Способ количественного определения суммы дубильных веществ в эвтерпы овощной плодах



Способ количественного определения суммы дубильных веществ в эвтерпы овощной плодах
Способ количественного определения суммы дубильных веществ в эвтерпы овощной плодах
Способ количественного определения суммы дубильных веществ в эвтерпы овощной плодах
Способ количественного определения суммы дубильных веществ в эвтерпы овощной плодах
G01N1/28 - Исследование или анализ материалов путем определения их химических или физических свойств (разделение материалов вообще B01D,B01J,B03,B07; аппараты, полностью охватываемые каким-либо подклассом, см. в соответствующем подклассе, например B01L; измерение или испытание с помощью ферментов или микроорганизмов C12M,C12Q; исследование грунта основания на стройплощадке E02D 1/00;мониторинговые или диагностические устройства для оборудования для обработки выхлопных газов F01N 11/00; определение изменений влажности при компенсационных измерениях других переменных величин или для коррекции показаний приборов при изменении влажности, см. G01D или соответствующий подкласс, относящийся к измеряемой величине; испытание

Владельцы патента RU 2763263:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования ФГБОУ ВО «Пензенский государственный университет» (RU)

Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано в фармацевтической промышленности. Способ количественного определения суммы дубильных веществ в эвтерпы овощной плодах методом прямой спектрофотометрии включает предварительное получение водно-спиртового извлечения из плодов эвтерпы путем экстракции 0,5 г точной навески, измельченной до частиц 1,0 мм, плодов эвтерпы этиловым спиртом, в пересчете на вещество фенольной природы, при этом экстракцию сырья осуществляют однократно, в качестве экстрагента используют этиловый спирт 40% в соотношении сырье-экстрагент - 1:100, количественное определение суммы дубильных веществ в эвтерпы овощной плодах проводят при длине волны 282±2 нм в пересчете на катехин и содержание суммы дубильных веществ (X в %) в пересчете на катехин с использованием теоретического значения его удельного показателя поглощения, равного 144. Техническим результатом является создание способа количественного определения суммы дубильных веществ в эвтерпы овощной плодах в пересчете на катехин. 2 ил., 1 табл.

 

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и может быть использовано в центрах контроля качества лекарственных средств и контрольно-аналитических лабораториях при проведении количественного определения суммы дубильных веществ в эвтерпы овощной плодах (Euterpe oleracea).

Эвтерпы овощной плоды обладают противовоспалительной, нейропротекторной, антиоксидантной и противоопухолевой активностью. Данные фармакологические эффекты связаны с наличием в составе эвтерпы овощной плодах определенного набора биологически активных соединений: дубильных веществ, витаминов, антоцианов, флавоноидов (1). В настоящее время для идентификации и количественного определения дубильных веществ в лекарственных растениях используют спектрофотометрические методы (2,3,4,5). Они быстры, удобны и не требуют сложного оборудования.

Известен способ определения дубильных веществ в лекарственном растительном сырье (ЛРС) методом кулонометрии в пересчете на таннин (С.Г.Абдуллина и др. Кулонометрическое определение дубильных веществ в лекарственном растительном сырье. // Фармация. №4. - 2010. - С.13-15).

Среди недостатков данного способа является использование дополнительного оборудования (кулонометра), специфичного титранта (гипойодид калия), который по окислительным свойствам приближается к перманганату калия и не дает возможность дифференцировано определить высоко- и низкомолекулярные дубильные вещества.

Известен также способ определения содержания таннина и производных галловой кислоты в чае методом кондуктометрии (Патент №2127878. Способ раздельного определения таннина и катехинов (в пересчете на галловую кислоту) в чае. М.: 1999 г.).

Недостатками данного способа является применение токсичных органических растворителей (изобутиловый спирт), а также использование цветной реакции с Fe (III), продуктом которой является нестабильное по окраске во времени окрашенное соединение.

Наиболее близким к заявленному способу является способ количественного определения дубильных веществ спектрофотометрическим методом (6), взятый за прототип. Данная методика включает в себя использование 10% свинца ацетата, 5% раствор натрия гидрофосфата, фосфатный буфер, железо-тартратный реактив.

Недостатками известного способа является многостадийность, длительность, трудоемкость методики, а также использование буферных растворов. В связи с этим целью изобретения является разработка способа определения суммы дубильных веществ в плодах эвтерпы овощной.

Техническим результатом является создание способа количественного определения суммы дубильных веществ в эвтерпы овощной плодах в пересчете на катехин. Технический результат достигается тем, что экстракцию сырья осуществляют однократно, в качестве экстрагента используют этиловый спирт 40% в соотношении «сырье-экстрагент» - 1:100, продолжительности экстракции - 60 минут; степень измельченности сырья (или размер частиц) - 1,0 мм. Количественное определение суммы дубильных веществ в эвтерпы овощной плодах в пересчете на катехин, проводят при длине волны 282±2 нм.

В случае отсутствия стандартного образца катехина содержание суммы дубильных веществ (X в процентах) для расчета целесообразно использовать теоретическое значение его удельного показателя поглощения = 144:

Х = ,

где D - оптическая плотность испытуемого раствора;

144 - удельный показатель поглощения стандартного образца катехина при 282 нм;

а - масса сырья, г;

W - влажность сырья, %.

Катехин является одним из доминирующих соединений в эвтерпы овощной плодах, поэтому количественное определение суммы дубильных веществ в эвтерпы овощной плодах спектрофотометрическим методом проводили в пересчете на катехин, дающий максимум поглощения при 282±2 нм.

В качестве экстрагента для разработки способа и подтверждения наличия дубильных веществ, использовали воду, т.к. дубильные вещества хорошо растворяются в воде, при этом другие фенольные соединения не будут переходить в раствор и мешать определению танинов.

Согласно данным УФ-спектров спиртового экстракта (фиг.1) и водного извлечения (фиг. 2) максимумы собственного поглощения дубильных веществ из эвтерпы плодов наблюдаются при 282±2 нм. Раствор СО катехина имеет максимум поглощения при 282±2 нм. Ввиду близкого расположения максимумов поглощения исследуемых извлечений из сырья эветрпы и СО катехина, одним из целесообразных вариантов стандартизации является прямая спектрофотометрия. При использовании в качестве экстрагентов воды, этанола 20%, 40%, 70% и 95%, положение максимумов не меняется.

Данный факт позволяет проводить спектрофотометрическое определение суммы дубильных веществ в эвтерпы плодах при аналитической длине волны 282±2 нм. Также нами было изучено влияние экстрагента на процесс экстракции. В таблице 1 представлена зависимость выхода дубильных веществ эвтерпы плодов от природы экстрагента. При этом спирт этиловый 40%- ной концентрации был выбран в качестве оптимального экстрагента. Изучен вопрос относительно продолжительности экстракции на кипящей водяной бане, представлена зависимость выхода дубильных веществ от времени экстракции на кипящей водяной бане, при этом было выбрано время экстракции 60 минут. Результаты исследований по выбору оптимального соотношения «сырье-экстрагент» также приведены в таблице 1. Оптимальными параметрами экстракции являются: извлечение 40 % этиловым спиртом на кипящей водяной бане в течение 60 минут в соотношении «сырье-экстрагент» - 1:100, степень измельчения сырья - 1 мм.

Таблица 1. Влияние различных факторов на полноту извлечения дубильных веществ

Экстрагент Соотношение «сырье - экстрагент» Степень измельченности, мм Время экстракции, мин Содержание суммы дубильных веществ в пересчете на катехин
Влияние степени измельченности
Вода 1:50 0,5 90 8,21±0,05
Вода 1:50 1,0 90 8,37±0,05
Вода 1:50 2,0 90 8,24±0,05
Влияние экстрагента
Вода 1:50 1,0 90 8,37±0,05
Этанол 20 % 1:50 1,0 90 8,22±0,06
Этанол 40 % 1:50 1,0 90 8,59±0,07
Этанол 70 % 1:50 1,0 90 3,37±0,11
Этанол 95 % 1:50 1,0 90 1,62±0,08
Влияние соотношения «сырье - экстрагент»
Этанол 40 % 1:25 1,0 90 8,48±0,08
Этанол 40 % 1:50 1,0 90 8,59±0,07
Этанол 40 % 1:100 1,0 90 8,88±0,11
Этанол 40 % 1:200 1,0 90 8,25±0,08
Влияние времени экстрагирования
Этанол 40 % 1:100 1,0 30 7,48±0,11
Этанол 40 % 1:100 1,0 60 8,88±0,11
Этанол 40 % 1:100 1,0 90 8,51±0,11

Учитывая, что увеличение числа операций на стадии пробоподготовки ведет к возрастанию ошибки, выбор сделан в пользу одностадийного процесса экстракции с подтверждением требуемой точности количественного определения.

Таким образом, было определено, что оптимальными параметрами экстракции являются: однократное извлечение 40% этиловым спиртом на кипящей водяной бане в течение 60 минут в соотношении «сырье-экстрагент» - 1:100 и степень измельчения сырья - 1 мм.

Принимая по внимание тот факт, что специфическим для эвтерпы плодов является катехин, а максимумы поглощения раствора катехина и водно-спиртового извлечения эвтерпы плодов находятся в области 282±2 нм (максимум), целесообразным является определение содержания суммы дубильных веществ в пересчете на катехин при длине волны 282±2 нм.

Способ реализуется следующим образом.

Пробу эвтерпы плодов измельчают до размера частиц 1 мм. 0,5 г (точная навеска) размельченного сырья засыпают в колбу объемом 100 мл, добавляют 50 мл спирта этилового 40%. Колбу закрывают, взвешивают, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане 60 мин с момента закипания экстрагента. После этого содержимое колбы охлаждают, взвешивают и при необходимости доводят до первоначальной массы экстрагентом. Полученный экстракт фильтруют (бумажный фильтр), отбирая первые 10 мл фильтрата (раствор А). 1 мл раствора А переносят в мерную колбу объемом 25 мл и доводят до метки экстрагентом.

Оптическую плотность определяют спектрофотометром при 282±2 нм. Сумму дубильных веществ (Х) рассчитывают по формуле:

Х = ,

где D - оптическая плотность испытуемого раствора;

144 - удельный показатель поглощения стандартного образца катехина при 282±2 нм;

а - масса сырья, г;

Предлагаемый способ поясняется следующим примером.

Аналитическую пробу сырья эвтерпы измельчают до размера частиц 1 мм. Около 0,5 г (точная навеска) измельченного сырья помещали в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, приливали 50 мл спирта этилового 40%, присоединяли к обратному холодильнику, нагревали на кипящей водяной бане в течение 60 минут с момента закипания экстрагента в колбе. После охлаждения полученное извлечение фильтровали через бумажный фильтр (красная полоса), смоченный тем же спиртом, отбирали первые 10 мл фильтрата (раствор А).

Испытуемый раствор для анализа суммы дубильных веществ готовят следующим образом: 1,0 мл полученного извлечения помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят объем раствора до метки спиртом этиловым 40% (испытуемый раствор). В качестве раствора сравнения использовали спирт этиловый концентрации 40%.

После измерения оптической плотности извлечения из эвтерпы плодов при длине волны 282±2 нм, содержание суммы дубильных веществ (X в процентах) в пересчете на катехин и абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле, используя теоретическое значение удельного показателя поглощения катехина = 144:

где 0,4757 - оптическая плотность испытуемого раствора;

0,5050 - масса сырья, г;

8 - потеря в массе при высушивании сырья (влажность), %;

144 - удельный показатель поглощения стандартного образца катехина при 282 нм;

Содержание суммы дубильных веществ в пересчете на катехин = 8,88%.

Все результаты были статистически обработаны. Ошибка единичного количественного определения составила ±1,56%.

Предлагаемый способ количественного определения суммы дубильных веществ в пересчете на катехин в плодах эвтерпы овощной с использованием прямой спектрофотометрии, разработан впервые для данного вида сырья и обладает следующими преимуществами:

1. Разработанный метод является более специфичным и селективным, а также позволяет проводить экстракцию сырья однократно 40% этиловым спиртом.

2. Пересчет суммы дубильных веществ идет на специфическое для эвтерпы плодов овощной вещество - катехин.

3. Ошибка единичного определения предлагаемого способа составляет ±1,56%, что свидетельствует об объективности разработанного способа и высокой точности.

Этот способ можно применять в центрах контроля качества лекарственных средств, на фармацевтических предприятиях и контрольно-аналитических лабораториях при проведении количественного анализа эвтерпы овощной плодов (Euterpe oleracea).

ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ

1. Heinrich M., Dhanji T., Casselman I. Acai (Euterpe oleracea Mart.) - A phytochemical and pharmacological assessment of the species’ health claims // Phytochem. Lett. 2011. №4. P.10-21.

2. Семенюта К.Н. Разработка методики количественного определения дубильных веществ в корнях ревеня тангутского / К.Н. Семенюта, В.А. Куркин, А.А. Шмыгарева, А.Н. Саньков // Вестник Воронежского государственного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация. 2020. № 2. С. 73-77.

3. Мальцева А.А. Количественное определение дубильных веществ в траве горца почечуйного / А.А. Мальцева, А.С. Чистякова, А.А. Сорокина // Вестник Воронежского государственного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация. 2013. № 2. С. 203-205.

4. Химический анализ лекарственных растений / Ладыгина Е. Я., Сафронич Л. Н., Отряшенкова, В. Э. и др. Под ред. Гринкевич Н. А., Сафронич Л. Н. - М.: Высшая Школа. 1983. - 176 с.

5. Государственная фармакопея 14 издание. Электронное издание. - 2018. URL:http://femb.ru/femb/pharmacopea.php [Gosudarstvennaya farmakopeya 14 izdanie. State Pharmacopoeia 14th edition. Elektronnoe izdanie. - 2018. URL:http://femb.ru/femb/pharmacopea.php

6. Данилова Н.А., Попов Д.М. Количественное определение дубильных веществ в корнях щавеля конского методом спектрофотометрии в сравнении с методом перманганатометрии // Вестник ВГУ. Серия: Химия. Биология. Фармация. - 2004. - №2. - с.179 - 182.

Способ количественного определения суммы дубильных веществ в эвтерпы овощной плодах с предварительным получением водно-спиртового извлечения из плодов эвтерпы путем экстракции 0,5 г точной навески, измельченной до частиц 1,0 мм, эвтерпы плодов этиловым спиртом, в пересчете на вещество фенольной природы, методом прямой спектрофотометрии, отличающийся тем, что экстракцию сырья осуществляют однократно, в качестве экстрагента используют этиловый спирт 40% в соотношении сырье-экстрагент - 1:100, количественное определение суммы дубильных веществ в эвтерпы овощной плодах проводят при длине волны 282±2 нм в пересчете на катехин и содержание суммы дубильных веществ (X в %) в пересчете на катехин с использованием теоретического значения его удельного показателя поглощения, равного 144, и содержание суммы дубильных веществ (X в %) рассчитывают по формуле

,

где D - оптическая плотность испытуемого раствора;

144 - удельный показатель поглощения стандартного образца катехина при 282 нм;

а - масса сырья, г;

W - влажность сырья, %.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано в нефтяной и газовой промышленности. Количественный анализ композиции из девяти индикаторов для геофизических исследований, состоящей из флуоресцеина натрия, родамина С, тиомочевины, карбамида, роданида аммония, нитрата натрия, изопропанола, пропанола и трет-бутанола в пластовой воде при их совместном присутствии включает отделение исследуемой пробы пластовой воды от нефти, осветление фильтрацией через гидрофильный мембранный фильтр, разделение индикаторов, пропусканием пробы через гидрофобизированный силикагель с привитыми октальными группами С8, разделение элюата на порции, добавление соответствующих реагентов для анализа ионных индикаторов и измерение при характерных для каждого индикатора длинах волн, количественное определение флуоресцеина натрия и родамина С люминесцентным методом проводят путем их десорбции с сорбента смесью метанола с водой в объемном соотношении 80:20, при этом нефтепродукты не сорбируются, добавляют боратный буфер с рН=9,18 и проводят измерения, алифатические спирты определяют газохроматографическим методом путем анализа паровой фазы с добавлением высаливателя, при этом для определения нитратов используют реакцию восстановления их до нитритов сухой смесью с последующим определением нитритов по реакции с реактивом Грисса.

Изобретение относится к способу оценки концентрации компонентов серы в бензине. Предложен способ оценки концентрации компонентов серы в бензине, который содержит компоненты серы и ароматические компоненты, при этом способ содержит: (A1) удаление части бензина путем превращения в газ для снижения соотношения концентрации ароматических компонентов относительно концентрации компонентов серы в бензине, причем бензин превращают в газ в концентрации 8,0 об.

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к способу детектирования антител. Способ детекции антител в биоматериале с использованием стеклянных микроструктурных волноводов включает получение оптического иммуносенсора путем введения реакционной смеси анализируемого образца с антигеном в полую сердцевину стеклянного микроструктурного волновода с последующим определением антител по положению локальных максимумов спектра пропускания образца, в режиме реального времени, до и после заполнения смесью антигена и анализируемого раствора, содержащего искомые антитела к данному антигену.

Изобретение относится к лазерной системе с оптической обратной связью. Заявленная лазерная система с оптической обратной связью содержит чувствительный к оптической обратной связи лазер (110), который излучает, через выходное оптическое волокно (111), непрерывную регулируемую по частоте распространяющуюся исходную оптическую волну (L0p), называемую исходной волной; оптический резонатор (120), связанный с помощью оптической обратной связи с лазером и выполненный с возможностью генерирования внутрирезонаторной волны (L5), одна часть которой возвращается на лазер в форме распространяющейся в обратном направлении оптической волны (L0c); электрооптический волоконный модулятор (115), размещаемый на оптическом пути между лазером и оптическим резонатором, причем упомянутый электро-оптический модулятор выполнен с возможностью генерирования сдвинутой по фазе исходной волны (L1p) путем фазового сдвига исходной волны и, путем фазового сдвига распространяющейся в обратном направлении оптической волны, генерирования сдвинутой по фазе, распространяющейся в обратном направлении волны (L0c), называемой волной обратной связи, которая достигает лазера; фазорегулирующее устройство (130) для генерирования управляющего сигнала (SC) для электрооптического модулятора по сигналу (SE) рассогласования, характеризующему относительную фазу между исходной волной (L0p) и волной (L0c) обратной связи, чтобы компенсировать относительную фазу между исходной волной и волной обратной связи.

Изобретение, раскрытое в данном документе, относится к способу измерения концентрации газа в контейнере, имеющем стенку с, по меньшей мере, одной деформируемой частью. Предложен способ 100 измерения концентрации газа в контейнере 20, имеющем стенку с, по меньшей мере, одной деформируемой частью, при этом газ поглощает электромагнитное излучение, по меньшей мере, в определенном спектральном диапазоне.

Изобретение относится к области лазерной измерительной техники и касается лазерного измерительного устройства. Устройство содержит лазерный генератор, измеритель лазерного излучения, измерительную кювету с первым блоком перемещения, эталонную кювету со вторым блоком перемещения, первый и второй фотоприемные блоки, первый и второй управляемые спектральные фильтры, управляемый оптический ослабитель, лазерный усилитель с блоком накачки, выдвижное полупрозрачное зеркало с третьим блоком перемещения, отражательное зеркало, три полупрозрачных зеркала и первый и второй уголковые отражатели.

Изобретение относится к способу и устройству для оптического анализа фруктов или овощей. Различные источники (7a, 7b) света выполнены с возможностью подачи светового излучения в различных спектральных диапазонах селективно на каждый объект в соответствии с заданной последовательностью освещения, а изображения формируются посредством по меньшей мере одной цветной камеры (4), чувствительной к инфракрасному излучению.

Устройство содержит множество пикселей формирования изображения, набор элементов, размещенных над множеством пикселей. Первый и второй элементы набора элементов размещены над первым пикселем множества пикселей и смещены относительно друг друга.
Изобретение относится к медицине и касается способа прогноза малигнизации и ранней диагностики злокачественных опухолей, характеризующегося тем, что осуществляют забор образца ротоглоточных смывов (РГС) у пациента; центрифугируют исследуемый образец 15-20 мин со скоростью 2000-3000 об/мин; получают надосадочный слой центрифугированного образца РГС и измеряют гидродинамический радиус глобул и их процентный вклад в светорассеивание в исследуемом образце с помощью монохроматического анализатора наночастиц (МАН); при обнаружении в РГС наночастиц с гидродинамическими радиусами от 1 до 25 нм при вкладе в светорассеивание от 35 до 55% прогнозируют процесс малигнизации, при обнаружении в РГС наночастиц с гидродинамическими радиусами 1-25 нм при их относительном вкладе в светорассеивание более 55% диагностируют злокачественные новообразования; по изменению процентного вклада в светорассеяние в течение 6-12 месяцев судят о положительной или отрицательной динамике состояния пациента.

Система освещения и визуализации образца содержит линзу объектива, первый источник света для подачи первого света освещения через линзу объектива в проточную ячейку с помощью первой решетки на проточной ячейке, первый датчик изображения для захвата света визуализации с помощью линзы объектива, причем первая решетка расположена вне поля зрения первого датчика изображения; и второй датчик изображения, выполненный с возможностью захвата изображения по меньшей мере первой решетки и планарного волновода в проточной ячейке, причем система выполнена с возможностью оценки изображения путем оценки выравнивания света освещения относительно проточной ячейки.

Изобретение относится к технологическому оборудованию для предприятий хранения нефти и нефтепродуктов, в частности к устройствам для получения фактического состава пробы на каждом измеряемом уровне из резервуара, оснащенного понтоном или плавающей крышей, без потерь нефтепродукта. Изобретение касается пробоотборника сниженного для резервуаров с плавающей крышей или понтоном, содержащего несущую коленную штангу, состоящую из верхней и нижней секций, соединенных посредством среднего шарнирного узла, верхний шарнирный узел, предназначенный для крепления к плавающей крыше (понтону) через кронштейн и нижний шарнирный узел, предназначенный для закрепления на стенке резервуара, а также пробозаборные колонны верхнего, среднего и нижнего уровней отбора пробы с верхним, средним и нижним узлами забора пробы соответственно, распределительное устройство, гидравлически связанное с патрубком прокачки, краны забора пробы с нижнего, среднего и верхнего уровней отбора пробы, краны слива и откачки, кран прокачки и насос.

Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано в фармацевтической промышленности. Способ количественного определения суммы дубильных веществ в эвтерпы овощной плодах методом прямой спектрофотометрии включает предварительное получение водно-спиртового извлечения из плодов эвтерпы путем экстракции 0,5 г точной навески, измельченной до частиц 1,0 мм, плодов эвтерпы этиловым спиртом, в пересчете на вещество фенольной природы, при этом экстракцию сырья осуществляют однократно, в качестве экстрагента используют этиловый спирт 40 в соотношении сырье-экстрагент - 1:100, количественное определение суммы дубильных веществ в эвтерпы овощной плодах проводят при длине волны 282±2 нм в пересчете на катехин и содержание суммы дубильных веществ в пересчете на катехин с использованием теоретического значения его удельного показателя поглощения, равного 144. Техническим результатом является создание способа количественного определения суммы дубильных веществ в эвтерпы овощной плодах в пересчете на катехин. 2 ил., 1 табл.

Наверх