Способ подавления роста меланомы в16 у лабораторных животных

Авторы патента:

A61P35/00 - Противоопухолевые средства

A61K31/502 - орто- или пери-конденсированные с карбоциклической системой, например циннолин, фталазин

Владельцы патента RU 2784443:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр радиологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ радиологии" Минздрава России) (RU)

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для оптимизации схем лечения меланомы В16 у лабораторных животных. Для этого соединение аминодигидрофталазиндион натрия в дозе 5 мг/мышь вводят дважды в неделю внутрибрюшинно через неделю после прививки опухоли меланомы В16 общим курсом 10 инъекций. Изобретение обеспечивает повышение выживаемости и уменьшение объема опухоли при лечении меланомы В16 у лабораторных животных в эксперименте. 1 ил., 2 табл.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, и может быть использовано для оптимизации схем лечения меланомы В16 у лабораторных животных, а именно для повышения выживаемости и уменьшения объема опухоли.

Так как злокачественный опухолевый процесс, оперативное вмешательство и развивающиеся в послеоперационном периоде осложнения приводят к значительной иммуносупрессии, одним из направлений, повышающих эффективность этиопатогенетической терапии в настоящее время является использование иммунотропных препаратов и разработка адекватных методов направленной иммунокоррекции в комплексной терапии.

Иммунотерапия представляет собой перспективный метод лечения злокачественных новообразований. В последние годы активно развивается иммунотерапия опухолей, направленная на ингибирование опухолевого роста и стимуляцию противоопухолевого иммунного ответа организма. Непосредственным влиянием на иммунную систему обладает иммуномодулятор Галавит, активное вещество - аминодигидрофталазиндион натрия (химическая формула - 5-амино-1,2,3,4-тетрагидрофталазин-1,4-диона натриевая соль).

Препарат Галавит представляет собой натриевую соль аминофталазина. Показано, что Галавит воздействует на клетки моноцитарно-макрофагального ряда и увеличивает функциональную активность макрофагов [Иммуномодулирующие и противовоспалительные свойства Галавита // Галавит. Клиническое использование и механизмы действия / Под ред член-корр РАМН Подколзина А.А., Гришаевой Т.И. - М.: Внешторгиздат, 2002. - С. 6-14].

Получены данные, характеризующие Галавит как потенциальный ингибитор метастазирования с патогенетической направленностью действия [Киселев С.М., Лабурдова Е.В., Козлов А.М. Влияние препарата Галавит на инвазивную активность опухолевых клеток // Российский биотерапевтический журнал. 2006. №3., С. 61-65].

Принимая во внимание способность клеток моноцитарно-макрофагального ряда и их продуктов играть важную роль в противоопухолевом иммунном ответе, было изучено действие Галавита на опухолевый рост и метастазирование мышиной меланомы В16, а также на продолжительность жизни животных-опухоленосителей [Хохлов А.П., Калюжин О.В., Абидов М.Т. Влияние Галавита на рост и метастазирование мышиной меланомы В 16 // Галавит в эксперименте и клинике. - М.:1998. - С. 32.].

Интересные данные получены in vivo при изучении антиметастатической активности препарата. При введении 50 мкг Галавита 1 раз в 3 дня показано достоверное (р <0,05) снижение на 44% количества легочных метастазов на 28-ой день эксперимента [Коробкова Л.И., Вельшер Л.З., Германов А.Б., Гришина Т.И., Станулис А.И., Гене Г.П., Щепеляев Д.О., и Израилов Р.Е. // Роль иммуномодулятора Галавит в онкологической и хирургической практике" Российский биотерапевтический журнал, Т. 3, № 3, 2004, С. 87-92.].

К недостаткам очевидно можно отнести тот факт, что не было выявлено статистически значимых различий с контролем.

Наиболее близким к данному изобретению является способ снижения метастазирования меланомы В-16 (RU 2308096 C2, 10.10.2007г.) Для этого вводят инъекционный водный раствор натриевой соли 5-амино-1,2,3,4-тетрагидрофталазин-1,4-диона внутрибрюшинно в дозе 40 мг соли/кг мыши один раз в сутки в течение 5 дней.

Недостатком данной работы является недостаточная информативность терапии. Не были выявлены результаты степени угнетения роста узла меланомы и продолжительности жизни мышей-опухоленосителей, что является важным фактором успешности лечения.

Задачей данного изобретения является разработка нового эффективного способа для увеличения продолжительности жизни и угнетения роста первичного узла меланомы мышей-опухоленосителей.

Техническим результатом изобретения является расширение арсенала средств для подавления роста злокачественных опухолей и повышения длительности жизни мышей-опухоленосителей путем введения аминодигидрофталазиндион натрия.

Указанный технический результат при осуществлении изобретения достигается за счет того, что также как и в известном способе, животным вводят внутрибрюшинно инъекционный водный раствор аминодигидрофталазиндион натрия.

Особенностью заявляемого способа является то, что препарат вводят через 7 суток после трансплантации опухоли в дозе 5 мг/мышь 2 раза в неделю общим курсом 10 инъекций.

Сущность изобретения заключается в противоопухолевой активности внутрибрюшинного применения соединения аминодигидрофталазиндион натрия в эксперименте на мышах с трансплантированной возле позвоночника подкожно меланомой В16.

Изобретение поясняется подробным описанием, экспериментальными данными, таблицами и иллюстрацией, на которой изображено:

Фиг. 1 - диаграмма 100% выживаемости мышей в III группе при отсроченной терапии Галавитом.

Изобретение осуществляют следующим способом.

В эксперименте использованы мыши линии CBAxC57BL/6 (F1), которые содержались в стандартных пластиковых клетках на стандартном пищевом рационе. Все манипуляции с мышами выполняли в соответствии с требованиями нормативно-правовых актов о порядке экспериментальной работы и гуманном отношении к животным [Euroguide on the accommodation and care of animals used for experimental and other scientific purposes. London: FELASA, 2007]. Ex vivo экспансированные клетки меланомы В16 инокулировали мышам около позвоночника на уровне бедра в количестве 10⁶ кл/мышь в 100мкл физиологического раствора.

Через 7 суток после трансплантации опухоли, лабораторным животным для лечения меланомы В16, внутрибрюшинно вводят Галавит (соединение аминодигидрофталазиндион натрия) в дозе 5 мг/мышь 2 раза в неделю общим курсом 10 инъекций.

Экспериментальные данные, подтверждающие эффективность лечения меланомы В16.

Были сформированы следующие 3 группы по 10 мышей в каждой:

Группа 1. Контроль (подкожная трансплантация клеток меланомы В16).

Группа 2. Сразу после трансплантации опухоли животным внутрибрюшинно вводили Галавит в дозе 5мг/мышь два раза в неделю, всего 10 инъекций.

Группа 3. Через 7 суток после трансплантации опухоли животным внутрибрюшинно вводили Галавит в дозе 5мг/мышь два раза в неделю, всего 10 инъекций

Оценивали формирование опухолевого узла, интенсивность его роста (объем опухоли) на 10-90 сутки, выживаемость на 10-90 сутки и развитие отдаленных метастазов на фоне иммунотерапии препаратом Галавит. Результаты оценивали по χ² (хи-квадрат)-критерию, а достоверность различий оценивали по t-критерию. Различия значений считали достоверными при p<0,05.

Установлено, что в группе контроля с 60-х по 90-е сутки наблюдали постепенное увеличение смертности мышей, 90-суточная выживаемость составила 70%. Во II группе 90-суточная выживаемость составила 30%, а в III группе при отсроченной терапии Галавитом наблюдали 100% выживаемость мышей (Фиг. 1).

В группе контроля опухолевые узлы начинали явно выявляться с 50-х суток. Во II группе при терапии Галавитом сразу с момента прививки опухолевых клеток были выявлены наиболее высокие темпы роста опухоли с 40 по 80 сутки. В III группе темпы роста опухоли при отсроченной терапии Галавитом были значительно ниже по сравнению с I и II группами (Таблица 1).

Таблица 1 Темпы роста опухоли меланомы В16 лабораторных животных под влиянием соединения аминодигидрофталазиндион натрия
Группа	Объем опухоли, мм³
Группа	Дни после перевивки
10	20	30	40	50	60	70	80	90
Контроль (I группа)	1	16±2	166±24	307± 40	748± 97	1383±166	1597± 233	2177±261	2957± 384
5мг/мышь сразу (II группа)	3	279±39	334±50	1261±151	1946± 253	2598±260	4501± 585	5014±601	7495± 824
5мг/мышь через неделю (III группа)				1	16±2	40±6	138± 14	288± 29	540± 81

Влияние аминодигидрофталазиндиона натрия на подавление роста опухоли (III группа) оценивали путем статистического сравнения объема опухолевых узлов в контрольной и подопытной группах при разных сроках наблюдения, по длительности задержки роста опухоли и индексу торможения роста (ТРО), рассчитанному по следующей формуле:

где V_к - средний объем опухолевых узлов в контрольной группе и V_э - средний объем опухолевых узлов в экспериментальной группе. Данные приведены в таблице 2.

Влияние аминодигидрофталазиндиона натрия на усиление роста опухоли (II группа) оценивали с применением индекса роста опухоли (ИР), рассчитанного по следующей формуле:

где: V_к - средний объем опухолевых узлов в контрольной группе и V_э - средний объем опухолевых узлов в экспериментальной группе. Данные также приведены в таблице 2.

Таблица 2
Дни после перевивки	Индекс роста опухоли, % (II группа)	Торможение роста опухоли, % (III группа)
50	160	98
60	87	97
70	182	91,4
80	130	86,8
90	153	81

При вскрытии животных на 90 сутки в контроле отмечено, что у трех из пяти выживших мышей при визуальном осмотре органов грудной и брюшной полостей были выявлены множественные метастатические узлы разных размеров. У 2-х мышей локализация метастазов у корня легких и в средостении, а у одной мышки - опухолевый узел с локализацией в районе мочевого пузыря. Во II группе при терапии галавитом сразу с момента прививки опухолевых клеток при вскрытии оставшихся в живых 3 мышей были выявлены метастатические узлы во внутренних органах грудной и брюшной полостях. При вскрытии в III группе лишь у одной из десяти выживших были метастазы различного размера в легких и средостении.

Проведенные исследования показали, что именно отсроченная на неделю (III группа) с момента прививки опухоли меланомы В 16 терапия аминодигидрофталазиндионом натрия в дозе 5 мг/мышь дважды в неделю (10 инъекций) оказала положительное влияние, значительно повышая показатели выживаемости и подавляя вероятность прививки опухоли на месте их трансплантации, а также развитие отдаленных метастазов. В то время как терапия аминодигидрофталазиндионом натрия сразу после прививки (II группа) дала отрицательную динамику, превосходящую по смертности и метастазированию даже контроль. Это связано вероятно с тем, что мгновенная терапия препаратом усилила действию опухолевых клеток, подстегнув их к росту.

Использование заявляемого способа позволит повысить выживаемость и уменьшить объем опухоли при лечении меланомы В16 у лабораторных животных в эксперименте.

Способ подавления роста меланомы В16 у лабораторных животных, включающий внутрибрюшинное введение инъекционного водного раствора аминодигидрофталазиндион натрия, отличающийся тем, что препарат вводят через 7 суток после трансплантации опухоли в дозе 5 мг/мышь 2 раза в неделю общим курсом 10 инъекций.

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложена молекула антитела, связывающаяся с лигандом-1 белка запрограммированной гибели клеток (PD-L1), и геном активации лимфоцитов 3 (LAG-3).

Питательная смесь для достижения полезных для здоровья эффектов у животных // 2784353

Группа изобретений относится к фармацевтической промышленности, а именно к ветеринарии, к композиции для лечения или предотвращения рака молочной железы у животного и способу лечения или предотвращения рака молочной железы у животного. Способ лечения или предотвращения рака молочной железы у животного, включающий пероральное введение животному композиции, содержащей 11,3 мас.% муки из цельных грецких орехов, 0,005 мас.% экстракта грифолы курчавой, 0,05 мас.% галлата эпигаллокатехина (EGCG), 3 мас.% порошка корня куркумы, 0,005 мас.% ликопина, 0,1 мас.% таурина и 2 мас.% рыбьего жира.

Метиловый эфир 24-дибром-4-оксо-2-циано-3,23-динорлуп-28-овой кислоты, проявляющий цитотоксическую активность // 2784317

Изобретение относится к области химии природных соединений класса 3,4-секо-лупановых тритерпеноидов – метиловому эфиру 24,24-дибром-4-оксо-2-циано-3,23-динорлуп-28-овой кислоты, который проявляет цитотоксическую активность, в том числе в отношении раковых клеток линий MCF-7, НСТ 116, RD ТЕ 32, MS, А549, PC-3, HepG2, HBL-100, HBL-100/Dox.

Применение антитела к pd-1 в комбинации с фамитинибом для получения лекарственного средства для лечения опухолей // 2783846

Группа изобретений относится к биотехнологии. Представлены: применение антитела к PD-1 в комбинации с фамитинибом для получения лекарственного средства для лечения опухолей, способ уменьшения побочной реакции, вызванной антителом к PD-1 или его антигенсвязывающим фрагментом, включающий введение фамитиниба или его фармацевтически приемлемой соли в комбинации с антителом к PD-1, способ снижения дозы антитела к PD-1 или его антигенсвязывающего фрагмента или дозы фамитиниба или его фармацевтически приемлемой соли и фармацевтический набор для лечения опухоли или рака, содержащий фамитиниб или его фармацевтически приемлемую соль и антитело к PD-1.

Прогнозирование риска развития нежелательной реакции, связанной с введением антитела к alk2, и способности отвечать на лечение антителом к alk2 // 2783762

Группа изобретений относится к прогнозированию риска развития нежелательной реакции, связанной с введением антитела к ALK2, прогнозированию ответа на лечение или профилактику путем введения антитела к ALK2, к способу отбора субъекта, подлежащего лечению или профилактике путем введения антитела к ALK2, и способу лечения или профилактики эктопической оссификации или опухоли головного мозга, вызванной передачей сигнала BMP, опосредованной ALK2, содержащим активную мутацию, путем введения антитела к ALK2.

Противоопухолевое средство и усилитель противоопухолевого действия // 2783759

Изобретение относится к способу лечения опухоли, включающему совместное введение соединения ацилтиомочевины или его фармакологически приемлемой соли и регулятора молекул контрольных точек иммунного ответа, выбранный из антагониста пути метаболизма PD-1 и антагониста пути метаболизма CTLA-4, таких как ниволумаб, пембролизумаб, атезолизумаб и ипилимумаб.

Соединения с конденсированными кольцами // 2783706

Группа изобретений относится к области органической химии и фармацевтики и направлена на лечение нарушения, опосредованного мутацией K-Ras G12C. Раскрыто соединение формулы (II) или его фармацевтически приемлемая соль или изомер, где R2 представляет собой NH2; R3 представляет собой Н; R4 представляет собой Н или С1-6 алкил; R5 представляет собой CF3; R7 выбран из группы, состоящей из Н, циано и галогена; каждый из R8 и R9 независимо выбран из группы, состоящей из Н, С1-6 алкила, С1-6 галогеналкила, C1-6 гидроксиалкила, циано и галогена; где С1-6 алкил необязательно замещен одним заместителем, выбранным из группы, состоящей из: метансульфонила (мезила), п-толуолсульфонила (тозила), уходящей группы алкил- или арилсульфоната, С1-6 алканоиламино, С1-6 алкокси, C1-6 алкиламино, C1-6 алкилсульфониламино, С6-12 диалкиламино и С1-6 галогеналкокси; X представляет собой пиперазинил, необязательно замещенный 1-4 заместителями, где каждый заместитель независимо выбран из группы, состоящей из циано, C1-6 алкила, С1-6 цианоалкила и С1-6 галогеналкила; Y (см.

Анти-pd-l1 антитело и его применение // 2783685

Изобретение относится к области биохимии, в частности выделенное анти-PD-L1 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент. Также раскрыты полинуклеотид и сочетание выделенных полинуклеотидов, кодирующие указанное антитело; вектор экспрессии, содержащий указанный полинуклеотид; клетка-хозяин, содержащая указанный вектор; конъюгат и фармацевтическая композиция, содержащие указанное антитело.

Молекулы, связывающие adam9, и способы их применения // 2783619

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к молекуле, связывающей ADAM9, а также содержащей ее композиции. Изобретение эффективно для лечения заболевания или патологического состояния, ассоциированного с экспрессией ADAM9 или характеризующегося ей.

Лечение рака с помощью антитела к семафорину 4d в комбинации с эпигенетическим модулирующим агентом // 2783535

Изобретение относится к области биотехнологии. Описана группа изобретений, включающая фармацевтическую композицию для ингибирования, задержки или снижения роста злокачественных клеток у субъекта, страдающего от рака (варианты) и способ ингибирования, задержки или снижения роста злокачественных клеток у субъекта, страдающего от рака, включающий введение субъекту вышеуказанной фармацевтической композиции.

Средство для комплексного лечения воспалительных заболеваний пародонта и слизистой оболочки полости рта // 2781848

Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, и касается средства местного применения для комплексного лечения воспалительных заболеваний пародонта и слизистой оболочки полости рта. Средство содержит: аминодигидрофталазиндион натрия – 0,17-0,70 мас.%, пентоксифиллин 0,8-1,2 мас.%, мирамистин – 0.025-0,075 мас.%, при этом в качестве гидрофильной основы используется кремнийорганический глицерогидрогель состава Si(C3H7O3)4⋅6C3H8O3⋅28H2O) или кремнийцинкорганический глицерогидрогель состава 2Si(C3H7O3)4⋅Zn(C3H6O3)⋅14C3H8O3⋅80H2O.