Способ оценки функционального состояния печени крупного рогатого скота



Способ оценки функционального состояния печени крупного рогатого скота
Способ оценки функционального состояния печени крупного рогатого скота

Владельцы патента RU 2773414:

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Краснодарский научный центр по зоотехнии и ветеринарии" ФГБНУ КНЦЗВ (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к ветеринарии, и может быть использовано для оценки функционального состояния печени крупного рогатого скота. Осуществляют клинический осмотр животного и биохимическое исследование сыворотки крови. В сыворотке крови определяют концентрацию молекул средней массы (МСМ) при длине волны облучения пробы 254 нм и концентрацию кетоновых тел. В случае концентрации МСМ выше 0,185 ед. оп. пл. в сочетании с концентрацией кетоновых тел выше или равной 1,033 ммоль/л выявляют патологию функционального состояния печени. Вариант изобретения - в сыворотке крови определяют концентрацию МСМ при длине волны облучения пробы 254 нм и концентрацию кетоновых тел в молоке. В случае концентрации МСМ выше 0,185 ед. оп. пл. в сочетании с концентрацией кетоновых тел в молоке выше 1,72 ммоль/л выявляют патологию функционального состояния печени. Способы обеспечивают возможность повышения качества оценки функционального состояния печени крупного рогатого скота за счет более точной и быстрой диагностики ранних нарушений функционального состояния печени крупного рогатого скота по совокупности определенных биохимических маркеров и использования компьютерных технологий. 1 з.п. ф-лы, 1 ил., 1 табл., 2 пр.

 

Изобретение относится к ветеринарии и может быть применено в диагностике нарушений функционального состояния печени крупного рогатого скота. Изобретение также относится к компьютерным технологиям и может найти применение в качестве специализированной экспертной системы, предназначенной для диагностики заболеваний печени крупного рогатого скота, обеспечивающей формирование вывода или в виде диагноза, или по отсутствию отклонений, характерных для заболеваний печени.

Животноводство несет колоссальный экономический ущерб от гепатопатологий вследствие падежа животных, снижения их продуктивности, резистентности, а также развития на этом фоне многих инфекционных болезней. Это обусловлено тем, что патологии печени длительное время протекают бессимптомно, их клинические признаки неспецифичны, что затрудняет своевременную диагностику и разработку эффективных схем лечения. Особенно это касается таких крупных животных, как молочный скот, поскольку дополнительные методы диагностики, такие как ульсонография на молочнотоварных фермах практически не применяются. Поэтому, точная и ранняя диагностика позволит своевременно начать лечение и предотвратить гибель животного.

Известен способ лабораторной диагностики ранних нарушений функционального состояния печени, когда измеряют активность ферментов АЛТ, ACT, ЛДГ, ГГТ, ЩФ, общего билирубина. Дополнительно проводят трехминутную окклюзию сосудов плеча - «манжеточную пробу» для создания кратковременной гипоксии (патент РФ №2432898).

Известен способ оценки функционального состояния печени, когда производят оценку лабораторных данных, характеризующих состояние органа: интенсивность процессов липопероксидации (ДК, МДА), функциональную активность (БИЛ, АлАТ, Рж, ЦП) и состояние гистоструктур органа (МИТ, ГЕП, СТ), определяют фазу патологического процесса. Для этого показатели сравниваются с их табличными значениями, полученными на основе математического анализа зависимостей, отображающих отдельные параметры реального состояния органа (патент РФ №2629202).

Известен способ скрининга заболеваний печени и система для реализации способа, которые позволяют сделать вывод об отсутствии отклонений, характерных для заболеваний печени человека в момент обследования пациента путем использования комбинации ряда лабораторных тестов (АЛТ, ACT, ЩФ, ГГТП, гамма-глобулины, общий билирубин, антитела к вирусу гепатита С (anti-HCV), поверхностный антиген вируса гепатита В (HBsAg) и непосредственных характеристик пациента (пол и возраст, рост и вес), данных анамнеза о систематическом приеме алкоголя и приеме каких-либо лекарственных препаратов в указанные в изобретении сроки. Для построения предварительного диагноза также необходимо рассчитать индекс Де-Ритиса (отношение ACT/АЛТ) и индекс массы тела (патент РФ №2523661).

Известен способ исследования состояния детоксикационной функции печени, заключающийся в определении утром натощак в крови содержания МСМ (молекулы средней массы), АЛТ (аланинаминотрансфераза) и ACT (аспартатаминотрансфераза), эти параметры определяют накануне вечером перед сном, а также утром и вечером, определяют объем циркулирующей крови и гематокрит, после чего оценивают коэффициент состояния детоксикационной функции печени (патент РФ №2537163).

Недостатком приведенных способов является отсутствие возможности их применения при постановке диагноза патологий печени у животных, так как все они предназначены для использования в здравоохранении. Кроме того, отсутствует качественная оценка степени эндотоксикоза и кетогенеза как реакции организма на развитие патологии или эффективности лечения.

Поэтому, наиболее близким к изобретению является способ ранней диагностики гепатозов у лактирующих коров, описанный в статье «Практические аспекты ранней диагностики гепатозов у лактирующих коров», авторы: Калюжный И.И., Степанов И.С., Солякина А.А. (журнал «Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана». - 2016. - Т. 226. - №2. - С. 72-76). В указанном способе для выявления степени распространения гепатозов проводится диспансерное исследования дойного стада и скрининг биохимических маркеров этой патологии среди поголовья. Биохимические исследования включают анализ параметров периферической крови животных, идентифицирующих нарушения обмена веществ у лактирующих коров: каротин, общий белок, щелочную фосфатазу, холестерин, энзимы, АсАТ (аспартаминотрансфераза) и АлАТ (аланинами-нотрансфераза), глюкозу, билирубин. В случаях необходимости подтверждения достоверности диагноза применяется усложненный клинико-биохимический тест-комплекс, объединяющий анализ белковых фракций, резервной щелочности, глюкозы, общих липидов, холестерина, общего билирубина, витамина А и кальция.

Однако данный способ устанавливает факт патологического состояния печени животных только тогда, когда уже определяется значительное повышение этих показателей в крови, поэтому в ветеринарии постоянно ведется поиск доступных для определения ранних признаков развития гепатопатологии у животных.

Техническим результатом предлагаемого способа является повышение качества оценки функционального состояния печени крупного рогатого скота.

Технический результат достигается тем, что в способе оценки функционального состояния печени крупного рогатого скота, включающем клинический осмотр животного и биохимическое исследование сыворотки крови, согласно изобретению, в сыворотке крови определяют концентрацию молекул средней массы (МСМ) при длине волны облучения пробы - 254 нм и концентрацию кетоновых тел, при этом в случае концентрации МСМ выше 0,185 ед. оп. пл. в сочетании с концентрацией кетоновых тел выше или равной 1,033 ммоль/л – выявляют патологию функционального состояния печени.

Технический результат также достигается тем, что в способе оценки функционального состояния печени крупного рогатого скота, включающем клинический осмотр животного и биохимическое исследование сыворотки крови, согласно изобретению, в сыворотке крови определяют концентрацию молекул средней массы (МСМ) при длине волны облучения пробы - 254 нм и концентрацию кетоновых тел в молоке, при этом в случае концентрации МСМ выше 0,185 ед. оп. пл. в сочетании с концентрацией кетоновых тел в молоке выше 1,72 ммоль/л – выявляют патологию функционального состояния печени.

Преимуществом заявляемого способа является более точная и быстрая диагностика ранних нарушений функционального состояния печени крупного рогатого скота по совокупности биохимических маркеров, что позволяет значительно экономить время при проведении диспансеризации и повысить сохранность поголовья. В качестве дополнительного чувствительного диагностического метода оценки развития и степени патологических процессов в гепатоцитах нами предложен метод определения уровня эндогенной интоксикации в организме посредством оценки концентрации МСМ в сыворотке крови при длине волны 254 нм (наиболее токсичная фракция). Стойкое повышение уровня МСМ при патологии печени, несмотря на улучшение других биохимических показателей, может являться признаком неблагоприятного исхода заболевания и позволяет скорректировать применяемую схему лечения. У животных с диагностированной хронической патологией печени регулярное определение уровня МСМ в период ремиссии позволяет предвидеть развитие рецидива и проводить превентивную терапию.

На основании собственных исследований установлено, что при постановке диагноза на патологию печени у крупного рогатого скота (особенно у дойных коров) необходимо обязательно контролировать уровень кетоновых тел в крови или молоке, поскольку повышение их концентрации авторы считают в числе информативных маркеров при поражении печени.

Таким образом, изобретение расширит способы, используемые при мониторинге состояния печени крупного рогатого скота, с возможностью получения диагноза и рекомендаций при выявлении отклонений в лабораторных тестах, в том числе и с использованием компьютерной системы.

Сопоставительный анализ заявляемого решения с известными способами оценки функционального состояния печени крупного рогатого скота, позволяет сделать вывод, о его соответствии критерию «НОВИЗНА», так как в результате проведенного патентно-информационного поиска, предлагаемая совокупность существенных признаков изобретения не обнаружена.

Сопоставление заявленного технического решения с известными позволили выявить признаки, не являющиеся очевидными для специалиста в связи с достигаемым всей совокупностью существенных признаков техническим результатом. Это позволяет сделать вывод о соответствии заявляемого технического решения критерию «ИЗОБРЕТАТЕЛЬСКИЙ УРОВЕНЬ».

Заявляемое техническое решение соответствует критерию «ПРОМЫШЛЕННАЯ ПРИМЕНИМОСТЬ», так как может быть использовано для оценки функционального состояния печени крупного рогатого скота в условиях современных животноводческих предприятий.

К анализируемым признакам, заявленным в изобретении, относятся следующие параметры:

1) АлАТ (сыворотка крови) - основной маркер, который отражает гепатоцеллюлярное воспаление и обладает высокой специфичностью. Норма для крупного рогатого скота составляет 6,9-35 Ед/л.

2) АсАТ (сыворотка крови) - митохондриальный гепатоиндикаторный фермент, повышение которого свидетельствует о более тяжелых поражениях печеночных клеток. Норма для крупного рогатого скота составляет 45-110 Ед/л.

3) ЩФ (сыворотка крови) - основной маркер холестаза при гепатопатиях. Норма для крупного рогатого скота составляет 17,5-152 Ед/л.

4) Общий билирубин (сыворотка крови) - повышенное содержание выявляется при повреждении клеток печени различного характера. Норма для крупного рогатого скота составляет 0,7-5,13 мкмоль/л.

5) Холестерин (сыворотка крови) - повышение показателя (вторичная гиперхолестеринемия) развивается при заболеваниях печени, сопровождаемых холестазом любой этиологии. Понижение тоже может иметь место при заболеваниях печени - некроз, злокачественные опухоли и др. Норма для крупного рогатого скота составляет 4,7-6,2 ммоль/л.

6) Общий белок (сыворотка крови) - диагностическое значение при заболеваниях печени имеет абсолютная гипопротеинемия, для которой характерно снижение синтеза белка в гепатоцитах. Норма для крупного рогатого скота составляет 79-89 г/л.

7) Кетоновые тела - продукты неполного окисления масляной кислоты, образующиеся из жирных кислот и некоторых кетогенных аминокислот. В здоровом организме они быстро окисляются, а при нарушении обмена веществ количество их в тканях может увеличиться и тогда их обнаруживают в крови в больших количествах. Это явление получило название кетонемии. Кетонемия вызывает кетонурию, а затем кетонолактию, т.е. выделение кетоновых тел с мочой и молоком. Синдром жировой дистрофии печени у коров постоянно развивается при кетозах Концентрация общих кетоновых тел в крови крупного рогатого скота выше 1,033 ммоль/л, а в молоке - выше 1,72 ммоль/л, указывает на наличие патологического процесса в печени.

8) Исследованиями, проведенными авторами, установлено, что у здорового крупного рогатого скота в сыворотке крови уровень МСМ при длине волны 254 нм не превышает 0,185 ед. оп. пл. Наиболее выраженные изменения в концентрации МСМ крови происходят у больных животных с синдромом нарушения целостности гепатоцитов и воспалительным синдромом (концентрация МСМ при этом увеличивается в несколько раз - до 0,963 ед. оп. пл). У коров с синдромом печеночно-клеточной недостаточности уровень МСМ повышается незначительно (до 0,270 ед. оп. пл.).

Для ускорения применения заявляемого способа в реальных условиях могут применяться автоматизированные диагностические комплексы, например, как представленный на фигуре разработанный нами аппаратно-программный комплекс, включающий: устройство пользователя с расположенным в нем блоком ввода полученных количественных параметров - АлАТ, АсАТ, ЩФ, общего билирубина, холестерина, общего белка, кетоновых тел, МСМ; блока хранения информации, включающий базу данных (БД) значений нормы для определяемых биохимических показателей; модуль анализа введенных показателей для формирования вывода о наличии или отсутствии отклонений, характерных для патологии печени; блок вывода на экран визуального интерфейса информации о поставленном диагнозе; базу знаний с рекомендациями по лечению конкретного гепатопатологического состояния крупного рогатого скота. Аппаратно-программный комплекс позволяет составлять отчет, содержащий дату, данные обследованного животного (кличка, пол, возраст, хозяин или животноводческое хозяйство), вывод о наличии или отсутствие гепатопатологии у животного.

На фигуре представлена структурная схема реализации аппаратно-программного комплекса.

Заявляемый способ оценки функционального состояния печени крупного рогатого скота поясняется примерами.

Пример 1. Проводят клинический осмотр животного, включающий термометрию, оценку состояния кожного покрова и слизистых, пальпацию и аускультации печеночной зоны. Проводят биохимическое исследование сыворотки крови с оценкой уровня АлАТ, АсАТ, ЩФ, общего билирубина, холестерина и общего белка, дополнительно в крови определяют концентрацию кетоновых тел, а в сыворотке крови МСМ при длине волны 254 нм. Проводят аналитическую обработку каждого из параметров, которая может быть выполнена с использованием программно-аппаратных средств, включающую сравнение результатов измеренных показателей со значениями нормы для крупного рогатого скота, по итогам компьютерная система формирует вывод о текущем функциональном состоянии печени с возможным диагнозом гепатопатологии, либо отсутствии отклонений в полученных результатах. В случае выявления нарушений выдаются рекомендации по лечению конкретного гепатопатологического состояния у животного.

Пример 2. Проводят клинический осмотр животного, включающий термометрию, оценку состояния кожного покрова и слизистых, пальпацию и аускультации печеночной зоны. Проводят биохимическое исследование сыворотки крови с оценкой уровня АлАТ, АсАТ, ЩФ, общего билирубина, холестерина и общего белка, дополнительно в молоке определяют концентрацию кетоновых тел, а в сыворотке крови МСМ при длине волны 254 нм. Проводят аналитическую обработку каждого из параметров, которая может быть выполнена с использованием программно-аппаратных средств, включающую сравнение результатов измеренных показателей со значениями нормы для крупного рогатого скота, по итогам компьютерная система формирует вывод о текущем функциональном состоянии печени с возможным диагнозом гепатопатологии, либо отсутствии отклонений в полученных результатах. В случае выявления нарушений выдаются рекомендации по лечению конкретного гепатопатологического состояния у животного.

В таблице приведены данные исследований, характеризующие эффективность заявляемого способа оценки функционального состояния печени крупного рогатого скота и системы для реализации способа, проведенных при диспансеризации поголовья в животноводческом хозяйстве. Была реализована диагностика 300 голов крупного рогатого скота, по 100 животных в группе (1 - контрольная, 2 опытная - пример 1 и 3 опытная - пример 2). В качестве контрольного аналога использовали общепринятый способ лабораторной оценки функционального состояния печени животных путем измерения в сыворотке крови АлАТ, АсАТ, ЩФ, общего билирубина и белка.

Из приведенных данных видно, что использование заявляемого способа приводит к значительному повышению эффективности диагностики состояния печени крупного рогатого скота. В контрольной группе (ближайший аналог) на 6-8% была ниже эффективность именно ранней диагностики гепатопатологии, поскольку классифицировать у животных синдром печеночно-клеточной недостаточности в практической ветеринарии наиболее сложно.

Таким образом, использование заявляемого способа позволяет достичь заданный технический результат: повысить качество оценки функционального состояния печени крупного рогатого скота, за счет большей информативности и точности диагностики, что позволяет своевременно начать лечение и предотвратить гибель животного.

1. Способ оценки функционального состояния печени крупного рогатого скота, включающий клинический осмотр животного и биохимическое исследование сыворотки крови, отличающийся тем, что в сыворотке крови определяют концентрацию молекул средней массы (МСМ) при длине волны облучения пробы 254 нм и концентрацию кетоновых тел, при этом в случае концентрации МСМ выше 0,185 ед. оп. пл. в сочетании с концентрацией кетоновых тел выше или равной 1,033 ммоль/л выявляют патологию функционального состояния печени.

2. Способ оценки функционального состояния печени крупного рогатого скота, включающий клинический осмотр животного и биохимическое исследование сыворотки крови, отличающийся тем, что в сыворотке крови определяют концентрацию молекул средней массы (МСМ) при длине волны облучения пробы 254 нм и концентрацию кетоновых тел в молоке, при этом в случае концентрации МСМ выше 0,185 ед. оп. пл. в сочетании с концентрацией кетоновых тел в молоке выше 1,72 ммоль/л выявляют патологию функционального состояния печени.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине и касается способа количественного определения антиконвульсантов в плазме крови больных эпилепсией, включающего их выделение из плазмы крови с последующей хромато-масс-спектрометрией продуктов экстракции и регистрацию масс-спектров анализируемых средств, где выделение антиконвульсантов из плазмы крови и очистку экстракта осуществляют путем депротеинизации, добавляя к образцу плазмы крови внутренний стандарт N-адамантил-гексаметиленимина в ацетонитриле, образовавшуюся смесь встряхивают, а затем центрифугируют, после чего надосадочную жидкость переносят в хроматографическую виалу, которую помещают в автосамплер хроматографа для дальнейшего масс-спектрометрического детектирования, а содержание антиконвульсантов определяют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием на жидкостном хромато-масс-спектрометре, анализируемые вещества разделяют на колонке, а количественное определение концентрации для каждого из соединений антиконвульсантов в плазме крови осуществляют по формуле как отношение площадей пиков анализируемого антиконвульсанта и внутреннего стандарта, выраженных в условных единицах интегрирования, умноженное на значение коэффициента пересчета наклона калибровочной кривой к оси абсцисс и суммированное с коэффициентом пересчета точки пересечения кривой с осью ординат.

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен метод иммуноферментного определения уровня антигенраспознающих рецепторов В-лимфоцитов, представленных мембранными, специфическими к RBD Protein SARS-CoV-2, IgG антителами.

Изобретение относится к области медицины, в частности к кардиологии, педиатрии, акушерству и гинекологии. Предложен способ прегравидарного прогнозирования риска формирования спорадических септальных врожденных пороков сердца без хромосомных заболеваний в последующих поколениях.

Группа изобретений относится к способу калибровки составного анализа, включающему: добавление калибровочного реагента, включающего по меньшей мере две различные связывающие молекулы, где каждая молекула обладает способностью специфичного связывания с агентом захвата и способностью связываться с детектирующей молекулой и где по меньшей мере две из связывающих молекул имеют различные специфичности и присутствуют в различных концентрациях, добавление детектирующей молекулы, детектирование связанной детектирующей молекулы, создание калибровочной кривой, включающей ряд калибровочных точек/интервалов.

Изобретение относится к биотехнологии и медицине и может быть использовано в технологии изготовления референс-панели сывороток, содержащих антигены и антитела к тестируемому вирусу, для контроля чувствительности, специфичности тест-систем иммуноферментных, иммунохемилюминесцентных и иммуноблотов. Способ получения референс-панели сывороток для контроля качества тест-систем и иммуноблотов, используемых для серологической диагностики маркеров ВИЧ-1, включает отбор иммуноспецифических сывороток, содержащих антитела ко всем основным антигенам вируса и имеющих разную концентрацию этих антител, а также отбор нативных донорских сывороток с нулевым титром.
Изобретение относится к медицине, а именно к инфектологии, и может быть использовано для диагностики значения объемной скорости мозгового кровообращения у больных гриппом. Для этого учитывают срок наблюдения за больным и значения ристомицин-агрегации тромбоцитов в сыворотке крови в секундах.

Группа изобретений относится к области медицинской диагностики, иммунологии и онкологии, в частности к новым онкомаркерам и способам диагностики онкологических заболеваний. Предложены новые антигены для проведения иммуноферментного анализа для выявления аутоантител, ассоциированных со злокачественными новообразованиями, а именно фрагменты плазминогена, содержащие кринглы.
Изобретение относится к медицине и касается способа получения референс-панели образцов сывороток, предназначенной для оценки специфичности результатов серологической диагностики социально значимых заболеваний, включающего: исследование образцов доноров и пациентов на наличие инфекционного материала, отбор для отрицательной части референс-панели образцов, не содержащих антитела к вирусу гепатита С (ВГС), поверхностного антигена HBsAg вируса гепатита В (ВГВ), раннего белка р24 и антител к вирусу иммунодефицита человека (ВИЧ), а также антитела к Treponema pallidum, отбор для положительной части референс-панели образцов, содержащих антитела к ВИЧ, ВГС, HBsAg и Treponema pallidum и введение в отобранные образцы стабилизирующего состава.
Изобретение относится к медицине, а именно к дерматовенерологии и клинической лабораторной диагностике, и представляет собой состав расширенной квалификационной панели контрольных материалов, приготовленных на основе сыворотки крови человека в жидкой нативной форме, готовых к использованию без предварительной подготовки.

Изобретение относится к технологии изготовления референс-панелей сывороток, содержащих антигены вирусных инфекций. .

Изобретение относится к медицине, а именно к дерматологии, косметологии и пластической хирургии, и может быть использовано для прогнозирования результата лазерного лечения гипертрофического рубца у женщин путем исследования крови. До лечения в фолликулярную фазу менструального цикла у пациентки в венозной крови определяют концентрацию прогестерона, фолликулостимулирующего гормона, холестерина, интерлейкина 6 и 10.
Наверх