Новые n4-модифицированные 5-метил-2'-дезоксицитидины, проявляющие антимикозную активность

Изобретение относится к области органической химии и микробиологии и предназначено для подавления роста грибов-биодеструкторов объектов культурного наследия. Предложены новые N⁴-производные 5-метил-2’-дезоксицитидина представленные общей формулой где: R₁ и R₂ независимо друг от друга означают: R₁=-C_nH_2n+1, -OC_nH_2n+1 (n=8-12); R₂=-OH, -N₃, -NH₂, -NHC(O)CH₃, -N(CH₃)₂, -NHC₂H₅, -N(C₂H₅)₂, -O(CH₂CH₂O)₃H, которые способны подавлять рост мицелиальных грибов. Технический результат: эффективное ингибиторование роста грибов-биодеструкторов объектов культурного наследия. 1 з.п. ф-лы, 1 табл., 23 пр., 6 ил.

 

Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к молекулярной биологии и микробиологии, а именно к применению новых производных N⁴-производных 5-метил-2'-дезоксицитидина для подавления роста мицелиальных грибов.

Уровень техники

Сообщества микроорганизмов играют одну из ключевых ролей в биоповреждении объектов культурного наследия вследствие своей способности ферментативного разложения кожи, масла, казеина, клея, камней и других материалов, используемых в произведениях исторического искусстве [Sterflinger K. Fungi: Their role in deterioration of cultural heritage. Fungal Biol Rev. 2010, 24, 47-55. doi:10.1016/J.FBR.2010.03.003]. Грибы из разных систематических групп могут повредить многие предметы искусства: от масляной живописи на холсте, темперной живописи, пергамента, каменных памятников до экспонатов целых музеев, библиотек, монастырей, наскальных рисунков, фресок в гротах и т.д. [López-Miras М. del М., Martin-Sánchez I., Yebra-Rodriguez Á., Romero-Noguera J., Bolivar-Galiano F., Ettenauer J., et al. PLoS One. 2013, 8, e80198 doi:10.1371/journal.pone.0080198; 52. Sterflinger K., Pinzari F. Environ Microbiol. 2012, 14, 559-566. doi:10.1111/j. 1462-2920.2011.02584.x; Garg K.L., Jain K.K., Mishra A.K. Sci Total Environ. 1995, 167, 255-271. doi:10.1016/0048-9697(95)04587-Q; Li Q., Zhang В., He Z., Yang X. PLoS One. 2016, 11, e0163287. doi:10.1371/journal.pone.0163287; Gorbushina A.A., Heyrman J., Dornieden Т., Gonzalez-Delvalle M., Krumbein W.E., Laiz L. Int Biodeterior Biodegrad. 2004, doi:10.1016/j.ibiod.2003.07.003]. Традиционные антисептики, используемые для противогрибкового лечения при реставрации и консервации темперных картин, используются с рядом ограничений; только небольшое количество антимикозных агентов было проверено на предмет их совместимости с историческими материалами, кроме того было проведено незначительное количество исследований на предмет долгосрочных эффектов биоцидов, таких как возможные изменения цвета или возникновения продуктов разложения [Zhgun, А.А.; Avdanina, D.A.; Shagdarova, В.Т.; Troyan, E. V.; Nuraeva, G.K.; Potapov, M.P.; Il'ina, Shitov, M.V.; Varlamov, V.P. Search for Efficient Chitosan-Based Fungicides to Protect the 15^th-16^th Centuries Tempera Painting in Exhibits from the State Tretyakov Gallery. Microbiology 2020, 89, 750-755, doi:10.1134/S0026261720060193]. Известно, что микроорганизмы способны к эффективному росту на самых разнообразных субстратах, применяемых в темперной живописи (темперы, пластификаторы, лаки, клеи), причем наилучшей средой для грибного роста явились варианты самих темперных красок [Zhgun АА, Avdanina DA, Simonenko NP, Volkov IA, Ivanov VV. Detection of biodeterioration on materials used in tempera painting. Znan misel J. 2018; 1: 7-15; Zhgun A. et al. PLoS ONE 2020, 15(4):e0230591]. В результате, биодеструкция является важнейшим фактором повреждения объектов культурного наследия. Неудивительно, что для ее предупреждения уже разработано значительное разнообразие соединений, обладающих фунгицидными свойствами. Однако большинство из них обладает теми или иными недостатками.

Многие фунгициды, используемые сегодня для защиты объектов культурного наследия, представляют собой металлорганические соединения. Например, немецкие исследователи показали, что по активности и длительности действия фенилртутный ацетат превосходит другие соединения, предлагавшиеся для обработки настенной живописи: пентахлорфенол (ПХФ), производные бензимидазола, оловоорганические соединения [Hirte W.F., Glathe I., Thürmer L. Untersuchungen zum Schuts von Gemälden vor Befall mit Pilzen. Zbl. Mikrobiol., 1987, Bl. 142, N5. S. 377]. Недостатком фенилацетата ртути является высокая токсичность и коррозионная активность по отношению к цветным металлам. Еще одним примером металлорганических фунгицидов является ТБТО (трибутилолово оксид), который применяется вместе с биоцидами из класса органических соединений, в частности, вместе с четвертичными аммониевыми соединениями (ЧАС). ТБТО и ЧАС в 70%-ном изопропиловом спирте были применены для обработки потолочных росписей в Швейцарии в церкви эпохи барокко [Raschle P. Experience of combating moulds during restoration of ceiling paintings in a Swiss baroque monastery church. Biodeterioration 5: ed., T.A. Oxley, S. Barry (International Biodeterioration Symposium 1981, 5th Aberdeen) 1983, Chichester N.Y., p.433]. Однако использование данной комбинации является временной защитой: пока не будут созданы микроклиматические условия, исключающие возможность биоповреждения живописи. Недостатком ТБТО и других оловоорганических соединений является их высокая токсичность. Этот недостаток в принципе свойственен большинству металлорганических фунгицидов.

В России среди реставраторов, работающих с настенной живописью, относящихся к памятникам искусства, получили распространение биоциды на основе полигексаметиленгуанидина (полигексаметиленгуанидин хлорид-метацид, полисепт или полигексаметиленгуанидин фосфат-фогуцид). Недостатком этих соединений является хорошая растворимость в воде. В условиях конденсации влаги или протечек они не могут обеспечить длительность антимикробного действия.

В патенте US 5882731 В (B05D 3/00, A01N 25/02, A01N 29/00, A01N 31/02) представлено изобретение по защите внешних и внутренних поверхностей от поражения микроскопическими грибами, плесенью. Изобретение представляет собой пленочные композиции, в состав которых в различных концентрациях входят наполнители из воска, аминов жирного ряда, аминосиликонов, ПАВ и водного растворителя и действующее вещество - фунгицид. В качестве фунгицида могут выступать следующие вещества: 2-(тиоцианометилтио)бензотиазол; 3-иод-2-пропинил-бутилкарбамат; 2,4,5,6-тетрахлоризофталонитрил; 2-(4-тиазолил)бензимидазол; 2-N-октил-4-изотиазолинон-3; n-толилдииодметилсульфон, а также смесь этих веществ в различных пропорциях. Поверхности рекомендуется обрабатывать этим составом превентивно путем нанесения тонкой пленки. Предложенные в патенте химические вещества являются эффективными, однако их недостатком является их высокая токсичность.

В изобретении SU 992241 А1 (МПК B44D 7/00, C07D 263/56) для защиты произведений изобразительного искусства предложено использовать антисептический препарат 1-(2-бензоксазолил)-3,3,3-трифторацетон в водно-спиртовом или водно-ацетоновом растворе в рыбьем клею. Обработка темперных красок 1%-ным водно-ацетоновым раствором или масляных красок 1%-ным водно-спиртовым раствором защищает красочное покрытие от растрескивания, отслаивания и изменения окраски даже после 30-ти дневного нахождения обработанных макетов окрасок на солнечном свете при комнатной температуре, т.е. препарат является нейтральным по отношению к материалам изобразительного искусства. В изобретении отмечается, что предлагаемое соединение обладает гораздо большей бактерицидной активностью в сравнении с имеющимися традиционными антисептиками, такими как катамин АБ, катапин и пентахлорфенолят натрия [Воронина Л.И. Дезинфекция станковой масляной и темперной живописи четвертичными солями аммония. Сборник. Реставрация, исследование, хранение произведений станковой живописи. Вып. 1, М., 1979 г.]. Однако предлагаемый препарат тестировался исключительно против бактерий рода Bacillus, выделенных из защищенного стандартным антисептиком рыбьего клея, применяемого в реставрационной практике. Тестирование 1-(2-бензоксазолил)-3,3,3-трифторацетона не проводилось на широком спектре прокариотических культур и, тем более, не тестировался на плесневых мицелиальных грибах, создающих микробном того или иного музея.

Среди перспективных классов биологически активных соединений стоит обратить внимание на нуклеозиды и их производные. Антимикозная активность нуклеозидов в отношении объектов культурного наследия до недавнего времени не изучалась. В последнее время появились сообщения о нескольких группах модифицированных нуклеозидов, продемонстрировавших заметную антимикозную активность в отношении возбудителей грибковых инфекций у человека [Serpi М, Ferrari V, Pertusati F. Nucleoside Derived Antibiotics to Fight Microbial Drug Resistance: New Utilities for an Established Class of Drugs? J Med Chem. 2016;59: 10343-10382; Niu G, Zheng J, Tan H. Biosynthesis and combinatorial biosynthesis of antifungal nucleoside antibiotics. Sci China Life Sci. 2017; 60: 939-947]. Антимикозная активность нуклеозидов, в особенности N⁴-модифицированных нуклеозидов, приводящая к ингибированию роста грибов-биодеструкторов объектов культурного наследия, до настоящего времени не была выявлена.

Раскрытие сущности изобретения

Целью данного изобретения является получение новых N⁴-модифицированных 5-метил-2'-дезоксицитидинов, содержащих в своем составе протяженный (с длиной углеродной цепи С₁₀-С₁₂) алкильный заместитель, подавляющих рост мицелиальных грибов. Введение протяженных алкильных заместителей в молекулу нуклеозида приводит к увеличению гидрофобности, и, как следствие, снижает водорастворимость целевых соединений.

Для осуществления поставленной цели используют такие методы, как:

- введение защитных групп (блокирование гидроксильных групп нуклеозида проводят с целью предотвращения нежелательных реакций в ходе синтеза, а также с целью улучшения подвижности промежуточных соединений при хроматографическом разделении, что облегчает их очистку);

- метод Дивакара и Риса (введение алкильных заместителей по N⁴-положению нуклеозида);

- восстановительное аминирование (восстановление азидогруппы до аминогруппы с одновременной конденсацией с альдегидом;

- деблокирование защитных групп (если это необходимо).

Следующим пунктом осуществления изобретения является проверка антимикозной активности полученных соединений, для этого тестируемое производное добавляют в твердую питательную среду, на которую затем высевают штаммы мицелиальных грибов, изолированные с экспонатов и поверхностей залов Живописи Древней Руси Третьяковской галереи.

Далее изобретение будет раскрыто подробнее со ссылками на фигуры и примеры, которые приводятся исключительно с целью иллюстрации и пояснения сущности заявленного изобретения, но которые не предназначены для ограничения объема притязаний.

Краткое описание фигур и таблиц

Фиг. 1. Синтез N⁴-модифицированных 5-метил-2'-дезоксицитидинов (1-1 - 1-7). Условия проведения реакций: i) уксусный ангидрид, пиридин, +37°С, 20 ч; ii) 1,2,4-триазол, 2-хлорфенилдихлорфосфат, пиридин, +20°С, 20 ч; iii) R-NH₂ или RO-NH₂, диоксан, +20°С, 20 ч; iv) 25% NH₃/H₂O, диоксан, +20°С, 20 ч.

Фиг. 2. Синтез 3'-замещенных N⁴-алкил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидинов (1-8 - 1-20). Условия проведения реакций: i) TBDMSCl, пиридин, +37°С, 20 ч; ii) 1,2,4-триазол, 2-хлорфенилдихлорфосфат, пиридин, +20°С, 20 ч; iii) R-NH₂, диоксан, +20°С, 20 ч; iv) Bu₄NF⋅3H₂O, диоксан, 20 ч; v) 1: Ph₃P, диоксан, +20°С, 20 ч; 2: 25% NH₃/H₂O, диоксан, +20°С, 20 ч; vi) Ac₂O, пиридин, +20°С, 20 ч; vii) 1: СН₃СНО, EtOH, 5°С, 2 ч; 2: NaBH₄, +20°С, 20 ч; viii) 1: СН₃СНО, EtOH, 5°С, 2 ч; 2: NaBH₃(CN), +20°С, 20 ч; ix) 1: СН₂О, МеОН, +20°С, 2 ч; 2: NaBH₃(CN), +20°С, 20 ч.

Фиг. 3. Синтез 3'-триэтиленгликолевых производных N⁴-алкил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидинов (1-21, 1-22). Условия проведения реакций: i) уксусный ангидрид, пиридин, +37°С, 20 ч; ii) CDI, DMF, +37°С, 48 ч; iii) триэтиленгликоль, диоксан, +37°С, 48 ч; iv) TBDMS-Cl, пиридин, +20°С, 20 ч; v) 1,2,4-триазол, 2-хлорфенилдихлорфосфат, пиридин, +20°С, 20 ч; vi) R-NH₂, диоксан, +20°С, 20 ч; vii) Bu₄NF⋅3H₂O, диоксан, 20 ч.

Фиг. 4. Рост различных штаммов мицелиальных грибов на агаризованной среде Чапека-Докса с добавлением N⁴-модифицированных 5-метил-2'-дезоксицитидинов в концентрации 0.7 мМ, а также без добавления (контроль) 30 дней после инокуляции.

Фиг. 5. Динамика ингибирования роста штаммов мицелиальных грибов, изолированных из залов и с произведений искусств Государственной Третьяковской галереи, соединениями 1-1-1-3, 1-21 и 5FC на среде ЧДА, добавленными в концентрациях 0.5 мМ и 3 мМ. Приведены данные на 6, 12, 24, 30, 42 и 48 дни после инокуляции.

Фиг. 6. Степень чувствительности штаммов мицелиальных грибов к N⁴-модифицированным 5-метил-2'-дезоксицитидинам (1-1 - 1-3, 1-5, 1-6, 1-11 - 1-13, 1-15 - 1-21) в концентрации 0.7 мМ и к 5FC.

Таблица 1. N⁴-модифицированные 5-метил-2'-дезоксирибоцитидины.

Осуществление изобретения

Синтез соединений осуществлялся на основе коммерчески доступных тимидина и 3'-азидо-3'-дезокситимидина. Это позволило получить ряд модифицированных 5-метил-2'-дезоксирибоцитидинов, содержащих протяженный алкильный заместитель в N⁴-Положении. Для некоторого улучшения их крайне низкой растворимости в некоторых случаях была произведена модификация положения 3', а именно замена гидроксила на амино-, моноалкиламино- и диалкиламиногрупп, а также конденсация триэтиленгликоля через карбонатный линкер. Список синтезированных соединений приведен в Таблице 1 (см. в конце описания).

Для получения N⁴-алкил производных 5-метил-2'-дезоксирибоцитидина использовали тимидин (2), в котором в первую очередь проводили защиту двух гидроксильных групп с помощью ацетильной группы, для чего тимидин обрабатывали уксусным ангидридом. Затем, согласно методу [Divakar, K.J.; Reese, С.В. J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1982, 1, 1171] или его модификации [Lee, B.-Y.; Park, S.R.; Jeon, H.B.; Kim, R.S.; Tetrahedron Lett., 2006, 47, 5105], в полученное соединение 3 в результате последовательных обработок 2-хлорфенилдихлорфосфатом с 1,2,4-триазолом, а затем соответствующим амином или О-алкилгидроксиламином в присутствии N,N-диизопропилэтиламина (Фиг. 1) вводили протяженный н-алкильный заместитель. После деблокирования защитных групп в соединении 4 водно-диоксановым раствором аммиака выделяли целевые соединения (1-1 - 1-7) колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя хлороформом или этилацетатом с увеличивающейся концентрацией этанола.

5'-O-TBDMS-3'-азидо-N⁴-алкил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидины (6-8) получали методом, аналогичном для синтеза соединений 1-1-1-7, исходя из азидотимидина 5, а в качестве защитной группой использовали трет-бутилдиметилсилильную группу (Фиг. 2). Деблокирование 5'-OTBDMS группы действием тригидрата фторида тетрабутиламмония дало 3'-азидо-N⁴-алкил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидины (1-8-1-10). Восстановление 5'-O-TBDMS-3'-азидо-N⁴-алкил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидинов (6-8) трифенилфосфином позволило получить ключевые 5'-O-TBDMS-3'-амино-N⁴-алкил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидины (9-10), а последующее деблокирование защитной группы действием тригидрата фторида тетрабутиламмония привело к целевым 3'-амино-N⁴-алкил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидинам (1-11 и 1-12). Взаимодействием 9-10 или с уксусным ангидридом, или с уксусным альдегидом и NaBH₄, с последующим деблокированием 5'-O-TBDMS группы действием тригидрата фторида тетрабутиламмония привело к 3'-ацетамидо- (1-13 и 1-14) и 3'-этиламино-N⁴-алкил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидинам (1-15 и 1-16), соответственно. Для получения 3'-диалкиламино-N⁴-алкил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидинов (1-17-1-20) использовали формальдегид и ацетальдегид, а в качестве восстановителя-цианоборгидрид натрия (NaBH₃(CN)).

Исходным соединением в синтезе триэтиленгликолевых производных N⁴-модифицированных 5-метил-2'-дезоксицитидинов являлся тимидин 2 (Фиг. 3). На первой стадии синтеза производили избирательную защиту гидроксильной группы в 5'-положении углеводного остатка путем конденсации 2 с трет-бутилдиметилсилилхлоридом в пиридине при охлаждении до +4°С. 3'-О-Карбонилтриэтиленгликолевое производное 5'-O-TBDMS-тимидина (11) получали последовательной обработкой защищенного тимидина с помощью карбонилдиимидазолом (CDI) в DMF и далее, без выделения интермедиата, триэтиленгликолем в диоксане. Затем, после экстракции водой из смеси хлороформ-гексан, органический слой упаривали и обрабатывали TBDMSC1 в пиридине с получением ключевого соединения (12). Обработка (12) 2-хлорфенилдихлорфосфатом и 1,2,4-триазолом, с последующей конденсацией с соответствующим амином (аналогично описанному выше методу) и деблокированием О-TBDMS защитных групп действием тригидрата фторида тетрабутиламмония позволила получить 3'-О-карбонилтриэтиленгликолевые производные (1-21 и 1-22), которые выделяли колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя хлороформом или этилацетатом с увеличивающейся концентрацией этанола.

Противогрибковую активность N⁴-модифицированных 5-метил-2'-дезоксицитидинов или 5-фторцитозина (5FC), как положительного контроля, оценивали в отношении 11-ти штаммов мицелиальных грибов, включая пять представителей семейства Aspergillus, два представителя семейства Cladosporium и по одному представителю семейств Ulocladium, Simplicillium, Microascus и Penicillium. Эффективность соединений оценивали количественно по проценту ингибирования роста колоний на агаризованной среде Чапека-Докса (ЧДА), дополненной N⁴-модифицированными 5-метил-2'-дезоксицитидинами или 5FC по сравнению с ростом на контрольной среде (без добавок). Тестируемые штаммы мицелиальных грибов изолировали с экспонатов и поверхностей залов Живописи Древней Руси (залы 56, 57 и 61) основного исторического здания Третьяковской Галереи (Лаврушинский пер., 10, Москва), а именно: штамм Aspergillus versicolor STG-25G (SRX7729174; MK260015.1), Ulocladium sp.AAZ-2020a STG-36 (SRX7729176; MW590700) - с иконы «Церковь Воинствующая» (1550-е), Cladosporium halotolerans STG-52B (SRX7729178; МК258720.1) - с бюстового фрагмента статуи «Святой Великомученик Георгий Победоносец» (1464, Известковый камень, темпера), Aspergillus creber STG-57 (SRX7729180; MK266993.1) - с иконы «Святой Великомученик Димитрий Солунский» (16 век), Aspergillus versicolor STG-86 (SRX7729182; MK262781.1), Aspergillus creber STG-93W (SRX7729186; MW575292), Cladosporium parahalotolerans STG-93B (SRX7729188; MK262909.1), Simplicillium lamellicola (STG-96 (SRX7729190; MK262921.1) - с поверхностей зала 61, Microascus paisii STG-103 (SRX7729192; MW591474)-в зале 57, Aspergillus protuberus STG-106 (SRX7729194; MK268342.1) и Penicillium chrysogenum STG-117 (MW556011.1) - в зале 56.

Полученные результаты наглядно демонстрируют антимикозную активность для большинства из полученных соединений, добавленных в концентрации 0.7 мМ (Фиг. 4). Соединения 1-12, 1-16 и 1-20 показали полное подавление роста всех тестируемых штаммов грибов после 60-ти дней культивирования на ЧДА при 26°С. Добавление соединений 1-11, 1-15 и 1-19 привело к полному подавлению роста большинства микроорганизмов, кроме S. lamellicola (STG-96) и P. chrysogenum (STG-117), характеризующихся быстрорастущими колониями, устойчивыми к широкому спектру антисептиков. Соединения 1-17 и 1-18 показали неполное ингибирование роста штаммов STG-96 и STG-117. Данные соединения также не смогли полностью подавить рост некоторых аспергилл. Так, штаммы STG-25G и STG-57 показали среднюю чувствительность против 1-17, а штамм STG-106 показал среднюю чувствительность как против 1-17, так и против 1-18. Интересный спектр резистентности выявлен в отношении соединения 1-3. Оно полностью подавляет быстрорастущие штаммы STG-96 и STG-117, но оказывает лишь частичное воздействие на аспергиллы (штаммы STG-25G, STG-57, STG-86, STG-93W и STG-106). Возможно, замена аминогруппы (или ее алкильных производных) на гидроксильную группу в 3'-положении углеводного остатка несколько меняет механизм фунгицидного действия, что отражается в чувствительности различных систематических групп грибов к этим соединениям.

Также можно проследить несколько характерных зависимостей в ряду синтезированных соединений. Чувствительность изученных штаммов грибов к соединениям с гидроксильной группой в 3'-положении углеводного остатка возрастает в ряду 1-1 - 1-2 - 1-3. Другими словами, увеличение длины алкильного заместителя с восьми до двенадцати атомов углерода приводит к улучшению ингибиторной активности. Особенно хорошо этот эффект выражен в случае с соединениями, содержащими аминогруппу в 3'-положении углеводного остатка: во всех случаях наличие додецила в положении N⁴ приводило к заметно большей ингибиторной активности по сравнению с децилом. Введение в 3'-положение углеводного остатка азидной или ацетамидной группы приводит практически к полной утрате фунгицидного действия нуклеозида в тестируемых концентрациях.

Замена децильного заместителя в положении N⁴ (соединение 1-2) на децилокси (соединение 1-5) приводит к снижению активности соединения (уровень антимикозной активности опускается до уровня соединения 1-1, с радикалом октил в соответствующем положении). Увеличение длины алкилокси-заместителя в этом же положении на одну метиленовую группу (соединение 1-6) несколько увеличивает активность по сравнению с 1-5 (при этом радикал ундецилокси в положении N⁴ приводит примерно к той же активности, что и радикал децил в том же положении (Фиг. 6)).

Таким образом, для изученных штаммов грибов наиболее эффективными явились соединения, содержащие додецильный радикал в положении N⁴ и аминогруппу в 3'-положении углеводного остатка (против всех штаммов). Замена аминогруппы на гидроксильную группу приводит к утрате ингибиторной активности в отношении аспергилл.

Коммерческие реагенты были закуплены от фирм Acros, Aldrich и Fluka. Все растворители были очищены согласно общеизвестным методам. Колоночную хроматографию проводили на силикагеле диаметром 40-63 мкм (Acros),тонкослойную хроматографию-на пластинках с силикагелем 60 F₂₅₄ (Merck, Germany). Спектры ЯМР регистрировали на спектрометре АМХ III-400 (Bruker BioSpin, GmbH, Germany) с рабочей частотой 400 МГц для ¹Н ЯМР (Me₄Si как внутренний стандарт для органических растворителей) и 101 МГц для ¹³С ЯМР (с подавлением С-Н корреляции) или на спектрометре АМ-300 (Bruker BioSpin, GmbH, Germany) с рабочей частотой 300 МГц для ¹Н ЯМР (Me₄Si как внутренний стандарт для органических растворителей) и 75 МГц для ¹³С ЯМР (с подавлением С-Н корреляции). УФ спектры были записаны с использованием Perkin Elmer lambda 25 (Perkin Elmer, USA) в метаноле. Масс-спектры высокого разрешения были записаны на масс-спектрометре Bruker Daltonics micrOTOF-Q II (Bruker-MS, GmbH, Germany) с ионизацией электроспреем. Измерения были проведены в режиме положительных ионов в соответствии с прежде использованными условиями.

Далее приведены примеры, иллюстрирующие данное изобретение. Варианты и модификации осуществления изобретения, которые могут быть воспроизведены, не отходя от общей концепции настоящего изобретения и без привлечения собственной изобретательской деятельности, также будут входить в объем притязаний настоящего изобретения.

Пример 1. Синтез N⁴-октил-5-метил-2'-дезоксицитидина (1-1)

К раствору тимидина 2 (121 мг, 0.5 ммоль) в абсолютном пиридине добавляли уксусный ангидрид (118 мкл, 1.25 ммоль) и оставляли при +37°С на 20 ч. Реакционную смесь упаривали, твердый остаток растворяли в минимальном объеме этанола и оставляли при +4°С на 48 ч. Полученные кристаллы отфильтровывали, промывали этанолом, охлажденным до -20°С, затем оставляли в эксикаторе над парафином при низком давлении на 48 ч. К полученному таким образом соединению 3, растворенному в абсолютном пиридине и охлажденному до 0°С, добавляли 1,2,4-триазол (200 мг, 3 ммоль) и 2-хлорфенилдихлорфосфат (188 мг, 0.77 ммоль). Смесь оставляли на 20 ч при комнатной температуре, затем упаривали, остаток распределяли между хлороформом и 0.5 М бикарбонатом натрия, органический слой промывали водой, высушивали над Na₂SO₄, упаривали, растворяли в безводном диоксане, охлаждали до 0°С и добавляли 1-октиламин (165 мкл, 1 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламин (175 мкл, 1 ммоль). Смесь оставляли на 20 ч при комнатной температуре, затем добавляли 3 мл 25%-ного водного раствора аммиака и оставляли на 40 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь упаривали. Полученную твердую смесь веществ разделяли на колонке (2×15 см) с силикагелем, элюируя системой хлороформ: этанол в соотношении 9: 1 (об./об.). Целевой продукт 1-1 был получен в количестве 138 мг (78%) в виде твердых белых кристаллов. УФ: λ_max 273 нм. ¹Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 0.84 (3Н, t, J=6.8 Гц, -CH₂-СН₃), 1.21-1.30 (10Н, m, -NH-(CH₂)₂-(CH₂)₅-), 1.46-1.55 (2Н, m, -NH-CH₂-CH₂-), 1.84 (3Н, s, 5-СН₃), 1.95 (1Н, ddd, J=13.3, 7.7, 6.0 Гц, 2'-На), 2.06 (1Н, ddd, J=13.1, 6.0, 3.2 Гц, 2'-Hb), 3.25-3.31 (2Н, m, -NH-CH₂-), 3.54 (1H, ddd, J=12.0, 5.3, 3.9 Гц, 5'-На), 3.59 (1H, ddd, J=11.8, 5.5, 3.8 Гц, 5'-Hb), 3.75 (1Н, td, J=3.9, 3.3 Гц, 4'-Н), 4.21 (1Н, ddt, J=6.0, 4.3, 3.3 Гц, 3'-Н), 4.96 (1H t, J=5.3 Гц, 5'-ОН), 5.15 (1Н, d, J=4.3 Гц, 3'-ОН), 6.17 (1Н, dd, J=7.6, 6.0 Гц, 1'-H), 7.10 (1Н, t, J=5.7 Гц, N⁴-H), 7.56 (1H, s, 6-H). ¹³C ЯМР (101 МГц, DMSO-d₆) δ 13.05 (5-CH₃), 13.84 (-CH₂-CH₃), 22.01, 26.43, 28.54, 28.61, 28.76, 31.19 (-NH-CH₂-(CH₂)₆-). 40.05 (2'-C), 40.17 (-NH-CH₂-), 61.39 (5'-C), 70.42 (3'-C), 84.56 (l'-C), 87.03 (4'-C), 101.63 (5-C), 137.09 (6-C), 155.09 (2-C), 162.61 (4-C). HRMS (ESI) рассчитано для C₁₈H₃₁N₃O₄, m/z: 354.2387 [M+H]+, найдено 354.2383.

Пример 2. Синтез N⁴-децил-5-метил-2'-дезоксицитидина (1-2)

Получен по методу, описанному в Примере 1, из 2 (121 мг, 0.5 ммоль) и 1-дециламина (200 мкл, 1 ммоль). Выход 147 мг (77%) в виде твердых белых кристаллов. УФ: λ_max 273 нм. ¹Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 0.84 (3Н, t, J=6.8 Гц, -СН₂-СН₃), 1.21-1.28 (14Н, m, -NH-(CH₂)₂-(CH₂)₇-), 1.45-1.55 (2Н, m, -NH-CH₂-CH₂-), 1.84 (3Н, d, J=1.0 Гц, 5-СН₃), 1.95 (1H, ddd, J=13.3, 7.8, 6.1 Гц, 2'-На), 2.06 (1H, ddd, J=13.1, 6.0, 3.2 Гц, 2'-Hb), 3.25-3.31 (2Н, m, -NH-CH₂-), 3.54 (1H, ddd, J=11.7, 5.3, 4.0 Гц, 5'-На), 3.59 (1Н, ddd, J=11.7, 5.3, 3.8 Гц, 5'-Hb), 3.75 (1Н, ddd, J=4.2, 3.7, 3.1 Гц, 4'-Н), 4.21 (1H, ddt, J=6.0, 4.2, 3.2 Гц, 3'-Н), 4.96 (1Н, t, J=5.3 Гц, 5'-ОН), 5.16 (1H, d, J=4.2 Гц, 3'-ОН), 6.17 (1Н, dd, J=7.6, 5.9 Гц, 1'-H), 7.09 (1Н, t, J=5.7 Гц, N⁴-H), 7.56 (1H, d, J=1.2 Гц, 6-H). ¹³C ЯМР (101 МГц, DMSO-d₆) δ 13.08 (5-CH₃), 13.87 (-CH₂-CH₃), 22.05, 26.45, 28.57, 28.67, 28.83, 28.94, 28.99, 31.26 (-NH-CH₂-(CH₂)₈-), 40.14 (2'-C), 40.20 (-NH-CH₂-), 61.42 (5'-C), 70.45 (3'-C), 84.59 (1'-C), 87.05 (4'-C), 101.66 (5-C), 137.11 (6-C), 155.12 (2-C), 162.64 (4-C). HRMS (ESI) рассчитано для C₂₀H₃₅N₃O₄, m/z: 382.2700 [M+H]+, найдено 382.2703.

Пример 3. Синтез N⁴-додецил-5-метил-2'-дезоксицитидина (1-3)

Получен по методу, описанному в Примере 1, из 2 (121 мг, 0.5 ммоль) мг и 1-додециламин (185 мг, 1 ммоль). Выход 147 мг (77%) в виде твердых белых кристаллов. УФ: λ_max 273 нм. ¹Н ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆) δ 0.86 (3Н, t, J=6.8 Гц, -СН₂-СН₃), 1.23 -1.28 (18Н, m, -NH-(CH₂)₂-(CH₂)₉-), 1.47-1.56 (2H, m, -NH-CH₂-CH₂-), 1.84 (3H, d, J=. 1.0 Гц, 5-СН₃), 1.95 (1H, ddd, J=13.2, 7.8, 6.0 Гц, 2'-Ha), 2.06 (1H, ddd, J=13.1, 6.0, 3.2 Гц, 2'-Hb), 3.19-3.32 (2H, m, -NH-CH₂-), 3.53 (1H, ddd, J=11.8, 5.3, 4.2 Гц, 5'-Hb), 3.59 (1H, ddd, J=11.7, 5.3, 3.9 Гц, 5'-Ha), 3.75 (1H, ddd, J=4.1, 3.6, 3.0 Гц, 4'-H), 4.21 (1H, dddd, J=6.0, 4.2, 3.2, 2.8 Гц, 3'-Н), 4.97 (1H, t, J=5.3 Гц, 5'-OH), 5.16 (1H, d, J=4.2 Гц, 3'-ОН), 6.18 (1H, dd, J=7.6, 6.0 Гц, 1'-H), 7.10 (1H, t, J=5.7 Гц, N⁴-H), 7.56 (1H, d, J=1.2 Гц, 6-H). ¹³C ЯМР (75 МГц, DMSO-d₆) δ 13.11 (5-СН₃), 13.90 (-C₁₁H₂₂-CH₃), 22.06, 26.45, 28.57, 28.68, 28.84, 29.00, 29.03, 31.27 (-NH-CH₂-(CH₂)₁₀-). 40.11 (2'-C), 40.24 (-NH-CH₂-), 61.40 (5'-C), 70.43 (3'-C), 84.58 (1'-C), 87.07 (4'-C), 101.65 (5-C), 137.18 (6-C), 154.93 (2-C), 162.50 (4-C). HRMS (ESI) рассчитано для C₂₂H₃₉N₃O₄, m/z: 410.3019 [M+H]+, найдено 410.3022.

Пример 4. Синтез N⁴-октилокси-5-метил-2'-дезоксицитидина (1-4)

Получен по методу, описанному в Примере 1, из 2 (121 мг, 0.5 ммоль) и О-октилгидроксиламина (145 мг, 1 ммоль). Выход 138 мг (78%) в виде твердых белых кристаллов. УФ: λ_max 276 нм. ¹Н ЯМР (DMCO-d₆): δ 0.84 (3Н, t, J=6.8 Гц, -(СН₂)₅СН₃), 1.25-1.48 (10Н, m, -СН₂СН₂(CH₂)₅СН₃), 1.50 (2Н, m, -СН₂СН₂(СН₂)₅СН₃), 1.84 (3Н, s, 5-СН₃), 1.93-1.99 (1Н, m, 2'-На), 2.03-2.08 (1H, m, 2'-Hb), 3.27 (2Н, m, -СН₂СН₂(СН₂)₅СН₃), 3.54-3.56 (2Н, m, 5'-Н), 3.76 (1Н, m, 4'-Н), 3.85 (2Н, m, O-СН₂), 4.19-4.21 (1Н, m, 3'-СН), 4.96 (1Н, t, J=5.3 Гц, 5'-ОН), 5.15 (1H, d, J=4.2 Гц, 3'-ОН), 6.18 (1Н, t, J=7 Гц, 1'-H), 7.56 (1Н, s, 6-CH), 9.48 (1H, s, NH). ¹³C ЯМР (ДМСО-d₆): δ 13.05 (5-СН₃), 13.83 (-(СН₂)₇СН₃), 22.0-31.19 (-C₇H₁₄), 40.17 (2'-C), 61.38 (5'-C), 70.31 (3'-C), 84.55 (l'-C), 87.01 (4'-C), 101.61 (5-C), 137.07 (6-C), 155.07 (2-C), 162.59 (4-C). HRMS (ESI) рассчитано для C₁₈H₃₁N₃O₅, m/z: 370.2342 [M+H]+, найдено 370.2330.

Пример 5. Синтез N⁴-децилокси-5-метил-2'-дезоксицитидина (1-5)

Получен по методу, описанному в Примере 1, из 2 (121 мг, 0.5 ммоль) и О-децилгидроксиламина (173 мг, 1 ммоль). Выход 161 мг (77%) в виде твердых белых кристаллов. УФ: λ_max 277 нм. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆): δ 0.81 (3Н, t, J=6.8 Гц, -(CH₂)₉СН₃), 1.21 (14Н, m, -СН₂СН₂(СН₂)₇CH₃. 1.52 (2Н, m, -СН₂СН₂(СН₂)₇СН₃), 1.57 (3Н, s, 5-СН₃), 1.92-2.08 (2Н, m, 2'-Н), 3.51-3.54 (2Н, m, 5'-Н), 3.76 (1Н, m, 4'-Н), 3.85 (2Н, m, О-CH₂(C₉H₁₈)-), 4.18-4.20 (1H, m, 3'-Н), 4.93 (1Н, t, J=5.3 Гц, 5'-ОН), 5.15 (1H, d, J=4.2 Гц, 3'-ОН), 6.15 (1Н, t, J=7 Гц, 1'-CH), 7.93 (1Н, s, 6-H), 9.47 (1H, s, NH). ¹³C ЯМР (ДМСО-d₆): δ 13.05 (5-CH₃), 13.87 (-(СН₂)₉СН₃), 22.02-31.23 (-C₉H₂₈), 39.29 (2'-C), 61.38 (5'-C), 70.42 (3'-C), 84.78 (1'-C), 87.1 (4'-C), 94.62 (5-C), 139.55 (6-C), 155.1 (2-C), 163.22 (4-C). HRMS (ESI) рассчитано для C₂₀H₃₅N₃O₅, m/z: 398.2655 [M+H]+, найдено 398.2659.

Пример 6. Синтез N⁴-ундецилокси-5-метил-2'-дезоксицитидина (1-6)

Получен по методу, описанному в Примере 1, из 2 (121 мг, 0.5 ммоль) и О-ундецилгидроксиламина (187 мг, 1 ммоль). Выход 161 мг (78%) в виде твердых белых кристаллов. УФ: λ_max 277 нм. ¹Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 0.85 (3Н, t, J=6.8 Гц, -СН₂-СН₃), 1.21-1.28 (16Н, m, -NH-(CH₂)₂-(CH₂)₈), 1.84 (3Н, d, J=1.0 Гц, 5-CH₃), 1.95 (1Н, ddd, J=13.3, 7.8, 6.1 Гц, 2'-Ha), 2.06 (1Н, ddd, J=13.1, 6.0, 3.2 Гц, 2'-Hb), 3.54 (1H, ddd, J=11.7, 5.3, 4.0 Гц, 5'-Ha), 3.59 (1H, ddd, J=11.7, 5.3, 3.8 Гц, 5'-Hb), 3.75 (1H, ddd, J=4.2, 3.7, 3.1 Гц, 4'-H), 3.86 (2H, m, -NH-O-CH₂-), 4.21 (1H, ddt, J=6.0, 4.2, 3.2 Гц, 3'-Н), 4.96 (1H, t, J=5.3 Гц, 5'-OH), 5.16 (1H, d, J=4.2 Гц, 3'-ОН), 6.17 (1H, dd, J=7.6, 5.9 Гц, 1'-H), 7.56 (1H, d, J=1.2 Гц, 6-H), 9.46 (1H, s, NH). ¹³C ЯМР (101 МГц, DMSO-d₆) δ 13.08 (-CH₂-CH₃), 13.87 (5-CH₃), 22.05, 26.45, 28.57, 28.67, 28.83, 28.94, 28.99, 31.26 (-NH-CH₂-(CH₂)₉-). 40.14 (2'-C), 40.20 (-NH-CH₂-), 61.42 (5'-C), 70.45 (3'-C), 84.59 (1'-C), 87.05 (4'-C), 101.66 (5-C), 137.11 (6-C), 155.12 (2-C), 162.64 (4-C). HRMS (ESI) рассчитано для C₂₁H₃₇N₃O₅, m/z: 412.2812 [M+H]+, найдено 412.2814.

Пример 7. Синтез N⁴-додецилокси-5-метил-2'-дезоксицитидина (1-7)

Получен по методу, описанному в Примере 1, из 2 (121 мг, 0.5 ммоль) и О-додецилгидроксиламина (201 мг, 1 ммоль). Выход 154 мг (75%) в виде твердых белых кристаллов. UV: λ_max 273 нм. ¹Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 0.81 (3Н, t, J=6.8 Гц, -СН₂-СН₃), 1.19 (18Н, m, -NH-(CH₂)₂-(CH₂)_9-). 1.49-1.58 (2Н, m, -NH-CH₂-CH₂-), 1.85 (3Н, d, J=1.0 Гц, 5-СН₃), 1.95 (1H, ddd, J=13.2, 7.8, 6.0 Гц, 2'-Ha), 2.06 (1H, ddd, J=13.1, 6.0, 3.2 Гц, 2'-Hb), 3.19-3.32 (2H, m, -NH-CH₂-), 3.53 (1H, ddd, J=11.8, 5.3, 4.2 Гц, 5'-Hb), 3.59 (1H, ddd, J=11.7, 5.3, 3.9 Гц, 5'-Ha), 3.75 (1H, ddd, J=4.1, 3.6, 3.0 Гц, 4'-H),. 3.85 (2H, -NH-O-CH₂-), 4.21 (1Н, dddd, J=6.0, 4.2, 3.2, 2.8 Гц, 3'-Н), 4.97 (1H, t, J=5.3 Гц, 5'-ОН), 5.16 (1H, d, J=4.2 Гц, 3'-ОН), 6.11 (1H, dd, J=7.6, 6.0 Гц, 1'-H), 6.94 (1H, d, J=1.2 Гц, 6-H), 9.46 (1H, s, NH). ¹³C ЯМР (75 МГц, DMSO-d₆) δ 13.11 (-CH₂-CH₃), 13.90 (5-СН₃), 22.06, 26.45, 28.57, 28.68, 28.84, 29.00, 29.03, 31.27 (-NH-CH₂-(CH₂)₁₀-). 40.11 (2'-C), 40.24 (-NH-CH₂-), 61.40 (5'-C), 70.43 (3'-C), 84.58 (1'-C), 87.07 (4'-C), 101.65 (5-C), 137.18 (6-C), 154.93 (2-C), 162.50 (4-C). HRMS (ESI) рассчитано для C₂₂H₃₉N₃O₅, m/z: 426.2968 [M+H]+, найдено 426.2969.

Пример 8. Синтез 3'-азидо-N⁴-октил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидина (1-8)

К раствору азидотимидина 5 (134 мг, 0.5 ммоль) в абсолютном пиридине добавляли трет-бутилдиметилсилилхлорид (98 мг, 0.65 ммоль) и оставляли при +37°С на 20 ч, после чего полученный раствор упаривали, остаток распределяли между этилацетатом и 0.5 М бикарбонатом натрия. Органическую фракцию собирали, сушили над Na₂SO₄ и упаривали. К полученному твердому остатку добавляли 1,2,4-триазол (345 мг, 5 ммоль) и 2-хлорфенилдихлорфосфат (165 мкл, 1 ммоль) и оставляли при комнатной температуре на 20 ч. Затем реакционную смесь упаривали, твердый остаток распределяли между этилацетатом и 0.5 М бикарбонатом натрия. Органическую фазу сушили над Na₂SO₄, после чего упаривали. К твердому остатку добавляли 1-октиламин (0.165 мкл, 1 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламин (348 мкл, 2 ммоль). Реакционную смесь упаривали, остаток распределяли между хлороформом и 0.5 М бикарбонатом натрия, органический слой промывали водой, высушивали над Na₂SO₄, упаривали. Соединение 6 очищали на колонке (2×15 см) с силикагелем в системе этилацетат: гексан в соотношении 1:1 (об./об.). Полученный раствор упаривали, растворяли в диоксане, добавляли тригидрат фторида тетрабутиламмония (205 мг, 0.65 ммоль), оставляли на 20 ч при комнатной температуре, после чего упаривали. Твердый остаток очищали на колонке (2×15 см) с силикагелем. Продукт 1-8 элюировали системой хлороформ: этанол (20:1). Выход 161 мг (85%) в виде твердых белых кристаллов. UV: λ_max 277 нм. ¹Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 0.85 (3Н, t, J=7.0 Гц, -C₇H₁₄CH₃), 1.25 (10Н, m, -NH-(CH₂)₂-C₅H₁₀-CH₃), 1.51 (2Н, m, -NH-CH₂-CH₂-), 1.84 (3Н, d,J=0.6 Гц, 5-СН₃), 2.24 (2Н, t, J=6.3 Гц, 2'-Н), 3.28 (2Н, m, -NHCH₂-), 3.58 (1H, ddd, J=11.8, 5.4, 4.1 Гц, 5'-На), 3.64 (1Н, ddd, J=11.8, 5.4, 4.1 Гц, 5'-Hb), 3.81 (1Н, q, J=4.1 Гц, 4'-Н), 4.34 (1H, td, J=6.3, 4.1 Гц, 3'-Н), 5.16 (1Н, t, J=5.4 Гц, 5'-ОН), 6.10 (1Н, t, J=6.5 Гц, 1'-H), 7.13 (1H, t, J=5.6 Гц, -NHCH₂-), 7.54 (1H, m, 6-H). ¹³C ЯМР (101 МГц, DMSO-d₆) δ 13.05 (5-СН₃), 13.88 (-C₇H₁₄CH₃), 22.04, 26.44, 28.54, 28.62, 28.77, 31.21 (-NHCH₂-C₆H₁₂-CH₃), 36.74 (-NHCH₂-), 40.20 (2'-C), 60.37 (3'-C), 60.95 (5'-C), 83.86 (1'-C), 84.25 (4'-C), 101.83 (5-C), 137.04 (6-C), 154.92 (2-C), 162.69 (4-C). HRMS (ESI) рассчитано для C₁₈H₃₀N₆O₃, m/z: 401,2277 [M+Na]+, найдено 401,2272.

Пример 9. Синтез 3'-азидо-N⁴-децил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидина (1-9)

Получен по методу, описанному в Примере 8, из 5 (134 мг, 0.5 ммоль) и 1-дециламина (200 мкл, 1 ммоль). Выход 169 мг (83%) в виде твердых белых кристаллов. UV: λ_max 276 нм. ¹Н ЯМР (DMSO-d₆, 400 МГц) δ 0.85 (3Н, t, J=6.8 Гц, -С₉Н₁₈-СН₃), 1.21-1.29 (14Н, m, -NH-(CH₂)₂-C₇H₁₄-), 1.45-1.56 (2Н, m, -NH-CH₂-CH₂-), 1.84 (3Н, s, 5-СН₃), 2.24 (2Н, t, J=6.3 Гц, Н-2'), 3.23-3.30 (2Н, m, -NH-CH₂-), 3.58 (1Н, ddd, J=11.8,5.4, 4.1 Гц, H-5'a), 3.64 (1Н, ddd, J=11.8, 5.4, 4.1 Гц, H-5'b), 3.81 (1Н, q, J=4.1 Гц, H-4'), 4.34 (1H, td, J=6.3, 4.1 Гц, H-3'), 5.16 (1H, t, J=5.4 Гц, -OH), 6.10 (1H, t, J =6.5 Гц, H-1'), 7.12 (1Н, t, J=5.6 Гц, H-N⁴), 7.51-7.58 (1H, m, Н-6). ¹³С ЯМР (DMSO-d₆, 101 МГц) δ 13.05 (5-СН₃), 13.88 (-C₉H₁₈CH₃), 22.04, 26.43, 28.65, 28.81, 28.92, 28.98, 31.25 (-NH-(CH₂)₂-C₇H₁₄-), 28.54 (-NH-CH₂-CH₂-), 36.75 (С-2'), 40.19 (-NH-CH₂-), 60.37 (С-3'), 60.95 (С-5'), 83.86 (С-1'), 84.25 (С-4'), 101.83 (С-5), 137.04 (С-6), 154.92 (С-2), 162.69 (С-4). HRMS (ESI) рассчитано для C₂₀H₃₄N₆O₃, m/z: 429.2590 [M+Na]+, найдено 429.2599.

Пример 10. Синтез 3'-азидо-N⁴-додецил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидина (1-10)

Получен по методу, описанному в примере 8, из 5 (134 мг, 0.5 ммоль) и 1-додециламина (185 мг, 1 ммоль). Выход 180 мг (83%) в виде твердых белых кристаллов. UV: λ_max 276 нм. ¹Н ЯМР (DMSO-d₆, 300 МГц) δ 0.86 (3Н, t, J=6.7 Гц, -С₁₁Н₂₂-СН₃), 1.21-1.30 (18Н, m, -NH-(CH₂)₂-C₉H₁₈-), 1.42-1.60 (2Н, m, -NH-CH₂-CH₂-), 1.85 (3Н, d, J=0.8 Гц, 5-СН₃), 2.25 (2Н, t, J=6.3 Гц, Н-2'), 3.20-3.31 (2Н, m, -NH-СН₂-), 3.59 (1Н, ddd, J=11.9, 5.4, 4.1 Гц, H-5'b), 3.65 (1H, ddd, J=11.9, 5.4, 4.1 Гц, Н-5'а), 3.82 (1H, q, J=4.4 Гц, Н-4'), 4.35 (1Н, td, J=6.3, 4.4 Гц, Н-3'), 5.17 (1H, t, J=5.4 Гц, -ОН), 6.10 (1Н, t, J=6.5 Гц, Н-1'), 7.14 (1Н, t, J=5.6 Гц, H-N⁴), 7.51-7.58 (1Н, m, Н-6). ¹³С ЯМР (DMSO-d₆, 75 МГц) δ 13.07 (5-СН₃), 13.90 (-С₁₁Н₂₂-СН₃), 22.06, 26.44, 28.67, 28.83, 28.99, 31.26 (-NH-(CH₂)₂-C₉H₁₈-), 28.55 (-NH-CH₂-CH₂-), 36.74 (-NH-CH₂-), 40.19 (С-2'), 60.36 (С-3'), 60.94 (С-5'), 83.85 (С-1'), 84.22 (С-4'), 101.81 (С-5), 137.04 (С-6), 154.90 (С-2), 162.68 (С-4). HRMS (ESI) рассчитано для C₂₂H₃₈N₆O₃, m/z: 457.2903 [M+Na]+, найдено 457.2902.

Пример 11. Синтез 3'-амино-N⁴-децил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидина (1-11)

К раствору азидотимидина 5 (134 мг, 0.5 ммоль) в абсолютном пиридине добавляли трет-бутилдиметилсилилхлорид (98 мг, 0.65 ммоль) и оставляли при +37°С на 20 ч, после чего полученный раствор упаривали, остаток распределяли между этилацетатом и 0.5 М бикарбонатом натрия. Органическую фракцию собирали, сушили над Na₂SO₄ и упаривали. К полученному твердому остатку добавляли 1,2,4-триазол (345 мг, 5 ммоль) и 2-хлорфенилдихлорфосфат (165 мкл, 1 ммоль) и оставляли при комнатной температуре на 20 ч. Затем реакционную смесь упаривали, твердый остаток распределяли между этилацетатом и 0.5 М бикарбонатом натрия. Органическую фазу сушили над Na₂SO₄, после чего упаривали. К твердому остатку добавляли 1-дециламин (200 мкл, 1 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламин (348 мкл, 2 ммоль). Реакционную смесь упаривали, остаток распределяли между хлороформом и 0.5 М бикарбонатом натрия, органический слой промывали водой, высушивали над Na₂SO₄, упаривали. Соединение 7 очищали на колонке (2×15 см) с силикагелем в системе этилацетат: гексан в соотношении 1:1 (об./об.). Полученный раствор упаривали, растворяли в диоксане (5 мл) и добавляли трифенилфосфин (262 мг, 1 ммоль), после чего выдерживали 20 ч при комнатной температуре, затем добавляли 1,5 мл 25%-ного водного раствора аммиака и оставляли на 20 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь упаривали, продукт 9 выделяли на колонке с силикагелем (2×15 см) смесью растворителей хлороформ-этанол 9:1 (об/об). Полученный раствор упаривали, растворяли в диоксане, добавляли тригидрат фторида тетрабутиламмония (205 мг, 0.65 ммоль), оставляли на 20 ч при комнатной температуре, после чего упаривали. Твердый остаток очищали на колонке (2×15 см) с силикагелем. Продукт 1-11 элюировали смесью растворителей хлороформ: метанол (3:2). Выход 143 мг (75%) в виде твердых белых кристаллов. UV: λ_max 277 нм. ¹Н ЯМР (DMSO-d₆, 300 МГц) δ 0.85 (3Н, t, J=6.7 Гц, -C₉H₁₈CH₃), 1.21-1.30 (14Н, m, -NH-(CH₂)₂-C₇H₁₄-), 1.45-1.56 (2Н, m, -NH-CH₂-CH₂-), 1.84 (3Н, d, J=0.8 Гц, 5-СН₃), 1.92-2.08 (2Н, m, Н-2'), 3.15-3.26 (2Н, m, -NH-CH₂-), 3.41-3.46 (1Н, m, Н-3'), 3.50-3.56 (1Н, m, Н-4'), 3.56-3.63 (1Н, m, H-5'a), 3.63-3.72 (1H, m, H-5'b), 6.07 (1Н, t, J=5.8 Гц, Н-1'), 7.06 (1Н, t, J=5.6 Гц, Н-N⁴), 7.62-7.66 (1Н, m, Н-6). ¹³С ЯМР (DMSO-d₆, 75 МГц) δ 13.15(5-СН₃), 13.95 (-С₉Н₁₈СН₃), 22.10, 26.50, 28.71, 28.88, 28.98, 29.04, 31.31 (-NH-(CH₂)₂-C₇H₁₄-), 28.63 (-NH-CH₂-CH₂-), 40.23 (-NH-CH₂-), 41.04 (С-2'), 50.56 (С-3'), 60.78 (С-5'), 84.15 (С-1'), 87.11 (С-4'), 101.32 (С-5), 137.30 (С-6), 155.12 (С-2), 162.70 (С-4). HRMS (ESI) рассчитано для C₂₀H₃₆N₄O₃, m/z: 381.2866 [М+Н]+, найдено 381.2857.

Пример 12. Синтез 3'-амино-N⁴-додецил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидина (1-12)

Получен по методу, описанному в Примере 11, из 5 (134 мг, 0.5 ммоль) и 1-додециламина (185 мг, 1 ммоль) с выходом 161 мг (79%) в виде твердых белых кристаллов. UV: λ_max 277 нм. ¹Н ЯМР (DMSO-d₆, 300 МГц) δ 0.85 (2Н, t, J=6.8 Гц, -С₁₁Н₂₂-СН₃), 1.20-1.30 (19Н, m, -NH-(CH₂)₂-C₉H₁₈-), 1.45-1.56 (2Н, m, -NH-CH₂-CH₂-), 1.85 (3Н, d, J=1.0 Гц, 5-СН₃), 1.93-2.10 (2Н, m, Н-2'), 3.24-3.33 (2Н, m, -NH-CH₂-), 3.37-3.47 (1Н, m, Н-3'), 3.54-3.58 (1Н, m, Н-4'), 3.58-3.63 (1H, m, H-5'a), 3.63-3.75 (1Н, m, H-5'b), 6.09 (1Н, dd, J=6.4, 5.3 Гц, Н-1'), 7.09 (1Н, t, J=5.7 Гц, H-N⁴), 7.63 -7.68 (1H, m, Н-6). ¹³С ЯМР (DMSO-d₆, 75 МГц) δ 13.11 (5-СН₃), 13.87 (-С₁₁Н₂₂-СН₃), 22.06, 26.49, 28.69, 28.87, 29.01, 29.04, 31.27 (-NH-(CH₂)₂-C₉H₁₈-), 28.60 (-NH-CH₂-CH₂-), 40.19 (-NH-CH₂-), 40.78 (С-2'), 50.50 (С-3'), 60.73 (С-5'), 84.12 (С-1'), 86.88 (С-4'), 101.28 (С-5), 137.22 (С-6), 155.07 (С-2), 162.64 (С-4). HRMS (ESI) рассчитано для C₂₂H₄₀N₄O₃, m/z: 409.3179 [М+Н]+, найдено 409.3188.

Пример 13. Синтез 3'-ацетамидо-N⁴-децил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидина (1-13)

К раствору азидотимидина 5 (134 мг, 0.5 ммоль) в абсолютном пиридине добавляли трет-бутилдиметилсилилхлорид (98 мг, 0.65 ммоль) и оставляли при +37°С на 20 ч, после чего полученный раствор упаривали, остаток распределяли между этилацетатом и 0.5 М бикарбонатом натрия. Органическую фракцию собирали, сушили над Na₂SO₄ и упаривали. К полученному твердому остатку добавляли 1,2,4-триазол (345 мг, 5 ммоль) и 2-хлорфенилдихлорфосфат (165 мкл, 1 ммоль) и оставляли при комнатной температуре на 20 ч. Затем реакционную смесь упаривали, твердый остаток распределяли между этилацетатом и 0.5 М бикарбонатом натрия. Органическую фазу сушили над Na₂SO₄, после чего упаривали. К твердому остатку добавляли 1-дециламин (200 мкл, 1 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламин (348 мкл, 2 ммоль). Реакционную смесь упаривали, остаток распределяли между хлороформом и 0.5 М бикарбонатом натрия, органический слой промывали водой, высушивали над Na₂SO₄, упаривали. Соединение 7 очищали на колонке (2×15 см) с силикагелем в системе этилацетат: гексан, 1:1 (об./об.). Полученный раствор упаривали, растворяли в диоксане (5 мл) и добавляли трифенилфосфин (262 мг, 1 ммоль), после чего выдерживали 20 ч при комнатной температуре, затем добавляли 1,5 мл 25%-ного водного раствора аммиака и оставляли на 20 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь упаривали, продукт 9 выделяли на колонке с силикагелем (2×15 см) смесью растворителей хлороформ-этанол 9:1 (об./об.). Полученный раствор упаривали, растворяли в пиридине, добавляли уксусный ангидрид (61 мкл, 0.65 ммоль) и оставляли на 20 ч. Затем реакционную смесь упаривали, растворяли в диоксане, добавляли тригидрат фторида тетрабутиламмония (205 мг, 0.65 ммоль), оставляли на 20 ч при комнатной температуре, после чего упаривали. Твердый остаток очищали на колонке (2×15 см) с силикагелем. Продукт 1-13 элюировали системой растворителей этилацетат: этанол (9:1). Выход 188 мг (89%) в виде твердых белых кристаллов. UV: λ_max 277 нм. ¹Н ЯМР (DMSO-d₆, 300 МГц) δ 0.86 (3Н, t, J=6.7 Гц, -С₉Н₁₈СН₃), 1.22-1.30 (14Н, m, -NH-(CH₂)₂-C₇H₁₄-), 1.45-1.58 (2Н, m, -NH-CH₂-CH₂-), 1.83 (3Н, s, -СОСН₃), 1.85 (3Н, d, J=0.7 Гц, 5-СН₃), 2.07 (2Н, t, J=6.5 Гц, Н-2'), 3.23-3.32 (2Н, m, -NH-CH₂-), 3.54 (1H, dt, J=11.9, 4.6 Гц, H-5'b), 3.64 (1Н, ddd, J=11.8, 5.2, 3.0 Гц, H-5'a), 3.75 (1Н, td, J=4.6, 3.0 Гц, Н-4'), 4.27 (1H, dtd, J=7.3, 6.5, 4.3 Гц, Н-3'), 5.01 (1Н, t, J=5.3 Гц, -ОН), 6.18 (1Н, t, J=6.5 Гц, Н-1'), 7.12 (1H, t, J=5.6 Гц, H-N⁴), 7.61-7.68 (1H, m, H-6), 8.30 (1H, d, J=7.3 Гц, -NH-СОСН₃). ¹³C ЯМР (DMSO-d₆, 75 МГц) δ 13.09 (5-CH₃), 13.87 (-C₉H₁₈-CH₃), 22.02, 26.43, 28.64, 28.80, 28.91, 28.96, 31.23 (-NH-(CH₂)₂-C₇H₁₄-), 22.50 (-COCH₃), 28.55 (-NH-CH₂-CH₂-), 37.75 (-NH-CH₂-), 40.17 (C-2'), 49.02 (C-3'), 61.36 (C-5'), 84.18 (C-1'), 84.85 (С-4'), 101.62 (C-5), 137.03 (C-6), 154.97 (C-2), 162.63 (C-4), 169.11 (-COCH₃). HRMS (ESI) рассчитано для C₂₂H₃₈N₄O₄, m/z: 445.2790 [M+Na]+, найдено 445.2796.

Пример 14. Синтез 3'-ацетамидо-N⁴-додецил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидина (1-14)

Получен по методу, описанному в Примере 13, из 5 (134 мг, 0.5 ммоль) и 1-додециламина (185 мг, 1 ммоль) с выходом 192 мг (85%) в виде твердых белых кристаллов. UV: λ_max 277 нм. ¹Н ЯМР (DMSO-d₅, 300 МГц) δ 0.86 (3Н, t, J=6.7 Гц, -С₁₁Н₂₂СН₃), 1.22-1.30 (18Н, m, -NH-(CH₂)₂-C₉H₁₈-), 1.45-1.58 (2Н, m, -NH-CH₂-CH₂-), 1.83 (3Н, s, -СОСН₃), 1.85 (3Н, d, J=0.7 Гц, 5-СН₃), 2.07 (2Н, t, J=6.5 Гц, Н-2'), 3.23 -3.32 (2Н, m, -NH-CH₂-). 3.54 (1H, dt, J=11.9, 4.6 Гц, H-5'b), 3.64 (1Н, ddd, J=11.8, 5.2, 3.0 Гц, H-5'a), 3.75 (1H, td, J=4.6, 3.0 Гц, Н-4'), 4.27 (1Н, dtd, J=7.3, 6.5, 4.3 Гц, Н-3'), 5.01 (1Н, t, J=5.3 Гц, -ОН), 6.18 (1Н, t, J=6.5 Гц, Н-1'), 7.12 (1H, t, J=5.6 Гц, H-N⁴),.7.61-7.68 (1Н, m, Н-6), 8.30 (1H, d, J=7.3 Гц, -NH-СОСН₃). ¹³С ЯМР (DMSO-d₆, 75 МГц) δ 13.09 (5-СН₃), 13.87 (-C₉H₁₈-CH₃), 22.02, 26.43, 28.64, 28.80, 28.91, 28.96, 31.23 (-NH-(CH₂)₂-C₇H₁₄-), 22.50 (-СОСН₃), 28.55 (-NH-CH₂-CH₂-), 37.75 (-NH-CH₂-), 40.17 (C-2'), 49.02 (C-3'), 61.36 (C-5'), 84.18 (С-1'), 84.85 (C-4'), 101.62 (C-5), 137.03 (C-6), 154.97 (C-2), 162.63 (C-4), 169.11 (-COCH3). HRMS (ESI) рассчитано для C₂₄H₄₂N₄O₄, m/z: 473.3104 [M+Na]+, найдено 473.3103.

Пример 15. Синтез 3'-этиламино-N⁴-децил-5-метал-2',3'-дидезоксицитидина (1-15)

К раствору азидотимидина 5 (134 мг, 0.5 ммоль) в абсолютном пиридине добавляли трет-бутилдиметилсилилхлорид (98 мг, 0.65 ммоль) и оставляли при +37°С на 20 ч, после чего полученный раствор упаривали, остаток распределяли между этилацетатом и 0.5 М бикарбонатом натрия. Органическую фракцию собирали, сушили над Na₂SO₄ и упаривали. К полученному твердому остатку добавляли 1,2,4-триазол (345 мг, 5 ммоль) и 2-хлорфенилдихлорфосфат (165 мкл, 1 ммоль) и оставляли при комнатной температуре на 20 ч. Затем реакционную смесь упаривали, твердый остаток распределяли между этилацетатом и 0.5 М бикарбонатом натрия. Органическую фазу сушили над Na₂SO₄, после чего упаривали. К твердому остатку добавляли 1-дециламин (200 мкл, 1 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламин (348 мкл, 2 ммоль). Реакционную смесь упаривали, остаток распределяли между хлороформом и 0.5 М бикарбонатом натрия, органический слой промывали водой, высушивали над Na₂SO₄, упаривали. Соединение 7 очищали на колонке (2×15 см) с силикагелем в системе этилацетат: гексан, 1:1 (об./об.). Полученный раствор упаривали, растворяли в диоксане (5 мл) и добавляли трифенилфосфин (262 мг, 1 ммоль), после чего выдерживали 20 ч при комнатной температуре, затем добавляли 1,5 мл 25%-ного водного раствора аммиака и оставляли на 20 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь упаривали, продукт 9 выделяли на колонке с силикагелем (2×15 см) смесью растворителей хлороформ-этанол 9:1 (об./об.). Полученный раствор упаривали, твердый остаток растворяли в этаноле и охлаждали до +4°С, добавляли уксусный альдегид (84 мкл, 1.5 ммоль), оставляли при +4°С на 2 ч, после чего добавляли боргидрид натрия (38 мг, 1 ммоль) и оставляли при комнатной температуре на 20 ч при перемешивании. Реакционную смесь упаривали, твердый остаток очищали на колонке с силикагелем. Продукт элюировали в системе хлороформ: этанол, 9:1 (об./об.), после чего полученный раствор упаривали, твердый остаток растворяли в диоксане, добавляли тригидрат фторида тетрабутиламмония (205 мг, 0.65 ммоль), оставляли на 20 ч при комнатной температуре, после чего упаривали. Твердый остаток очищали на колонке (2×15 см) с силикагелем. Продукт 1-15 элюировали системой растворителей хлороформ: метанол в соотношении 3:2 (об./об.). Выход 141 мг (69%) в виде твердых белых кристаллов. UV: λ_max 277 нм. ¹Н ЯМР (DMSO-d₆, 300 МГц) δ 0.86 (3Н, t, J=6.5 Гц, -С₉Н₁₈-СН₃), 1.11 (3Н, t, J=7.1 Гц, -NH-CH₂-CH₃), 1.17-1.38 (14Н, m, -NH-(CH₂)₂-C₇H₁₄-), 1.40-1.61 (4Н, m, -NH-CH₂-CH₂-), 1.85 (3Н, d, J=0.7 Гц, 5-СН₃), 2.08 (1H, ddd, J=13.5, 7.4, 6.7 Гц, H-2'b), 2.26 (1H, ddd, J=13.5, 6.1, 4.9 Гц, H-2'a), 2.73 (2H, qd, J=6.9, 2.1 Гц, -NH-СН₂-СН₃), 3.29 (2H, dt, J=7.8, 6.4 Гц, -NH-CH₂-), 3.48 (1H, ddd, J=7.4, 4.9, 4.1 Гц, H-3'), 3.60 (1H, dd, J=11.9, 3.9 Гц, H-5'b), 3.67 (1H, dd, J=11.8, 3.5 Гц, H-5'a), 3.89 (1H, dt, J=4.1, 3.5 Гц, H-4'), 4.90-5.43 (1H, m, -OH), 6.19 (1H, t, J=6.7, 6.1 Гц, Н-1'), 7.14 (1H, t, J=5.6 Гц, H-N⁴), 7.56-7.67 (1H, m, Н-6). ¹³C ЯМР (DMSO-d₆, 75 МГц) δ 13.12 (5-СН₃), 13.43 (-NH-CH₂-CH₃), 13.89 (-C₉H₁₈CH₃), 22.04, 26.44, 28.65, 28.82, 28.93, 28.98, 31.25 (-NH-(CH₂)₂-C₇H₁₄-), 28.56 (-NH-CH₂-CH₂-), 36.68 (-NH-CH₂-СН₃), 40.18 (-NH-CH₂-), 41.41 (C-2'), 57.27, (C-3'), 61.43 (C-5'), 83.52 (C-4'), 84.45 (С-1'), 101.66 (C-5), 137.12 (C-6), 155.00 (C-2), 162.66 (C-4). HRMS (ESI) рассчитано для C₂₂H₄₀N₄O₃, m/z: 409.3179 [M+H]+, найдено 409.3168.

Пример 16. Синтез 3'-этиламино-N⁴-додецил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидина (1-16)

Получен по методу, описанному в примере 15, из 5 (134 мг, 0.5 ммоль) и 1-додециламина (185 мг, 1 ммоль) с выходом 164 мг (75%) в виде твердых белых кристаллов. UV: λ_max 277 нм. ¹Н ЯМР (DMSO-d₆, 300 МГц) δ 0.86 (3Н, t, J=6.9 Гц, -С₁₁Н₂₂-СН₃), 1.12 (3Н, t, J=7.1 Гц, -NH-CH₂-CH₃), 1.18-1.35 (18Н, m, -NH-(CH₂)₂-С₉Н₁₈-), 1.44-1.58 (2Н, m, -NH-CH₂-CH₂-), 1.85 (3Н, d, J=1.0 Гц, 5-CH₃), 2.08 (1Н, ddd, J=13.9, 7.3, 6.7 Гц, H-2'a), 2.27 (1H, ddd, J=13.8, 6.4, 4.4 Гц, H-2'b), 2.74 (2H, qd, J=7.1, 2.2 Гц, -NH-CH₂-CH₃), 3.22-3.35 (2H, m, -NH-CH₂-), 3.49 (1H, dt, J=7.3, 4.4 Гц, H-3'), 3.60 (1H, dd, J=11.9, 3.9 Гц, H-5'b), 3.67 (1H, dd, J=11.9, 3.5 Гц, H-5'a), 3.90 (1H, dt, J=4.2, 3.5 Гц, H-4'), 4.87-5.33 (1H, m, -OH), 6.19 (1H, t, J=6.5 Гц, Н-1'), 7.14 (1H, t, J=5.6 Гц, H-N⁴), 7.53-7.66 (1H, m, Н-6). ¹³C ЯМР (DMSO-d₆, 75 МГц) δ 13.12 (5-СН₃), 13.34 (-NH-CH₂-CH₃), 13.90 (-C₁₁H₂₂-CH₃), 22.04, 26.45, 28.66, 28,83, 28.97, 31.25 (NH-(CH₂)₂-C₉H₁₈-), 28.56 (-NH-CH₂-CH₂-), 36.59 (-NH-CH₂-CH₃), 40.18 (-NH-CH₂-), 41.39 (C-2'), 57.25 (C-3'), 61.42 (C-5'), 83.43 (C-4'), 84.44 (С-1'), 101.67 (C-5), 137.12 (C-6), 154.99 (C-2), 162.66 (C-4). HRMS (ESI) рассчитано для C₂₄H₄₄N₄O₃, m/z: 437.3492 [M+H]+, найдено 437.3495.

Пример 17. Синтез 3'-диэтиламино-N⁴-децил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидина (1-17)

К раствору азидотимидина 5 (134 мг, 0.5 ммоль) в абсолютном пиридине добавляли трет-бутилдиметилсилилхлорид (98 мг, 0.65 ммоль) и оставляли при +37°С на 20 ч, после чего полученный раствор упаривали, остаток распределяли между этилацетатом и 0.5 М бикарбонатом натрия. Органическую фракцию собирали, сушили над Na₂SO₄ и упаривали. К полученному твердому остатку добавляли 1,2,4-триазол (345 мг, 5 ммоль) и 2-хлорфенилдихлорфосфат (165 мкл, 1 ммоль) и оставляли при комнатной температуре на 20 ч. Затем реакционную смесь упаривали, твердый остаток распределяли между этилацетатом и 0.5 М бикарбонатом натрия. Органическую фазу сушили над Na₂SO₄, после чего упаривали. К твердому остатку добавляли 1-дециламин (200 мкл, 1 ммоль) и N,N-диизопропилзтиламин (348 мкл, 2 ммоль). Реакционную смесь упаривали, остаток распределяли между хлороформом и 0.5 М бикарбонатом натрия, органический слой промывали водой, высушивали над Na₂SO₄, упаривали. Соединение 7 очищали на колонке (2×15 см) с силикагелем в системе этилацетат: гексан в соотношении 1:1 (об./об.). Полученный раствор упаривали, растворяли в диоксане (5 мл) и добавляли трифенилфосфин (262 мг, 1 ммоль), после чего выдерживали 20 ч при комнатной температуре, затем добавляли 1,5 мл 25%-ного водного раствора аммиака и оставляли на 20 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь упаривали, продукт 9 выделяли на колонке с силикагелем (2×15 см) смесью растворителей хлороформ-этанол 9:1 (об./об.). Полученный раствор упаривали, твердый остаток растворяли в этаноле и охлаждали до +4°С, добавляли уксусный альдегид (560 мкл, 10 ммоль), оставляли при +4°С на 2 ч, после чего добавляли цианоборгидрид натрия (94 мг, 1.5 ммоль) и выдерживали при комнатной температуре на 20 ч при перемешивании. Реакционную смесь упаривали, твердый остаток очищали на колонке с силикагелем. Продукт элюировали в системе хлороформ: этанол в соотношении 9:1 (об./об.), после чего полученный раствор упаривали, твердый осадок растворяли в диоксане, добавляли тригидрат фторида тетрабутиламмония (205 мг, 0.65 ммоль), оставляли на 20 ч при комнатной температуре, после чего упаривали. Твердый остаток очищали на колонке (2×15 см) с силикагелем. Продукт 1-17 элюировали системой растворителей хлороформ: этанол в соотношении 4:1 (об./об.). Выход 170 мг (78%) в виде твердых белых кристаллов. UV: λ_max 277 нм. ¹Н ЯМР (DMSO-d₆, 300 МГц) δ 0.86 (3Н, t, J=6.6 Гц, -С₉Н₁₈-СН₃), 1.09 (6Н, t, J=7.1 Гц, -N-(CH₂-CH₃)₂), 1.17-1.38 (14Н, m, -NH-(CH₂)₂-C₇H₁₄-), 1.40-1.61 (4H, m, -NH-CH₂-CH₂-), 1.85 (3Н, d,J=0.7 Гц, 5-CH₃), 2.08 (1H, ddd, J=13.5, 7.7, 6.7 Гц, H-2'b), 2.26 (1Н, ddd, J=13.5, 6.1, 4.7 Гц, H-2'a), 2.65 (4H, qd, J=6.9, 2.1 Гц, -N-(CH₂-CH₃)₂), 3.29 (2H, dt, J=7.8, 6.4 Гц, -NH-CH₂-). 3.45 (1H, ddd, J=1.1, 4.7, 4.5 Гц, H-3'), 3.60 (1H, dd, J=11.9, 3.9 Гц, H-5'b), 3.67 (1H, dd, J=11.8, 3.5 Гц, H-5'a), 3.89 (1H, dt, J=4.5, 3.5 Гц, H-4'), 4.90-5.43 (1H, m, -OH), 6.19 (1H, t, J=6.7, 6.1 Гц, Н-1'), 7.14 (1H, t, J=5.6 Гц, H-N⁴), 7.56-7.67 (1H, m, Н-6). ¹³C ЯМР (DMSO-d₆, 75 МГц) δ 13.12 (5-СН₃), 13.43 (-NH-CH₂-CH₃), 13.89 (-C₉H₁₈CH₃), 22.04, 26.44, 28.65, 28.82, 28.93, 28.98, 31.25 (-NH-(CH₂)₂-C₇H₁₄-), 28.56 (-NH-CH₂-CH₂-), 36.68 (-NH-CH₂-CH₃), 40.18 (-NH-CH₂-), 41.41 (C-2'), 57.27, (C-3'), 61.43 (C-5'), 83.52 (C-4'), 84.45 (С-1'), 101.66 (C-5), 137.12 (C-6), 155.00 (C-2), 162.66 (C-4). HRMS (ESI) рассчитано для C₂₄H₄₄N₄O₃, m/z: 437.3492 [M+H]+, найдено 437.3494.

Пример 18. Синтез 3'-диэтиламино-N⁴-додецил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидина (1-18)

Получен по методу, описанному в Примере 17, из 5 (134 мг, 0.5 ммоль) и 1-додециламина (185 мг, 1 ммоль) с выходом 153 мг (66%) в виде твердых белых кристаллов. UV: λ_max 211 нм. ¹Н ЯМР (DMSO-d₆, 300 МГц) δ 0.86 (3Н, t, J=6.6 Гц, -C₁₁H₂₂-CH₃), 1.09 (6Н, t, J=7.1 Гц, -N-(CH₂-CH₃)₂), 1.17-1.38 (18Н, m, -NH-(CH₂)₂-C₉H₁₈-), 1.40-1.61 (4H, m, -NH-CH₂-CH₂-), 1.85 (3Н, d, J=0.7 Гц, 5-СН₃), 2.08 (1H, ddd, J=13.5, 7.7, 6.7 Гц, H-2'b), 2.26 (1H, ddd, J=13.5, 6.1, 4.7 Гц, H-2'a), 2.65 (4H, qd, J=6.9, 2.1 Гц, -N-(CH₂-CH₃)₂), 3.29 (2H, dt, J=7.8, 6.4 Гц, -NH-CH₂-), 3.45 (1H, ddd, J=7.7, 4.7, 4.5 Гц, H-3'), 3.60 (1H, dd, J=11.9, 3.9 Гц, H-5'b), 3.67 (1H, dd, J=11.8, 3.5 Гц, H-5'а), 3.89 (1Н, dt, J=4.5, 3.5 Гц, Н-4'), 4.90-5.43 (1H, m, -OH), 6.19 (1H, t, J=6.7, 6.1 Гц, H-l'), 7.14 (1H, t, J=5.6 Гц, H-N⁴), 7.56-7.67 (1H, m, Н-6). ¹³C ЯМР (DMSO-d₆, 75 МГц) δ 13.12 (5-СН₃), 13.43 (-NH-CH₂-CH₃), 13.89 (-C₉H₁₈CH₃), 22.04, 26.44, 28.65, 28.82, 28.93, 28.98, 31.25 (-NH-(CH₂)₂-C₇H₁₄-), 28.56 (-NH-CH₂-CH₂-), 36.68 (-NH-CH₂-CH₃), 40.18 (-NH-CH₂-), 41.41 (C-2'), 57.27, (C-3'), 61.43 (C-5'), 83.52 (C-4'), 84.45 (С-1'), 101.66 (C-5), 137.12 (C-6), 155.00 (C-2), 162.66 (C-4). HRMS (ESI) рассчитано для C₂₆H₄₈N₄O₃, m/z: 465.3805 [M+H]+, найдено 465.3806.

Пример 19. Синтез 3'-диметиламино-N⁴-децил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидина (1-19)

К раствору азидотимидина 5 (134 мг, 0.5 ммоль) в абсолютном пиридине добавляли трет-бутилдиметилсилилхлорид (98 мг, 0.65 ммоль) и оставляли при +37°С на 20 ч, после чего полученный раствор упаривали, остаток распределяли между этилацетатом и 0.5 М бикарбонатом натрия. Органическую фракцию собирали, сушили над Na₂SO₄ и упаривали. К полученному твердому остатку добавляли 1,2,4-триазол (345 мг, 5 ммоль) и 2-хлорфенилдихлорфосфат (165 мкл, 1 ммоль) и оставляли при комнатной температуре на 20 ч. Затем реакционную смесь упаривали, твердый остаток распределяли между этилацетатом и 0.5 М бикарбонатом натрия. Органическую фазу сушили над Na₂SO₄, после чего упаривали. К твердому остатку добавляли 1-дециламин (200 мкл, 1 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламин (348 мкл, 2 ммоль). Реакционную смесь упаривали, остаток распределяли между хлороформом и 0.5 М бикарбонатом натрия, органический слой промывали водой, высушивали над Na₂SO₄, упаривали. Соединение 7 очищали на колонке (2×15 см) с силикагелем в системе этилацетат: гексан в соотношении 1:1 (об./об.). Полученный раствор упаривали, растворяли в диоксане (5 мл) и добавляли трифенилфосфин (262 мг, 1 ммоль), после чего выдерживали 20 ч при комнатной температуре, затем добавляли 1,5 мл 25%-ного водного раствора аммиака и оставляли на 20 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь упаривали, продукт 9 выделяли на колонке с силикагелем (2×15 см) смесью растворителей хлороформ-этанол 9:1 (об./об.). Полученный раствор упаривали, твердый остаток растворяли в метаноле, добавляли 37%-й формалин (370 мкл, 5 ммоль), ждали 2 ч, после чего добавляли цианоборгидрид натрия (94 мг, 1.5 ммоль) и оставляли при комнатной температуре на 20 ч при перемешивании. Реакционную смесь упаривали, твердый остаток очищали на колонке с силикагелем. Продукт элюировали в системе хлороформ: этанол в соотношении 9:1 (об./об.), после чего полученный раствор упаривали, твердый остаток растворяли в диоксане, добавляли тригидрат фторида тетрабутиламмония (205 мг, 0.65 ммоль), оставляли на 20 ч при комнатной температуре, после чего упаривали. Твердый остаток очищали на колонке (2×15 см) с силикагелем. Продукт 1-17 элюировали системой растворителей хлороформ: этанол в соотношении 3: 2 (об./об.). Выход 125 мг (61%) в виде твердых белых кристаллов. UV: λ_max 277 нм. ¹Н ЯМР (DMSO-d₆, 300 МГц) δ 0.86 (3Н, t, J=6.6 Гц, -С₉Н₁₈-СН₃), 1.17-1.38 (14Н, m, -NH-(CH₂)₂-C₇H₁₄-), 1.40-1.61 (4Н, m, -NH-CH₂-СН₂-), 1.85 (3Н, d, J=0.7 Гц, 5-СН₃), 2.08 (1H, ddd, J=13.5, 7.7, 6.7 Гц, H-2'b), 2.26 (1H, ddd, J=13.5, 6.1, 4.8 Гц, H-2'a), 2.46 (6Н, s, -N-(CH₃)₂), 3.29 (2Н, dt, J=7.8, 6.4 Гц, -NH-СН₂-), 3.45 (1H, ddd, J=7.7, 4.8, 4.3 Гц, H-3'), 3.60 (1H, dd, J=11.9, 3.9 Гц, H-5'b), 3.67 (1H, dd, J=11.8, 3.5 Гц, H-5'a), 3.89 (1H, dt, J=4.3, 3.5 Гц, H-4'), 4.90-5.43 (1H, m, -OH), 6.19 (1H, t, J=6.7, 6.1 Гц, Н-1'), 7.14 (1H, t, J=5.6 Гц, H-N⁴), 7.56-7.67 (1H, m, H-6). ¹³C ЯМР (DMSO-d₆, 75 МГц) δ 13.12 (5-CH₃), 13.43 (-NH-CH₂-CH₃), 13.89 (-C₉H₁₈CH₃), 22.04, 26.44, 28.65, 28.82, 28.93, 28.98, 31.25 (-NH-(CH₂)₂-C₇H₁₄-), 28.56 (-NH-CH₂-CH₂-), 36.68 (-NH-CH₂-CH₃), 40.18 (-NH-CH₂-), 41.41 (C-2'), 57.27, (C-3'), 61.43 (C-5'), 83.52 (C-4'), 84.45 (С-1'), 101.66 (C-5), 137.12 (C-6), 155.00 (C-2), 162.66 (C-4). HRMS (ESI) рассчитано для C₂₂H₄₀N₄O₃, m/z: 409.3179 [M+H]+, найдено 409.3175.

Пример 20. Синтез 3'-диметиламино-N⁴-додецил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидина (1-20)

Получен по методу, описанному в примере 19, из 5 (134 мг, 0.5 ммоль) и 1-додециламина (185 мг, 1 ммоль) с выходом 162 мг (74%) в виде твердых белых кристаллов. UV: λ_max 277 нм. ¹Н ЯМР (DMSO-d₆, 300 МГц) δ 0.86 (3Н, t, J=6.6 Гц, -С₁₁Н₂₂-СН₃), 1.17-1.38 (18Н, m, -NH-(CH₂)₂-C₉H₁₈-), 1.40-1.61 (4Н, m, -NH-CH₂-CH₂-), 1.85 (3Н, d, J=0.7 Гц, 5-СН₃), 2.08 (1Н, ddd, J=13.5, 7.7, 6.7 Гц, H-2'b), 2.26 (1H, ddd, J=13.5, 6.1, 4.8 Гц, H-2'a), 2.46 (6H, s, -N-(CH₃)₂), 3.29 (2H, dt, J=7.8, 6.4 Гц, -NH-CH₂-), 3.45 (1H, ddd, J=7.7, 4.8, 4.3 Гц, H-3'), 3.60 (1H, dd, J=11.9, 3.9 Гц, H-5'b), 3.67 (1H, dd, J=11.8, 3.5 Гц, H-5'a), 3.89 (1H, dt, J=4.3, 3.5 Гц, H-4'), 4.90-5.43 (1H, m, -OH), 6.19 (1H, t, J=6.7, 6.1 Гц, Н-1'), 7.14 (1H, t,J=5.6 Гц, H-N⁴), 7.56-7.67 (1H, m, Н-6), ¹³C ЯМР (DMSO-d₆, 75 МГц) δ 13.12 (5-СНз), 13.43 (-NH-CH₂-CH₃), 13.89 (-C₉H₁₈CH₃), 22.04, 26.44, 28.65, 28.82, 28.93, 28.98, 31.25 (-NH-(CH₂)₂-C₇H₁₄-), 28.56 (-NH-CH₂-CH₂-), 36.68 (-NH-CH₂-CH₃), 40.18 (-NH-CH₂-), 41.41 (C-2'), 57.27, (C-3'), 61.43.(C-5'), 83.52 (C-4'), 84.45 (С-1'), 101.66 (C-5), 137.12 (C-6), 155.00 (C-2), 162.66 (C-4). HRMS (ESI) рассчитано для C₂₄H₄₄N₄O₃, m/z: 437.3492 [M+H]+, найдено 437.3486.

Пример 21. Синтез 3'-O-(8-гидрокси-3,6-диоксаоктилоксикарбонил)-N⁴-децил-2'-дезоксицитидина (1-21)

К раствору тимидина (2) (121 мг, 0.5 ммоль) в абсолютном пиридине, охлажденному до +4°С, добавляли трет-бутилдиметилсилилхлорид (90 мг, 0.6 ммоль) и оставляли при +4°С на 20 ч. Полученный раствор упаривали, твердый остаток распределяли между этилацетатом и 0.5 М бикарбонатом натрия. Органическую фазу сушили над Na₂SO₄, после чего упаривали. Твердый остаток растворяли в DMF (3 мл) и добавляли CDI (297 мг, 1.83 ммоль), после чего оставляли при +37°С на 48 ч. Затем добавляли триэтиленгликоль (273 мкл, 2 ммоль) в диоксане и выдерживали 48 ч при +37°С. Реакционную смесь упаривали, остаток распределяли между 40% гексаном в хлороформе (10 мл) и 0,5 М раствором бикарбоната натрия (10 мл), органический слой промывали водой (5×5 мл), высушивали над Na₂SO₄, упаривали, переупаривали с пиридином и растворяли в пиридине. К раствору добавляли TBDMSCl (98 мг, 0.65 ммоль) и оставляли при +20°С на 20 ч, затем распределяли между хлороформом (10 мл) и 0,5 М раствором бикарбоната натрия (10 мл), органический слой промывали водой (5×5 мл), высушивали над Na₂SO₄. Продукт 12 очищали на колонке с силикагелем (2×15 см) в системе хлороформ: этилацетат: этанол, 5:5:0,1 (об./об./об.). Целевую фракцию упаривали, переупаривали с пиридином и растворяли в пиридине (5 мл). К охлажденному до 0°С раствору добавляли 1,2,4-триазол (345 мг, 5 ммоль) и 2-хлорфенилдихлорфосфат (165 мкл, 1 ммоль). Смесь оставляли на 20 ч при комнатной температуре, затем упаривали, остаток распределяли между хлороформом и 0.5 М бикарбонатом натрия, органический слой промывали водой, высушивали над Na₂SO₄, упаривали, растворяли в безводном диоксане (3 мл), охлаждали до 0°С и добавляли 1-дециламин (200 мкл, 1 ммоль). Спустя 20 ч при комнатной температуре смесь упаривали, остаток распределяли между хлороформом и водой, органический слой промывали водой, высушивали над Na₂SO₄, упаривали. Остаток растворяли в диоксане (3 мл) и добавляли Bu₄NF⋅3H₂O (380 мг, 1.2 ммоль). Реакционную смесь упаривали, остаток распределяли между 40% гексаном в хлороформе (10 мл) и 0,5 М раствором бикарбоната натрия (10 мл), органический слой промывали водой (5×5 мл), высушивали над Na₂SO₄, упаривали. Соединение 1-21 очищали на колонке с силикагелем (2×15 см) и элюировали системой растворителей этилацетат: этанола, 20:1 (об./об.). Выход 175 мг (63%) в виде твердых белых кристаллов. УФ: λ_max 273 нм. ¹Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 0.85 (3Н, t, J=6.8 Гц, -СН₂-СН₃), 1.23-1.29 (14Н, m, -NH-(СН₂)₂-(СН₂)₇-), 1.46-1.56 (2Н, m, -NH-CH₂-CH₂-), 1.84 (3Н, d, J=1.1 Гц, 5-СН₃), 2.19 (1H, ddd, J=14.2, 8.8, 5.9 Гц, 2'-На), 2.28 (1Н, ddd, J=14.0, 5.7, 1.8 Гц, 2'-Hb), 3.25-3.29 (2Н, m, -NH-CH₂-), 3.40-3.65 (12Н, m, 5'-СН₂+-CH₂OC₂H₄OC₂H₄OH, 4.02 (1Н, td, J=3.6, 1.8 Гц, 4'-Н), 4.20-4.25 (2Н, m, -СО₃-СН₂-), 4.54 (1Н, t, J=5.5 Гц, -СН₂-СН₂-ОН), 5.13 (1Н, dt, J=5.9, 1.8 Гц, 3'-Н), 5.15 (1H, t, J=5.3 Гц, 5'-OH), 6.17 (1H, dd, J=8.8, 5.6 Гц, 1'-Н), 7.14 (1H, t, J=5.7 Гц, N⁴-H), 7.54-7.58 (1H, m, 6-H). ¹³C ЯМР (101 МГц, DMSO-d₆) δ 13.09 (5-CH₃), 13.88 (-CH₂-CH₃), 22.02, 26.41, 28.51, 28.63, 28.78, 28.90, 28.95, 31.23 (-NH-CH₂-(CH₂)₈-), 36.96 (2'-C), 40.18 (-NH-CH₂-), 60.18 (-CH₂-CH₂-OH), 61.37 (5'-C), 67.01, 68.06, 69.72, 72.31 (-СО₃-СН₂ОС₂Н₄ОСН₂-СН₂-ОН), 78.62 (3'-C), 84.04 (1'-С), 84.60 (4'-C), 102.02 (5-C), 136.91 (6-C), 153.84 (-CO₃-), 154.90 (2-C), 162.65 (4-C). HRMS (ESI) рассчитано для C₂₇H₄₇N₃O₉, m/z: 558.3391 [M+H]⁺, найдено 558.3400.

Пример 22. Синтез 3'-O-(8-гвдрокси-3,6-диоксаоктилоксикарбонил)-N⁴-додецил-2'-дезоксицитидина (1-22)

Получен по методу, описанному в примере 21, из 2 (121 мг, 0.5 ммоль) и 1-додециламина (185 мг, 1 ммоль). Выход 191 мг (65%) в виде твердых белых кристаллов. УФ: λ_max 273 нм. ¹Н ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆) δ 0.85 (3Н, t, J=6.6 Гц, -СН₂-СН₃), 1.21-1.30 (18Н, m, -NH-(CH₂)₂-(CH₂)₉-). 1.46-1.57 (2Н, m, -NH-СН₂-СН₂-), 1.86 (3Н, s, 5-СН₃), 2.20 (1H, ddd, J=14.1, 8.8, 5.8 Гц, 2'-На), 2.30 (1H, ddd, J=14.1, 5.8, 1.8 Гц, 2'-Hb), 3.26-3.33 (2Н, m, -NH-CH₂-), 3.40-3.66 (12Н, m, 5'-СН₂+-СН₂ОС₂Н₄ОС₂Н₄ОН), 4.04 (1H, td, J=3.6, 1.8 Гц, 4'-Н), 4.18-4.27 (2Н, m, -CO₃-СН₂-), 4.55 (1H, t, J=5.4 Гц, -СН₂-СН₂-ОН), 5.15 (1Н, dt, J=5.8, 1.8 Гц, 3'-Н), 5.19 (1H, t, J=5.4 Гц, 5'-ОН), 6.19 (1Н, dd, J=8.8, 5.6 Гц, 1'-Н), 7.19 (1H, t, J=5.6 Гц, N⁴-H), 7.59 (1H, s, 6-H). ¹³C ЯМР (75 МГц, DMSO-d₆) δ 13.10 (5-CH₃), 13.86 (-CH₂-CH₃), 22.09, 26.51, 28.59, 28.73, 28.90, 29.05, 29.08, 31.31 (-NH-CH₂-(CH₂)₁₀-). 37.12 (2'-C), 40.27 (-NH-CH₂-), 60.25 (-CH₂-CH₂-OH), 61.43 (5'-C), 67.02, 68.13, 69.76, 69.81, 72.38 (-CO₃-CH₂OC₂H₄OCH₂-СН₂-ОН), 78.72 (3'-C), 84.18 (l'-C), 84.74 (4'-C), 102.15 (5-C), 136.90 (6-C), 153.90 (-CO₃-), 155.08 (2-C), 162.72 (4-C). HRMS (ESI) C₂₉H₅₁N₃O₉, m/z: 586.3698 [M+H]⁺, найдено 586.3717.

Пример 23. Ингибирование роста грибов

Штаммы мицелиальных грибов, культивировали на агаризованной среде Чапека-Докса (ЧДА) (30 г/л сахарозы, 2 г/л NaNO₃, 1 г/л K₂HPO₄, 0,5 г/л MgSO₄ × 7 H₂O, 0,5 г/л KCl, 0,01 г/л FeSO₄ × 7 H₂O, 20 г/л агара, рН 7,0-7,4). Для определения токсического действия N⁴-модифицированных 5-метил-2'-дезоксицитидинов на рост грибковых клеток использовали метод капельного разбавления [М.Т. Т.А. G.K. Nuraeva, D.V. Yanvarev, М. Khomutov, E.N. Khurs, S.N. Kochetkov, J. A.A. Zhgun, A.R. Khomutov, Hydroxylamine analogue of agmatine: Magic bullet for arginine decarboxylase, Biomolecules. 10 (2020) 1-16. https://doi.org/10.3390/biom10030406] с некоторыми модификациями. Клетки собирали из скошенных агаров и разбавляли 0,9% раствором NaCl до OD₆₀₀=0,5 (основная концентрация) с последующим серийным десятикратным разбавлением тем же растворителем. Затем 2 мкл клеточной суспензии инокулировали на чашки Петри со средой ЧДА, приготовленной с добавлением или без добавления тестируемых соединений (N⁴-модифицированных 5-метил-2'-дезоксицитидинов (1-1 - 1-22) или 5-фторцитозина (5FC) в качестве положительного контроля) в концентрациях 0,5 мМ, 0.7 мМ или 3 мМ. Инокулированные чашки инкубировали в течение 60 суток при 26°С. Ингибирующее действие соединений измеряли каждые три дня после инокуляции и оценивали по соотношению роста колоний на ЧДА к контрольному росту колоний на агаризованной среде ЧДА без каких-либо добавок. Процент ингибирования роста грибков (FGI) рассчитывали по формуле:

FGI%=[(D_c-D_t) / D_c] × 100,

где D_c - диаметр колонии в контрольном наборе,

D_t - диаметр колонии в наборе лечения.

Ингибирующее действие оценивали для каждой концентрации тестируемого соединения в двух параллелях и в трех повторах.

Таблица 1. Синтезированные N⁴-модифицированные 5-метил-2'-дезоксирибоцитидина.

1. N⁴-модифицированные 5-метил-2'-дезоксицитидины, содержащие в своем составе протяженный алкильный заместитель, подавляющие рост мицелиальных грибов, представленные общей формулой:

где R₁ и R₂ независимо друг от друга означают:

R₁=-C_nH_2n+1, -OC_nH_2n+1 (n=8-12);

R₂=-OH, -N₃, -NH₂, -NHC(O)CH₃, -N(CH₃)₂, -NHC₂H₅, -N(C₂H₅)₂,-O(CH₂CH₂O)₃H.

2. Соединения по п. 1, представляющие собой:

N⁴-октил-5-метил-2'-дезоксицитидин;

N⁴-децил-5-метил-2'-дезоксицитидин;

N⁴-додецил-5-метил-2'-дезоксицитидин;

N⁴-октилокси-5-метил-2'-дезоксицитидин;

N⁴-децилокси-5-метил-2'-дезоксицитидин;

N⁴-ундецилокси-5-метил-2'-дезоксицитидин;

N⁴-додецилокси-5-метил-2'-дезоксицитидин;

3'-азидо-N⁴-октил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидин;

3'-азидо-N⁴-децил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидин;

3'-азидо-N⁴-додецил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидин;

3'-амино-N⁴-децил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидин;

3'-амино-N⁴-додецил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидин;

3'-ацетамидо-N⁴-децил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидин;

3'-ацетамидо-N⁴-додецил-5 -метил-2',3'-дидезоксицитидин;

3'-этиламино-N⁴-децил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидин;

3'-этиламино-N⁴-додецил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидин;

3'-диэтиламино-N⁴-децил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидин;

3'-диэтиламино-N⁴-додецил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидин;

3'-диметиламино-N⁴-децил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидин;

3'-диметиламино-N⁴-додецил-5-метил-2',3'-дидезоксицитидин;

3'-O-(8-гидрокси-3,6-диоксаоктилоксикарбонил)-N⁴-децил-2'-дезоксицитидин;

3'-O-(8-гидрокси-3,6-диоксаоктилоксикарбонил)-N⁴-додецил-2'-дезоксицитидин.