Способ диагностики у детей аллергического ринита, ассоциированного с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции

Изобретение относится к медицине, а именно к экологии, и может быть использовано для диагностики у детей аллергического ринита, ассоциированного с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции. При содержании в крови ребенка уровня бензола не менее чем в 1,1 раза выше референтного уровня, равного 0 мг/дм³, уровня формальдегида не менее чем в 1,1 раза выше референтного уровня, равного 0,0076 мг/дм³, уровня марганца не менее чем в 1,1 раза выше референтного уровня, равного 0,017 мг/дм³, уровня хрома не менее чем в 1,1 раза выше референтного уровня, равного 0,0047 мг/дм³, и уровня никеля не менее чем в 1,1 раза выше референтного уровня, равного 0,0043 мг/дм³, IgE специфического к формальдегиду, марганцу, никелю и IgG специфического к бензолу, при одновременном наличии совокупности следующих показателей: уровня показателя моды (Мо) в пределах 0,705-0,860 сек; уровня показателя амплитуды моды (АМо) в пределах 24,40-39,10%; показателя индекса напряжения (ИН1) в пределах 34,50-87,10 у.е.; соотношения индекса напряжения в клиноортостатической пробе к индексу напряжения в исходном состоянии (ИН2/ИН1) в пределах 1,55-3,55 у.е.; наличия реактивной гиперплазии лимфоузлов верхней яремной группы; содержания абсолютного количества CD56⁺-лимфоцитов в пределах 0,306-0,368⋅10⁹/дм³; уровня ИЛ-4 в пределах 1,99-3,57 пг/см³, ИЛ-6 в пределах 0,90-2,19 пг/см³; уровня прямого билирубина в пределах 5,50-6,08 мкмоль/дм³; уровня общей железосвязывающей способности (ОЖСС) в пределах 62,0-67,74 мкмоль/дм³; уровня IgE общего в пределах 124,66-205,18 МЕ/см³ диагностируют у ребенка наличие аллергического ринита, ассоциированного с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции. Способ обеспечивает создание информативного и доказательного способа диагностики у детей аллергического ринита, ассоциированного с сочетанным воздействием вредных химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции за счет определения функциональных и лабораторных показателей, а также содержания бензола, формальдегида, марганца, хрома и никеля в крови. 6 табл., 2 пр.

 

Изобретение относится к области медицины и экологии и может быть использовано для диагностики у детей, страдающих персистирующей герпес-вирусной инфекцией и пребывающих в неблагополучных условиях среды обитания, а именно, в условиях загрязнения атмосферного воздуха металлами и ароматическими соединениями, заболевания аллергическим ринитом. Изобретение может быть использовано в целях установления экологически детерминированной патологии.

Аллергический ринит (МКБ: J30.3; J30.4) (далее - АР) - это хроническое аллергическое воспаление слизистой оболочки носа, обусловленное контактом с причинным аллергеном и проявляющееся ринореей, заложенностью носа, зудом и чиханием. Ключевым звеном является иммуноглобулин Е (IgE) - зависимым с воспалением слизистой оболочки носовой полости, обусловленный специфическими иммунологическими или неспецифическими механизмами.

Отмечено, что число пациентов с неинфекционным ринитом в последние годы значительно увеличилось, в том числе благодаря росту частоты встречаемости аллергического ринита, характеризующегося интермиттирующим или постоянным воспалением слизистой оболочки носа и околоносовых пазух под действием аллергенов.

На сегодняшний день аллергическими заболеваниями в той или иной степени страдают до 20% населения планеты. Общее число пациентов с аллергическими заболеваниями по РФ составляет примерно 20 млн человек. В промышленно-развитых странах все более важным фактором, влияющим на развитие аллергий, становится загрязнение окружающей среды. Но речь идет не об аллергических реакциях на загрязнение как таковое, а о том, что загрязнение усиливает аллергическую реакцию. Решение именно этой проблемы представляется одной из важных задач, поскольку оно позволит в будущем выработать более эффективные меры профилактики.

Химический фактор - это разнообразные вредные вещества: пары, газы, жидкости, аэрозоли, соединения, смеси, которые при контакте с организмом человека могут вызывать заболевания или отклонения в состоянии здоровья, обнаруживаемые как в процессе контакта с ним, так и в отдаленные сроки жизни настоящего и последующих поколений.

Вместе с этим на заболевания аллергическим ринитом оказывает влияние и герпес-вирусная инфекция. Герпес-вирусная инфекция - широко распространенная хроническая рецидивирующая инфекция, вызываемая герпес-вирусами и характеризующаяся преимущественным поражением нервной и эпителиальной ткани.

Герпетическая инфекция приводит к иммунной недостаточности с нарушением интерферонообразования. По данным ВОЗ из всех известных герпесвирусов чаще у детей встречаются ЦМВ, ВЭБ, ВПГ 1-го, 2-го и 6-го типов. После попадания вируса в кровеносную систему происходит инфицирование лимфоцитарных клеток, что способствует развитию иммунных нарушений. Из анамнестических данных при герпесвирусной инфекции наиболее существенными представляются острые респираторные заболевания, в том числе аллергический ринит.

Также можно предположить, что хроническая экспозиция техногенных химических веществ и персистирующая гепертическая инфекция могут иметь общие механизмы развития аллергического ринита.

Выявление закономерностей формирования аллергического ринита, ассоциированного с комплексным влиянием техногенных химических веществ атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции, может быть использовано для разработки патогенетически обоснованных профилактических мероприятий с целью минимизации риска развития и прогрессирования аллергических хронических заболеваний дыхательной системы.

Из уровня техники известен ряд технических решений, обеспечивающих диагностику аллергического ринита. Из сведений интернета (http://medportal.ru/enc/otolaryngology/rhinit/4/) известно, что для диагностики хронического ринита и определения причины его возникновения выполняют эндоскопическое обследование - риноскопию, а если есть гнойные выделения, то рентгенографию или компьютерную томографию околоносовых пазух. Также проводят лабораторную диагностику: общий и биохимический анализ крови, общий анализ мочи, при подозрении на аллергическую природу заболевания - определение иммуноглобулинов в крои и внутрикожные аллергические тесты.

Однако этот известный способ является недостоверным при выполнении диагностики хронического аллергического ринита у детей, проживающих в условиях хронического воздействия химических токсикантов, т.к. не принимается во внимание их токсическое действие.

Из Патента РФ №2249429 известен способ дифференциальной диагностики круглогодичного аллергического ринита и вазомоторного ринита. Согласно этому способу, методом лазерной допплеровской флоуметрии изучают реакцию на стимуляцию симпатической иннервации микроциркуляции крови слизистой оболочки полости носа и кожи тыльной стороны левого предплечья путем сравнения конфигураций лазерных допплеровских флоуграмм, снятых во время проведения дыхательной пробы со слизистой оболочки нижней носовой раковины полости носа и с кожи тыльной стороны левого предплечья. Если конфигурация лазерной допплеровской флоуграммы, снятой со слизистой оболочки нижней носовой раковины полости носа, отлична от нормальной и от конфигурации лазерной допплеровской флоуграммы, снятой с кожи тыльной стороны левого предплечья, то считают, что у больного вазомоторный ринит. Если конфигурация лазерной допплеровской флоуграммы, снятой со слизистой оболочки нижней носовой раковины полости носа, нормальная или схожа с конфигурацией лазерной допплеровской флоуграммы, снятой с кожи тыльной стороны левого предплечья, то считают, что у больного круглогодичный аллергический ринит.

Недостатком указанного известного способа является то, что проводится регистрация лазерных допплеровских флоуграммы во время проведения дыхательной пробы (задержки дыхания на 15 секунд на высоте вдоха) со слизистой оболочки нижней носовой раковины полости носа, что затрудняет проведение такого обследования у детей дошкольного возраста.

Также известен способ дифференциальной диагностики круглогодичного аллергического ринита и вазомоторного ринита, основанный на исследовании чувствительности к аллергенам путем проведения кожных проб (Клиническая иммунология и аллергология. Под ред. Г. Лолора-мл., Т. Фишера, Д. Адельмана. Пер. с английского. - М., Практика, 2000. - 806 с.).

Недостатком этого способа является возможность провоцирования аллергических реакций и дополнительной сенсибилизации организма. А также кожные пробы имеют ограниченность в связи с сезонностью проведения, количества одновременного использования аллергенов. Затруднено проведение у детей до 5-6 лет.

Из Патента РФ №2513477 известен способ диагностики форм аллергического ринита. При реализации этого способа проводят эндоскопический осмотр полости носа. Участки слизистой оболочки нижней и средней носовой раковин полости носа очищают от слизи. Проводят исследование интенсивности флуоресценции слизистой оболочки полости носа при помощи ультрафиолетового импульсного лазера на молекулярном азоте. При показателях длин волн 440 нм и 560 нм определяют спектральный индекс F по логарифму отношения интенсивности флуоресценции при минимальной длине волны (440 нм) к интенсивности флуоресценции при максимальной длине волны (560 нм). При спектральном индексе F, равном 2,28±0,14, диагностируют круглогодичную форму аллергического ринита. При спектральном индексе F, равном 1,86±0,14, диагностируют сезонную форму аллергического ринита.

Однако, данный метод не учитывает этиологический фактор развития заболевания, а дает лишь возможность проведения дифференциальной диагностики сезонного и круглогодичного аллергического ринита. Данный способ обследования проводился у взрослых.

Известен способ диагностики аллергического ринита у детей (Патент РФ №2298187). Сущностью способа диагностики аллергического ринита у детей с бронхиальной астмой заключается в определении эндотоксина в плазме крови. При уровне эндотоксина в плазме 4,84 EU/мл и более диагностируют аллергический ринит. Использование способа позволяет повысить точность диагностики аллергического ринита у детей с бронхиальной астмой. Недостатком указанного способа является то, что диагностика проводится только у детей с бронхиальной астмой, при этом аллергический ринит утяжеляет ее течение и повышает уровень эндотоксина в плазме крови, что делает обследование недостаточно достоверным и точным.

Известен способ диагностики аллергического ринита, который заключается в том, что больным в период ремиссии проводят кожные тесты с атопическими аллергенами (prick, скарификационные), а также дополнительные аллергологические и иммунологические исследования: проведение провокационных назальных тестов, определение общего сывороточного IgE, определение специфических IgE в сыворотке крови, определение IgA, IgM, IgG (Л.В. Лусс. «Этиология, патогенез, проблемы диагностики и лечения аллергического ринита», РМЖ, Том 11, №12, 2003).

Также известен способ диагностики аллергического круглогодичного ринита, который проводится путем кожного тестирования, провокационных назальных тестов, а также акустической ринометрии, ультразвукового исследования полости носа, исследования полости носа с помощью тепловизора, исследования содержания гистамина и других медиаторов в назальном секрете, содержания специфических аллергических антител, иммуноглобулина Е в назальном секрете, а также выделение и исследование субпопуляций лимфоцитов (Н.И. Ильина, С.А. Польнер. «Круглогодичный аллергический ринит» Consilium medicum, Том 3/N8/2001).

Недостатками этих известных способов является то, что имеются особенности интерпретации и диагностические ограничения общего IgE: примерно 30% больных атопическими заболеваниями имеют уровень общего IgE в пределах значений нормы. Некоторые больные бронхиальной астмой, аллергическим ринитом, атопическим дерматитом могут иметь повышенную чувствительность только к одному аллергену (антигену), в результате чего общий IgE может быть в пределах нормы, в то время как кожная проба и специфический IgE будут положительными. Т.е. указанные известные способы не обладают необходимой точностью.

Из патента РФ №2724881 известен способ оценки прогноза развития у детей, имеющих диагноз аллергический ринит, сопутствующей ей коморбидной патологии в виде расстройства вегетативной нервной системы в условиях многокомпонентного загрязнения атмосферного воздуха взвешенными веществами, металлами и формальдегидом на территории, где проживают дети. Для этого в пробе крови определяют содержание химических соединений: марганца, ванадия, формальдегида, а в атмосфере территории, где проживают дети, определяют содержание взвешенных частиц. При превышении содержания марганца, ванадия и формальдегида в крови по сравнению с референтным количеством не менее чем в 1,5 раза и при наличии содержания взвешенных частиц в атмосферном воздухе территории, где проживают дети, не менее чем 1,1 предельно-допустимой концентрации, проводят определение лабораторных и функциональных показателей. При этом в качестве лабораторных показателей определяют содержание глутатион-S-трансферазы в крови, а в качестве функциональных показателей определяют уровень соотношение индекса напряжения в клиноортостатической пробе к исходному индексу напряжения (ИН2/ИН1) и суммарную общую скорость носового потока с обеих сторон (СОП). При снижении уровня глутатион-S-трансферазы в крови ниже 99 нг/мл, повышении уровня показателя ИН2/ИН1 выше 3,3 у.е., снижении уровня показателя СОП ниже 450 см³/с, оценивают прогноз развития сопутствующей аллергическому риниту коморбидной патологии как высокий. Однако данный известный способ не позволяет точно диагностировать заболевание аллергическим ринитом при наличии у ребенка герпес-вирусной инфекции.

Из патента РФ №2616530 известен способ диагностики аллергического ринита у детей, ассоциированного с токсическим действием формальдегида техногенного происхождения. Сущность способа: производят отбор пробы крови у ребенка и устанавливают в ней содержание формальдегида, при его концентрации в крови в 2 и более раз выше фонового уровня выполняют риноманометрию по установлению суммарного объемного потока и суммарного сопротивления. Также проводят лабораторное обследование для установления следующих лабораторных диагностических показателей: эозинофильно-лимфоцитарный индекс; уровень иммуноглобулина Е IgE; уровень IgE специфического к формальдегиду; уровень иммуноглобулина A IgA; фагоцитарное число; фагоцитарный индекс; уровень гидроперекиси липидов; уровень малонового диальдегида МДА в плазме крови; антиоксидантная активность сыворотки АОА крови. При установлении у ребенка увеличения по сравнению с нормой суммарного объемного потока на 50% и снижения суммарного сопротивления на 25%, при одновременном наличии следующих отклонений в лабораторных диагностических показателях, а именно: превышение относительно физиологической возрастной нормы эозинофильно-лимфоцитарного индекса более чем в 1,3 раза; уровня IgE более чем 1,5 раза; фагоцитарного числа более чем в 1,3 раза; гидроперекиси липидов более чем в 1,2 раза; уровня МДА в 1,2 и более раз, и снижение относительно физиологической возрастной нормы уровня IgA на 15% и более; фагоцитарного индекса более чем в 1,2 раза; уровня АОА более чем в 1,3 раза, при одновременном наличии IgE специфического к формальдегиду, диагностируют у ребенка аллергический ринит, ассоциированный с токсическим действием формальдегида техногенного происхождения, причем диагностируют в том случае, если указанные отклонения результатов риноманометрии и лабораторных диагностических показателей присутствуют у ребенка в количестве не менее 2/3 вышеуказанных отклонений.

Указанный известный способ является достаточно точным, однако в нем отсутствуют критерии диагностики аллергического ринита при оценке сочетанного влияния на ребенка расширенного ряда компонентов вредных химических веществ и одновременно герпес-вирусной инфекции.

При этом из уровня техники не были выявлены известные способы диагностики у детей аллергического ринита, ассоциированного с сочетанным воздействием как химических факторов атмосферного воздуха, так и персистирующей герпес-вирусной инфекции, поэтому сделать выбор ближайшего аналога к заявляемому объекту не представляется возможным.

Технический результат, достигаемый предлагаемым изобретением, заключается в создании информативного и доказательного способа диагностики у детей аллергического ринита, ассоциированного с сочетанным воздействием вредных химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции для возможного прогнозирования в дальнейшем развития аллергического ринита у детей, страдающих заболеванием герпетической инфекции и проживающих в неблагоприятной экологической обстановке.

Поставленный технический результат достигается предлагаемым способом диагностики у детей аллергического ринита, ассоциированного с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции, согласно которому производят отбор пробы крови у ребенка, в анамнезе которого имеется диагноз - персистирующая герпес-вирусная инфекция, устанавливают в пробе крови содержание бензола, формальдегида, марганца, хрома и никеля, определяют у ребенка функциональные и лабораторные показатели, выполняющих роль диагностических маркеров, при этом в качестве функциональных показателей определяют: методом кардиоинтервалографии показатель моды (Мо), показатель амплитуды моды (АМо), индекс напряжения (ИН1) и соотношение индекса напряжения в клиноортостатической пробе к индексу напряжения в исходном состоянии (ИН2/ИН1), методом ультразвукового исследования определяют наличие реактивной гиперплазии лимфоузлов верхней яремной группы; а в качестве лабораторных показателей определяют: содержание абсолютного количества СD56⁺-лимфоцитов, содержание интерлейкинов ИЛ-4 и ИЛ-6, уровень прямого билирубина, уровень общей железосвязывающей способности (ОЖСС), уровень иммуноглобулина Е (IgE) общего, и уровень IgE специфического к марганцу, никелю, формальдегиду и IgG специфического к бензолу, и при содержания в крови ребенка уровня бензола не менее, чем в 1,1 раза выше референтного уровня, равного 0 мг/дм³, уровня формальдегида не менее, чем в 1,1 раза выше референтного уровня, равного 0,0076 мг/дм³, уровня марганца не менее, чем в 1,1 раза выше референтного уровня, равного 0,017 мг/дм³, уровня хрома не менее, чем в 1,1 раза выше референтного уровня, равного 0,0047 мг/дм³ и уровня никеля не менее, чем в 1,1 раза выше референтного уровня, равного 0,0043 мг/дм³, при одновременном наличии совокупности следующих показателей: уровня показателя Мо в пределах 0,705-0,860 сек; уровня показателя АМо в пределах 24,40-39,10%; показателя ИН1 в пределах 34,50-87,10 у.е.; соотношения ИН2/ИН1 в пределах 1,55-3,55 у.е.; наличия реактивной гиперплазии лимфоузлов верхней яремной группы; содержания абсолютного количества CD56+-лимфоцитов в пределах 0,306-0,368* 10⁹/дм³; уровня ИЛ-4 в пределах 1,99-3,57 пг/см³, ИЛ-6 в пределах 0,90-2,19 пг/см³; уровня прямого билирубина в пределах 5,50-6,08 мкмоль/дм³; уровня ОЖСС в пределах 62,0-67,74 мкмоль/дм³; уровня IgE общего в пределах 124,66-205,18 МЕ/см³; и при наличие в крови IgE специфического к формальдегиду, марганцу, никелю и IgG специфического к бензолу, диагностируют у ребенка наличие аллергического ринита, ассоциированного с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции.

Указанный технический результат достигается за счет следующего:

- использования совокупности диагностических маркеров, через определение функциональных и лабораторных показателей;

- применения при реализации предлагаемого способа расширенной системы взаимосвязей диагностических показателей между собой и их взаимосвязи с химическими соединениями, представляющими опасность для развития аллергического ринита, а также с наличием у ребенка герпес-вирусной инфекции.

Для выявления особенностей и закономерностей формирования у детей аллергического ринита, ассоциированного с одновременным влиянием техногенных химических факторов и герпес-вирусной инфекции, оценивались причинно-следственные связи, полученные с помощью методов статистического анализа.

При проведении моделирования методом регрессионного анализа оценку адекватности и достоверности моделей осуществляли с помощью однофакторного дисперсионного анализа по величине критерия Фишера (F) с 95% уровнем значимости, коэффициенту детерминации (R²) и t-критерию Стьюдента для уровня значимости р≤,05.

Для понимания существа вопроса, следует пояснить, что проблема оценки влияния промышленного загрязнения окружающей среды на здоровье детского населения является актуальной для многих стран мира, в том числе и для России. Детская популяция представляет собой группу высокого риска, так как дети имеют ряд физиологических особенностей, характеризуются наличием критических периодов развития, большей чувствительностью к влиянию токсичных веществ.

Принимаемые во внимание при реализации предлагаемого способа герпес-ассоциированные заболевания входят в число наиболее распространенных и плохо контролируемых инфекций человека. После попадания вируса в эпителий слизистой ротоглотки и верхних дыхательных путей происходит заражение лимфоцитов. Первичная ВЭБ-инфекция протекает бессимптомно и только в ряде случаев может проявляться как инфекционный мононуклеоз. При этом на ранних этапах инфицирования возможно инфицирование Т- и NK-клеток с развитием хронической ВЭБ-инфекции с персистенцией вируса в лимфоцитах на протяжении всей жизни. Способность ВЭБ к персистенции, несмотря на высокую иммуногенность, указывает на то, что вирус выработал механизм ускользания от иммунного ответа.

Негативное влияние аэрогенных химических веществ техногенного происхождения приводит к развитию иммуноаллергических реакций, являющихся основой хронических воспалительных заболеваний органов дыхания.

Длительное низкоуровневое воздействие техногенных химических соединений атмосферного воздуха и наличие персистирующей герпесвирусной инфекции приводит к дисбалансу окислительных процессов и антиоксидантной защиты на клеточном уровне, развитию гиперпластических и иммуноаллергических воспалительных процессов в слизистой оболочке дыхательных путей, нарушению вегетативной и иммунной регуляции, что способствует формированию хронической патологии дыхательной системы и в результате к аллергическому риниту.

Маркерными показателями при развитии аллергического ринита в условиях сочетанного воздействия химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции являются повышение содержания абсолютного количества СD56⁺-лимфоцитов, уровней ИЛ-4, ИЛ-6, прямого билирубина, ОЖСС, IgE общего, IgE специфического к марганцу, никелю и формальдегиду, IgG специфическому к бензолу, показателей Мо, АМо, ИН1, ИН2/ИН1, увеличение размеров лимфоузлов верхней яремной группы (R²=0,173-0,845; 37,578≤F≤532,104; р=0,0001) и снижение показателя ИН1 (R²=0,515; F=l44,349; р=0,0001).

Таким образом, в результате проведенного последовательного моделирования «химический фактор/маркер герпесвируса-»индикаторный показатель-»заболевание» установлены вероятности развития у детей заболевания аллергический ринит, ассоциированного с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции.

Выявленные в результате исследований причинно-следственные связи обусловлены, на наш взгляд, следующим.

Определение показателей вариационной пульсометрии моды (Мо), амплитуды моды (АМо), индексов напряжения ИН1 и ИН2, а также их соотношения вызвано тем, что это позволяет учитывать регуляторные влияния вегетативной нервной системы и уровень функционирования центрального контура регуляции ритма сердца

Увеличение размеров лимфоузлов верхней яремной группы может быть обусловлено ответной реакцией лимфоидной ткани на воздействие герпетической инфекции.

Определение уровня прямого билирубина в пробе крови для целей диагностирования вызвано тем, что токсиканты обладают цитотоксическим действием, а также подвергаются биотрансформации в печени.

Изменение процессов обмена железа (индикаторные показатели: повышение ОЖСС, связанные с увеличением уровня металлов в крови) способствуют развитию тканевой гипоксии.

Определение иммунологических показателей и уровня ИЛ-4, ИЛ-6 в пробе крови для целей диагностирования вызвано тем, что токсиканты оказывают местное раздражающее действие на органы дыхания, угнетают иммунную систему, а хронические герпетические инфекции приводят к вторичной иммунной недостаточности.

Показатель абсолютного количества СD56⁺-лимфоцитов свидетельствует о длительной персистенции герпесвирусной инфекции в организме.

Выявленные индикаторные и маркерные показатели и закономерности формирования негативных эффектов могут служить научно-методическим обоснованием для разработки принципов и программ профилактики, направленных на снижение уровня распространенности у детей заболеваний аллергической природы, ассоциированных с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпесвирусной инфекции.

Благодаря расширению в предлагаемом способе диагностических информационных маркеров и будет обеспечена достоверность оценки влияния как указанных токсикантов, так и других факторов, на диагностику указанной патологии.

Исходя из вышеизложенного, можно сделать вывод, что поставленный технический результат обеспечивается за счет совокупности всех операций предлагаемого способа, их последовательности и режимов его реализации.

При реализации предлагаемого способа осуществляют следующие операции в нижеуказанной последовательности:

1. проводят отбор детей, проживающих на территории с неблагополучными условиями окружающей среды и в анамнезе которых имеется диагноз - персистирующая герпес-вирусная инфекция. Для последующих результатов проводили исследование (подтверждение у детей) маркеров герпесвирусов (вирус простого герпеса 1,2 типа - HHV1,2; вирус герпеса 6 типа - HHV6; вирус Эпштейна-Барр - EBV) в образцах биологического материала (кровь, буккальный эпителий) методами иммуноферментного анализа (ИФА) и полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени на приборе BioRADCFX 96 (Сингапур) в программе TaqMAN.

2. устанавливают в пробе крови содержание бензола, формальдегида, марганца, никеля и хрома. При этом химическо-аналитическое исследование содержания указанных элементов в крови проводили следующим образом:

- формальдегида в соответствии с методическими указаниями МУК 4.1.2111-06 «Измерение массовой концентрации формальдегида, ацетальдегида, пропионового альдегида, масляного альдегида и ацетона в пробах крови методом высокоэффективной жидкостной хроматографии»;

- ароматических углеводородов (бензола) - в соответствии с МУК 4.1.765-99 «Газохроматографический метод количественного определения ароматических углеводородов (бензол, толуол, этилбензол, о-,м-, п-ксилол) в биосредах (кровь)»;

- металлов (марганца, никеля, хрома) - в соответствии с МУК 4.1.3230-14 «Измерение массовых концентраций химических элементов в биосредах (кровь, моча) методом масс-спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой».

Критериями оценки концентраций химических соединений в биосредах детей служили региональные фоновые уровни содержания анализируемых соединений в крови детского населения, проживающего на экологически благополучных территориях

3. определяют у ребенка функциональные и лабораторные показатели, выполняющих роль диагностических маркеров:

- в качестве функциональных показателей определяют:

- показатели вариационной пульсометрии - моду (Мо), амплитуду мода (АМо), индекс напряжения ИН1 и ИН2 (определяли методом кардиоинтервалографии (КИГ) на компьютерном электрокардиографе «Поли-Спектр-8/ЕХ» (Нейрософт, Россия) с использованием кардиоритмографической программы по стандартной методике с оценкой показателей временного, спектрального анализов и вариационной пульсометрии по P.M. Баевскому);

- методом ультразвукового исследования (УЗИ) определяли реактивную гиперплазию лимфоузлов верхней яремной группы на аппарате экспертного класса «Vividiq» (GE Medical systems, Китай) с использованием линейного датчика (4,0-13,0 МГц);

4. определяют у ребенка лабораторные показатели: содержание прямого билирубина; иммунологические показатели: уровень абсолютного количества СD56⁺-лимфоцитов, содержание интерлейкина 4 (ИЛ-4), содержание интерлейкина 6 (ИЛ-6), уровень иммуноглобулина Е (IgE) общего, уровень IgE специфического к формальдегиду, марганцу, хрому, никелю, уровень специфического IgG к бензолу. При этом указанное клинико-лабораторное исследование выполнялось стандартными унифицированными методами с использованием следующего оборудования: автоматического гематологического анализатора DREW-3 (Biocode Hycel Holdings SAS, Франция), микроскопов «PrimoStar» (Zeiss, Германия), DM 1000 (Leica Microsystem, Германия), автоматического и полуавтоматического биохимических анализаторов Keylab (BPC+Biosed, Италия) и Humalyzer 2000 (Human GmbH, ФРГ), спектрофотометра ПЭ-5300 В (Экохим, Россия), анализатора электролитов крови Easy Lyte Calcium (Medica Corp, США), автоматического аппликатора SAS-lplusn окрашивателя SAS-2 (Helena, Великобритания), иммуноферментных анализаторов Infinite F50 и Sunrise (Тесап, Австрия), проточного цитометра FACS Calibur фирмы «Becton Dickinson» с универсальной программой Cell Quest PrO, прибора Bio RADCFX96 (Сингапур) в программе TaqMAN.

5. диагностируют у ребенка аллергический ринит, обусловленный сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции, в том случае, если ребенок одновременно характеризуется следующими маркерами:

- при наличии в крови антител к герпетической инфекции и при превышении содержания бензола, формальдегида, марганца, никеля и хрома в крови по сравнению с референтным количеством (оптимально - не менее, чем в 1,1 раза),

- при наличии совокупности следующих показателей:

- уровня показателя Мо в пределах 0,705-0,860 сек,

- уровня показателя АМо в пределах 24,40-39,10%,

- показателя ИН1 в пределах 34,50-87,10 у.е.,

- соотношения ИН2/ИН1 в пределах 1,55-3,55 у.е.;

- наличия реактивной гиперплазии лимфоузлов верхней яремной группы,

- содержания абсолютного количества СD56⁺-лимфоцитов в пределах 0,306-0,368 Ч09/дм³,

- уровня ИЛ-4 в пределах 1,99-3,57 пг/см³, ИЛ-6 в пределах 0,90-2,19 пг/см³;

- уровня прямого билирубина в пределах 5,50-6,08 мкмоль/дм³,

- уровня ОЖСС в пределах 62,0-67,74 мкмоль/дм³,

- уровня IgE общего в пределах 124,66-205,18 МЕ/см³,

- и при наличие в крови IgE специфического к формальдегиду, марганцу, никелю и IgG специфического к бензолу.

На основании полученных результатов делается вывод, что такой ребенок нуждается в дополнительном наблюдении и лечении.

Группу наблюдения составили 206 детей с заболеваниями органов дыхания, проживающих на территории с промышленными производствами Пермского края (50% мальчиков и 50% девочек; средний возраст 10,88±0,47 лет). Распределение по возрастным группам представлено в таблице 1.

В группу сравнения вошли 158 детей с респираторной патологией, проживающих на территории относительного благополучия Пермского края (55,06% мальчиков и 44,94% девочек; средний возраст 10,61±0,54 лет). Группы были сопоставимы по поло-возрастному составу (р=0,167-0,706).

В атмосферном воздухе на территории наблюдения определено превышение в 1,7 раза концентрации формальдегида и в 4,8 раза содержания марганца относительно референтных концентраций при хроническом ингаляционном воздействии (RfC_xp.) (р<0,05).

За период натурных наблюдений установлено, что на территории наблюдения среднеарифметические концентрации формальдегида были выше в 2,3 раза, марганца - в 3,9 раза, хрома - в 2,6 раза, никеля - в 1,3 раза, чем на территории сравнения (р<0,05). Содержание бензола в атмосферном воздухе на сравниваемых территориях не имело значимых различий.

Содержание в крови детей различных групп химических веществ, приведены в таблице 2.

Данные, приведенные в таблице 2, показывают, что в крови детей группы наблюдения содержание бензола в 1,6 раза превышает содержание в крови детей группы сравнения, никеля в 1,1 раза, марганца в 1,1 раза, формальдегида в 1,3 раза, хрома в 1,1 раза.

Данные о частоте встречаемости отклонений в диагностических маркерах у детей группы наблюдения и группы сравнения, а также об установленном относительном риске (OR) встречаемости диагностических маркеров и критериев, ассоциированных с воздействием химических элементов техногенного происхождения и наличием вирусной герпесной инфекции, приведены в таблице 3.

Результаты исследования, приведенные в таблице 3, показывают, что диагностируют у ребенка наличие аллергического ринита, ассоциированного с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции, в том случае, если ребенок одновременно характеризуется следующими обстоятельствами: - при наличии в крови антител к герпетической инфекции и при содержании в крови ребенка бензола, формальдегида, марганца, хрома и никеля выше референтного уровня,

- при одновременном наличии совокупности следующих показателей:

- уровня показателя Мо в пределах 0,705-0,860 сек,

- уровня показателя АМо в пределах 24,40-39,10%,

- показателя ИН1 в пределах 34,50-87,10 у.е.,

- соотношения ИН2/ИН1 в пределах 1,55-3,55 у.е.;

- наличия реактивной гиперплазии лимфоузлов верхней яремной группы,

- содержания абсолютного количества СD56⁺-лимфоцитов в пределах 0,306-0,3 68 -10⁹/дм³,

- уровня ИЛ-4 в пределах 1,99-3,57 пг/см³, ИЛ-6 в пределах 0,90-2,19 пг/см³;

- уровня прямого билирубина в пределах 5,50-6,08 мкмоль/дм3,

- уровня ОЖСС в пределах 62,0-67,74 мкмоль/дм³,

- уровня IgE общего в пределах 124,66-205,18 МЕ/см³,

- и при наличие в крови IgE специфического к формальдегиду, марганцу, никелю и IgG специфического к бензолу.

Причинно-следственная связь указанных диагностических критериев заболеваний носоглотки с химическими элементами в крови ребенка и с наличием вирусно-герпесной инфекцией дополнительно подтверждается результатами, приведенными в таблицах 4-6 (результаты для детей группы наблюдения).

Таким образом, данные, приведенные в таблицах 2-6, являются доказательствами того, что предлагаемым способом у детей, страдающих вирусно-герпесной инфекцией и в крови которых имеются в наличии указанные вредные химические элементы, превышающие референтную концентрацию, действительно верно будет поставлен диагноз наличия аллергического ринита.

Ниже приводим пример двух пациентов из группы наблюдения, которым поставлен диагноз аллергический ринит.

Пример 1.

Больной А., 6,5 лет, проживающий на территории промышленного центра, с диагнозом «Аллергический круглогодичный ринит, персистирующее течение».

Жалобы: на длительную заложенность носа, обильное слизистое отделяемое и повторные простудные заболевания (более 5 раз в год).

При проведении клинико-лабораторного обследования выявлено наличие в крови HSV1,2 IgG - 1,93 у.е., EBV-NA IgG - 131,99 у.е. По данным химико-аналитического исследования содержание бензола в крови составило 0,0014 мг/дм³, формальдегида - 0,012 мг/дм³, марганца - 0,014 мг/дм³, хрома - 0,0055 мг/дм³, никеля - 0,0156 мг/дм³. В биохимическом анализе крови уровень прямого билирубина составил 5,52 мкмоль/дм³, ОЖСС - 63,4 мкмоль/дм³. Иммунологическое обследование показало, что абсолютный количество СD56⁺-лимфоцитов было 0,334* 10⁹/дм³, уровень ИЛ-4 - 2,24 пг/см³, ИЛ-6 - 1,2 пг/см³, IgE общего выше 127,3 МЕ/см³, выявлены в крови IgE специфического к формальдегиду (0,187 МЕ/см³), марганцу (1,41 МЕ/см³), никелю (0,78 МЕ/см3) и IgG специфического к бензолу (0,763 у.е.).

При проведении вариационной пульсометрии показала у ребенка наличие ваготонического исходного вегетативного тонуса и асимпатикотонической вегетативной реактивности, при этом показатель Мо составил 0,75 сек, АМо - 29,9%, ИН1 - 38 у.е., ИН2/ИН1 - 0,764 у.е.

При проведении ультразвуковой диагностики выявлены признаки реактивной гиперплазии югуло-дигастрального лимфоузла верхней яремной группы.

В данном случае, у пациента были выявлены отклонения как функциональных, так и лабораторных показателей, которые предлагается использовать как диагностические критерии в заявляемом способе. Таким образом, была доказана достоверность и точность предлагаемого способа.

Пример 2.

Больной В., 12 лет, проживающий на территории с многокомпонентным загрязнением атмосферного воздуха техногенными химическими веществами, с диагнозом «Аллергический круглогодичный ринит, персистирующее течение».

Жалобы: на периодическую заложенность носа, эпизоды чихания, обильное прозрачное отделяемое из носа.

При проведении клинико-лабораторного обследования выявлено наличие в крови HSV1,2 IgG - 5,73 у.е., EBV-NA IgG - 99,69 у.е. По данным химико-аналитического исследования содержание бензола в крови составило 0,0025 мг/дм³, формальдегида - 0,009 мг/дм³, марганца - 0,0165 мг/дм³, хрома - 0,0088 мг/дм³, никеля - 0,0042 мг/дм³. В биохимическом анализе крови уровень прямого билирубина составил 5,54 мкмоль/дм³, ОЖСС - 64,1 мкмоль/дм³. Иммунологическое обследование показало, что абсолютный количество СD56⁺-лимфоцитов было 0,344⋅10⁹/дм³, уровень ИЛ-4 - 3,25 пг/см³, ИЛ-6 - 2,1 пг/см3, IgE общего выше 126,96 МЕ/см³, выявлены в крови IgE специфического к формальдегиду (0,414 МЕ/см³), марганцу (0,201 МЕ/см³), никелю (0,135 МЕ/см3) и IgG специфического к бензолу (0,62 у.е.).

При проведении вариационной пульсометрии показала у ребенка наличие эйтонического исходного вегетативного тонуса и нормальной вегетативной реактивности, при этом показатель Мо составил 0,75 сек, АМо - 36,5%, ИН1 - 86 у.е., ИН2/ИН1 - 1,58 у.е.

При проведении ультразвуковой диагностики выявлены признаки реактивной гиперплазии югуло-дигастрального лимфоузла верхней яремной группы.

В данном случае, у пациента были выявлены отклонения как функциональных, так и лабораторных показателей, которые предлагается использовать как диагностические критерии в заявляемом способе. Таким образом, была доказана достоверность и точность предлагаемого способа.

Предлагаемый способ рекомендуется применять с целью выявления контингента детей, в отношении которых необходимо осуществление дополнительной специализированной лечебной и профилактической программы.

Разработанный способ диагностики позволяет получить достоверные и точные данные, не требует дефицитных реактивов, прост в исполнении, экономичен и не имеет противопоказаний.

Способ диагностики у детей аллергического ринита, ассоциированного с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции, характеризующийся тем, что производят отбор пробы крови у ребенка, в анамнезе которого имеется диагноз - персистирующая герпес-вирусная инфекция, устанавливают в пробе крови содержание бензола, формальдегида, марганца, хрома и никеля, определяют у ребенка функциональные и лабораторные показатели, выполняющие роль диагностических маркеров, при этом в качестве функциональных показателей определяют: методом кардиоинтервалографии показатель моды (Мо), показатель амплитуды моды (АМо), индекс напряжения (ИН1) и соотношение индекса напряжения в клиноортостатической пробе к индексу напряжения в исходном состоянии (ИН2/ИН1), методом ультразвукового исследования определяют наличие реактивной гиперплазии лимфоузлов верхней яремной группы; а в качестве лабораторных показателей определяют: содержание абсолютного количества CD56⁺-лимфоцитов, содержание интерлейкинов ИЛ-4 и ИЛ-6, уровень прямого билирубина, уровень общей железосвязывающей способности (ОЖСС), уровень иммуноглобулина Е (IgE) общего, и уровень IgE специфического к марганцу, никелю, формальдегиду и IgG специфического к бензолу, и при содержании в крови ребенка уровня бензола не менее чем в 1,1 раза выше референтного уровня, равного 0 мг/дм³, уровня формальдегида не менее чем в 1,1 раза выше референтного уровня, равного 0,0076 мг/дм³, уровня марганца не менее чем в 1,1 раза выше референтного уровня, равного 0,017 мг/дм³, уровня хрома не менее чем в 1,1 раза выше референтного уровня, равного 0,0047 мг/дм³, и уровня никеля не менее чем в 1,1 раза выше референтного уровня, равного 0,0043 мг/дм³, при одновременном наличии совокупности следующих показателей: уровня показателя Мо в пределах 0,705-0,860 сек; уровня показателя АМо в пределах 24,40-39,10%; показателя ИН1 в пределах 34,50-87,10 у.е.; соотношения ИН2/ИН1 в пределах 1,55-3,55 у.е.; наличия реактивной гиперплазии лимфоузлов верхней яремной группы; содержания абсолютного количества CD56⁺-лимфоцитов в пределах 0,306-0,368⋅10⁹/дм³; уровня ИЛ-4 в пределах 1,99-3,57 пг/см³, ИЛ-6 в пределах 0,90-2,19 пг/см³; уровня прямого билирубина в пределах 5,50-6,08 мкмоль/дм³; уровня ОЖСС в пределах 62,0-67,74 мкмоль/дм³; уровня IgE общего в пределах 124,66-205,18 МЕ/см³; и при наличии в крови IgE специфического к формальдегиду, марганцу, никелю и IgG специфического к бензолу диагностируют у ребенка наличие аллергического ринита, ассоциированного с сочетанным воздействием химических факторов атмосферного воздуха и персистирующей герпес-вирусной инфекции.