железы и лимфатических узлов таза, удаленных во время простатэктомии;

• Ответ в опухоли (изменение визуализированного объема на мпМРТ; гистологическая оценка путем биопсии);

• Наличие опухолевых клеток в опухоли внутри предстательной железы, ипсилатеральной доли предстательной железы, контралатеральной доли предстательной железы и лимфатических узлов таза, удаленных во время простатэктомии.

Популяция: Как максимум до 30 мужчин с одним участком аденокарциномы простаты, которым назначена радикальная простатэктомия.

Описание исследуемого агента: порошок NanoPac™ (стерильные частицы паклитаксела) для суспензии («NanoPac») для прямой инъекции в наиболее пораженную долю предстательной железы в концентрациях 6, 10, 15 мг/мл, где объем инъекции составляет до 20% от наиболее пораженной доли предстательной железы.

Название и описание исследуемого агента:

Состав дисперсного паклитаксела, называемый порошком NanoPac™ (стерильный дисперсный паклитаксел) для суспензии получают при помощи способа осаждения с использованием сжатого антирастворителя (РСА), в котором применяют сверхкритический диоксид углерода и ацетон для получения наночастиц паклитаксела с хорошо охарактеризованным распределением частиц по размерам. После РСА частицы паклитаксела вводят в 60 мл пробирки из прозрачного стекла 1 типа, USP, (306 мг/пробирка), каждую из которых закрывают бромбутиловой пробкой и обжимным алюминиевым колпачком и стерилизуют гамма-излучением. Перед введением в больнице/клинике частицы паклитаксела следует перерастворять в 1% полисорбате 80, NF, в 0,9% хлориде натрия (солевой раствор) для инъекций, USP, для получения суспензии. Суспензию следует дополнительно разбавлять 0,9% хлоридом натрия для инъекций, USP, для обеспечения конечного клинического состава. Указанные операции перерастворения и разбавления следует проводить в аптеках при клиниках. Концентрация NanoPac в конечном клиническом составе должна составлять 6 мг/мл, 10 мг/мл или 15 мг/мл. Конечная концентрация полисорбата 80 составляет 0,1% в 6 мг/мл суспензии, 0,16% в 10 мг/мл суспензии и 0,25% в 15 мг/мл суспензии.

Важность исследования:

Рак простаты является вторым по распространенности раковым заболеванием у мужчин, уступая только немеланомному раку кожи. Несмотря на широкое распространение этого заболевания, эта область медицины постоянно развивается, что ставит пациентов и лиц, оказывающих медицинские услуги, перед сложным выбором. В настоящее время способы лечения рака простаты включают, главным образом, один из двух вариантов: активный надзор или радикальную терапию железы в целом. Тем не менее, такой выбор не может в полной мере охватить гетерогенность рака простаты и особенности реакции каждого пациента. Отчасти в результате широкого использования ПСА в качестве средства скрининга все большему количеству мужчин ставят диагноз низкорискового низкозлокачественного рака. Активный надзор может быть подходящим выбором для некоторых мужчин, так как радикальная терапия железы в целом несет в себе риск последствий, изменяющих качество жизни, таких как импотенция и недержание. Этот факт подтверждается статистикой, у 49% мужчин, которым проводили радикальную простатэктомию, был обнаружен незначительный или невыраженный рак. Тем не менее, рак простаты имеет четвертый уровень смертности среди всех раковых заболеваний, и у 73% пациентов, которые изначально находились под активным надзором, но которым в конечном итоге была проведена простатэктомия, был обнаружено значимое раковое заболевание. Таким образом, активный надзор не только создает риск прогрессирования заболевания, но также может являться источником психологического стресса у пациентов.

Обоснование:

В указанное исследование фазы На будут включены пациенты с аденокарциномой простаты, которым назначено проведение простатэктомии. Дизайн исследования позволяет проводить оценку безопасности прямой инъекции частиц паклитаксела в наиболее пораженную долю предстательной железы в качестве фокальной терапии перед простатэктомией. Авторы изобретения сделали предположение о том, что прямая инъекция частиц паклитаксела в простату приведет к ограниченному системному воздействию паклитаксела, если вообще вызовет его, и, таким образом, вызовет только слабо выраженные и временные НЯ.

Прямая инъекция в отличие от внутривенного (в.в.) введения частиц паклитаксела обеспечит локальное накопление лекарственного средства в повышенной концентрации в целевом участке заболевания при пониженной системной токсичности. Можно ожидать, что введение частиц паклитаксела внутрь простаты будет более эффективным по сравнению с в.в. введением паклитаксела благодаря продленному удерживанию и растворению в простате, что будет непрерывно обеспечивать повышенную концентрацию паклитаксела в участке опухоли. Планируется проводить субъектам инъекцию NanoPac™, руководствуясь данными комбинированной визуализации магнитного резонанса-трансректального ультразвукового исследования (MR-TRUS), непосредственно в наиболее пораженную долю предстательной железы. Через четыре недели после инъекции NanoPac™ пациенту будет проведена радикальная простатэктомия.

Перед включением в исследование субъектам будет проведена биопсия предстательной железы, основанная на данных ультразвукового исследования, для диагностики и определения стадии рака простаты. Указанную биопсию планируется использовать для выявления основного поражения, которое определяют как участок с наивысшей суммой Глисона. Результаты ультразвукового исследования, проводимого во время биопсии, также можно использовать для вычисления общего объема предстательной железы. Объем наиболее пораженной доли предстательной железы может быть определен путем вычисления 50% от общего объема предстательной железы, измеренного в ультразвуковом исследовании, проводимом во время биопсии перед исследованием.

Исследование будет включать фазу с увеличением дозы и фазу с подтверждением дозы.

• Увеличение дозы: Планируется исследовать NanoPac™ в концентрациях 6, 10 и 15 мг/мл, объем инъекции до 20% от наиболее пораженной доли предстательной железы. Набор в группы будет проводиться последовательно, начиная с наименьшей концентрации. В каждой группе по плану будет как минимум три субъекта. Данные первых трех субъектов из группы будут изучены и оценены в DSMB. Результатом будет решение о а) увеличении дозы до следующего значения; b) добавлении еще трех субъектов в группу с текущей дозой; или с) увеличении группы с предыдущей дозой на три субъекта.

• Фаза с подтверждением дозы: После определения дозы, подходящей для расширения группы и проведения дополнительной оценки, проведут отбор субъектов в группу с введением указанной дозы, чтобы в группе 12 субъектам вводили указанную дозу. Если две дозы являются схожими, то субъектам будут вводить каждую из доз; тем не менее, общее количество субъектов, которым проводят лечение, будет составлять 12.

Процедуры исследования стандарта здравоохранения

У субъектов, отобранных для указанного исследования, запланировано проведение простатэктомии. Традиционную подготовку к хирургии и хирургию, как таковую, рассматривают как стандарт здравоохранения. Последующие процедуры после хирургии будут проведены в соответствии со стандартом здравоохранения. Уровень ПСА в сыворотке будет определен перед инъекцией частиц паклитаксела и еженедельно в период от инъекции частиц паклитаксела до простатэктомии.

Визуализация ультразвуком и мпМРТ будет проведена перед участием в исследовании в рамках традиционного исследования и подтверждения аденокарциномы. Указанные результаты будут использованы в качестве данных до начала лечения (или исходного уровня) перед инъекцией частиц паклитаксела; затем за три дня до простатэктомии будет проведена другая процедура мпМРТ, необходимая для проведения исследования, и в рамках простатэктомии будет проведено ультразвуковое исследование.

В период между инъекцией частиц паклитаксела и простатэктомией, начиная с первой недели после инъекции, еженедельно планируется собирать образцы эякулятов и проводить оценку для определения концентрации паклитаксела.

В день проведения простатэктомии после анестезии будет проведена биопсия. Непосредственно после биопсии под той же анестезией субъектам будет проведена запланированная простатэктомия, и после хирургии будут взяты образцы из удаленной ткани (предстательной железы и лимфатических узлов) для оценки концентрации паклитаксела и опухолевых клеток, что было описано выше.

Пример 10. Исследование фазы IIa для оценки безопасности внутриопухолевой инъекции частиц паклитаксела субъектам с локально распространенной аденокарциномы поджелудочной железы

В указанном открытом исследовании фазы Па субъектам с локально распространенной аденокарциномой поджелудочной железы, локализованной в теле или хвосте поджелудочной железы, будет проведен по меньшей мере один курс химиотерапии в рамках стандарта здравоохранения (SOC). После достаточного гематологического восстановления субъектам планируется вводить ITU частицы паклитаксела (т.е. NanoPac™) путем прямой инъекции на основании данных эндоскопического ультразвукового исследования. У субъектов планируется отслеживать общую выживаемость (OS), выживаемость без прогрессирования заболевания (PFS), уровень СА-19-9, уровень карциноэмбриональных антигенов (СЕА), уменьшение боли и ответ опухоли на терапию (что можно увидеть при визуализации).

Субъекты будут последовательно отобраны в группы, в которых вводят увеличивающиеся концентрации частиц паклитаксела 6, 10 или 15 мг/мл путем прямой инъекции в опухоль внутри поджелудочной железы в объеме до 20% от объема опухоли (где каждому субъекту вводят не более 5 мл). Исследование будет включать фазу с увеличением дозы и фазу с подтверждением дозы.

На основании приведенных расчетов объема опухоли количество частиц паклитаксела, соответствующее 20% от объема опухоли, но не превышающее 5 мл у любого субъекта, можно вводить в опухоль путем инъекции.

Частицы паклитаксела для применения в исследовании (называемые NanoPac™) получают в CritiTech, Inc. (Lawrence, Kansas) при помощи способа осаждения с использованием сжатого антирастворителя (РСА), в котором применяют сверхкритический диоксид углерода и ацетон для получения наночастиц паклитаксела с хорошо охарактеризованным распределением частиц по размерам. Перед введением в больнице/клинике порошок частиц паклитаксела в пробирке суспендируют в стерильном растворе для перерастворения (1% полисорбат 80, NF, в 0,9% хлориде натрия для инъекций, USP) и затем дополнительно разбавляют 0,9% хлоридом натрия для инъекций, USP, для получения 6, 10 или 15 мг/мл суспензии NanoPac™.

Предполагается, что введение суспензии дисперсного паклитаксела в участок злокачественного образования создает депо паклитаксела внутри пораженной области (в данном случае опухоли поджелудочной железы), в результате чего происходит медленное высвобождение паклитаксела из частиц в пространство внутри опухоли, что тем самым обеспечивает продленное воздействие паклитаксела в участке злокачественного образования. Пониженный клиренс из поджелудочной железы должен приводить к пониженному системному уровню паклитаксела, что дополнительно ограничивает системную токсичность.

Исследование фазы IIa планируется проводить для оценки безопасности и переносимости частиц паклитаксела не более чем у 30 пациентов, которым проводят химиотерапию локально распространенной аденокарциномы поджелудочной железы, локализованной в хвосте или теле поджелудочной железы. В указанном клиническом испытании частицы паклитаксела планируется вводить напрямую в поджелудочную железу путем тонкоигольной инъекции под контролем эндоскопического ультразвукового исследования (EUS-FNI).

Лекарственный продукт содержится в 60 мл пробирке из прозрачного стекла 1 типа, USP, (306 мг/пробирка) в виде дисперсного порошка паклитаксела, закрытый бутиловой пробкой и алюминиевым обжимным колпачком, и стерилизованный гамма-излучением. Для клинического введения порошок частиц паклитаксела в пробирке суспендируют стерильным раствором для перерастворения (1% полисорбат 80, NF, в 0,9% хлориде натрия для инъекций, USP) и затем дополнительно разбавляют различным количеством 0,9% хлорида натрия для инъекций, USP. Это приводит к получению 6, 10 или 15 мг/мл суспензии NanoPac, содержащей 0,1, 0,16 или 0,25% полисорбата 80, NF, соответственно, в 0,9% хлориде натрия для инъекций, USP.

Конечные критерии оценки: Первичный критерий оценки: Безопасность и переносимость определяемые на основании нежелательных явлений (НЯ), изменений измеряемых лабораторных показателей, данных медицинского осмотра и основных показателей жизнедеятельности.

Вторичные критерии оценки:

• Концентрация паклитаксела в системном кровотоке после инъекции (определенная в анализе РК);

• Ответ опухоли (RECIST согласно Eisenhauer et al. 2009);

• Уменьшение боли (измеренное по визуальной аналоговой шкале [ВАШ]);

• Изменение уровня маркера опухоли СА19-9;

• Изменение уровня маркера опухоли СЕА.

Популяция: Не более 30 субъектов с локально распространенной аденокарциномой поджелудочной железы, локализованной в хвосте или теле поджелудочной железы.

1. Способ лечения солидной опухоли, включающий введение субъекту с солидной опухолью эффективного количества композиции, содержащей частицы таксана, для лечения опухоли, при этом композицию вводят напрямую в опухоль путём инъекции, где частицы таксана содержат по меньшей мере 95% паклитаксела или доцетаксела или их фармацевтически приемлемых солей, при этом частицы таксана имеют удельную площадь поверхности (УПП) от 10 м²/г до 50 м²/г, при этом частицы таксана имеют среднюю насыпную плотность от 0,050±0,0025 г/см³ до 0,12±0,006 г/см³ и при этом частицы таксана включают агломерированные частицы таксана и неагломерированные частицы таксана.

2. Способ по п. 1, в котором указанная композиция состоит из частиц таксана и фармацевтически приемлемого носителя.

3. Способ по п. 2, в котором указанный носитель представляет собой жидкий носитель на водной основе.

4. Способ по п. 3, в котором указанный жидкий носитель на водной основе представляет собой солевой раствор.

5. Способ по п. 1, в котором указанная композиция представлена в форме суспензии.

6. Способ по п. 1, в котором указанный таксан представляет собой паклитаксел или его фармацевтически приемлемую соль.

7. Способ по п. 1, в котором указанная опухоль выбрана из группы, состоящей из сарком, карцином и лимфом, опухолей груди, опухолей простаты, опухолей головы и шеи, глиобластом, опухолей мочевого пузыря, опухолей поджелудочной железы, опухолей печени, опухолей яичников, колоректальных опухолей, кожных, лимфоидных опухолей и опухолей желудочно-кишечного тракта.

8. Способ по п. 1, в котором указанная опухоль выбрана из группы, состоящей из опухолей яичников, мочевого пузыря, груди, простаты, легкого, поджелудочной железы, кожных, лимфоидных опухолей и опухолей желудочно-кишечного тракта.

9. Способ по п. 1, в котором указанный таксан представляет собой доцетаксел или его фармацевтически приемлемую соль.

10. Способ по п. 9, в котором указанная опухоль выбрана из группы, состоящей из опухолей яичников, мочевого пузыря, груди и простаты.

11. Способ по п. 1, в котором указанные частицы таксана содержат по меньшей мере 98% таксана.

12. Способ по п. 1, в котором указанные частицы таксана имеют УПП от 18 м²/г до 50 м²/г.

13. Способ по п. 12, в котором указанный таксан представляет собой паклитаксел или его фармацевтически приемлемую соль, и частицы паклитаксела имеют УПП от 22±1,1 м²/г до 40±2 м²/г.

14. Способ по п. 9, в котором указанные частицы доцетаксела имеют насыпную плотность от 0,06±0,003 г/см³ до 0,1±0,005 г/см³.

15. Способ по п. 1, в котором указанные частицы имеют среднечисловой размер от 0,4±0,02 мкм до 1,2±0,06 мкм.

16. Способ по п. 5, в котором указанная суспензия дополнительно содержит полисорбат, причём полисорбат содержится в суспензии в концентрации от 0,01±0,0005% (об./об.) до 1,5±0,075% (об./об.).

17. Способ по п. 5, в котором указанный таксан содержится в суспензии в концентрации от 1±0,05 мг/мл до 40±2 мг/мл.

18. Способ по п. 1, в котором указанные частицы таксана (i) не содержат покрытие; (ii) не включены, не содержатся, не заключены или не инкапсулированы в твердое вспомогательное вещество; и (iii) не являются микросферами, липосомами или микрокапсулами, содержащими химиотерапевтический агент и вспомогательное вещество.

19. Способ по п. 1, в котором указанные частицы таксана не содержат покрытие, и композиция не включает полимеры, белки, полиэтоксилированное касторовое масло и/или глицериды полиэтиленгликоля, содержащие моно-, ди- и триглицериды и сложные моно- и диэфиры полиэтиленгликоля.