Инъекционный состав, содержащий конъюгат филлера с поли-l-молочной кислотой и филлера с гиалуроновой кислотой, и способ его приготовления
Изобретение относится к инъекционному составу с замедленным высвобождением. Способ получения филлера включает этапы: (а) смешивают РLLА с КМЦ и маннитом, выполняют сублимационную сушку, измельчают до определенного размера и стерилизуют с использованием гамма-излучения; (b) смешивают HA со сшивающим агентом БДДЭ, гелируют, промывают фосфатным буфером, собирают сшитую HA с одинаковыми частицами и пропускают HA через сито; (с) растворяют РLLА смесь в органическом растворителе, получая масляную фазу; (d) добавляют дистиллированную воду к сшитой HA, получая водную фазу; (е) смешивают масляную фазу с водной фазой, получая эмульсию; (f) выполняют распылительную сушку эмульсии; где сублимационная сушка на этапе (а) включает: выполнение основной сублимационной сушки при температуре от -60 до -100°С в течение 12-24 часов; выполнение дополнительной сушки при температуре 15-25°С в течение 5-10 дней, размер измельченных частиц находится в интервале 30-100 мкм. Изобретение обеспечивает улучшенный начальный объем и однородность суспензии. 2 з.п. ф-лы, 3 пр.
Область техники
Настоящее изобретение касается инъекционного состава, который содержит конъюгат филлера с поли-L-молочной кислотой (далее обозначается "РLLА") и филлера с гиалуроновой кислотой (далее обозначается "HA") и содержит микрокапсулу РLLА-HA, и способа его приготовления.
Уровень техники
В общем, филлер с поли-L-молочной кислотой (РLLА) представляет собой полимерное синтетическое вещество, имеющее биосовместимость и биоразрушаемость, в качестве опоры для микросфер. Кроме того, гиалуроновая кислота (HA) является биосинтетическим природным веществом, которое присутствует в больших количествах в коже животных и подобном, и филлер с гиалуроновой кислотой (HA) является веществом для увеличения лицевого объема без хирургии.
В обычных способах приготовления и использования РLLА, смесь РLLА в виде высушенного порошка с КМЦ (карбоксиметилцеллюлоза) и маннитом подвергают сублимационной сушке, и высушенный РLLА смешивают с дистиллированной водой, получая суспензию, после чего полученную суспензию впрыскивают в тело. В результате, после 3-6 месяцев в теле производится коллаген, достигая увеличения объема.
Однако в этом обычном способе есть ограничения в том, что дистиллированная вода и КМЦ компонент в инъекционной РLLА суспензии абсорбируются в тело в течение нескольких дней, поэтому увеличенный объем, который возникает сразу после инъекции суспензии РLLА в тело, исчезает, эффект увеличенного объема не может быть получен через несколько дней после инъекции и может постепенно обеспечиваться только после нескольких месяцев (3-6 месяцев).
Следовательно, требуется длительный период в несколько месяцев после инъекции в тело, пока получается коллаген. Однако этот период в несколько месяцев вызывает неудовлетворение и жалобы пациентов. Кроме того, разные типы филлеров и биоматериалов для восстановления ткани тела нужно дополнительно использовать, чтобы преодолевать этот неудобный недостаток.
Кроме того, обычный РLLА филлер имеет недостатком то, что вызывает узелки и гранулемы.
Кроме того, РLLА впрыскивают в виде разбавления дистиллированной водой. В этом случае, когда суспензию готовят с дистиллированной водой, концентрация суспензии снижается. По этой причине есть также проблема в том, что длительное время требуется для получения однородной суспензии.
Чтобы решить эту проблему, корейский патент №10-1852127 раскрывает способ приготовления конъюгата РLLА и HA.
Однако, так как потребительский запрос на филлеры быстро увеличивается и потребительские требования становятся более подробными и конкретными, существует необходимость в РLLА филлерах, имеющих улучшенный начальный объем и однородность суспензии по сравнению с предшествующим уровнем техники.
Описание
Техническая проблема
Соответственно, одной задачей настоящего изобретения является обеспечить конъюгат филлера с поли-L-молочной кислотой (РLLА) и филлера с гиалуроновой кислотой (HA), микрокапсулу конъюгата РLLА-HA, имеющую одинаковые частицы, и способ их приготовления.
Техническое решение
Согласно настоящему изобретению вышеуказанные и другие задачи могут быть выполнены путем обеспечения способа получения филлера, содержащего микрокапсулы РLLА-HA, включающего в себя (а) смешивание РLLА (поли-L-молочная кислота) с КМЦ (карбоксиметилцеллюлоза) и маннитом, сублимационную сушку полученной смеси, измельчение высушенного продукта до определенного размера и стерилизацию полученного продукта с использованием гамма излучения с получением смеси РLLА, (b) смешивание HA (гиалуроновой кислоты) со сшивающим агентом БДДЭ (бутандиолдиглицидиловый эфир), загустевание полученной смеси, промывание геля фосфатным буфером, сбор сшитой HA с одинаковыми частицами и пропускание HA через сито с получением сшитой HA с одинаковыми частицами с получением HA смеси, (с) растворение РLLА смеси в органическом растворителе с получением масляной фазы (О), (d) добавление дистиллированной воды к сшитой HA с получением водной фазы (W), (е) смешивание масляной фазы (О) с водной фазой (W) с получением РLLА-HA эмульсии, и (f) распылительную сушку РLLА-HA эмульсии из этапа (е) с получением микрокапсулы.
Применяемый здесь термин "поли-L-молочная кислота" (также называемая "PLLA" или "полиL-молочная кислота") представляет собой филлер, одобренный US FDA в отношении лечения лицевой липидной жесткости у больных, инфицированных вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), и содержит компонент, экстрагированный из таких растений, как сахарный тростник. Кроме того, гиалуроновая кислота (HA) представляет собой полимерный материал биологического происхождения, широко присутствующий в природе, и представляет собой полианионный мукополисахарид, который впервые изолировали из стекловидного тела глаз Мейер и Палмер в 1934.
Применяемый здесь термин "гиалуроновая кислота" относится к линейному полисахариду, образованному из глюкуроновой кислоты и ацетилглюкозамина, и представляет собой глюкозаминогликан, присутствующий во внеклеточном матриксе (ВКМ), синовиальной жидкости суставов и основе, составляющей хрящи. Гиалуроновая кислота также играет критическую роль в качестве сигнальной молекулы в подвижности клеток, дифференциации клеток, лечении ран и метастазе рака. Ее важность в качестве синовиальной жидкости суставов дополнительно увеличивается благодаря особым вязкоупругим свойствам гиалуроновой кислоты и сшитой гиалуроновой кислоты. Также гиалуроновая кислота является биоматериалом, имеющим прекрасную биосовместимость, который может быть использован для восстановления тканей и для систем подачи лекарств, так как она не имеет проблем, связанных с иммунитетом. Гиалуроновая кислота и олигосахариды гиалуроновой кислоты имеют трехмерную структуру в растворе и, таким образом, способны образовывать широкий набор внутренних водородных связей, ограничивающих текучесть полимерных цепей и определенные реакции винтовой и свернутой спирали.
Гиалуроновая кислота обычно имеет молекулярную массу приблизительно от 1000 до 10000000 Да и имеет определенные физико-химические свойства и биологические функции, упомянутые выше.
Гиалуроновая кислота играет ключевую роль в гомеостазе клеточных тканей и смазке суставов, а также играет очень важную роль в текучести клеток, действии фактора роста и воспалительном ответе путем особого связывания определенных белков на поверхности клетки. Гиалуроновая кислота была разработана и используется в качестве медицинского компонента для восстановления ткани (замещение и восстановление человеческой ткани) в Корее и других странах и широко применяется в областях ухода за кожей, косметики и пластической хирургии.
Карбоксиметилцеллюлоза (КМЦ) используется в качестве носителя, и носитель настоящего изобретения не ограничивается КМЦ и может включать в себя, по меньшей мере, один носитель, выбранный из группы, состоящей из карбоксиметилцеллюлозы, натрий карбоксиметилцеллюлозы, альгината натрия, желатина, альбумина, коллагена, натрий гиалуроновой кислоты, декстрана, гидроксиэтилцеллюлозы, гидроксипропилметилцеллюлозы, глицерина, сорбита и пропиленгликоля.
Кроме того, используемый здесь носитель представляет собой маннит, но не ограничивается этим и может быть любым из обычно применяемых наполнителей и разбавителей, таких как лактоза, декстроза, сахароза, сорбит, маннит, ксилит, эритрит, мальтит, крахмал, гуммиарабик, альгинат, желатин, фосфат кальция, силикат кальция, целлюлоза, метилцеллюлоза, микрокристаллическая целлюлоза, поливинилпирролидон, вода, метилгидроксибензоат, пропилгидроксибензоат, тальк, стеарат магния или минерал, но не ограничивается этим.
Диглицидиловый эфир бутандиола (БДДЭ) использовали в качестве сшивающего агента для гиалуроновой кислоты, но не ограничиваясь этим, и агент может быть выбран из группы, состоящей из дивинилсульфона (ДВС), диэтилкарбодиимида (ВКДИ) и полиэтиленгликоля (ПЭГ).
Более конкретно, сублимационная сушка на этапе (а) филлера настоящего изобретения, содержащего микрокапсулы РLLА-HA, включает в себя основную сублимационную сушку при от -60 до -100°С в течение от 12 до 24 часов и дополнительную сушку при от 15 до 25°С в течение от 5 до 10 дней. Размер измельченных частиц может быть в интервале от 30 мкм до 100 мкм, но не ограничивается этим.
Кроме того, более конкретно, в филлере настоящего изобретения, содержащем микрокапсулы РLLА-HA, от 30 до 80 литров фосфатного буфера на этапе (b) используют со 100 граммами HA, и равномерные частицы получают путем пропускания смеси через сито 80-120 меш, но настоящее изобретение не ограничивается этим.
Кроме того, более конкретно, когда филлер настоящего изобретения, содержащий микрокапсулы РLLА-HA, используют в качестве филлера для лица после этапа (f), от 15 до 25 мл дистиллированной воды можно смешивать с 10 мг микрокапсул, и когда филлер, содержащий микрокапсулы РLLА-HA, используют в качестве филлера для тела после этапа (f), от 25 до 35 см3 дистиллированной воды можно смешивать с 10 мг микрокапсул.
Преимущественные эффекты
Конъюгат РLLА-HA согласно настоящему изобретению готовят, используя способ приготовления микрокапсул, используя РLGА и HA. РLLА-HA равномерно располагается в форме эмульсии микрочастиц в суспензии, преимущественно предохраняя РLLА от агрегирования в одном месте и снижая образование гранулем.
Эффекты настоящего изобретения не ограничиваются указанными выше. Следует понимать, что эффекты настоящего изобретения включают в себя все эффекты, которые могут подразумеваться из конфигураций, описанных в подробном описании настоящего изобретения или формуле изобретения.
Лучший вариант осуществления
Предпочтительный вариант осуществления способа приготовления микрочастиц с замедленным высвобождением, содержащих конъюгат филлера с поли-L-молочной кислотой и филлера с гиалуроновой кислотой согласно настоящему изобретению, заданный, как описано выше, будет описан далее. Когда определено, что подробное описание связанной известной функции или конфигурации в последующем описании настоящего изобретения может излишне затемнять предмет настоящего изобретения, его подробное описание будет опущено. Кроме того, описанные ниже термины определяются при рассмотрении функций в настоящем изобретении и могут варьировать согласно интенциям пользователей или операторов, или прецедентов, и, соответственно, значение каждого термина следует интерпретировать на основании содержания настоящего описания.
Во-первых, в настоящем изобретении, чтобы приготовить конъюгат филлера поли-L-молочной кислоты (РLLА) и филлера гиалуроновой кислоты (HA), РLLА подвергают сублимационной сушке, HA сшивают, используя ВDDЕ, и сшитую HA вводят в пробирку с РLLА, смешивают, извлекают шприцем и затем используют для лечения.
Применяемый здесь термин "поли-L-молочная кислота" (также называемая "PLLA" или "полиL-молочная кислота") представляет собой филлер, одобренный US FDA в отношении лечения лицевой липидной жесткости у больных, инфицированных вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), и содержит компонент, экстрагированный из таких растений, как сахарный тростник. Кроме того, гиалуроновая кислота (HA) представляет собой полимерный материал биологического происхождения, широко присутствующий в природе, и представляет собой полианионный мукополисахарид, который впервые изолировали из стекловидного тела глаз Мейер и Палмер в 1934.
Гиалуроновая кислота распределена с различными молекулярными массами (от 1 до 10 миллионов Дальтон) почти во всех тканях, таких как кожа, мускулы, скелет, кровь, лимфа, плацента, глаза, хрящи и синовиальная жидкость животных, и наиболее широко распространена в тканях кожи среди всех тканей. Гиалуроновая кислота разработана и применяется в качестве медицинского компонента для восстановления тканей (замещение и восстановление человеческих тканей) в Корее и других странах, и широко используется областях ухода за кожей, косметики и пластической хирургии.
Кроме того, термин "конъюгат", используемый в настоящем изобретении, означает простую смесь филлера с поли-L-молочной кислотой и филлера с гиалуроновой кислотой, а не особый тип физического или химического объединения.
Пример 1. Приготовление порошка РLLА смеси (поли-L-молочной кислоты)
Чтобы приготовить РLLА смесь, сначала готовили РLLА (поли-L-молочная кислота), имеющую молекулярную массу приблизительно 150000 кДа (килодальтон). КМЦ (карбоксиметилцеллюлоза) и маннит смешивали с РLLА с последующей сублимационной сушкой. Сублимационную сушку выполняли путем основной сублимационной сушки от -60 до -100°С в течение 12-24 часов и дополнительной сушки при 15-25°С в течение 5-10 дней.
Высушенную РLLА смесь измельчали до размера в интервале от 30 мкм до 100 мкм (уместно 50 мкм), используя верхнюю мешалку, и подвергали стерилизации гамма лучами, получая порошок РLLА смеси.
Пример 2. Приготовление эмульсии О/W
Чтобы приготовить эмульсию масла в воде (О/W), РLLА смесь, приготовленную в примере 1, перемешивали со смесью масла среднецепного триглицерида (СЦТ) и ПГПР (полирицинолеат полиглицерина) в качестве эмульгатора, получая прозрачную масляную фазу (О).
Водную фазу (W) для инкапсулирования масляной фазы готовили следующим образом.
Сначала HA, имеющую молекулярную массу приблизительно 2 миллиона кДа, смешивали с БДДЭ (диглицидиловый эфир бутандиола) в качестве сшивающего агента в заданном отношении, и застывшую HA промывали фосфатным буфером. Фосфатный буфер использовали в количестве от 30 до 80 литров (годится 50 литров) на 100 грамм HA.
Промытую HA пропускали через сито 80-120 меш, имеющее равномерный размер, получая сшитую HA с однородными частицами. В этом случае, оптимальный размер отверстий сита может быть 100 меш.
Дистиллированную воду добавляли к сшитой HA и затем перемешивали при 9400 об/мин, используя гомогенизатор, в течение 5 минут. Этот материал дополнительно гомогенизировали при 14000 об/мин, используя гомогенизатор, в течение 5 минут, получая водную фазу (W).
Затем масляную фазу (О) смешивали с водной фазой (W) с последующим перемешиванием при 400 об/мин в мешалке в течение 5 минут и гомогенизировали, используя гомогенизатор (5 минут, 20000 об/мин), получая эмульсию О/W.
Пример 3. Приготовление микрокапсул, используя распылительную сушку
Микрокапсулы в виде порошка готовили из О/W эмульсии, приготовленной в примере 2, используя распылительную сушилку (распылительная сушилка Eyela SD-1000, Eyela, Токио, Япония). Более конкретно, температуру подаваемого воздуха устанавливали 130±5°С, температуру выходящего воздуха доводили до 80±5°С, вращательный распылитель регулировали на 10×10 кПа, скорость дутья устанавливали 0,80 м3/мин, и скорость насоса устанавливали 1,0 мл/мин.
Микрокапсулы, приготовленные с помощью указанного способа, впрыскивали в пробирку и затем стерилизовали гамма лучами еще раз, и замораживали при -20°С.
Настоящее изобретение отличается тем, что эмульсия с микрокапсулами РLLА-HA О/W может быть использована сразу после введения в нее инъекционной воды. Более конкретно, когда готовили филлер для лица, 15-25 мл дистиллированной воды смешивали с 10 мг микрокапсул, тогда как при приготовлении филлера для тела 25-35 см3 дистиллированной воды смешивали с 10 мг микрокапсул.
Эмульсию с микрокапсулами РLLА-HA О/W полностью микронизировали и гомогенизировали во время процесса получения, решая, тем самым, обычные проблемы, в которых требуется формировать суспензию и позволять суспензии отстаиваться в течение 2 часов или больше перед применением после подмешивания воды для инъекции, а частицам РLLА агломерировать в композиции.
Как описано выше, настоящее изобретение отличается тем, что длительное время, затрачиваемое для формирования начального объема во время инъекции, которое является недостатком обычных РLLА филлеров (например, такие продукты, как Sculptra), может быть сокращено на 6-8 недель или больше, и настоящее изобретение основано на комбинации со сшитой гиалуроновой кислотой, чтобы минимизировать образование гранулем, которые являются другим недостатком обычных РLLА филлеров, и агрегация РLLА существенно снижается даже после недостаточного времени смешения или длительного хранения путем образования тонких частиц.
Описание настоящего изобретения приведено только для иллюстрации, и специалисты в данной области техники будут понимать, что различные модификации, дополнения и замены возможны без отклонения от объема и сущности изобретения, описанного в формуле изобретения. Поэтому следует понимать, что варианты осуществления, описанные выше, являются иллюстративными и не ограничивающими во всех отношениях. Например, компонент, описанный как единый элемент, может быть выполнен отдельным образом, и, аналогично, компоненты, описанные как раздельные, также могут быть выполнены в объединенной форме.
Объем настоящего изобретения задается формулой изобретения, приведенной ниже, и все изменения или модификации, производимые из смысла и объема пунктов формулы изобретения и их эквивалентов, следует понимать как попадающие в объем настоящего изобретения.
1. Способ получения филлера, содержащего микрокапсулы РLLА-HA, в котором:
(а) смешивают РLLА (поли-L-молочная кислота) с КМЦ (карбоксиметилцеллюлоза) и маннитом, выполняют сублимационную сушку полученной смеси, измельчают высушенную смесь до определенного размера и стерилизуют смесь с использованием гамма-излучения, получая РLLА смесь;
(b) смешивают HA (гиалуроновая кислота) со сшивающим агентом БДДЭ (диглицидиловый эфир бутандиола), гелируют полученную смесь, промывают полученный гель фосфатным буфером, собирают сшитую HA с одинаковыми частицами и пропускают HA через сито с получением сшитой HA с одинаковыми частицами, получая HA смесь;
(с) растворяют РLLА смесь в органическом растворителе, получая масляную фазу (О);
(d) добавляют дистиллированную воду к сшитой HA, получая водную фазу (W);
(е) смешивают масляную фазу (О) с водной фазой (W), получая РLLА-HA эмульсию; и
(f) выполняют распылительную сушку РLLА-HA эмульсии, получая микрокапсулы,
где сублимационная сушка на этапе (а) включает:
выполнение основной сублимационной сушки при температуре от -60 до -100°С в течение от 12 до 24 часов и
выполнение дополнительной сушки при температуре от 15 до 25°С в течение от 5 до 10 дней, и
размер измельченных частиц находится в интервале от 30 мкм до 100 мкм.
2. Способ по п. 1, в котором фосфатный буфер на этапе (b) используют в количестве от 30 до 80 литров на 100 грамм HA и
равномерные частицы получают путем пропускания данной смеси через сито 80-120 меш.
3. Способ по п. 1, в котором дополнительно смешивают от 15 до 25 мл дистиллированной воды с 10 мг микрокапсул с получением филлера для лица после этапа (f) и смешивают от 25 до 35 см3 дистиллированной воды с 10 мг микрокапсул с получением филлера для тела после этапа (f).
