Способ получения индигокармина

Изобретение относится к способу получения динатрий-5,5'-индигосульфоната, который находит применение в качестве красителя в пищевой, фармацевтической и косметической отрасли, а также в области печати и фотографии. Способ включает следующие стадии: i) индиго подвергают сульфированию с получением смеси, содержащей 5,5'-индигосульфоновую кислоту; ii) смесь, полученную на стадии i), подвергают восстановлению с получением таким образом композиции, содержащей лейко-5,5'-индигосульфоновую кислоту; iii) лейко-5,5'-индигосульфоновую кислоту выделяют из композиции, полученной на стадии ii); iv) лейко-5,5'-индигосульфоновую кислоту, полученную на стадии iii), окисляют до динатрий-5,5'-индигосульфоната. Способ характеризуется быстротой, высокими выходами продукта и возможностью масштабирования. Изобретение относится также к способам производства диагностического продукта для окрашивания тканей и пищевой композиции, содержащим динатрий-5,5'-индигосульфонат. 3 н. и 13 з.п. ф-лы, 1 пр.

 

Настоящее изобретение относится к новому способу получения молекулы индигокармина, который дает возможность достичь высокой степени чистоты и в то же время очень прост для выполнения и характеризуется высокими выходами.

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Индигокармин, также известный под названиями динатрий-5,5'-индигосульфонат и динатрий-3,3'-диоксо-2,2'-бис(индолиден)-5,5'-дисульфонат (номер CAS 860-22-0), известен своим применением в качестве красителя, в пищевой, фармацевтической и косметической отрасли, но также в области печати и фотографии (R.W. Sabnis, Handbook of Biological Dyes and Stains, 2010, Wiley and Sons, c. 239). Для пищевого применения индигокармин подлежит спецификациям, описанным в EFSA Journal 2014; 12(7): 3768. В фармацевтической области его применяют, в частности, для окрашивания тканей, для обнаружения некоторых опухолевых клеток. Динатрий-5,5'-индигосульфонат обычно получают из индиго или 2-(1,3-дигидро-3-оксо-2H-индол-2-илиден)-1,2-дигидро-3H-индол-3-она (номер CAS: 482-89-3) в соответствии с реакцией, кратко описанной на схеме 1 ниже:

Однако в ходе этой реакции обычно образуются другие соединения, которые являются моно-, ди-, три- или тетрасульфированными, главным образом в положениях 5, 5', 7, 7'.

Дисульфированные изомеры присутствуют в больших количествах и обладают очень сходными физико-химическими свойствами с индигокармином. Из-за структурного сходства дисульфированных молекул их трудно разделить. Недостаток присутствия дисульфированных изомеров для медицинского и диагностического применения состоит во введении нежелательных загрязняющих веществ в организм человека. В работе Sung-Hoon Kim et al., Korean J. Anesthesiol. 2011 Nov; 61(5): 435-438 описаны случаи гипотензии у пациентов в результате введения им индигокармина, содержащего примеси. Эти побочные эффекты были связаны с примесями.

Таким образом, задача изобретения состояла в разработке способа получения динатрий-5,5'-индигосульфоната, по существу не содержащего примесей, и, в частности, дисульфированных примесей. Цель состояла в том, чтобы разработать способ, посредством которого получают динатрий-5,5'-индигосульфонат, удовлетворяющий требованиям Европейского агентства по безопасности продуктов питания (EFSA) для пищевого применения и стандартам МКГ (Международной конференции по гармонизации технических требований к регистрации фармацевтических препаратов для медицинского применения; гармонизированное трехчастное руководство МКГ - Примеси в новых лекарственных веществах - Q3A(R2); версия стадии 4; 25 октября 2006). В стандарте МКГ указано, что действующее вещество не должно содержать неидентифицированных примесей в количестве, большем или равным 0,10% относительно действующего вещества. Цель состояла в разработке способа, который является быстрым, экономичным, эффективным, с высокими выходами, и обладающий возможностью масштабирования для промышленного применения.

КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Изобретение относится к способу получения динатрий-5,5'-индигосульфоната, где исходное вещество представляет собой индиго, причем способ включает следующие стадии:

i) индиго подвергают сульфированию с получением смеси, содержащей 5,5'-индигосульфоновую кислоту,

где данный способ характеризуется тем, что:

ii) смесь, полученную на стадии i), подвергают восстановлению и необязательно стадии очистки с получением таким образом композиции, содержащей лейко-5,5'-индигосульфоновую кислоту,

iii) лейко-5,5'-индигосульфоновую кислоту выделяют из композиции, полученной на стадии ii),

iv) лейко-5,5'-индигосульфоновую кислоту, полученную на стадии iii), окисляют до динатрий-5,5'-индигосульфоната.

В соответствии с предпочтительным воплощением изобретения восстановление на стадии i) проводят с использованием дитионита натрия в водной среде.

В соответствии с предпочтительным воплощением изобретения после завершения стадии ii) лейко-5,5'-индигосульфоновую кислоту осаждают в реакционной среде.

В соответствии с предпочтительным воплощением изобретения стадия iii) включает по меньшей мере одну стадию, заключающуюся в

iiia) фильтровании композиции, полученной на стадии ii),

iiib) выделении твердого вещества, задержанного на фильтре.

Преимущественно стадия iii) также включает после стадии iiib) по меньшей мере одну стадию iiic), заключающуюся в промывке твердого вещества водной средой.

Более предпочтительно стадию iiic) применяют от одного до пяти раз.

В соответствии с предпочтительным воплощением изобретения композиция, полученная после завершения стадии iii), включает по меньшей мере 90 мол.% лейко-5,5'-индигосульфоновой кислоты относительно общего количества моль композиции.

В соответствии с предпочтительным воплощением изобретения стадия iv) включает по меньшей мере одну стадию iva), заключающуюся в обработке основанием в спиртовой среде в присутствии окисляющего агента.

Преимущественно стадия iva) заключается в обработке этилатом натрия в этаноле в присутствии окисляющего агента.

Преимущественно окисляющий агент представляет собой газообразный кислород.

В соответствии с предпочтительным воплощением изобретения способ также включает после стадии iva) по меньшей мере одну стадию ivb), заключающуюся в одной или более чем одной промывке одним или более чем одним спиртовым и/или водно-спиртовым растворителем.

Изобретение также относится к применению определенного выше способа для получения композиции, содержащей по меньшей мере 99,5% динатрий-5,5'-индигосульфоната, процентную долю которого определяют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с детектированием при 290 нм.

Изобретение также относится к применению определенного выше способа для получения композиции, в которой количество примеси составляет не более 0,10%, процентную долю которой определяют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с детектированием при 290 нм.

Изобретение также относится к способу производства лекарственного средства или диагностического продукта, содержащего динатрий-5,5'-индигосульфонат, где способ включает производство динатрий-5,5'-индигосульфоната описанным выше и подробно описанным ниже способом и введение динатрий-5,5'-индигосульфоната в фармацевтически приемлемый носитель.

Изобретение также относится к способу производства пищевой композиции, содержащей динатрий-5,5'-индигосульфонат, который включает производство динатрий-5,5'-индигосульфоната описанным выше и подробно описанным ниже способом и введение динатрий-5,5'-индигосульфоната в носитель, приемлемый для пищевого применения.

Например, последний способ может относиться к производству красящей пищевой композиции или окрашенной пищевой композиции.

Авторы изобретения неожиданно обнаружили, что лейко-5,5'-индигосульфоновую кислоту, полученную путем сульфирования индиго и применения процедуры восстановления, можно легко отделить от ее дисульфированных изомеров, при этом смеси 5,5'-индигосульфоновой кислоты и ее дисульфированных изомеров в форме кислоты или в форме двунатриевой соли разделять трудно.

Конкретно восстановление выполняли в реакционной среде, в которой лейко-5,5'-индигосульфоновая кислота умеренно растворима, при этом ее контаминанты, а именно ее дисульфированные изомеры, растворимы в этой среде.

Переход к следующей стадии посредством этих промежуточных продуктов в восстановленной форме, таким образом, позволяет эффективно разделять их с высокими выходами. Таким образом, выделяют лейко-5,5'-индигосульфоновую кислоту. Впоследствии изолированный продукт можно подвергать такому окислению, чтобы образовался динатрий-5,5'-индигосульфонат, обладающий высокой степенью чистоты.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Стадия i): сульфирование индиго

Исходное вещество представляет собой индиго или 2-(1,3-дигидро-3-оксо-2H-индол-2-илиден)-1,2-дигидро-3H-индол-3-он (CAS: 482-89-3). Индиго подвергают сульфированию в соответствии с приведенной ниже схемой 2.

Эту известную реакцию обычно проводят путем обработки серной кислотой. Ссылка может быть сделана, например, на следующие публикации: US647280; Tudora Baltac et al., Revista de Chimie (Bucharest, Romania) (2012), 63(6), 618-620; Iqbal T. Shadi et al., Chemical Communications (Cambridge, United Kingdom) (2004), (12), 1436-1437; Capron, F. (1863), Blues and carmines of indigo: a practical treatise on the fabrication of every commercial product derived from indigo; Philadelphia: H. C. Baird (https://catalog.hathitrust.org/Record/006218585); Vanessa Bianda et al., Bulgarian Journal of Science Education, Volume 22, Number 1, 2013; Charles E. Carraher et al., Journal of Macromolecular Science, Volume 15, Issue 5 1981, pages 773-785; R.W. Sabnis, Handbook of Biological Dyes and Stains, 2010, Wiley and Sons, page 239.

Тем не менее способ по изобретению не ограничен продуктом этой реакции и может быть применен к любой композиции, содержащей 5,5'-индигосульфоновую кислоту и дисульфированные изомеры 5,5'-индигосульфоновой кислоты независимо от способа их получения.

Если исходную композицию получают в результате сульфирования индиго, в дополнение к 5,5'-индигосульфоновой кислоте и ее дисульфированным изомерам она может также содержать: индиго, его моносульфированные, трисульфированные, тетрасульфированные производные, а также побочные продукты этой реакции. Однако обычно эти производные удаляют известным способом, например высокоэффективной жидкостной хроматографией, (ВЭЖХ).

Если исходную композицию получают в результате сульфирования индиго, она содержит приблизительно от 60 до 95% 5,5'-индигосульфоновой кислоты и от 5 до 40% дисульфированных изомеров, предпочтительно от 75 до 80% 5,5'-индигосульфоновой кислоты и от 20 до 25% дисульфированных изомеров, процентные доли которых приведены как количество моль относительно общего количества моль всех дисульфированных молекул. Тем не менее способ по изобретению можно применять к композиции, содержащей смесь изомеров в любых соотношениях.

Преимущественно для осуществления способа по изобретению на практике используют исходную композицию, в которой количество 5,5'-индигосульфоновой кислоты и ее дисульфированных изомеров составляет по меньшей мере 90 мол.% относительно общего количества моль исходной композиции, более предпочтительно 95%, и еще более предпочтительно по меньшей мере 98%.

Термин "дисульфированные изомеры" 5,5'-индигосульфоновой кислоты означает любую молекулу, имеющую структуру индиго, или 2-(1,3-дигидро-3-оксо-2H-индол-2-илиден)-1,2-дигидро-3H-индол-3-она, замещенной сульфоновой кислотой или сульфонатной функциональной группой на каждой индольной группе. Примером дисульфированного изомера 5,5'-индигосульфоновой кислоты является 5,7'-индигосульфоновая кислота.

Стадия ii): восстановление смеси, полученной на стадии i)

На первой стадии смесь, полученную на стадии i), содержащую 5,5'-индигосульфоновую кислоту, подвергают восстановлению с получением смеси лейко-5,5'-индигосульфоновой кислоты и других соединений.

Преимущественно восстановление проводят с использованием дитионита натрия в качестве восстанавливающего агента. Альтернативно можно применять какой-либо один из следующих восстанавливающих агентов: смеси сесквисульфида мышьяка и гидросульфита натрия, сульфата железа (II), цинка, или выполнять восстановление методом электролиза.

Предпочтительно восстановление проводят в водной среде.

Преимущественно восстановление проводят при нагревании при температуре от 40 до 60°C, преимущественно от 45 до 55°C.

Предпочтительно общая продолжительность обработки составляет от 30 минут до 6 часов, преимущественно от 1 часа до 4 часов.

Предпочтительно после восстановления полученную композицию очищают в условиях, позволяющих увеличить содержание лейко-5,5'-индигосульфоновой кислоты. Следует отметить, что среду экстрагируют органическим растворителем так, чтобы удалить некоторые загрязняющие вещества, например восстановленный индиго. Экстракция может быть выполнена этилацетатом или любым другим растворителем, подходящим для экстракции несульфированных компонентов.

Стадия iii): отделение лейко-5,5'-индигосульфоновой кислоты

На второй стадии лейко-5,5'-индигосульфоновую кислоту отделяют от реакционной среды. Преимущественно лейко-5,5'-индигосульфоновую кислоту отделяют от реакционной среды путем осаждения лейко-5,5'-индигосульфоновой кислоты с последующим фильтрованием и выделением твердого вещества.

Предпочтительно стадию ii) выполняют в растворителе, в котором осаждают изомер лейко-5,5'-индигосульфоновой кислоты. Предпочтительно изомер лейко-5,5'-индигосульфоновой кислоты отделяют от содержащей ее водной композиции. Преимущественно отделение выполняют непосредственно в реакционной среде, полученной на стадии ii), необязательно после первой очистки, например экстракции органическим растворителем. Предпочтительно после завершения стадии ii) лейко-5,5'-индигосульфоновая кислота осаждается в реакционной смеси.

Альтернативно в случае проведения реакции стадии ii) в среде, в которой лейко-5,5'-индигосульфоновая кислота растворима, для осаждения лейко-5,5'-индигосульфоновой кислоты можно выполнить последующее добавление воды в реакционную среду или замену растворителя.

Предпочтительно отделение выполняют, пропуская реакционную среду, полученную на стадии ii), через фильтрующую подложку. Например, реакционную среду, полученную на стадии ii), можно фильтровать через такой фильтр, как фильтровальная воронка с пористостью 3 или фильтровальная сетка из многонитевого полипропилена. Преимущественно реакционную среду, полученную на стадии ii), фильтруют в горячем состоянии, предпочтительно при температуре от 40 до 60°C, преимущественно от 45 до 55°C.

В этих условиях изомер лейко-5,5'-индигосульфоновой кислоты, представляющий собой твердое вещество, удерживается на фильтре, при этом другие компоненты реакционной среды, которые растворимы в реакционной среде со стадии ii), остаются в водной фазе в ходе фильтрования.

Преимущественно это фильтрование может быть выполнено с обработкой, состоящей в суспендировании твердого вещества в органическом растворителе, например тетрагидрофуране (ТГФ), и фильтровании образовавшейся в результате массы. Такое суспендирование позволяет улучшить степень чистоты лейко-5,5'-индигосульфоновой кислоты.

В соответствии с изобретением преимущественно предусмотрено выполнение стадии отделения лейко-5,5'-индигосульфоновой кислоты путем такой дополнительной очистки, как промывка водой, например, путем растворения содержащей лейко-5,5'-индигосульфоновую кислоту твердой фазы в воде, которую доводят до температуры в диапазоне от 40 до 60°C, преимущественно от 45 до 55°C, с последующим фильтрованием полученной таким путем суспензии. Твердое вещество, выделенное на фильтре, представляет собой лейко-5,5'-индигосульфоновую кислоту. За счет этой дополнительной стадии очистки степень очистки улучшается.

Предпочтительно операцию промывки лейко-5,5'-индигосульфоновой кислоты водой применяют от одного до пяти раз, еще более предпочтительно от двух до четырех раз.

Предпочтительно эта промывка может быть выполнена с обработкой, состоящей в суспендировании твердого вещества в органическом растворителе, например ТГФ, и фильтровании образовавшейся в результате массы. Такое суспендирование позволяет улучшить степень чистоты лейко-5,5'-индигосульфоновой кислоты.

Предпочтительно очистку повторяют до тех пор, пока не будет получена лейко-5,5'-индигосульфоновая кислота ожидаемой степени чистоты. Предпочтительно очистку повторяют до тех пор, пока не будет получена композиция, содержащая по меньшей мере 99 мол.% лейко-5,5'-индигосульфоновой кислоты относительно количества моль композиции.

Лейко-5,5'-индигосульфоновая кислота является основным промежуточным веществом при выполнении способа по изобретению.

Могут быть использованы другие методы отделения лейко-5,5'-индигосульфоновой кислоты от реакционной среды, полученной на стадии ii), например высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ). Однако преимущество фильтрования состоит в том, что оно является практичным, эффективным способом, очень легко масштабируемым для промышленного применения.

Стадия iv): окисление лейко-5,5'-индигосульфоновой кислоты

На четвертой стадии лейко-5,5'-индигосульфоновую кислоту преобразуют в динатрий-5,5'-индигосульфонат посредством подходящей процедуры окисления в соответствии со схемой 3 ниже.

Преимущественно данная процедура состоит в обработке основанием в спиртовой среде в присутствии окисляющего агента. Предпочтительно лейко-5,5'-индигосульфоновую кислоту обрабатывают алкоголятом натрия в спиртовой среде и в присутствии окисляющего агента.

Предпочтительно лейко-5,5'-индигосульфоновую кислоту обрабатывают этилатом натрия в этанольной среде и в присутствии окисляющего агента. Предпочтительно обработку выполняют при нагревании, преимущественно при температуре в диапазоне от 40 до 60°C, еще более предпочтительно от 45 до 55°C. Предпочтительно лейко-5,5'-индигосульфоновую кислоту обрабатывают от 0,5 до 2,5 моль эквивалент алкоголята натрия, предпочтительно от 0,8 до 1,5 моль эквивалент алкоголята натрия, в присутствии окисляющего агента. Еще более предпочтительно лейко-5,5'-индигосульфоновую кислоту обрабатывают от 0,5 до 2,5 моль эквивалент этилата натрия, предпочтительно от 0,8 до 1,5 моль эквивалент этилата натрия, в присутствии окисляющего агента. Преимущественно окисляющий агент выбран из O₂, H₂O₂, KHSO₅, FeCl₃.

Предпочтительно окисляющий агент представляет собой газообразный кислород, который можно использовать в чистом виде или в виде смеси с другими газами, например атмосферный кислород. Предпочтительно продолжительность обработки составляет от 30 минут до 10 часов, еще более предпочтительно от 1 часа до 8 часов и преимущественно от 2 часов до 6 часов.

Предпочтительно после обработки на стадии iv) следует одна или более чем одна промывка одним или более чем одним органическим растворителем. Предпочтительно после обработки на стадии iv) следует одна или более чем одна промывка одним или более чем одним спиртовым и/или водно-спиртовым растворителем, в частности промывка этанолом, и/или промывка метанолом, и/или промывка смесью воды и метанола, и/или промывка смесью воды и этанола.

Виды применения

Предметом изобретения также является применение описанного выше способа для получения индигокармина или динатрий-5,5'-индигосульфоната высокой степени чистоты. В частности, изобретение относится к применению описанного выше способа для получения композиции, содержащей по меньшей мере 99,5%, более предпочтительно по меньшей мере 99,7% индигокармина или динатрий-5,5'-индигосульфоната. Процентное содержание индигокармина в материале композиции измеряют с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с детектированием при 290 нм на колонке C18 150×4,6-5 мкм, элюируя градиентом 10 мМ натрийфосфатного буфера (pH 3,0) с добавлением 1 мМ хлорида тетрабутиламмония (TBACl)/MeOH (от 70/30 до 10/90).

Изобретение относится к применению описанного выше способа для получения композиции, в которой количество присутствующих примесей составляет не более 0,10%, и более предпочтительно количество присутствующих примесей составляет не более 0,05%. Определение количества примесей выполняют посредством такого же способа, как используют для определения количества индигокармина.

Предметом изобретения также является применение описанного выше способа для получения лекарственного средства или диагностического продукта, содержащего индигокармин или динатрий-5,5'-индигосульфонат. Указанные лекарственное средство или диагностический продукт могут находиться в любой форме, подходящей для таких видов применения. В частности, они могут быть выполнены в форме таблетки или гелевой капсулы, содержащей от 1 до 1000 мг индигокармина; в форме водного раствора, содержащего индигокармин в концентрации от 0,1 до 10 масс.%. Такие композиции, кроме индигокармина, содержат эксципиенты, хорошо известные специалистам в данной области техники, например лимонную кислоту и/или цитраты, фосфатный буфер, полимеры, производные целлюлозы, липиды. Составы, содержащие индигокармин, проиллюстрированы, в частности, в WO 2011/107945 и в WO 2010/018723. Преимущество индигокармина, полученного посредством способа по изобретению, для применении в медицине и диагностике состоит в высокой степени чистоты, что позволяет избежать попадания в организм веществ, не полезных для данного применения.

Предметом изобретения также является применение описанного выше способа для получения пищевого красителя, содержащего индигокармин или динатрий-5,5'-индигосульфонат. Указанный пищевой краситель может находиться в любой форме, подходящей для его использования в этих областях применения, в частности в форме порошка или водного раствора. Высокая степень чистоты индигокармина, полученного посредством способа по изобретению, дает возможность гарантировать его безвредность.

Эффективность способа по изобретению позволяет получать продукт с меньшими затратами.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЙ РАЗДЕЛ

I- Материалы и методы

1- Исходные материалы и оборудование

Индиго был приобретен у компании Fisher Scientific по коммерческому номеру 21213. Чистота: 94,8% в соответствии со спецификациями поставщика.

Сетка (фильтровальная): коммерческий номер V-05-6-475 K, производство компании SEFAR.

Нутч-фильтр: диаметр 280 мм, 35 л, производство компании BUCHI.

2- Методики анализа

Аппарат: Agilent 1100®

Колонка: KROMASIL C18® 150×4,6-5 мкм

Детектирование: при 290 нм

Концентрация образца: 1000 млн^-1

Растворитель для растворения образца: 90/10 H₂O/MeOH

Растворитель для элюирования: 10 ммоль/л натрийфосфатного буфера (pH 3,0) с добавлением 1 мМ TBACl/MeOH

II- Протоколы

1- Преобразование индиго в 5,5'-индигосульфоновую кислоту

1,5 кг индиго (5,72 моль) помещают в 10-литровый реактор, в который при перемешивании и при комнатной температуре добавляют 6 литров 96% водного раствора H₂SO₄. Температуру смеси поддерживают при 70°C в течение 3 часов при непрерывном перемешивании. Затем смесь охлаждают до 5°C. Смесь медленно добавляют в 60-литровый реактор, содержащий 15 литров воды, охлажденной до 5°C. Добавление смеси выполняют в течение 1 часа 15 минут. К смеси добавляют 90 мл октанола, и полученную в результате смесь доводят до температуры 50°C. Получают твердое вещество в виде суспензии в реакционной среде, которое представляет собой смесь, содержащую 5,5'-индигосульфоновую кислоту.

2- Восстановление смеси, содержащей 5,5'-индигосульфоновую кислоту

Водный раствор дитионита натрия готовят из 15 литров воды и 3,51 кг 85%-го раствора дитионита натрия. Приготовленный таким образом водный раствор помещают в капельную воронку в атмосфере азота. К реакционной смеси, полученной на стадии 1-, добавляют водный раствор дитионита натрия при перемешивании, поддерживая температуру реакционной среды при 50°C. Добавление водного раствора дитионита натрия выполняют в течение 1 часа. Затем перемешивание и температуру смеси при 50°C поддерживают в течение около 1 часа. Затем к смеси добавляют 7,5 литров этилацетата, и полученную в результате смесь перемешивают при 50°C в течение 20 минут. Среда все еще находится в форме суспензии, содержащей лейко-5,5'-индигосульфоновую кислоту.

3- Отделение лейко-5,5'-индигосульфоновой кислоты

Затем реакционную среду, полученную на стадии 2-, фильтруют через нутч-фильтр, оборудованный сеткой V-05-6-475 K.

Твердое вещество, оставшееся на фильтре, суспендируют 4,5 литрами тетрагидрофурана (ТГФ), а затем жидкость отфильтровывают.

4- Промывка лейко-5,5'-индигосульфоновой кислоты

Продукт, оставшийся на фильтре после завершения стадии 3-, растворяют в 30 литрах воды в 60-литровом реакторе. Всю смесь нагревают при 50°C в течение 30 минут, а затем фильтруют через нутч-фильтр, оборудованный сеткой V-05-6-475 K.

Твердое вещество, оставшееся на фильтре, суспендируют 4,5 литрами тетрагидрофурана (ТГФ), а затем жидкость отфильтровывают.

Эту промывку проводят до достижения общего количества промывок, равного трем, в одинаковых условиях. Получают 1,8 кг влажного продукта. Расчетная масса сухого вещества: 1,3 кг.

5- Преобразование двунатриевой соли лейко-5,5'-индигосульфоновой кислоты в динатрий-5,5'-индигосульфонат

1,8 кг продукта, полученного на стадии 4-, суспендируют в 26 литрах этанола в 60-литровом реакторе. Добавляют 1143 мл раствора, содержащего 21 масс.% этилата натрия (NaOEt) в этаноле. Температуру смеси доводят до 50°C, и в реакционную смесь барботируют воздух в течение 4 часов, поддерживая ее температуру при 50°C.

В конце этого периода реакционную среду фильтруют через воронку из спеченного материала, и за фильтрованием следует промывка 5,2 литрами этанола.

6- Промывка динатрий-5,5'-индигосульфоната

Влажное твердое вещество растворяют в 26 литрах метанола, всю смесь нагревают в течение 30 минут при 40°C, а затем фильтруют через воронку из спеченного материала, и за фильтрованием следует промывка 5,2 литра метанола.

Эту промывку повторяют один раз.

Далее влажное твердое вещество растворяют в смеси 13 литров воды и 13 литров метанола, всю смесь нагревают в течение 30 минут при 60°C, а затем фильтруют через воронку из спеченного материала, и за фильтрованием следует промывка 3,9 л метанола.

Твердое вещество высушивают в сушилке с вентиляцией.

Получают 1,05 кг динатрий-5,5'-индигосульфоната, выход составляет 39% относительно общего количества индиго, задействованного в процессе.

III- Результаты

Полученный продукт анализируют с помощью ВЭЖХ описанным выше способом. Чистоту оценивают как составляющую от 99,85 до 99,95% в зависимости от тестов (проводили три теста).

Обнаружено, что в результате применения простого, экономичного протокола, легко масштабируемого для промышленного применения, способ по изобретению дает возможность получить продукт высокой степени чистоты при хороших выходах, и его результаты воспроизводимы с точки зрения качества (чистоты) полученного продукта.

1. Способ получения динатрий-5,5'-индигосульфоната, в котором исходное вещество представляет собой индиго, где способ включает следующие стадии:

i) индиго подвергают сульфированию с получением смеси, содержащей 5,5'-индигосульфоновую кислоту,

где способ отличается тем, что:

ii) смесь, полученную на стадии i), подвергают восстановлению с получением таким образом композиции, содержащей лейко-5,5'-индигосульфоновую кислоту,

iii) лейко-5,5'-индигосульфоновую кислоту выделяют из композиции, полученной на стадии ii),

iv) лейко-5,5'-индигосульфоновую кислоту, полученную на стадии iii), окисляют до динатрий-5,5'-индигосульфоната.

2. Способ по п. 1, в котором восстановление на стадии ii) выполняют с использованием дитионита натрия в водной среде.

3. Способ по п. 1, в котором лейко-5,5'-индигосульфоновую кислоту осаждают в реакционной среде после завершения стадии ii).

4. Способ по п. 1, в котором стадия iii) включает по меньшей мере одну стадию, заключающуюся в

iiia) фильтровании композиции, полученной на стадии ii),

iiib) выделении твердого вещества, задержанного на фильтре.

5. Способ по п. 4, в котором стадия iii) также включает после стадии iiib) по меньшей мере одну стадию iiic), заключающуюся в промывке твердого вещества водной средой.

6. Способ по п. 5, в котором стадию iiic) применяют от одного до пяти раз.

7. Способ по п. 1, в котором композиция, полученная после завершения стадии iii), включает по меньшей мере 90 мол.% лейко-5,5'-индигосульфоновой кислоты относительно общего количества моль композиции.

8. Способ по п. 1, в котором стадия iv) включает по меньшей мере одну стадию iva), заключающуюся в обработке основанием в спиртовой среде в присутствии окисляющего агента.

9. Способ по п. 8, в котором стадия iva) заключается в обработке этилатом натрия в этаноле в присутствии окисляющего агента.

10. Способ по п. 8, в котором окисляющий агент представляет собой газообразный кислород.

11. Способ по п. 8, который также включает после стадии iva) по меньшей мере одну стадию ivb), заключающуюся в одной или более чем одной промывке одним или более чем одним спиртовым и/или водно-спиртовым растворителем.

12. Способ по п. 1, который также включает после стадии ii) стадию очистки композиции, содержащей лейко-5,5'-индигосульфоновую кислоту.

13. Способ по п. 1 для получения композиции, содержащей по меньшей мере 99,5% динатрий-5,5'-индигосульфоната, процентную долю которого определяют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с детектированием при 290 нм.

14. Способ по п. 1 для получения композиции, в которой количество примеси составляет не более 0,10%, процентную долю которой определяют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с детектированием при 290 нм.

15. Способ производства диагностического продукта для окрашивания тканей, содержащего динатрий-5,5'-индигосульфонат, где способ включает производство динатрий-5,5'-индигосульфоната способом по п. 1 и введение динатрий-5,5'-индигосульфоната в фармацевтически приемлемый носитель.

16. Способ производства пищевой композиции, содержащей динатрий-5,5'-индигосульфонат, где способ включает производство динатрий-5,5'-индигосульфоната способом по п. 1 и введение динатрий-5,5'-индигосульфоната в носитель, приемлемый для пищевого применения.