Изобретение относится к новым соединениям С-маннозида формулы I или их фармацевтически приемлемым солям, которые обладают ингибирующей активностью в отношении FimH. В формуле I R₁ представляет собой CH₃ или CF₃; R₂ представляет собой H; R₃ представляет собой F; R₄ представляет собой CH₃, Cl, Br, винил, CF₃, F или H; R₅ представляет собой F или H; и R₆ представляет собой H. Изобретение относится также к фармацевтической композиции, в том числе, для местного и перорального введения, содержащей соединение формулы I, способу ингибирования функции FimH и способу лечения FimH-опосредуемого заболевания. 6 н. и 22 з.п. ф-лы, 2 табл., 110 пр.

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Настоящее изобретение относится к новым соединениям и композициям C-маннозида и их применению в качестве фармацевтических средств для лечения заболеваний человека. Изобретение также относится к способам ингибирования активности FimH у пациента, который является человеком, для лечения заболеваний, таких как инфекция мочевыводящих путей.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Инфекция мочевыводящих путей (ИМП) является одним из наиболее распространенных инфекционных заболеваний у женщин. Распространенность заболевания и экономические последствия являются колоссальными: ежегодно на лечение тратится более 2,5 млрд долларов США. Кроме того, несмотря на соответствующую антибиотикотерапию при первичном случае инфицирования, значительной проблемой являются рецидивирующие инфекции. У женщин с первичным эпизодом ИМП в течение шести месяцев после первичного эпизода вероятность развития второго эпизода составляет 25-44%, а вероятность развития третьего - 3%. Кроме того, у уропатогенов быстро развивается резистентность к антибиотикам, обычно назначаемым для лечения или профилактики ИМП, что усиливает потребность в новых терапевтических средствах, снижающих потребность применения антибиотиков и обладающих высокой эффективностью.

Более 85% ИМП вызывается уропатогенной кишечной палочкой Escherichia coli (uropathogenic Escherichia coli - UPEC). Грамм-отрицательные бактерии, такие как UPEC, являются возбудителями широкого спектра острых и хронических инфекционных заболеваний. Многие из этих инфекций инициируются критическим взаимодействием между лигандами-хозяевами (которые часто представляют собой полисахаридные фрагменты) и бактериальными адгезинами (которые часто экспрессируются на дистальном конце полимерных волокон фимбрии, собранных с помощью метаболического пути шаперон-ашер). Животные модели ИМП показали, что манноза-связывающий адгезин FimH фимбрий типа 1 имеет решающее значение для колонизации и инвазии в эпителий мочевого пузыря UPEC, а также других уропатогенных представителей семейства энтеробактерий (Enterobacteriaceae), таких как бактерии видов Klebsiella, Enterobacter и Citrobacter.

Фимбрии типа 1 закреплены на внешней мембране бактерий и в значительной степени состоят из повторяющихся субъединиц белка FimA, образующих спирально скрученный цилиндр, который включает толстый стержень фимбрия. Дистальный белок адгезина FimH соединен со стержнем фимбрия гибкой концевой фибриллой, которая состоит из одной копии каждого из FimF и FimG. Белок FimH адгезинового кончика представляет собой двухдоменный белок, состоящий из домена пилина (FimHP), который позволяет ему встраиваться в пилус, и домена лектина (FimHL), который содержит консервативный карман для связывания маннозы. Рентгеноструктурный анализ FimH, связанного с маннозой, показал, что манноза связывается в отрицательно заряженном кармане на FimH. Сайт связывания маннозы является высококонсервативным, поскольку является инвариантным в 300 генах fimH, секвенированных из клинических штаммов UPEC. Считается, что именно взаимодействие FimH с маннозилированными белками-хозяевами опосредует колонизацию нижних мочевыводящих путей UPEC и другими бактериями семейства Enterobacteriaceae во время ИМП.

Для выяснения молекулярных деталей патогенеза UPEC было создано несколько мышиных моделей инфекций, которые воспроизводят многие клинические проявления, часто наблюдаемые у людей. Эти модели включают острые инфекции UPEC, хронические и/или рецидивирующие инфекции и катетер-ассоциированные ИМП. Было показано, что во всех этих моделях FimH ангезина играет важную роль в патогенезе, что делает его превосходной терапевтической мишенью. Считается, что фундаментальное взаимодействие между FimH и хозяином происходит при связывании с гликанами с высоким содержание маннозы, такими как уроплакины и другие белки, экспрессированные на поверхности эпителиальных клеток мочевого пузыря, которые покрывают его внутреннюю поверхность. Это начальное связывание обеспечивает бактериальную колонизацию эпителия мочевого пузыря и инвазию бактерий в эпителиальные клетки мочевого пузыря. После интернализации даже единственная бактерия, которая проникает в цитоплазму клетки-хозяина, может быстро реплицироваться и прогрессировать с образованием внутриклеточного бактериального сообщества (intracellular bacterial community - IBC), подобного биопленке. После достижения зрелости эти сообщества могут распределяться и покидать клетку, образуя нити для предотвращения фагоцитоза нейтрофилов. Затем эти нитеобразные бактерии могут продолжать инфицировать соседние клетки, снова инициируя образование IBC и патогенный цикл. Важно отметить, что доказательства наличия IBC и бактериальных нитей наблюдались в моче женщин, страдающих острой ИМП, что подтверждает достоверность мышиной модели в воспроизведении болезни человека.

В отличие от ИМП, которая в основном опосредуется бактериальным патогеном, заболевание, выявленное у пациентов, страдающих идиопатическим воспалительным заболеванием кишечника (ВЗК), таким как болезнь Крона (БК) и язвенный колит (ЯК), является результатом сложного взаимодействия между генетически восприимчивым хозяином, неправильно функционирующей иммунной системой и микробным компонентом. Исследование ткани, полученной биопсией у пациентов, страдающих БК и ЯК, выявило значительное повышение содержания E. coli, связанной со слизистой оболочкой кишечника. Анализ этих бактерий привел к открытию особого патотипа, известного как адгезивная и инвазивная E. coli (adherent и invasive E. сoli - AIEC), хотя часть этих штаммов геномно сходна с UPEC. Изучение AIEC и их предполагаемой роли в БК и ЯК стало предметом ряда исследований, проведенных несколькими независимыми группами, изучающими кишечную микробиоту у пациентов с ВЗК. Эта работа предоставила существенные доказательства чрезмерного роста AIEC у пациентов с подвздошнокишечной БК и менее убедительные данные для других подтипов ВЗК, включая ЯК, БК толстой кишки и тонкотолстокишечную БК. Анализ илеальных энтероцитов, выделенных у пациентов с БК, выявил аномальную экспрессию рецептора-хозяина гликопротеина семейства раково-эмбриональных антигенов (carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 6 - CEACAM6), который является высокоманнозилированным и, как было показано, способствует связыванию AIEC с этими клетками через фимбрии 1 типа. Интересно, что адгезия и инвазия AIEC в эпителиальные клетки кишечника приводит к повышенной экспрессии рецептора CEACAM6, позволяя сделать предположение о том, что AEIC могут способствовать собственной колонизации подвздошной кишки у пациентов с БК. Использование трансгенной мыши, экспрессирующей кластер генов человека семейства раково-эмбриональных антигенов (сatcino-embryonic antigens - CEA), включая CEACAM6, приводит к повышению колонизации AIEC, которая приводит к проявлению многих клинических симптомов БК, включая тяжелый колит, потерю массы тела, а также к снижение выживаемости в этой модели. Кроме того, эти симптомы могут полностью устраняться введением антитела против CEACAM6 или генетической делецией FimH в бактериальной линии, демонстрируя прямую связь между распознаванием CECAM6 FimH и развитием заболевания. Таким образом, терапевтические средства, действие которых направлено на FimH среди AIEC, могут быть очень полезны в облегчении симптомов у пациентов с БК.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к новым соединениям и фармацевтическим композициям, которые, как было установлено, ингибируют FimH, а также к способам синтеза и применения указанных соединений, включая способы лечения пациентов с заболеваниями, опосредуемыми FimH, введением указанных соединений.

Точнее, в одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы I или его фармацевтически приемлемой соли:

где

R₁ представляет собой CH₃, CF₃ или Cl;

R₂ представляет собой F, Cl, OR’ или H;

R₃, R₄ и R₅ независимо представляют собой H, F, Cl, Br, C_3-6циклоалкил, OR’, -N(C_1-6 алкил)₂, C_2-6 алкенил, C_2-6 алкинил, C_1-6 алкил (необязательно замещенный и содержащий в качестве заместителей до семи атомов фтора, не более одной гидроксильной группы, не более одной группы -N(C_1-6 алкил)₂ и не более одной группы -OC_1-6 алкил); при условии, что не все R₃, R₄ и R₅ одновременно представляют собой водород.

R₆ представляет собой H или F;

R’ независимо представляет собой H или C_1-6 алкил, необязательно замещенный и содержащий в качестве заместителей до семи атомов фтора.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения R₁ представляет собой CH₃ или CF₃.

В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения R₁ представляет собой CH₃.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения R₂представляет собой H.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения R₃ представляет собой F или CF₃.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения R₄ представляет собой CH₃, Cl, Br, винил, CF₃, F или H.

В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения R₄ представляет собой H.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения R₅ представляет собой F или H.

В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения R₅ представляет собой F.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения R₆ представляет собой H.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения R₁ представляет собой CH₃ или CF₃; R₂ представляет собой H; R₃ представляет собой F; R₄ представляет собой CH₃, Cl, Br, винил, CF₃, F или H; R₅ представляет собой F или H; и R₆ представляет собой H.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения соединение представляет собой (2R,3S,4S,5S,6R)-2-((R)-(3',5'-дифтор-3,4'-диметил-[1,1'-бифенил]-4-ил)(гидрокси)метил)-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2H-пиран-3,4,5-триол.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения соединение представляет собой (2R,3S,4S,5S,6R)-2-((R)-(4'-хлор-3',5'-дифтор-3-метил-[1,1'-бифенил]-4-ил)(гидрокси)метил)-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2H-пиран-3,4,5-триол.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения соединение представляет собой (2R,3S,4S,5S,6R)-2-((R)-(4'-бром-3',5'-дифтор-3-метил-[1,1'-бифенил]-4-ил)(гидрокси)метил)-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2H-пиран-3,4,5-триол.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения соединение представляет собой (2R,3S,4S,5S,6R)-2-((R)-(3',5'-дифтор-3-метил-4'-винил-[1,1'-бифенил]-4-ил)(гидрокси)метил)-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2H-пиран-3,4,5-триол.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения соединение представляет собой (2R,3S,4S,5S,6R)-2-((R)-(3'-фтор-3-метил-4'-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-4-ил)(гидрокси)метил)-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2H-пиран-3,4,5-триол.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения соединение представляет собой (2R,3S,4S,5S,6R)-2-((R)-(3'-фтор-3-метил-5'-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-4-ил)(гидрокси)метил)-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2H-пиран-3,4,5-триол.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения соединение представляет собой (2R,3S,4S,5S,6R)-2-((R)-гидрокси-3',4',5'-трифтор-3-метил-[1,1'-бифенил]-4-ил)метил)-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2H-пиран-3,4,5-триол.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения соединение представляет собой (2R,3S,4S,5S,6R)-2-((R)-(3',5'-дифтор-3-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-4-ил)(гидрокси)метил)-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2H-пиран-3,4,5-триол.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения соединение представляет собой (2R,3S,4S,5S,6R)-2-((R)-(3',5'-дифтор-3-метил-[1,1'-бифенил]-4-ил)(гидрокси)метил)-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2H-пиран-3,4,5-триол.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к применению в качестве лекарственного средства соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли.

В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для применения в терапии.

В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к применению соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли в лечении инфекции мочевыводящих путей (ИМП).

В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли для применения при заболевании или состоянии, которое облегчается ингибированием функции или активности FimH.

В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли для применения в лечении или предотвращении ИМП.

В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к применению соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли в производстве лекарственного средства для предотвращения или лечения заболевания или состояния, которое облегчается ингибированием функции или активности FimH.

В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, включающей соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль вместе с фармацевтически приемлемым носителем.

В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения FimH-опосредуемого заболевания, включающему введение терапевтически эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли пациенту-человеку, нуждающемуся в этом.

В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения бактериальной инфекции, болезни Крона (БК) или воспалительной болезни кишечника (ВБК) соединением формулы I или его фармацевтически приемлемой солью.

В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения инфекции мочевыводящих путей (ИМП), включающему введение терапевтически эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли пациенту-человеку, нуждающемуся в этом.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения указанная бактериальная инфекция представляет собой инфекцию мочевыводящих путей (ИМП).

В одном варианте осуществления настоящего изобретения указанная инфекция мочевыводящих путей является рецидивирующей.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения указанная инфекция мочевыводящих путей является хронической.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения указанная бактериальная инфекция представляет собой бактериальную инфекцию, резистентную к антибиотикам.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения указанное заболевание представляет собой болезнь Крона.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения указанное заболевание представляет собой воспалительную болезнь кишечника.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения указанная фармацевтическая композиция представляет собой композицию для перорального (ПО) введения.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения указанная композиция выбрана из таблетки и капсулы.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения представляет собой фармацевтическую композицию, изготовленную для местного введения.

В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится способу лечения заболевания, опосредуемого FimH, который включает стадию введения:

a. терапевтически эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли и

b. другого терапевтического средства.

В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к комбинации соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли и другого терапевтического средства.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Определения

Термин «C_1-6 алкил», когда используется в настоящем описании сам по себе или в сочетании, относится к алкильному радикалу с прямой или разветвленной цепью, содержащему от 1 до 6 атомов углерода. Примеры C_1-6 алкильных радикалов включают метил (Me), этил (Et), н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил, изоамил, гексил и т.п.

Термин «C_3-6 циклоалкил», когда используется в настоящем описании один или в сочетании, относится к насыщенной моноциклической алкильной группе, в которой каждый циклический фрагмент содержит в цикле от 3 до 6 атомов углерода. Примерами такой группы являются циклопропил (cPr), циклопентил (cPe), циклобутил (cBu) и циклогексил (cHex).

Термин «C_2-6 алкенил», когда используется в настоящем описании, относится к прямым или разветвленным углеводородным цепям, содержащим от 2 до 6 атомов углерода и по меньшей мере одну двойную углерод-углеродную связь. Примеры такой группы включают этенил (или этенилен) и пропенил (или пропенилен).

Термин «C_2-6 алкинил», когда используется в настоящем описании, относится к прямым или разветвленным углеводородным цепям, содержащим от 2 до 6 атомов углерода и по меньшей мере одну тройную углерод-углеродную связь. Примеры такой группы включают этинил (или этинилен) и пропинил (или пропинилен).

Термин «необязательно замещенная» означает, что предшествующая группа может быть замещенной или не замещенной группами, которые указаны далее. Например, «C_1-6алкил (необязательно замещенный и содержащий в качестве заместителей до семи атомов фтора, не более одной гидроксильной группы, не более одной группы -N(C_1-6 алкил)₂, и не более одной группы -OC_1-6а алкил)» включает такие группы, как -CF₃, -CF₂CF₃, -CH₂NMe, -CH₂OMe, -CHF₂, -CHOHMe и т.д.

Соединение формулы I может содержать асимметрические центры. Следует понимать, что настоящее изобретение включает соединения абсолютной конфигурации, которые представлены формулой I.

Вследствие возможного применения в медицине, указанные соли соединений формулы I представляют собой фармацевтически приемлемые соли. Таким образом, указанные соли представляют собой фармацевтически приемлемые соли. Термин «фармацевтически приемлемое» относится к тем соединениям (включая соли), материалам, композициям и лекарственным формам, которые с медицинской точки зрения являются подходящими для применения в контакте с тканями человека и животных без избыточной токсичности, раздражения и других проблем или осложнений при разумном соотношении «польза/риск». Подходящие фармацевтически приемлемые соли включают соли, описанные в публикации Bighley и Monkhouse в J. Pharm. Sci (1977) 66, pp. 1-19, или соли, указанные в справочнике P.H. Stahl and C.G. Wermuth, editors, Handbook of Pharmaceutical Salts; Properties, Selection and Use, Second Edition Stahl/Wermuth: Wiley- VCH/VHCA, 2011 (см. http://www.wiley.com/WileyCDA/WileyTitle/productCd-3906390519.html).

Когда соединение по настоящему изобретению представляет собой основание (содержит основной фрагмент), желаемая солевая форма может быть получена любым подходящим способом, известным в данной области техники, включая обработку свободного основания неорганической кислотой, такой как соляная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и т.п., или органической кислотой, такой как уксусная кислота, трифторуксусная кислота, малеиновая кислота, янтарная кислота, миндальная кислота, фумаровая кислота, малоновая кислота, пировиноградная кислота, щавелевая кислота, гликолевая кислота, салициловая кислота, пиранозидиловая кислота, такая как глюкуроновая кислота или галактуроновая кислота, альфа-гидроксикислота, такая как лимонная кислота или винная кислота, аминокислота, такая как аспарагиновая кислота или глутаминовая кислота, ароматическая кислота, такая как бензойная кислота или коричная кислота, сульфоновая кислота, такая как п-тололуолсульфоновая кислота, метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота или т.п. Примеры фармацевтически приемлемых солей включают сульфаты, пиросульфаты, бисульфаты, сульфиты, бисульфиты, фосфаты, хлориды, бромиды, йодиды, ацетаты, пропионаты, деканоаты, каприлаты, акрилаты, формиаты, изобутираты, капроаты, гептаноаты, пропиолаты, оксалаты, малонаты, сукцинаты, субераты, себакаты, фумараты, малеаты, бутин-1,4-диоаты, гексин-1,6-диоаты, бензоаты, хлорбензоаты, метилбензоаты, динитробензоаты, гидроксибензоаты, метоксибензоаты, фталаты, фенилацетаты, фенилпропионаты, фенилбутираты, цитраты, лактаты, гамма-гидроксибутираты, гликоляты, тартраты, манделаты и сульфонаты, такие как ксилолсульфонаты, метансульфонаты, пропансульфонаты, нафталин-1-сульфонаты и нафталин-2-сульфонаты.

Если основное соединение по настоящему изобретению выделено в форме соли, указанное соединение в форме свободного основания может быть получено любым подходящим способом, известным в данной области техники, включая обработку соли неорганическим или органическим основанием, где значение рKa подходящего неорганического или органического основания выше значения pKa соединения в форме свободного основания.

Когда соединение по настоящему изобретению представляет собой кислоту (содержит кислотный фрагмент), желаемая соль может быть получена подходящим способом, известным в данной области техники, включая обработку свободной кислоты неорганическим или органическим основанием, таким как амин (первичный, вторичный или третичный), гидроксидом щелочного или щелочно-земельного металла или т.п.. Типичные примеры подходящих солей включают органические соли, полученные из аминокислот, таких как глицин и аргинин, аммиака, первичных, вторичных и третичных аминов, а также циклических аминов, таких как этилендиамин, дициклогексилмин, этаноламин, пиперидин, морфолин и пиперазин, и неорганические соли, полученный из натрия, кальция, калия, магния, марганца, железа, меди, цинка, алюминия и лития.

Некоторые из соединений по настоящему изобретению могут образовывать соли с одним или несколькими эквивалентами кислоты (если соединение содержит основной фрагмент) или основания (если соединение содержит кислотный фрагмент). Настоящее изобретение включает все возможные стехиометрические и нестехиометрические формы солей.

Поскольку соединения по настоящему изобретению могут содержать как кислотные, так и основные фрагменты, фармацевтически приемлемые соли могут быть получены обработкой этих соединений основным реагентом или кислотным реагентом соответственно. Соответственно, настоящее изобретение также предусматривает превращение одной фармацевтически приемлемой соли соединения настоящего изобретения, например гидрохлоридной соли, в другую фармацевтически приемлемую соль соединения по настоящему изобретения, например натриевую соль или динатриевую соль.

Поскольку соединения по настоящему изобретению предназначены для использования в фармацевтических композициях, легко понять, что каждое из них предпочтительно предоставляется в по существу чистой форме, например в форме с чистотой по меньшей мере 60%, более приемлемо с чистотой меньшей мере 75%, предпочтительно с чистотой по меньшей мере 85%, особенно предпочтительно с чистотой по меньшей мере 98% (% из расчета на массу). Неочищенные препараты соединений могут использоваться для получения более чистых форм, применяемых в фармацевтических композициях.

Термин «комбинация» означает введение двух или более терапевтических средств для лечения терапевтического состояния или расстройства, описанного в настоящем изобретении. Такое введение включает совместное введение этих терапевтических средств по существу одновременно, например в одной капсуле с фиксированным соотношением активных ингредиентов, или в нескольких отдельных капсулах каждого активного ингредиента. Кроме того, такое введение также включает введение каждого терапевтического средства последовательно. В любом случае схема лечения обеспечит полезное воздействие комбинации лекарственных средств при лечении состояний или расстройств, описанных в настоящем документе.

Термин «ингибитор FimH» или «антагонист FimH» используется в описании для обозначения соединения, которое проявляет титр HAI (анализ ингибирования гемагглютинации) или EC>90 в отношении функции/активности FimH не более примерно 100 мкм, более типично не более примерно 50 мкм, как определено в анализе гемагглютинации FimH (HA), который в общем виде описан в настоящем изобретении. Термин «титр HAI или EC>90» означает концентрацию ингибитора/антагониста FimH, которая снижает бактериальную агглютинацию эритроцитов морской свинки более чем на 90%. Было обнаружено, что некоторые соединения, раскрытые в настоящем изобретении, проявляют ингибирование этой функции/активности FimH. В некоторых вариантах осуществления соединения будут демонстрировать EC>90 в отношении FimH не более чем примерно 10 мкм; в других вариантах осуществления соединения будут демонстрировать EC>90 в отношении FimH не более чем примерно 1 мкм; в других вариантах осуществления соединения будут демонстрировать EC>90 в отношении FimH не более примерно 250 нМ; в других вариантах осуществления соединения будут демонстрировать EC>90 в отношении FimH не более примерно 100 нМ; в других вариантах осуществления соединения будут демонстрировать EC>90 в отношении FimH не более примерно 50 нМ; в других вариантах осуществления соединения будут демонстрировать EC>90 в отношении FimH не более примерно 10 нМ, как определено измерено в анализе FimH, описанном в настоящем изобретении.

Фраза «терапевтически эффективный» предназначена для определения количества активных ингредиентов, используемых для лечения заболевания или расстройства или для воздействия на клиническую конечную точку.

Термин «лечить», когда используется в настоящем описании в отношении состояния, означает: (1) улучшение или предотвращение состояния или одного или нескольких биологических проявлений указанного состояния, (2) влияние на (а) одну или несколько точек в биологическом каскаде, который приводит к состоянию или отвечает за него, или (b) одно или несколько биологических проявлений состояния, (3) облегчение одного или несколько симптомов или эффектов, связанных с состоянием, или (4) замедление прогрессирования состояния или одного или нескольких биологических проявлений состояния.

Подразумевается, что термин «предотвращение» в отношении пациента, когда используется в настоящем описании, включает профилактику. Предотвращение заболевания может включать полную защиту от заболевания, например в случае предотвращения инфицирования патогеном, или может включать предотвращение прогрессирования заболевания. Например, предотвращение заболевания может не означать полное исключение какого-либо эффекта, связанного с заболеваниями, на любом уровне, но может означать предотвращение развития симптомов заболевания до клинически значимого или обнаруживаемого уровня. Предотвращение заболеваний может также означать предотвращение развития заболевания до его более поздней стадии развития.

Термин «пациент» обычно является синонимом термина «субъект» и включает всех млекопитающий, в том числе человека. Примеры пациентов включают людей, домашний скот, такой как коровы, козы, овцы, свиньи и кролики, а также животных-компаньонов, таких как собаки, кошки, кролики и лошади. Предпочтительно пациентом является человек.

Хотя соединения по настоящему изобретению могут вводиться в форме необработанного химического соединения, их также можно предоставить в виде фармацевтического препарата (альтернативно называемого фармацевтической композицией). Соответственно, в настоящем изобретении представлены фармацевтические препараты, которые включают одно или несколько определенных соединений, раскрытых в настоящем описании, или одну или несколько их фармацевтически приемлемых солей, сложных эфиров, пролекарств, амидов или сольватов вместе с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями и необязательно с одним или несколькими другими терапевтическими ингредиентами. Носитель(и) должен(должны) быть «терапевтически приемлемым(и)» в том смысле, что должен(должны) быть совместим(ыми) с другими ингредиентами препарата и не оказывать неблагоприятного воздействия на его реципиента. Подходящий препарат определяется выбранным способом введения. Любой из хорошо известных способов, носителей и эксципиентов может использоваться как подходящий и известный в данной области техники. Фармацевтические композиции, раскрытые в настоящем изобретении, могут производиться любым известным способом, например с помощью стандартного смешивания, растворения, гранулирования, получения драже, левигирования, эмульгирования, инкапсулирования, улавливания или прессования.

Указанные препараты включают препараты, подходящие для перорального, парентерального (включая подкожное, внутрикожное, внутримышечное, внутривенное, внутрисуставное и интрамедуллярное), внутрибрюшинного, трансмукозального, трансдермального, ректального, ингаляционного, интраназального и местного (включая кожное, буккальное, сублингвальное и внутриглазное) введения, хотя наиболее подходящий способ введения может зависеть, например, от состояния реципиента и его расстройства. Препараты могут быть удобно представлены в лекарственной форме стандартной дозы и могут быть получены любым из способов, хорошо известных в области фармации. Обычно эти способы включают стадию объединения соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли, сложного эфира, амида, пролекарства или сольвата («активный ингредиент») с носителем, который представляет собой один или несколько дополнительных ингредиентов. Обычно препараты получают однородным или тщательным объединением активного ингредиента с жидкими носителями или тонко измельченными твердыми носителями либо с теми и другими с последующим, если это необходимо, формованием продукта в желаемым препарат.

Термин «соединение(я)», когда используется в настоящем описании, означает соединение формулы I в любой форме, то есть в любой солевой или несолевой форме (например, в форме свободной кислоты или свободного основания или в форме его фармацевтически приемлемой соли), и его любой физической форме (включая нетвердые формы (например, жидкие или полутвердые формы) и твердые формы (например, аморфные или кристаллические формы, специфические полиморфные формы, сольваты, включая гидраты (e.g., моно-, ди- и гемигидраты)), а также в смесях различных форм.

Препараты описанных в настоящем изобретении соединений, подходящие для перорального введения, могут быть представлены в форме дискретных единиц, таких как капсулы, саше или таблетки, каждая из которых содержит предопределенное количество активного ингредиента; в виде порошка или гранул; в виде раствора или суспензии в водной жидкости или неводной жидкости; или в виде жидкой эмульсии «масло в воде» или жидкой эмульсии «вода в масле». Активный ингредиент также может быть представлен в виде болюса, электуария или пасты.

Фармацевтические препараты, которые могут использоваться перорально, включают таблетки, твердые капсулы из желатина, а также мягкие герметичные капсулы из желатина и пластификатора, такого как глицерин и сорбит. Таблетки могут быть изготовлены прессованием или формованием, необязательно с одним или несколькими вспомогательными ингредиентами. Прессованные таблетки могут быть получены прессованием в подходящем аппарате активного ингредиента, представленного в сыпучей форме, такой как порошок или гранулы, необязательно в смеси со связующими веществами, инертными разбавителями или смазывающими веществами, поверхностно-активными веществами или диспергирующими добавками. Формованные таблетки могут быть получены формованием в подходящем аппарате смеси увлажненного порошкообразного соединения с инертным жидким разбавителем. Таблетки необязательно могут быть покрыты оболочкой или иметь насечки и могут быть изготовлены таким образом, чтобы обеспечивать медленное или контролируемое высвобождение активного ингредиента. Все препараты для перорального введения должны быть представлены в дозах, подходящих для такого введения. Твердые капсулы могут содержать активные ингредиенты в смеси с наполнителем, таким как лактоза, связующими веществами, такими как крахмалы, и/или смазывающими веществами, такими как тальк или стеарат магния, и, необязательно, стабилизаторами. В мягких капсулах активные соединения могут быть растворены или суспендированы в подходящих жидкостях, таких как жирные масла, жидкий пaрафин или жидкие полиэтиленгликоли. Кроме того, могут добавляться стабилизаторы. Ядра драже покрываются подходящими оболочками. Для этой цели могут использоваться концентрированные растворы сахаров, которые могут необязательно содержать гуммиарабик, тальк, поливинилпирролидон, карбополовый гель, полиэтиленгликоль и/или диоксид титана, растворы лаков и подходящие органические растворители и смеси растворителей. В покрытия таблеток или драже могут добавляться красители или пигменты для идентификации или характеристики различных комбинаций доз активного соединения.

Соединения могут вводиться в препарат для парентерального введения инъекцией, например болюсной инъекцией или непрерывной инфузией. Препараты для инъекции могут быть представлены в лекарственной форме стандартной дозы, например в ампулах или в контейнерах с несколькими дозами, с добавлением консерванта. Композиции могут принимать такие формы как суспензии, растворы или эмульсии в маслянистых или водных разбавителях, и могут содержать добавки для сохранения формы, такие как суспендирующие, стабилизирующие или диспергирующие агенты. Препараты могут поставляыться в контейнерах с разовой дозой или несколькими дозами, например в герметичных ампулах и флаконах, и могут храниться в виде порошка или в лиофилизированном состоянии, для которого необходимо только добавление стерильного жидкого носителя, например физиологического раствора или стерильной апирогенной воды, непосредственно перед применением. Экстемпоральные инъекционные растворы и суспензии могут быть получены из стерильных порошков, гранул и таблеток, которые описаны выше.

Препараты для парентерального введения включают водные и неводные (масляные) стерильные растворы активных соединений для введения инъекций, которые могут содержать антиоксиданты, буферы, бактериостаты и растворенные вещества, придающие препарату изотоничность с кровью предполагаемого реципиента; и водные и неводные стерильные суспензии, которые могут включать суспензирующие агенты и загустители. Подходящие липофильные растворители или разбавители включают жирные масла, такие как кунжутное масло, или синтетические эфиры жирных кислот, такие как этилолеат или триглицериды, или липосомы. Водные суспензии для инъекций могут содержать вещества, повышающие вязкость суспензии, такие как натрийкарбоксиметилцеллюлоза, сорбит или декстран. Необязательно, суспензия может содержать подходящие стабилизаторы или добавки, которые повышают растворимость соединений, что позволяет получить высококонцентрированные растворы.

Помимо описанных выше препаратов соединения могу вводиться в депо-препарат. Такие препараты длительного действия могут вводиться имплантацией (например, подкожно или внутримышечно) или внутримышечной инъекцией. Так, например, соединения могут вводиться в препарат с подходящими полимерными или гидрофобными материалами (например, в форме эмульсии в подходящем масле) или ионообменными смолами, или в виде труднорастворимых производных, например в виде труднорастворимой соли.

Для буккального или подъязычного введения композиции могут принимать формул таблеток, лепешек, пастилок или гелей, полученных обычным способом. Такие композиции могут включать активный ингредиент в ароматизированной основе, такой как сахароза и аравийская камедь или трагакант.

Соединения также могу вводиться в композиции для ректального введения, такие как суппозитории или удерживающие клизмы, например содержащие обычные основы, такие как масло какао, полиэтиленгликоль или другие глицериды.

Некоторые соединения, раскрытые в настоящем изобретении, могут вводиться местно, то есть посредством несистемного введения. Оно включает нанесение соединения, раскрытого в настоящем изобретения, наружно на эпидермис или в щечную полость и инстилляцию такого соединения в кишку, легкое, вагинальную полость, ухо, глаз и нос, так что соединение по существу не попадает в кровоток. В отличие такого введения системное введение включает пероральное, внутривенное, интраперитонеальное и внутримышечное введение.

Препараты, подходящие для местного введения, включают жидкие или полужидкие препараты, подходящие для проникновения через кожу к месту воспаления, такие как гели, линименты, лосьоны, кремы, мази или пасты, а также капли, подходящие для введения в глаз, ухо или нос. Содержащие активный ингредиент в препарате для местного введения может составлять, например, от 0,001% до 10% масс./масс. (по массе) препарата. В некоторых вариантах осуществления содержание активного ингредиента может составлять до 10% масс./масс. В других вариантах осуществления оно может составлять менее 5% масс./масс. В некоторых вариантах осуществления содержание активного ингредиента может составлять от 2% масс./масс. до 5% масс./масс. В других вариантах осуществления оно может составлять от 0,1% до 1% масс./масс. препарата.

Для введения ингаляцией соединения могут быть удобно доставлены из инсуффлятора, упаковок небулайзера под давлением или других удобных средств доставки аэрозольного спрея. Герметичные упаковки под давлением могут включать подходящий пропеллент, такой как дихлордифторметан, трихлорфторметан, дихлортетрафтопентан, диоксид углерода или другой подходящий газ. В случае аэрозоля под давлением стандартная доза может быть определена с помощью клапана для доставки отмеренного количества. Альтернативно, для введения ингаляцией или инсуффляцией соединения по настоящему изобретению могут принимать форму сухого порошка, например порошковой смеси соединения и подходящей порошкообразной основы, такой как лактоза или крахмал. Порошкообразная композиция может быть представлена в лекарственной форме стандартной дозы, например в капсулах, картриджах, желатиновых или блистерных упаковках, из которых порошок может вводиться с помощью ингалятора или инсуффлятора.

Предпочтительными препаратами стандартной дозы являются препараты, которые содержат эффективную дозу активного ингредиента, указанную ниже, или ее соответствующую часть.

Следует понимать, что в дополнение к ингредиентам, конкретно перечисленным выше, препараты, описанные выше, могут включать другие добавки, традиционно используемые в данной области техники, с учетом типа рассматриваемого препарата, например добавки, которые подходят для перорального введения, могут включать ароматизаторы.

Соединения могут вводиться перорально или инъекцией в дозе от 0,1 до 500 мг/кг в день. Интервал доз для взрослых людей обычно составляет от 5 мг до 2 г/день. Таблетки или другие формы выпуска, представленные в виде дискретных частиц, могут удобно содержать количество одного или нескольких соединений, которое является эффективным в такой дозе или в нескольких дозах, например, в частицах, содержащих от 5 мг до 500 мг, обычно примерно от 10 мг до 200 мг. В одном варианте осуществления соединение по настоящему изобретению вводится примерно в дозе примерно 150 мг qd (один раз в день) или bid (два раза в день).

Количество активного ингредиента, которое может быть объединено с материалами носителя для получения лекарственной формы разового ввещения, будет изменяться в зависимости от пациента, подлежащего лечению, и конкретного способа введения.

Соединения могут вводиться различными способами, например перорально, местно или инъекцией. Точное количество соединения, вводимое пациенту, будет определяться лечащим врачом. Конкретный уровень дозы для каждого конкретного пациента будет зависеть от множества факторов, включая активность конкретного применяемого соединения, возраст, массу тела, общее состояние здоровья, пол, рацион питания пациента, время введения, способ введения скорость выведения, комбинацию лекарственных средств, конкретное заболевание, которое подлежит лечению, и тяжесть показания или состояния, которое подлежит лечению. Кроме того, способ введения может изменяться в зависимости от состояния и его тяжести.

В некоторых случаях может быть целесообразным введение по меньшей мере одного из соединений, описанных в настоящем изобретении (или его фармацевтически приемлемой соли, фармацевтически приемлемого сложного эфира или пролекарства), в комбинации с другим терапевтическим средством. Например, если одним из побочных эффектов, наблюдаемым у пациента при приеме одного из описанных в настоящем изобретении соединений, является гипертония, то может быть целесообразным введение гипотензивного средства в комбинации с исходным терапевтическим средством. Или, например, терапевтическая эффективность одного из описанных в настоящем изобретении соединений может быть повышена введением адъюванта (т.е. терапевтическое полезное действие адъюванта самого по себе может быть минимальным, но при его сочетании с другим терапевтическим средством общее полезное для пациента терапевтическое действие повышается). Или, например, полезное для пациента действие может быть повышено введением одного из описанных в настоящем изобретении соединений с другим терапевтическим средством (также включенным в схему терапевтического лечения), которое также обладает полезным терапевтическим действием. Например, при лечении инфекции мочевыводящих путей, включающем введение одного из описанных в настоящем изобретении соединений, повышение полезного терапевтического действия может быть также получено при обеспечении пациента другим терапевтическим средством для лечения инфекции мочевыводящих путей. В любом случае, независимо от заболевания, расстройства или состояния, которое подлежит лечению, общее полезное действие для пациента может представлять собой просто аддитивное действие двух терапевтических средств или может представлять собой их синергическое действие.

В любом случае, несколько терапевтических средств (из которых по меньшей мере одно является соединением, описанным в настоящем изобретении) могут вводиться в любом порядке или даже одновременно. При одновременном введении множество терапевтических средств могут вводиться в единой унифицированной форме или могут вводиться во множестве форм (например, в форме одной пилюли или в форме двух пилюль). Одно из терапевтических средств может быть представлено во множестве доз, или оба могут быть представлены во множестве доз. При неодновременном введении интервал между множественными дозами могут составлять от нескольких минут до четырех недель.

Таким образом, в другом аспекте некоторые варианты осуществления предоставляют способы лечения FimH-опосредованных расстройств у пациента-человека или пациента-животного, нуждающегося в таком лечении, которые включают введение указанному пациенту количества описанного в настоящем изобретении соединения, эффективного для снижения тяжести или предотвращения указанного расстройства у пациента, в комбинации по меньшей мере с одним дополнительным средством для лечения указанного расстройства, которое известно в данной области техники. В родственном аспекте некоторые варианты осуществления предоставляют терапевтические композиции, включающие по меньшей мере одно описанное в настоящем изобретении соединение в комбинации с одним или несколькими дополнительными лекарственными средствами для лечения FimH-опосредуемых расстройств.

Конкретные заболевания, подлежащие лечению с помощью соединений, композиций и способов, раскрытых в настоящем изобретении, включают бактериальные инфекции, болезнь Крона и синдром раздраженного кишечника (СРК). В некоторых вариантах осуществления бактериальная инфекция представляет собой инфекцию мочевыводящих путей.

Помимо того, что некоторые соединения и препараты, раскрытые в настоящем изобретения, полезны для человека, они могут быть также полезными для лечения животных-компаньонов, экзотических животных и сельскохозяйственных животных, включая млекопитающих, и т.п. Более предпочтительные животные включают лошадей, собак и кошек.

Общие схемы синтеза, использованные в примерах

Соединения по настоящему изобретению могут быть получены в соответствии со способами синтеза или очевидными их вариантами, описанными в WO2017/156508. Однако, без какого бы то ни было ограничения настоящего изобретения, далее представлены описания способов реакций, которые могут применяться для получения соединений по настоящему изобретению.

Для синтеза соединений, описанных в примерах ниже, используются четыре общих схемы (A - D). Во всех этих схемах используется реакция сочетания Сузуки маннозида, замещенного арилбромидом (или боронатом), и сложного арилборонатного эфира (или арилгалогенида). Манозиды защищены ацетильными или бензильными группами. Ацетильные группы удаляются с помощью NaOMe, бензильные группы удаляются с помощью BCl3 или гидрогенолиза с Pd/C.

Общая схема реакция сочетания Сузуки: К раствору маннозида (1,0 экв.) в смеси диоксан/вода (об./об. = 5/1) при комнатной температуре добавляют арилбороновую кислоту (или боронат) или арилгалогенид (~1,1 экв.), карбонат цезия (~3 экв.) и тетракис(трифенилфосфин)палладий (~0,05 экв.). Полученную смесь дегазируют три раза. После этого колбу помещают на масляную баню, предварительно нагретую до 80°C, и перемешивают реакционную смесь в течение определенного времени (обычно от 2 мин до 2 ч). После этого реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и выпаривают растворители при пониженном давлении. Далее сырой остаток очищают хроматографией (силикагель). После этого из продукта удаляют защитную группу в соответствии с методикой протокола А или B.

Протокол удаления защитной группы A: Если не указано иное, ацетатные защитные группы удаляют растворением частично очищенного маннозида, полученного в соответствии с реакцией Сузуки, в MeOH при охлаждении до 0°C. По каплям добавляют 1M раствор метоксида натрия в MeOH до достижения значения рН 9-10. Спустя 5 минут ледяную баню удаляют и перемешивают реакционную смесь в течение определенного времени. После завершения реакции реакционную смесь гасят водой или 1N HCl и концентрируют при пониженном давлении. Сырой продукт очищают препаративной ВЭЖХ в различных условиях.

Протокол удаления защитной группы B: Если не указано иное, защитные группы простых бензиловых эфиров удаляются добавлением BCl₃ (8,0 экв., 1M в ДХМ) к раствору частично очищенного маннозида, полученного в реакции Сузуки, в ДХМ (10 мл) при -78°C. Реакционную смесь перемешивают в течение определенного периода времени при -78°C. После завершения реакции реакционную смесь гасят с помощью MeOH (1 мл) при -78°C. После этого реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и концентрируют при пониженном давлении с получением дебензилированного соединения. После этого ацетильную группу удаляют способом, описанным в протоколе A.

Синтез С-маннозид-образующего блока:

Промежуточные соединения, используемые для получения соединений примеров, получают с использованием общих стадий, представленных выше, которые далее описаны более подробно.

Метил-2,3,4,6-тетра-О-бензил-α-D-маннопиранозид

К перемешиваемому раствору коммерчески доступного метил-α-D-маннопиранозида (30,0 г, 0,15 моль) в сухом ДМФА (1000 мл), охлажденному на бане со смесью лед-вода, небольшими порциями добавляют NaH (37,1 г, 0,93 моль, 60% в минеральном масле). После добавления реакционную смесь перемешивают при охлаждении на бане со смесью лед-вода до прекращения выделения газа (обычно в течение 30 мин) и затем нагревают до комнатной температуры в течение 2 ч. К реакционной смеси добавляют бензилбромид (158,7 г, 0,92 моль). После добавления реакционную смесь перемешивают при указанной температуре в течение 48 ч, после чего ТСХ анализ показывает, что реакция завершена. Реакционную смесь осторожно выливают в ледяную воду (2500 мл) при перемешивании и экстрагируют реакционную смесь ДХМ (2500 мл × 3). Объединенный органический слой промывают насыщенным раствором соли, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают на роторном испарителе с получением маслянистого остатка, который очищают хроматографией (силикагель, элюирование: EtOAc в петролейном эфире (0~20%)) с получением чистого соединения (71,0 г, выход 83%) в виде бесцветного масла.

Формула: C₃₅H₃₈O₆; точная масса: 554,27; молекулярная масса: 554,67.

Аналитические данные: ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для (C₃₅H₃₈O₆Na⁺) 577,27, найдено 577,0.

(2R,3R,4R,5R,6R)-2-Аллил-3,4,5-трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пиран

К перемешиваемому раствору метил-2,3,4,6-тетра-О-бензил-α-D-маннопиранозида (78,0 г, 0,14 моль) в сухом ACN (300 мл), охлажденному на бане со смесью лед-вода, по каплям добавляют аллилтриметилсилан (33,0 г, 0,29 моль) и триметилсилилтрифторметансульфонат (16,0 г, 0,07 моль). После добавления реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. После завершения реакции реакционную смесь осторожно выливают в ледяную воду (200 мл) при перемешивании и экстрагируют полученную смесь EtOAc (300 мл × 3). Объединенный органический слой промывают насыщенным раствором соли (200 мл), сушат над безводным сульфатом натрия и фильтруют. Фильтрат упаривают на роторном испарителе с получением маслянистого остатка, который очищают хроматографией (силикагель, элюирование: EtOAc в петролейном эфире (1~6%)) с получением чистого целевого продукта (68,0 г, выход 86%) в виде масла желтого цвета.

Формула: C₃₇H₄₀O₅; точная масса: 564,29; молекулярная масса: 564,71.

Аналитические данные: ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₃₇H₄₀O₅Na⁺ 587,29, найдено 587,30.

(2R,3R,4R,5R,6R)-3,4,5-Трис(бензилокси)-2-((бензилокси)метил)-6-(проп-1-ен-1-ил)тетрагидро-2H-пиран

Pd(PhCN)₂Cl₂ (7,0 г, 0,018 ммоль) в атмосфере азота добавляют к раствору (2R,3R,4R,5R,6R)-2-аллил-3,4,5-трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пирана (68,0 г, 0,12 моль) в сухом толуоле (350 мл). Полученную смесь нагревают до 90°C и выдерживают при указанной температуре в течение ночи в атмосфере N₂. После завершения реакции реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают хроматографией (силикагель, элюирование с градиентом: EtOAc в петролейном эфире) с получением целевого продукта (48,0 г, выход 71%, смесь цис- и транс-изомеров) в виде масла желтого цвета.

Формула: C₃₇H₄₀O₅; точная масса: 564,29; молекулярная масса: 564,71.

Аналитические данные: МС (ESI+): вычислено для C₃₇H₄₀O₅Na⁺ [M+Na]⁺ 587,29, найдено 587,30.

1-((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(Бензилокси)-6-(бензилоксиметил)-тетрагидро-2H-пиран-2-ил)пропен-1,2-диол

OsO₄ (5 г, в 70 мл t-BuOH) добавляют к раствору (2R,3R,4R,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-2-((бензилокси)метил)-6-(проп-1-ен-1-ил)тетрагидро-2H-пирана (48 г, 0,085 моль) и 4-метилморфолина-N-оксида (39,8 г, 0,34 моль) в смеси ТГФ/вода (100 мл/100 мл) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь выливают в насыщенный водн. раствор Na₂S₂O₃ (300 мл) и экстрагируют EtOAc (300 мл × 3), сушат над Na₂SO₄ и фильтруют. Фильтрат концентрируют в вакууме с получением остатка, который очищают хроматографией (силикагель, элюирование: EtOAc в ДХМ (10~20%)) с получением целевого продукта (34,0 г, выход 67%, смесь изомеров) в виде твердого белого вещества.

Формула: C₃₇H₄₂O₇; точная масса: 598,29; молекулярная масса: 598,73.

Аналитические данные: ¹H-ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ 7,42-7,12 (м, 20H), 4,66-4,36 (м, 7H), 4,08-3,93 (м, 3H), 3,92-3,85 (м, 2 H), 3,83-3,68 (м, 2H), 3,64-3,58 (м, 2H), 3,52-3,44 (м, 1 H), 1,25-1,17 (м, 3H). MС (ESI+): вычислено для C₃₇H₄₂O₇Na⁺ [M+Na]⁺ 621,29, найдено 621,30.

(2S,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-Трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пиран-2-карбальдегид

К раствору 1-((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-6-бензилоксиметил)-тетрагидро-2H-пиран-2-ил)пропен-1,2-диола (13,0 г, 21,7 ммоль) в смеси ТГФ/вода (120 мл/120 мл) добавляют NaIO₄(13,0 г, 60,75 ммоль) и перемешивают реакционную смесь при комнатной температуре в атмосфере N₂ в течение 3 ч. После завершения реакции реакционную смесь гасят ледяной водой (100 мл) и экстрагируют ДХМ (250 мл × 3). Объединенный органический слой промывают насыщенным раствором соли (100 мл), сушат над Na₂SO₄ и фильтруют. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении с получением целевого продукта (12,9 г, сырой продукт), который используют непосредственно в следующей стадии без дополнительной очистки.

Формула: C₃₅H₃₆O₆; точная масса: 552,25; молекулярная масса: 552,66.

Аналитические данные: ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₃₅H₃₆NaO₆ Na⁺ 575,24, найдено 575,20.

(R/S)-(4-Бром-2-метилфенил)((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)метанол

Стандартная методика: В колбу, содержащую 150 мл Et₂O, при -78°C в атмосфере N₂добавляют 4-бром-1-йод-2-метилбензол (22,6 г, 76,1 ммоль) в безводном Et₂O (10 мл)_.Затем к смеси по каплям при -78°C добавляют BuLi в гексанах (2,5 M, 26 мл, 65 ммоль) и перемешивают в течение дополнительного часа. Затем с помощью канюли в течение 5 минут добавляют свежеприготовленный сырой (2S,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пиран-2-карбальдегид (12,0 г, 21,7 ммоль) в Et₂O (90 мл). Смесь перемешивают при -78°C в течение 30 мин и затем медленно нагревают до 0°C в течение 1,5 ч. Реакционную смесь гасят насыщенным водным раствором NH₄Cl и экстрагируют EtOAc (250 мл × 3). Объединенную органическую фазу промывают насыщенным раствором соли (100 мл), сушат над Na₂SO₄ и фильтруют. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают хроматографией (силикагель, элюирование: ДХМ/EtOAc/петролейный эфир) с получением (R)-(4-бром-2-метилфенил)((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)метанола (4,0 г, выход 25% для двух стадий) в виде масла светло-желтого цвета и (S)-(4-бром-2-метилфенил)((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)метанола (8,0 г, выход 51% для двух стадий) в виде масла светло-желтого цвета.

(R) изомер:

Формула: C₄₂H₄₃BrO₆; точная масса: 722,22; молекулярная масса: 723,69.

Аналитические данные для 1R: ¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 7,41-7,28 (м, 21H), 7,18-7,13 (м, 2H), 5,08 (д, J=5,1 Гц, 1H), 4,71 (д, J=11,7 Гц, 1H), 4,64-4,56 (м, 3H), 4,49 (c, 2H), 4,40 (c, 2H), 4,28-4,21 (м, 1H), 4,18-4,13 (м, 1H), 4,10 (т, J=5,1 Гц, 1H), 3,99-3,94 (м, 1H), 3,89 (т, J=5,9 Гц, 1H), 3,83-3,70 (м, 2H), 3,49 (уш. c, 1H), 2,29 (c, 3H). ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₄₂H₄₃BrO₆Na 745,5 (100%), найдено 747,5 (97,3%).

(S) изомер:

Формула: C₄₂H₄₃BrO₆; точная масса: 722,22; молекулярная масса: 723,69.

Аналитические данные для 1S: ¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 7,37-7,16 (м, 23H), 5,06 (д, J=5,5 Гц, 1H), 4,73-4,67 (м, 1H), 4,62-4,44 (м, 7H), 4,11-4,03 (м, 2H), 3,85-3,76 (м, 3H), 3,73-3,67 (м, 2H), 3,19 (уш. c, 1H), 2,18 (c, 3H). ESI-МС [M+Na]⁺ вычислено для C₄₂H₄₃BrO₆Na⁺ 745,21, найдено 745,5 (100%), 747,5 (97,3%).

(4-Бром-2-метилфенил)((2S,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)метанон

К перемешиваемому раствору (S)-(4-бром-2-метилфенил)((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)метанола (2,9 г,0,004 моль) в сухом ДХМ (200 мл) в атмосфере N₂ при 0°C добавляют сухой пиридин (0,79 г, 0,01 моль), затем порциями добавляют периодинан Десса-Мартина (3,4 г, 0,008 моль), полученную реакционную смесь выдерживают при 0°C в течение 1 ч и затем дают возможность смеси нагреться до 15°C в течение дополнительного 1,5 ч. Реакционную колбу охлаждают на ледяной бане, к смеси добавляют 1∶1 смесь 10% раствора Na₂S₂O₃ (30 мл) и насыщенного водного раствора NaHCO₃ (30 мл) и реакционную смесь перемешивают в течение 5 мин при комнатной температуре. Слои разделяют и экстрагируют водный слой ДХМ (20 мл × 3). Органические фракции объединяют и промывают раствором NaHCO_3,затем разделяют, сушат над Na₂SO₄, концентрируют в вакууме без нагрева и очищают хроматографией (силикагель, элюирование: EtOAc в петролейном эфире (12%)) с получением кетона (2,03 г, 70%) в виде масла желтого цвета (2,03 г, выход 70%, сырой продукт).

Формула: C₄₂H₄₁BrO₆; точная масса: 720,21, молекулярная масса: 721,68.

(R)-(4-Бром-2-метилфенил)((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)метанол

К перемешиваемому раствору (4-бром-2-метилфенил)((2S,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)метанона (2,03 г, 2,8 ммоль) в сухом ТГФ (200 мл) в атмосфере N₂ при -40°C добавляют LTBA (8,2 мл, 8,2 ммоль, 1M раствор в ТГФ). Смесь нагревают до 0°C и перемешивают в течение дополнительного 1 ч. Когда ТСХ анализ показывает, что реакция завершена, реакционную смесь разбавляют EtOAc (400 мл). Добавляют насыщенный водный раствор тартрата калия-натрия (200 мл) и смесь энергично перемешивают в течение 1 ч при комнатной температуре. Органический слот отделяют и водный слой экстрагируют EtOAc (2 × 100 мл), объединенные органические слои сушат над Na₂SO₄, фильтруют и фильтрат концентрируют в вакууме. Остаток очищают хроматографией (силикагель, элюирование: ДХМ/EtOAc/петролейный эфир) с получением целевого изомера 1R (1,62 г, выход 80%) в виде масла желтого цвета.

Аналитические данные соответствуют данным представленным выше.

(R)-(4-Бром-2-метилфенил)((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)метилацетат

Диметиламинопиридин (21 мг, 0,17 ммоль) и (R)-(4-бром-2-метилфенил)((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)метанол (2,45 г, 3,4 ммоль) растворяют в сухом пиридине (10 мл) в атмосфере N₂. К смеси по каплям в течение 5 минут добавляют уксусный ангидрид (518 мг, 5,08 ммоль). После перемешивания в течение 1 ч при комнатной температуре реакционную смесь охлаждают до 0°С, гасят добавлением MeOH (2 мл) и растворители выпаривают в вакууме. Остаток снова растворяют в ДХМ (30 мл) и последовательно промывают водой (30 мл), 1 N водной HCl (30 мл × 2) и водой (30 мл), затем сушат над Na₂SO₄ и фильтруют. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают хроматографией (силикагель, элюирование: EtOAc в петролейном эфире (0~20%)) с получением целевого продукта 3 (2,5 г, выход 96%) в виде масла желтого цвета.

Формула: C₄₄H₄₅BrO₇; точная масса: 764,23; молекулярная масса 765,73.

Аналитические данные: ¹H-ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ 7,32-7,24 (м, 14H), 7,23-7,14 (м, 8H), 7,02 (д, J=8,2 Гц, 1H), 6,06 (д, J=6,9 Гц, 1H), 4,73 (д, J=11,1 Гц, 1H), 4,61-4,30 (м, 7H), 4,25 (дд, J=6,9 Гц, 3,7 Гц, 1H), 3,99-3,82 (м, 2H), 3,78-3,52 (м, 4H), 2,31 (c, 3H), 1,85 (c, 3H). ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₄₄H₄₅BrO₇Na⁺ 787,22, найдено 787 & 789.

(2R,3R,4S,5R,6R)-2-((R)-Ацетокси(4-бром-2-метилфенил)метил)-6-(ацетоксиметил)тетрагидро-2H-пиран-3,4,5-триилтриацетат

(R)-(4-бром-2-метилфенил)((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)метилацетат (340 мг, 0,44 ммоль) растворяют в сухом ДХМ (15 мл) в атмосфере N₂ и охлаждают реакционную смесь до -78°C. К смеси по каплям добавляют трихлорид бора (3,56 мл, 1M в ДХМ, 3,56 ммоль) и перемешивают реакционную смесь в течение 30 мин. После завершения реакции реакционную смесь гасят добавлением MeOH (2 мл). Реакционную смесь концентрируют в вакууме и остаток очищают хроматографией (силикагель, элюирование: MeOH/ДХМ) с получением дебензилированного промежуточного продукта. Это промежуточное соединение (~150 мг) снова растворяют в сухом пиридине (3 мл) в атмосфере N₂ и охлаждают реакционную смесь до 0°C. К смеси добавляют диметиламинопиридин (2,5 мг, 0,02 ммоль) и затем уксусный ангидрид (230 мг, 2,3 ммоль) и перемешивают реакционную смесь перемешивают в течение 5 мин при 0°C и затем нагревают смесь до комнатной температуры. Спустя 1 ч реакционную смесь охлаждают до 0°C и гасят MeOH (2 мл). Растворители удаляют в вакууме, полученный остаток снова растворяют в ДХМ (25 мл) и промывают последовательно водой (10 мл), 1 N водной HCl (10 мл × 2) и водой (10 мл). Органический слой отделяют, сушат над Na₂SO₄ и фильтруют. Фильтрат концентрируют в вакууме и остаток очищают хроматографией (силикагель, элюирование: EtOAc в петролейном эфире) с получением целевого продукта (200 мг, выход 79% для двух стадий) в виде твердого белого вещества.

Формула: C₂₄H₂₉BrNaO₁₁; точная масса: 572,09; молекулярная масса: 573,38.

Аналитические данные: ¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ м.д. 7,36-7,32 (м, 2H), 7,24-7,21 (м, 1H), 6,19 (д, J=6,9 Гц, 1H), 5,54 (т, J=3,3 Гц, 1H), 5,37 (дд, J₁=9,0 Гц, J₂=3,6 Гц, 1H), 5,18 (т, J=8,5 Гц, 1H), 4,26-4,21 (м, 2H), 4,02-3,91 (м, 2H), 2,43 (c, 3H), 2,14 (c, 3H), 2,08 (c, 6H), 2,03 (c, 3H), 1,97 (c, 3H). ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₄H₂₉BrNaO₁₁Na⁺ 595,08, найдено 595,2 (100%), 597,3 (97,3%).

(2R,3R,4S,5R,6R)-2-((R)-Ацетокси(2-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метил)-6-(ацетоксиметил)тетрагидро-2H-пиран-3,4,5-триилтриацетат

В атмосфере азота смесь (2R,3R,4S,5R,6R)-2-(ацетоксиметил)-6-(4-бром-2-метилбензол)тетрагидро-2H-пиран-3,4,5-триилтриацетат (500 мг, 0,87 ммоль), бис(пинаколато)дибор (243,5 мг, 0,96 ммоль), ацетат калия (256,1 мг, 2,61 ммоль) и комплекса (1,1’-бис(дифенилфосфино)ферроцен)дихлорпалладия (II) и дихлорметана (Pd(dppf)Cl₂⋅ДХМ) (71 мг, 0,09 ммоль) в диоксане (10 мл) нагревают до 90°С при перемешивании и выдерживают с указанных условиях в течение 3 ч. После завершения реакции реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают хроматографией (силикагель, элюирование: EtOAc в петролейном эфире (0~25%)) с получением целевого продукта (480 мг, выход 89%) в виде масла светло-желтого цвета (чистота 90%).

Формула: C₃₀H₄₁BO₁₃; точная масса: 620,26; молекулярная масса: 620,46.

Аналитические данные: ¹H-ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ 7,66-7,56 (м, 1H), 7,38-7,28 (м, 1H), 7,22-7,19(м, 1H), 6,21 (дд, J=26,3 Гц, 6,8 Гц, 1H), 5,58-5,52 (м, 1H), 5,41-5,33 (м, 1H), 5,20-5,11 (м, 1H), 4,25-4,19 (м, 2H), 4,00-3,91 (м, 2H), 2,42 (д, J=7,3 Гц, 3H), 2,12 (c, 3H), 2,07-1,98 (м, 9H), 1,94 (д, J=2,8 Гц, 3H), 1,32-1,19 (м, 12H).

ESI-МС [M+H]⁺: вычислено для C₃₀H₄₁BO₁₃H 621,26, найдено 621,0.

(R)-(2-Метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-6-(бензилоксиметил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)метилацетат

В атмосфере азота смесь (R)-(4-бром-2-метилфенил)((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)метилацетата (1,2 г, 1,57 ммоль), бис(пинаколато)дибора (438 мг, 1,72 ммоль), ацетата калия (462 мг, 4,71 ммоль) и комплекса (1,1’-бис(дифенилфосфино)ферроцен)дихлорпалладия (II) и дихлорметана (Pd(dppf)Cl₂⋅ДХМ) (131 мг, 0,16 ммоль) в диоксане (10 мл) перемешивают в течение 16 ч при 90°C. После завершения реакции реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают хроматографией (силикагель, элюирование: EtOAc в петролейном эфире (0~20%)) с получением целевого бороната (920 мг, выход 72%) в виде масла желтого цвета.

Формула: C₅₀H₅₇BO₉; точная масса: 812,14; молекулярная масса: 812,79.

Аналитические данные: ¹H-ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ 7,66 -7,56 (м, 1H), 7,38-7,28 (м, 1H), 7,22-7,19(м, 1H), 6,21 (дд, J=26,3 Гц, 6,8 Гц, 1H), 5,58-5,52 (м, 1H), 5,41-5,33 (м, 1H), 5,20-5,11 (м, 1H), 4,25-4,19 (м, 2H), 4,00-3,91 (м, 2H), 2,42 (д, J=7,3 Гц, 3H), 2,12 (c, 3H), 2,07-1,98 (м, 9H), 1,94 (д, J=2,8 Гц, 3H), 1,32-1,19 (м, 12H).

ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₅₀H₅₇BO₉NH₄⁺ 830,41, найдено 830,5.

(R)-(4-Бром-2-трифторметилфенил)((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)метилацетат & (S)-(4-бром-2-трифторметилфенил)((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)метилацетат

В соответствии с методикой, описанной выше для (R)-(4-бром-2-метилфенил)((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)метанола, 4-бром-1-йод-2-(трифторметил)бензол (6,24 г, 18 ммоль) обрабатывают n-BuLi и подвергают взаимодействию с (2S,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пиран-2-карбальдегидом (3,3 г, 6,0 ммоль). Смесь очищают хроматографией на системе Combiflash (фаза A: петролейный эфир; фаза B: ДХМ/EtOAc/петролейный эфир (20/1/2), скорость истечения: 80 мл/мин; градиент: от 30% B до 70% B в течение 60 мин; (R)-спирт элюируют при 30 мин, (S)-спирт элюируют при 50 мин) с получением (R)-спирта (1,2 г, предполагаемый, 26% для двух стадий) в виде масла светло-желтого цвета и (S)-спирта (1,2 г, предполагаемый, 26% для двух стадий) в виде масла светло-желтого цвета. В соответствии с методикой ацетилирования, описанной выше для (R)-(4-бром-2-метилфенил)((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)метилацетата, (S)-спирт (1,1 г) является защищенным для получения (S)-ацетата (1,1 г, 95%), и (R)-спирт (1,1 г) является защищенным для получения (R)-ацетата (1,2 г, 99%).

Формула: C₄₄H₄₂BrF₃O₇; точная масса: 818,21; молекулярная: масса 819,7.

Аналитические данные для (R)-изомера: ¹H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ 7,86 (д, J=1,8 Гц, 1H), 7,77-7,66 (м, 2H), 7,33-7,17 (м, 20H), 6,20 (д, J=6,3 Гц, 1H), 4,65 (д, J=11,4 Гц, 1H), 4,54-4,49 (м, 4H), 4,43-4,37 (м, 1H), 4,33-4,25 (м, 3H), 4,03-4,00 (м, 1H), 3,89-3,86 (м, 1H), 3,77-3,72 (м, 2H), 3,61-3,45 (м, 2H), 1,92 (c, 3H). ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₄₄H₄₂BrF₃O₇Na⁺ 841,20, найдено 841,40, 843,40.

Аналитические данные для (S)-изомера: ¹H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ 7,87 (д, J=1,8 Гц, 1H), 7,74-7,62 (м, 2H), 7,36-7,20 (м, 20H), 6,28 (д, J=6,0 Гц, 1H), 4,60-4,56 (м, 4H), 4,52 (c, 1H), 4,39 (д, J=12,0 Гц,1H), 4,22-4,18 (м, 2H), 4,11-3,99 (м, 3H), 3,85-3,82 (м, 1H), 3,69-3,66 (м, 1H), 3,58-3,52 (м, 1H), 3,42-3,37 (м, 1H), 1,96 (c, 3H). ESI-МС [M+Na]+: вычислено для C₄₄H₄₂BrF₃O₇Na⁺ [M+Na]⁺841,20, найдено 841,0.

ПРИМЕР 1

(2 R ,3 S ,4 S ,5 S ,6 R )-2-(( R )-(3',5'-Дифтор-3,4'-диметил-[1,1'-бифенил]-4-ил)(гидрокси)метил)-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2 H -пиран-3,4,5-триол

В соответствии со схемой D, (R)-(2-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)метилацетат (200 мг, 0,25 ммоль) и 5-бром-1,3-дифтор-2-метилбензол (56 мг, 0,27 ммоль) подвергают взаимодействию в соответствии с реакцией сочетания Сузуки (1 ч при 80ºC) с последующим удалением защитных групп в соответствии с методикой протокола B (BCl₃, 1M в ДХМ, 60 мин при -78°C) и методикой протокола A (1 ч при комнатной температуре) и затем очищают препаративной ВЭЖХ (условия: колонка XBridge Prep C18 OBD 19×150 мм 5 мкм; подвижная фаза А: вода (10 ммоль/л NH₄HCO₃), подвижная фаза B: ACN; скорость истечения: 20 мл/мин; градиент: от 27% B до 50% B в течение 7 мин; 254 нм; Rt: 6,23 мин) с получением указанного в заголовке соединения (30 мг, выход 30% для трех стадий) в виде твердого белого вещества.

Формула: C₂₁H₂₄F₂O₆; точная масса: 410,15, молекулярная масса: 410,41.

Аналитические данные: ¹H ЯМР (300 МГц, метанол-d₄) δ 7,62 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,51-7,41 (м, 2H), 7,22-7,19 (м, 2H), 5,24 (д, J=6,7 Гц, 1H), 4,25 (т, J=2,8 Гц, 1H), 4,10 (дд, J=6,8 Гц, 2,6 Гц, 1H), 4,07-4,03 (м, 1H), 3,80-3,62 (м, 4H), 2,50 (c, 3H), 2,23 (c, 3H). ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₁H₂₄F₂O₆NH₄⁺ 428,19, найдено 428,20.

ПРИМЕР 2

(2 R ,3 S ,4 S ,5 S ,6 R )-2-(( R )-(4'-Хлор-3',5'-дифтор-3-метил-[1,1'-бифенил]-4-ил)(гидрокси)метил)-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2 H -пиран-3,4,5-триол

В соответствии со схемой D, (R)-(2-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)метилацетат (200 мг, 0,25 ммоль) и 5-бром-2-хлор-1,3-дифторбензол (67 мг, 0,29 ммоль) подвергают взаимодействию в соответствии с реакцией сочетания Сузуки (40 мин при 80°C) с последующим удалением защитных групп в соответствии с протоколом B (BCl₃, 1M в ДХМ, 40 мин при -78°C) и в соответствии с протоколом A (40 мин при 0°C). Очистка остатка препаративной ВЭЖХ (условия: колонка XBridge Prep OBD C18 30×150 мм 5 мкм; подвижная фаза A: вода (10 ммоль/л NH₄HCO₃), подвижная фаза B: ACN; скорость истечения: 60 мл/мин; градиент: от 5% B до 65% В в течение 1 мин; 254 нм; Rt: 6,17 мин) с получением указанного в заголовке соединения (41,0 мг, выход 39% для трех стадий) в виде твердого белого вещества.

Формула: C₂₀H₂₁ClF₂O₆; точная масса: 430,10; молекулярная масса 430,83.

Аналитические данные: ¹H ЯМР (300 МГц, метанол-d₄) δ 7,64 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,54-7,38 (м, 4H), 5,25 (д, J=6,7 Гц, 1H), 4,23 (т, J =2,8 Гц 1H), 4,10 (дд, J=6,7, 2,6 Гц, 1H), 4,05-4,02 (м, 1H), 3,74-3,62 (м, 4H), 2,51 (c, 3H). ESI-МС[M+Na]⁺:вычислено для C₂₀H₂₁ClF₂O₆Na⁺ 453,09, найдено 453,10.

ПРИМЕР 3

(2R,3S,4S,5S,6R)-2-((R)-(4'-Бром-3',5'-дифтор-3-метил-[1,1'-бифенил]-4-ил)(гидрокси)метил)-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2H-пиран-3,4,5-триол

4-Бром-3,5-дифторфенил трифторметансульфонат. К раствору 4-бром-3,5-дифторфенола (300 мг, 1,44 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляют NaOtBu (276 мг, 2,9 ммоль) и PhN(SO₂CF₃)₂ (569 мг, 1,6 ммоль) при 25°C. Полученную смесь перемешивают при 25°C в течение 3 ч. Реакцию гасят водой (10 мл), смесь экстрагируют EtOAc (20 мл × 3) и сушат над Na₂SO_4. Раствор концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают хроматографией (силикагель, элюирование: EtOAc в петролейном эфире (0~10%)) с получением 4-бром-3,5-дифторфенилтрифторметансульфоната (120 мг, выход 25%) в виде бесцветного масла.

Формула: C₇H₂BrF₅O₃S; точная масса: 339,88; молекулярная масса: 341,05.

МС (ESI+) [M+H]⁺: вычислено для C₇H₂BrF₅O₃SH⁺ 340,89, сигнал МС отсутствует.

В соответствии со схемой D, (R)-(2-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)метилацетат (200 мг, 0,25 ммоль) и 4-бром-3,5-дифторфенилтрифторметансульфонат (100 мг, 0,29 ммоль) подвергают взаимодействию в соответствии со стандартной методикой реакции сочетания Сузуки (2 ч при 80°C) с последующим удалением защитных групп в соответствии с протоколом B (BCl₃, 1M в ДХМ, 60 мин при -78°C) и в соответствии с протоколом A (1 ч при комнатной температуре). Очистка остатка препаративной ВЭЖХ (условия: колонка XBridge Shield RP 18 OBD 30×150 мм 5 мкм; подвижная фаза A: вода (10 ммоль/л NH₄HCO₃), подвижная фаза B: ACN; скорость истечения: 60 мл/мин; градиент: от 5% B до 60% B в течение 7 мин; 254 нм; Rt: 6,50 мин) с получение указанного в заголовке соединения (24 мг, выход 20% для трех стадий) в виде твердого белого вещества.

Формула: C₂₀H₂₁BrF₂O₆; точная масса: 474,05; молекулярная масса: 475,28.

Аналитические данные: ¹H ЯМР (400 МГц, метанол-d₄) δ 7,65 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,55-7,48 (м, 2H), 7,43-7,37 (м, 2H), 5,25 (д, J=6,7 Гц, 1H), 4,23(т, J =2,9 Гц, 1H), 4,10 (дд, J=6,7 Гц, 2,6 Гц, 1H), 4,06-4,03 (м, 1H), 3,76-3,60 (м,4H), 2,52 (c,3H). ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₀H₂₁BrF₂O₆NH₄⁺ 492,08, найдено 492,05.

ПРИМЕР 4

(2 R ,3 S ,4 S ,5 S ,6 R )-2-(( R )-(3',5'-Дифтор-3-метил-4'-винил-[1,1'-бифенил]-4-ил)(гидрокси)метил)-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2 H -пиран-3,4,5-триол

5-Бром-1,3-дифтор-2-винилбензол. К раствору бромида метилтрифенилфосфония (6,92 г, 19,4 ммоль) в ТГФ (20 мл) при 0°C в атмосфере N₂добавляют NaHMDS (17,8 мл, 1M в ТГФ). Полученный раствор перемешивают в течение 30 мин при 0ºC. Затем к полученному раствору при 0°C добавляют 4-бром-2,6-дифторбензальдегид (3,0 г, 13,6 ммоль). Полученный раствор перемешивают в течение 3 ч при 0°C. Реакцию гасят водой (20 мл), смесь экстрагируют EtOAc (20 мл × 3), затем сушат над Na₂SO₄ и фильтруют. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают хроматографией (силикагель, элюирование: петролейный эфир) с получением указанного в заголовке соединения (1,5 г, 50%) в виде масла желтого цвета.

Формула: C₈H₅BrF₂; точная масса: 217,95; молекулярная масса: 219,03.

MС (ESI+) [M+H]⁺: вычислено для C₈H₅BrF₂H⁺ 220,04, МС сигнал отсутствует.

2-(3,5-Дифтор-4-винилфенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан. Смесь 5-бром-1,3-дифтор-2-винилбензола (500 мг, 2,3 ммоль), бис(пинаколато)диборона (640 мг, 2,5 ммоль), комплекса (1,1’-бис(дифенилфосфино)ферроцен)дихлорпалладия (II) и дихлорметана (187 мг, 0,23 ммоль) и KOAc (674 мг, 6,9 ммоль) в диоксане (5 мл) перемешивают в течение 12 ч при 80°C в атмосфере N₂. После завершения реакции реакционную смесь охлаждают до 25°C. Реакционную смесь разбавляют водой (5 мл), затем экстрагируют EtOAc (10 мл × 3), сушат над Na₂SO₄ и фильтруют. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают хроматографией (силикагель, элюирование: петролейный эфир) с получением указанного в заголовке соединения (270 мг, 44%) в виде масла желтого цвета.

Формула: C₁₄H₁₇BF₂O₂; точная масса: 266,13; молекулярная масса: 266,09.

МС (ESI+) [M+H]⁺: вычислено для C₁₄H₁₇BF₂O₂H⁺ 267,14, МС сигнал отсутствует.

(2 R ,3 S ,4 S , 5S ,6 R )-2-(( R )-(3',5'-Дифтор-3-метил-4'-винил-[1,1'-бифенил]-4-ил)(гидрокси)метил)-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2 H -пиран-3,4,5-триол

В соответствии со схемой B, (R)-(4-бром-2-метилфенил)((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)метилацетат (200 мг, 0,26 ммоль) и 2-(3,5-дифтор-4-винилфенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан (80 мг, 0,3 ммоль) подвергают взаимодействию в соответствии со стандартной методикой реакции сочетания Сузуки (40 мин при 80°C) с последующим удалением защитных групп в соответствии с методикой протокола B (BCl₃, 1 M в ДХМ, 40 мин при -78°C) и затем в соответствии с методикой протокола A (40 мин при 23ºC). Очистка остатка препаративной ВЭЖХ (условия: колонка XBridge Shield RP18 OBD 30×150 мм, 5 мкм; подвижная фаза A: вода (0,1% муравьиная кислота), подвижная фаза B: ACN; скорость истечения: 60 мл/мин; градиент: от 5% B до 50% B в течение 10 мин; 254 нм; Rt: 9,77 мин) с получением указанного в заголовке соединения (30 мг, выход 27% для трех стадий) в виде твердого белого вещества.

Формула: C₂₂H₂₄F₂O₆; точная масса: 422,15; молекулярная масса: 422,42.

Аналитические данные: ¹H ЯМР (300 МГц, метанол-d₄) δ 7,62 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,55-7,42 (м, 2H), 7,27-7,25 (м, 2H), 6,82-6,72 (м, 1H), 6,04 (д, J=18,4 Гц, 1H), 5,60 (д, J=12,8 Гц, 1H), 5,23 (д, J=6,8 Гц, 1H), 4,23 (т, J=2,8 Гц, 1H), 4,09 (дд, J=2,6 Гц, 9,4 Гц, 1H), 4,05-4,00 (м, 1H), 3,73-3,66 (м, 4H), 2,50 (c, 3H). ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₂H₂₄F₂O₆NH₄⁺ 440,16, найдено 440,20.

ПРИМЕР 5

(2R,3S,4S,5S,6R)-2-((R)-(3'-Фтор-3-метил-4'-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-4-ил)(гидрокси)метил)-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2H-пиран-3,4,5-триол

В соответствии со схемой B, (R)-(4-бром-2-метилфенил)((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)метилацетат (220 мг, 0,29 ммоль) и коммерчески доступную (3-фтор-4-(трифторметил) фенил)бороновую кислоту (72 мг, 0,35 ммоль) подвергают взаимодействию в соответствии со стандартной методикой реакции сочетания Сузуки (45 мин при 80°C) с последующим удалением защитных групп в соответствии с методикой протокола B (BCl₃, 1M в ДХМ, 45 мин при -78°C) и затем в соответствии с методикой протокола A (1 ч при 0°C). Очистка остатка препаративной ВЭЖХ (условия: колонка XBridge Prep OBD C18 19×150 мм 5 мкм; подвижная фаза A: вода (10 ммоль/л NH₄HCO₃), подвижная фаза B: ACN; скорость истечения: 20 мл/мин; градиент: от 25% B до 55% B в течение 7 мин; 254/220 нм; Rt: 6,17 мин) приводит к получению целевого продукта (49,0 мг, 38% для трех стадий) в виде твердого белого вещества.

Формула: C₂₁H₂₂F₄O₆; точная масса: 446,14; молекулярная масса: 446,39.

Аналитические данные: ¹H ЯМР (300 МГц, метанол-d₄) δ 7,75 (т, J=8,0 Гц, 1H), 7,66-7,51 (м, 5H), 5,26 (д, J=6,7 Гц, 1H), 4,24 (т, J=3,0 Гц, 1H), 4,11 (дд, J=6,7 Гц, 2,6 Гц, 1H), 4,07-4,03 (м, 1H), 3,72-3,67 (м, 4H), 2,53 (c, 3H). ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₁H₂₂F₄O₆Na⁺ 469,13, найдено 469,25.

ПРИМЕР 6

(2R,3S,4S,5S,6R)-2-((R)-(3'-Фтор-3-метил-5'-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-4-ил)(гидрокси)метил)-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2H-пиран-3,4,5-триол

В соответствии со схемой B, (R)-(4-бром-2-метилфенил)((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)метилацетат (200 мг, 0,26 ммоль) и коммерчески доступную (3-фтор-5-(трифторметил)фенил)бороновую кислоту (108 мг, 0,52 ммоль) подвергают взаимодействию в соответствии со стандартной методикой реакции сочетания Сузуки (1,0 ч при 80°C) с последующим удалением защитных групп в соответствии с методикой протокола B (BCl₃, 1M в ДХМ, 1 ч при -78°C) и затем в соответствии с методикой протокола A (1 ч при 25°C). Очистка остатка препаративной ВЭЖХ приводит к получению целевого продукта (40,0 мг, 34% для трех стадий) в виде твердого белого вещества.

Формула: C₂₁H₂₂F₄O₆; точная масса: 446,14; молекулярная масса: 446,39.

Аналитические данные: ¹H ЯМР (400 МГц, метанол-d₄) δ 7,75 (c, 1H), 7,70-7,67 (м, 2H), 7,55 (дд, J =8,2 Гц, 2,0 Гц, 1H), 7,51 (д, J=1,6 Гц, 1H), 7,43 (д, J=8,4 Гц, 1H), 5,27 (д, J=6,7 Гц, 1H), 4,25 (т, J=3,0 Гц, 1H), 4,11 (дд, J=6,8 Гц, 2,6 Гц, 1H), 4,06 (дд, J=8,0 Гц, 3,5 Гц, 1H), 3,74-3,64 (м, 4H), 2,53 (c, 3H). ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₁H₂₂F₄O₆NH₄⁺ 464,17, найдено 464,05.

ПРИМЕР 7

(2R,3S,4S,5S,6R)-2-((R)-Гидрокси(3',4',5'-трифтор-3-метил-[1,1'-бифенил]-4-ил)метил)-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2H-пиран-3,4,5-триол

В соответствии со схемой B, (R)-(4-бром-2-метилфенил)((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)метилацетат (200 мг, 0,26 ммоль) и коммерчески доступную (3,4,5-трифторфенил)бороновую кислоту (91 мг, 0,52 ммоль) подвергают взаимодействию в соответствии со стандартной методикой реакции сочетания Сузуки (1 ч при 80°C) с последующим удалением защитных групп в соответствии с методикой протокола B (BCl₃, 1M в ДХМ, 1 ч при -78°C) и затем в соответствии с методикой протокола A (1 ч при 25°C). Очистка остатка препаративной ВЭЖХ приводит к получению целевого продукта (25,0 мг, 23% для трех стадий) в виде твердого белого вещества.

Формула: C₂₀H₂₁F₃O₆; точная масса: 414,13;, молекулярная масса: 414,37.

Аналитические данные: ¹H ЯМР (400 МГц, метанол-d₄) δ 7,63 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,47 (дд, J=8,0 Гц, 2,1 Гц, 1H), 7,45-7,36 (м, 3H), 5,25 (д, J=6,7 Гц, 1H), 4,24 (т, J=3,0 Гц, 1H), 4,10 (дд, J=6,8 Гц, 2,6 Гц, 1H), 4,07-4,04 (м, 1H), 3,77-3,58 (м, 4H), 2,51 (c, 3H). ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для (C₂₀H₂₄F₃O₆NH₄⁺) 432,16, найдено 432,15.

ПРИМЕР 8

(2R,3S,4S,5S,6R)-2-((R)-(3',5'-Дифтор-3-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-4-ил)(гидрокси)метил)-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2H-пиран-3,4,5-триол

В соответствии со схемой B, (R)-(4-бром-2-трифторметилфенил)((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)метилацетат (200 мг, 0,24 ммоль) и коммерчески доступную (3,5-дифторфенил)бороновую кислоту (50 мг, 0,32 ммоль) подвергают взаимодействию в соответствии со стандартной методикой реакции сочетания Сузуки (1 ч при 80°C) с последующим удалением защитных групп в соответствии с методикой протокола B (BCl₃, 1M в ДХМ, 30 мин при -78°C) и затем в соответствии с методикой протокола A (1 ч при 25°C). Очистка остатка препаративной ВЭЖХ (условия: колонка Xbridge Shield RPC18 OBD, 19×150 мм, 5 мкм; подвижная фаза A: вода (10 ммоль/л NH₄HCO₃), подвижная фаза B: ACN; скорость истечения: 20 мл/мин; градиент: от 25% B до 50% B в течение 7 мин; 254 нм; Rt: 5,98 мин) приводит к получению целевого продукта (60 мг, 56% для трех стадий) в виде твердого белого вещества.

Формула: C₂₀H₁₉F₅O₆; точная масса: 450,11; молекулярная масса: 450,36.

Аналитические данные: ¹H ЯМР (400 МГц, Метанол-d₄) δ 8,02-7,90 (м, 3H), 7,39-7,27 (м, 2H), 7,05-7,00 (м, 1H), 5,38 (д, J=6,9 Гц, 1H), 4,32 (т, J=2,8 Гц, 1H), 4,19 (дд, J=6,8 Гц, 2,0 Гц, 1H), 4,02 (дд, J=8,8 Гц, 3,4 Гц, 1H), 3,75 (т, J=8,5 Гц, 1H), 3,70-3,58 (м, 3H). ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₀H₁₉F₅O₆NH₄⁺ 468,14, найдено 468,20.

ПРИМЕР 9

(2R,3S,4S,5S,6R)-2-((R)-(3',5'-Дифтор-3-метил-[1,1'-бифенил]-4-ил)(гидрокси)метил)-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2H-пиран-3,4,5-триол

(R)-(3',5'-Дифтор-3-метил-[1,1'-бифенил]-4-ил)((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)метанол. Круглодонную 3-горлую колбу объемом 10 л продувают и заполняют инертной атмосферой азота, в колбу загружают (R)-(4-бром-2-метилфенил)((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)метанол (230 г, 317 ммоль, 1 экв.), смесь диоксан:H₂O (4:1) (2,3 л), (3,5-дифторфенил)бороновую кислоту (55,2 г, 349 ммоль, 1,1 экв.), Cs₂CO₃ (310,6 г, 953 ммоль, 3,0 экв.) и Pd(PPh₃)₄ (18,4 г, 15,9 ммоль, 0,05 экв.). Полученный раствор перемешивают в течение 1 ч при 80°C, нагревая на масляной бане. Твердые вещества удаляют фильтрацией. Фильтрат экстрагируют этилацетатом (3 × 4 л). полученную смесь промывают насыщенным раствором NaCl (3 × 4 л). Смесь сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют. Остаток очищают хроматографией (силикагель, элюирование: EtOAc в петролейном эфире (3%)) с получением 197 г (82%) целевого продукта в виде масла светло-желтого цвета.

Формула: C₄₈H₄₆F₂O₆; точная масса: 756,33; молекулярная масса: 756,87.

Аналитические данные:¹H ЯМР (300 МГц, хлороформ-d) δ 7,52 (д, J=8,6 Гц, 1H), 7,30 (дддд, J=20,6, 8,1, 6,4, 3,9 Гц, 21H), 7,16 (дд, J=6,6, 2,9 Гц, 2H), 7,11-7,00 (м, 2H), 6,81 (тт, J=8,9, 2,4 Гц, 1H), 6,40-6,26 (м, 1H), 5,19 (д, J=5,8 Гц, 1H), 4,66 (д, J=11,6 Гц, 1H), 4,60 (д, J=4,6 Гц, 3H), 4,42 (д, J=2,4 Гц, 3H), 4,37 (д, J=11,8 Гц, 1H), 4,25-4,01 (м, 5H), 3,89-3,75 (м, 2H), 3,69 (дд, J=10,6, 4,2 Гц, 1H), 2,40 (c, 3H).

ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₄₈H46F₂O₆Na⁺ 779,33, найдено 779,33.

(2R,3S,4S,5S,6R)-2-((R)-(3',5'-Дифтор-3-метил-[1,1'-бифенил]-4-ил)(гидрокси)метил)-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2H-пиран-3,4,5-триол

Раствор (R)-(3',5'-дифтор-3-метил-[1,1'-бифенил]-4-ил)((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-трис(бензилокси)-6-((бензилокси)метил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)метанола (1,00 г, 1,32 ммоль) приготавливают в метаноле (20 мл, 20 объемов) при выдерживании смеси при температуре, близкой к температуре кипения. Смесь переносят в реактор Хастерлоя высокого давления, охлаждают до комнатной температуры и одной порцией добавляют палладий на активированном угле (100 мг, 10% масс.) JM Type 10T755 (10% масс./масс. Pd). Полученную суспензию гидрируют с помощью H₂ с давлением 60 фунтов на кв. дюйм (413,7 кПа) в течение 5,75 ч при 45°С. Реакционную суспензию фильтруют через слой целита, фильт промывают дополнительной порцией MeOH и концентрируют полученный фильтрат в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества серого цвета (525 мг, 1,2 ммоль, выход сырого продукта ~100%).

Формула: C₂₀H₂₂F₂O₆;точная масса: 396,14; молекулярная масса: 396,38.

Аналитические данные: 1H ЯМР (400 МГц, MeOH-d₄) δ 2,39 (c, 3H), 3,55-3,60 (м, 4H), 3,92-3,96 (м, 1H), 3,99 (дд, J=6,6, 2,4 Гц, 1H), 4,13 (т, J=2,7 Гц, 1H), 5,13 (д, J=6,8 Гц, 1H), 6,80 (tt, J=9,0, 2,2 Гц, 1H), 7,10-7,14 (м, 2H), 7,34 (c, 1H), 7,37 (д, J=8,3 Гц, 1H), 7,52 (д, J=8,1 Гц, 1H). ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₀H₂₂F₂O₆NH₄⁺ 414,17, найдено 414,15.

Представленные в таблице 1 соединения примеров получают в соответствии с описанными выше способами, где структура указанных соединений соответствует формуле I.

Таблица 1

Пример №	R₁	R₆	R₂	R₃	R₄	R₅	МС характеристика
10	Me	H	O-iPr	H	H	Cl	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₃H₂₉ClO₇Na⁺ 475,91, найдено 475,2977
11	Me	H	F	H	Me	Cl	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₀H₂₂ClFO₆Na⁺ 449,85, найдено 449,2958
12	Me	H	H	Me	Cl	Me	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₂H₂₇ClO₆Na⁺ 445,89, найдено 445,3463
13	Me	H	H	Me	OCF₃	Me	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₂H₂₅F₃O₇Na⁺ 481,41, найдено 481,3141
14	Me	H	H	Me	H	tBu	ESI-МС [M+Na]+: вычислено для C₂₅H₃₄O₆Na⁺ 453,52, найдено 453,4106
15	Me	H	H	Cl	Cl	H	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₀H₂₂Cl₂O₆Na⁺ 451,07, найдено 451,00
16	Me	H	H	Cl	H	Cl	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₀H₂₂Cl₂O₆NH₄⁺ 446,11, найдено 446,10
17	Me	H	F	H	H	F	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₀H₂₂F₂O₆NH₄⁺ 414,17, найдено 414,15
18	Me	H	F	F	H	H	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₀H₂₂F₂O₆NH₄⁺ 414,17, найдено 414,15
19	Me	H	OH	H	Cl	Cl	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₀H₂₂Cl₂O₇Na⁺ 467,06, найдено 467,15
20	Me	H	OMe	H	Cl	Cl	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₁H₂₄Cl₂O₇Na⁺ 481,08, найдено 481,20
21	Me	H	OcPe	H	Me	H	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₆H₃₄O₇NH₄⁺ 476,26, найдено 476,20
22	Me	H	H	F	H	Cl	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₀H₂₂ClFO₆NH₄⁺ 430,14, найдено 430,05
23	Me	H	H	F	F	H	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₀H₂₂F₂O₆NH₄⁺ 414,17, найдено 414,15
24	Me	H	H	OMe	H	F	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₁H₂₅FO₇NH₄⁺ 426,19, найдено 426,15
25	Me	H	H	CF₃	F	H	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₁H₂₂F₄O₆NH₄⁺ 464,17, найдено 464,05
26	Me	H	H	CF₃	H	Cl	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₁H₂₂ClF₃O₆NH₄⁺ 480,14, найдено 480,05
27	Me	H	H	OMe	F	H	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₁H₂₅FO₇NH₄⁺ 426,19, найдено 426,10
28	Me	H	H	F	OCF₃	H	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₁H₂₂F₄O₇NH₄⁺ 480,16, найдено 480,05
29	Cl	H	H	F	H	F	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₁₉H₁₉ClF₂O₆Na⁺ 439,07, найдено 439,30
30	Me	H	H	CF₃	Cl	H	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₁H₂₂ClF₃O₆NH₄⁺ 480,14, найдено 480,05
31	Me	H	H	OCF₃	F	H	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₁H₂₂F₄O₇Na⁺ 485,12, найдено 485,40
32	CF₃	F	H	F	H	F	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₀H₁₈F₆O₆NH₄⁺ 486,13, найдено 486,45
33	Me	H	H	OMe	H	OMe	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₂H₂₈O₈NH₄⁺ 438,21, найдено 438,10
34	Me	H	H	OMe	F	F	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₁H₂₄F₂O₇NH₄⁺ 444,18, найдено 444,20
35	Me	H	H	F	OMe	F	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₁H₂₄F₂O₇Na⁺ 449,14, найдено 449,15
36	Me	H	H	OCF₃	H	F	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₁H₂₂F₄O₇Na⁺ 485,12, найдено 485,15
37	Me	F	H	F	H	F	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₀H₂₁F₃O₆Na⁺ 437,12, найдено 437,00
38	Me	H	H	F	cPr	H	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₃H₂₇FO₆Na⁺ 441,17, найдено 441,05
39	Me	H	H	OMe	F	OMe	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₂H₂₇FO₈NH₄⁺ 456,20, найдено 456,25
40	Me	H	F	H	Cl	Me	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₁H₂₄ClFO₆Na⁺ 449,85, найдено 449,4
41	Me	H	H	Cl	CF₃	H	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₁H₂₂ClF₃O₆Na⁺ 485,83, найдено 485,3
42	Me	H	F	H	CF₃	H	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₁H₂₂F₄O₆Na⁺ 469,38, найдено 469,4
43	Me	H	F	H	H	OCF₃	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₁H₂₂F₄O₇Na⁺ 485,38, найдено 485,4
44	Me	H	F	H	H	Cl	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₀H₂₂ClFO₆Na⁺ 435,83, найдено 435,4
45	Me	H	F	H	Me	F	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₁H₂₄F₂O₆Na⁺ 433,4, найдено 433,3
46	Me	H	F	H	H	CF₃	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₁H₂₂F₄O₆Na⁺ 469,38, найдено 469,4
47	Me	H	F	H	Cl	F	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₀H₂₁ClF₂O₆Na⁺ 453,82, найдено 453,3
48	Me	H	F	H	F	Cl	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₀H₂₁ClF₂O₆Na⁺ 453,82, найдено 453,3
49	Me	H	F	F	CF₃	H	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₁H₂₁F₅O₆Na⁺ 487,37, найдено 487,3
50	Me	H	Cl	H	Me	F	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₁H₂₄ClFO₆Na⁺ 449,85, найдено 449,4
51	Me	H	H	F	H	OcPr	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₃H₂₇FO₇Na⁺ 457,16, найдено 457,15
52	Cl	F	H	F	H	F	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₁₉H₁₈ClF₃O₆NH₄⁺ 452,11, найдено 452,10
53	Me	H	H	F	cPr	F	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₃H₂₆F₂O₆NH₄⁺ 454,20, найдено 454,20
54	Me	H	F	H	H	cPr	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₃H₂₇FO₆Na₂⁺ 464,43, найдено 464,5
55	Me	H	OCF₃	H	H	Cl	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₁H₂₂ClF₃O₇Na⁺ 501,83, найдено 501,4
56	Me	H	F	H	cPr	Cl	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₃H₂₆ClFO₆NH₄⁺ 470,17, найдено 470,15
57	Me	H	H	F	Me	H	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₁H₂₅FO₆NH₄⁺ 410,20, найдено 410,20
58	CF₃	H	H	OMe	H	F	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₁H₂₂F₄O₇NH₄⁺ 480,16, найдено 480,15
59	CF₃	H	H	F	H	CF₃	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₁H₁₉F₇O₆NH₄⁺ 518,14, найдено 518,10
60	Me	H	H	F	H	Me	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₁H₂₅FO₆NH₄⁺ 410,20, найдено 410,20
61	Me	H	H	OMe	H	CF₃	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₂H₂₅F₃O₇NH₄⁺ 476,19, найдено 476,25
62	Me	H	H	F	H	cPr	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₃H₂₇FO₆NH₄⁺ 436,21, найдено 436,25
63	Me	H	H	OMe	CH₃	F	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₂H₂₇FO₇NH₄⁺ 440,21, найдено 440,25
64	Me	H	H	F	CF₃	F	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₁H₂₁F₅O₆Na⁺ 487,12, найдено 487,10
65	Me	H	H	OMe	H	Me	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₂H₂₈O₇NH₄⁺ 422,22, найдено 422,20
66	Me	H	H	Me	CF₃	H	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₂H₂₅F₃O₆NH₄⁺ 460,19, найдено 460,15
67	Me	H	H	CF₃	CF₃	H	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₂H₂₂F₆O₆Na⁺ 519,12, найдено 519,10
68	Me	H	H	CF₃	H	Me	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₂H₂₅F₃O₆NH₄⁺ 460,19, найдено 460,20
69	Me	H	H	CF₃	OMe	H	ESI-МС [M+2Na]⁺: вычислено для C₂₂H₂₅F₃O₇Na₂⁺ 504,2, найдено 504,5
70	Me	H	F	F	H	F	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₀H₂₁F₃O₆Na⁺ 437,1, найдено 437,4
71	Me	H	H	F	OMe	Cl	ESI-МС [M+2Na]⁺: вычислено для C₂₁H₂₄ClFO₇Na₂⁺ 488,1, найдено 488,5
72	Me	H	H	OiPr	H	F	ESI-МС [M+2Na]⁺: вычислено для C₂₂H₂₉FO₇Na₂⁺ 482,2, найдено 482,6
73	Me	H	H	F	F	Cl	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₀H₂₁ClF₂O₆Na⁺ 453,1, найдено 453,3
74	Me	H	H	CF₃	H	CF₃	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₂H₂₂F₆O₆Na⁺ 519,13 найдено 519,4
75	Me	H	H	CF₃	H	H	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₁H₂₃F₃O₆Na⁺ 451,15, найдено 451,3
76	Me	H	H	OMe	CF₃	H	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₂H₂₅F₃O₇Na⁺ 481,2, найдено 481,4
77	Me	H	H	F	H	H	ESI-МС [M+2Na]⁺: вычислено для C₂₀H₂₃FO₆Na₂⁺ 424,15, найдено 424,4
78	Me	H	H	OEt	H	F	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₁H₂₃F₃O₆Na⁺ 451,15, найдено 451,3
79	Me	H	H	CF₂CF₃	H	H	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₂H₂₅F₃O₇Na⁺ 481,2, найдено 481,4
80	CF₃	H	H	F	CF₃	H	ESI-МС [M+2Na]⁺: вычислено для C₂₀H₂₃FO₆Na₂⁺ 424,15, найдено 424,4
81	Me	H	H	F	OEt	H	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₂H₂₇FO₇NH₄⁺ 440,21, найдено 440,25
82	Me	H	F	H	OMe	F	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₁H₂₄F₂O₇Na⁺ 449,14, найдено 449,15
83	Me	H	H	F	CH₂NMe₂	H	ESI-МС [M+1]⁺: вычислено для C₂₃H₃₀FNO₆ 435,21, найдено 436,3
84	Me	H	H	F	Me	Me	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₂H₂₇FO₆NH₄⁺ 424,21, найдено 424,25
85	Me	H	H	F	H	CHF₂	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₁H₂₃F₃O₆NH₄⁺ 446,18, найдено 446,15
86	Me	H	H	CHF₂	H	CHF₂	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₂H₂₄F₄O₆NH₄⁺ 478,18, найдено 478,15
87	Me	H	H	OMe	CF₃	F	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₂H₂₄F₄O₇NH₄⁺ 494,18, найдено 494,25
88	Me	H	H	F	F	Me	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₁H₂₄F₂O₆NH₄⁺ 428,19, найдено 428,15
89	Me	H	H	F	iPr	F	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₃H₂₈F₂O₆NH₄⁺ 456,22, найдено 456,25
90	Me	H	H	OiPr	H	CF₃	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₄H₂₉F₃O₇NH₄⁺ 504,22, найдено 504,25
91	Me	H	H	F	OiPe	F	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₄H₃₀F₂O₇NH₄⁺ 486,23, найдено 486,30
92	Me	H	H	F	Pr	F	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₃H₂₈F₂O₆NH₄⁺ 456,22, найдено 456,20
93	Me	H	H	F	OiPr	F	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₃H₂₈F₂O₇NH₄⁺ 472,21, найдено 472,30
94	Me	H	H	F	Et	F	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₂H₂₆F₂O₆Na⁺ 447,16, найдено 447,20
95	Me	H	H	F	CHOHMe	F	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₂H₂₆F₂O₇NH₄⁺ 458,20, найдено 458,15
96	Me	H	H	F	OCHF₂	F	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₁H₂₂F₄O₇NH₄⁺ 480,16, найдено 480,25
97	CF₃	H	H	F	F	F	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₀H₁₈F₆O₆Na⁺ 491,09, найдено 490,95
98	Me	H	H	H	F	H	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₀H₂₃FO₆NH₄⁺ 396,18, найдено 396,25
99	Me	H	H	H	Cl	H	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₀H₂₃ClO₆NH₄⁺ 412,15, найдено 412,15
100	Me	H	H	H	cPr	H	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₃H₂₈O₆NH₄⁺ 418,22, найдено 418,20
101	Me	H	H	F	OCF₃	F	ESI-МС [M+Na]⁺: вычислено для C₂₁H₂₁F₅O₇Na⁺ 503,11, найдено 503,15
102	Me	H	H	F	CH₂OMe	F	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₂H₂₆F₂O₇NH₄⁺ 458,20, найдено 458,25
103	Me	H	H	F	CCH	F	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₂H₂₂F₂O₆NH₄⁺ 438,17, найдено 438,20
104	Me	H	H	F	NMe₂	F	ESI-МС [M+H]⁺: вычислено для C₂₂H₂₇F₂NO₆H⁺ 440,19, найдено 440,15
105	Me	H	H	H	CF3	H	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₁H₂₃F₃O₆NH₄⁺ 446,18, найдено 446,20
106	Me	H	H	OMe	F	CF₃	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₂H₂₄F₄O₇NH₄⁺ 494,18, найдено 494,15
107	Me	H	H	F	CHOHMe	F	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₂H₂₆F₂O₇NH₄⁺ 458,20, найдено 458,15
108	Me	H	H	F	CHOHMe	F	ESI-МС [M+NH₄]⁺: вычислено для C₂₂H₂₆F₂O₇NH₄⁺ 458,20, найдено 458,15
109	Me	H	H	F	H	N(CH₃)₂	ESI-МС [M+H]+: вычислено для C22H28FNO6H+ 422,20, найдено 422,25
110	Me	H	H	CF₃	F	F	ESI-МС [M+NH4]+: вычислено для C21H21F5O6NH4+ 482,16, найдено 482,14

Протокол оценки биологической активности соединений по настоящему изобретению

Активности соединений примеров 1-108, представленных выше, в качестве антагонистов/ингибиторов FimH определяют в соответствии с описанным(и) далее анализом(ами), полученные результаты представлены в таблице 2. Отсутствие результатов означает, что активности не тестировались.

АНАЛИЗ ИНГИБИРОВАНИЯ ГЕМАГГЛЮТИНАЦИИ (HEMAGGLUTINATION INHIBITION - HAI)

Анализ ингибирования гемагглютинации (HAI) проводят с бактериями UTI89 и эритроцитами морской свинки, как описано ранее (S.J. Hultgren, W.R. Schwan, A.J. Schaeffer, J.L. Duncan Infect. Immun. 1986, 54, 613-620; и Jarvis, C.; Han, Z.; Kalas, V.; Klein, R.; Pinkner, J. S.; Ford, B.; Binkley, J.; Cusumano, C.K.; Cusumano, Z.; Mydock-McGrane, L.; Hultgren, S.J.; Janetka, J.W., ChemMedChem 2016, 11, 367−373). Результаты представлены в таблице 2. Если в таблице не представлено значение, это означает, что соединение представленные в таблице, не тестировались.

Общие методики анализов для получения значений AUC при пероральном введении время (ч)×доза (мкм), %F и Ue% ПО

1.1 Животные

Самцов крыс приобретают у компании Vital River Laboratory Animal Technology Co. Ltd (Beijing, China). На дату введения дозы возраст животных -приблизительно 6-8 недель, масса тела - 200-300 г. Животных содержат при 12 ч освещенности/12 ч темноты со свободным доступом к пище и воде. Всех животных кормят перед введением дозы. Исследования одобрены Комитетом по уходу и использованием животных (Pharmaron Institutional Animal Care и Use Committee - IACUC).

1.2. План исследования

Самцов крыс Wistar Han (n=3 на группу дозы) распределяют по группам, как показано в таблице ниже. Тестируемое соединение вводят внутривенной инфузией в течение 1 ч (1 мг/кг) со скоростью 5 мл/кг/ч Спустя 48 ч животные получают разовую пероральную дозу (5 мг/кг, свободная форма) в объеме дозы 10 мл/кг, соответственно. Образцы крови отбирают в различные моменты времени после внутривенной инфузии и перорального введения. Образцы мочи отбирают в различные моменты времени после внутривенной инфузии и перорального введения.

Группа	Доза (мг/кг)	Скорость инфузии (мл/кг/ч)	Объем дозы (мл/кг)	Конц. (мг/мл)	Способ введения	Количество животных
1	1	5	-	0,2	Внутривенная инфузия	3/группа
2	5	-	10	0,5	Пероральное введение	3/группа

1.3. Получение препарата

Получение препарата для внутривенного введения инфузией (1 мг/кг)

Тестируемое соединение растворяют в ДМСО при интенсивном перемешивании и ультразвуковой обработке для получения исходного раствора. Алкиквоту исходного раствора смешивают с 10% HP-β-CD в физиологическом растворе при интенсивном перемешивании с получением раствора тестируемого соединения с концентрацией 0,2 мг/мл.

Получение препарата для перорального введения (5 мг/мг)

Тестируемое соединение добавляют к 1% метилцеллюлозе при интенсивном перемешивании и ультразвуковой обработке с получением гомогенной суспензии тестируемого соединения с концентрацией 0,5 мг/мл.

1.4. Забор образцов

Образцы крови

При введении внутривенной инфузией (1 мг/кг) образцы крови отбирают у каждого животного через 0, 0,25, 0,5, 0,75, 1, 1,08, 1,25, 1,5, 1,75, 2, 3, 5, 8, 12, 24 ч после введения дозы.

При пероральном введении (ПО) (5 мг/кг) образцы крови отбирают у каждого животного через 0, 0,25, 0,5, 1, 1,5, 2, 3, 4, 6, 8, 12, 24 ч после введения дозы.

Образцы крови (50 мкл) собирают от каждого животного через яремную вену. Полученные образцы помещают в пробирки, содержащие К₂EDTA. Цельную кровь смешивают с таким же объемом воды и несколько раз переворачивают. Образцы хранят при -75±15°C до проведения анализа.

Образцы мочи

При введении внутривенной инфузией (1 мг/мг) образцы мочи собирают от каждого животного через 0-4, 4-8, 8-12, 12-24 ч после введения дозы.

При пероральном введении (5 мг/кг) образцы мочи собирают от каждого животного через 0-4, 4-8, 8-12, 12-24 ч после введения дозы.

Образцы мочи собирают непрерывно в контейнеры, находящиеся на сухом льду, с интервалами, указанными ниже, и хранят при -80°C до проведения анализа.

1.5. Получение стандартных растворов для ЖХ-МС/МС анализа

Исходный раствор тестируемого соединения с концентрацией 10 мг/мл разбавляют ДМСО для получения стандартного исходного раствора с концентрацией 1 мг/мл (свободная форма).

Приготавливают стандартные рабочие калибровочные растворы с концентрациями 5, 10, 20, 50, 100, 500, 1000, 5000 и 10000 нг/мл последовательным разбавлением стандартного исходного раствора в в 50% растворе ацетонитрила в воде. Рабочие растворы контрольного качества (quality control - QC) с концентрациями 10, 500 и 8000 нг/мл получают последовательным разбавлением стандартного исходного раствора в 50% растворе ацетонитрила в воде. Эти QC образцы получают в день анализа способом, аналогичным способу получения калибровочных стандартов.

1.6 Обработка образцов

5 мкл каждого стандартного калибровочного рабочего раствора (5, 10, 20, 50, 100, 500, 1000, 5000 и 10000 нг/мл) добавляют к 50 мкл чистой крови крыс Wistar Han (чистая кровь:вода=1:1) или мочи для получения калибровочных образцов 0,5-1000 нг/мл (0,5, 1, 2, 5, 10, 50, 100, 500, 1000 нг/мл) в общем объеме 55 мкл. Образцы контроля качества (Quality Control - QC) при 1 нг/мл (низкое), 50 нг/мл (среднее), 800 нг/мл (высокое) для крови или мочи получают независимо для образцов, используемых для калибровочных кривых. Эти QC образцы получают в день анализа таким же образом, как и калибровочные стандарты.

55 мкл стандартов, 55 мкл QC образцов или 55 мкл неизвестных образов (50 мкл крови или мочи с 5 мкл 50% ацетонитрила) смешивают с 200 мкл ацетонитрила, содержащего IS (дексаметазон) для осаждения белков. Затем образцы энергично перемешивают в течение 30 сек. После центрифугирования при 4°C со скоростью 4700 об/мин в течение 30 мин 5 мкл супернатанта впрыскивают в ЖХ-МС/МС систему для количественного анализа.

1.7. Фармакокинетический анализ

Для расчета фармакокинетических параметров используют концентрации крови и мочи каждого животного после внутривенной инфузии в дозе 1 мг/кг и перорального введения в дозе и 5 мг/кг с использованием некомпартментного анализа (Phoenix TM WinNonlin® 7.0). Для расчета AUC используют линейный метод трапеций.

AUC при пероральном введении (ч*мкM): Площадь под кривой «концентрация в крови - время (единицы: ч*мкM) после перорального введения

%F: Биодоступность при пероральном введении (%), полученная из соотношения «доза-нормализованная AUC» после перорального и внутривенного введения

Ue% при пероральном введении: Процент пероральной дозы, которая выведена в неизмененном виде в мочу

Таблица 2

Пример №	HAI титр EC>90	*AUC при пероральном введении чмкM**	%F	Ue% при пероральном введении
1	"++++"	"+"	"++"	"++"
2	"++++"	"+++"	"++"	"++"
3	"++++"	"+++"	"++"	"++"
4	"++++"	"+"	"++"	"++"
5	"++++"	"++"	"++"	"++"
6	"++++"	"+"	"++"	"++"
7	"++++"	"+++"	"+++"	"+++"
8	"++++"	"+"	"+++"	"++"
9	"++++"	"++"	"+++"	"+++"
10	"++++"
11	"+++"	"++"	"+++"	"++"
12	"+++"
13	"+++"
14	"+++"
15	"++++"	"+"	"++"	"++"
16	"++++"	"++"	"++"	"++"
17	"+++"
18	"+++"
19	"++++"
20	"++++"
21	"+++"
22	"++++"
23	"+++"
24	"++++"	"+"	"++"	"++"
25	"++++"
26	"++++"
27	"+++"
28	"+"
29	"+++"
30	"++++"
31	"+++"
32	"++++"	"+"	"++"	"++"
33	"++++"
34	"++++"
35	"++++"
36	"++++"
37	"++++"
38	"+++"
39	"++++"
40	"+++"
41	"++++"
42	"+++"
43	"+++"
44	"+++"
45	"++++"
46	"+++"
47	"++++"
48	"+++"
49	"+++"
50	"+++"
51	"++++"
52	"+++"
53	"++++"
54	"+++"
55	"+++"
56	"+++"
57	"+++"
58	"++++"
59	"++++"
60	"+++"
61	"++++"	"++"	"++"	"+"
62	"+++"
63	"++++"
64	"++++"	"++"	"++"	"++"
65	"+++"
66	"++++"
67	"++++"
68	"++++"
69	"++++"
70	"++++"
71	"++++"
72	"++++"
73	"++++"	"+"	"++"	"++"
74	"++++"	"++"	"++"	"+"
75	"+++"
76	"++++"
77	"+++"
78	"++++"
79	"+++"
80	"++++"
81	"++++"
82	"++++"
83	"++++"
84	"++++"
85	"++++"
86	"++++"
87	"++++"
88	"++++"
89	"++++"
90	"+++"
91	"++++"
92	"++++"
93	"++++"	"+"	"++"	"+"
94	"++++"	"+"	"++"	"+"
95	"++++"
96	"++++"
97	"++++"
98	"+++"
99	"+++"
100	"+++"
101	"++++"	"+"	"++"	"+"
102	"++++"
103	"++++"
104	"++++"
105	"+++"
106	"++++"
107	"++++"
108	"++++"
109	«++++»
110	«++++»

Условные обозначения для таблицы 2

	*AUC при пероральном введении, чмкM n=3**	%F	Ue% при пероральном введении
«+»	<0,5 ч, мкмM	<10%	<0,5%
«++»	0,5<=x<=1 ч, мкМ	10<=x<=30%	0,5<=x<=5%
«+++»	>1 ч, мкмM	>30%	>5%

HAI нM

<50	«++++»
50-200	«+++»
201-1000	«++»
>1000	«+»

Из приведенного выше описания специалист в данной области техники может легко определить основные характеристики данного изобретения и может внести в изобретение различные изменения и модификации, не выходя за рамки его сущности и объема, для адаптации к различным видам использования и условиям.

1. Соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль

где

R₁ представляет собой CH₃ или CF₃;

R₂ представляет собой H;

R₃ представляет собой F;

R₄ представляет собой CH₃, Cl, Br, винил, CF₃, F или H;

R₅ представляет собой F или H; и

R₆ представляет собой H.

2. Соединение по п. 1, которое представляет собой (2R,3S,4S,5S,6R)-2-((R)-(3',5'-дифтор-3,4'-диметил-[1,1'-бифенил]-4-ил)(гидрокси)метил)-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2H-пиран-3,4,5-триол.

3. Соединение по п. 1, которое представляет собой (2R,3S,4S,5S,6R)-2-((R)-(4'-хлор-3',5'-дифтор-3-метил-[1,1'-бифенил]-4-ил)(гидрокси)метил)-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2H-пиран-3,4,5-триол.

4. Соединение по п. 1, которое представляет собой (2R,3S,4S,5S,6R)-2-((R)-(4'-бром-3',5'-дифтор-3-метил-[1,1'-бифенил]-4-ил)(гидрокси)метил)-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2H-пиран-3,4,5-триол.

5. Соединение по п. 1, которое представляет собой (2R,3S,4S,5S,6R)-2-((R)-(3',5'-дифтор-3-метил-4'-винил-[1,1'-бифенил]-4-ил)(гидрокси)метил)-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2H-пиран-3,4,5-триол.

6. Соединение по п. 1, которое представляет собой (2R,3S,4S,5S,6R)-2-((R)-(3'-фтор-3-метил-4'-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-4-ил)(гидрокси)метил)-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2H-пиран-3,4,5-триол.

7. Соединение по п. 1, которое представляет собой (2R,3S,4S,5S,6R)-2-((R)-гидрокси(3',4',5'-трифтор-3-метил-[1,1'-бифенил]-4-ил)метил)-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2H-пиран-3,4,5-триол.

8. Соединение по п. 1, которое представляет собой (2R,3S,4S,5S,6R)-2-((R)-(3',5'-дифтор-3-(трифторметил)-[1,1'-бифенил]-4-ил)(гидрокси)метил)-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2H-пиран-3,4,5-триол.

9. Соединение по п. 1, которое представляет собой (2R,3S,4S,5S,6R)-2-((R)-(3',5'-дифтор-3-метил-[1,1'-бифенил]-4-ил)(гидрокси)метил)-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2H-пиран-3,4,5-триол.

10. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пп. 1-9 для применения в качестве лекарственного средства.

11. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пп. 1-9 для применения в предотвращении или лечении заболевания или состояния, которое облегчается ингибированием функции или активности FimH.

12. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пп. 1-9 для применения в предотвращении или лечении бактериальной инфекции, болезни Крона (БК) и воспалительной болезни кишечника (ВБК).

13. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пп. 1-9 для применения в предотвращении или лечении инфекции мочевыводящих путей (ИМП).

14. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пп. 1-9 для применения в производстве лекарственного средства для предотвращения или лечения заболевания или состояния, которое облегчается ингибированием функции или активности FimH.

15. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пп. 1-9 для применения в производстве лекарственного средства для предотвращения или лечения бактериальной инфекции, болезни Крона (БК) и воспалительной болезни кишечника (ВБК).

16. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пп. 1-9 для применения в производстве лекарственного средства для предотвращения или лечения инфекции мочевыводящих путей.

17. Фармацевтическая композиция, обладающая свойствами ингибитора в отношении функции или активности FimH, содержащая соединение или его фармацевтически приемлемую соль по любому из пп. 1-13 вместе с фармацевтически приемлемым носителем.

18. Способ ингибирования функции FimH, включающий контактирование FimH с соединением или его фармацевтически приемлемой солью по любому из пп. 1-9.

19. Способ лечения FimH-опосредуемого заболевания, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп. 1-9 пациенту-человеку, нуждающемуся в этом.

20. Способ по п. 19, в котором указанное заболевание выбрано из бактериальной инфекции, болезни Крона (БК) и воспалительной болезни кишечника (ВБК).

21. Способ по п. 20, в котором указанная бактериальная инфекция представляет собой инфекцию мочевыводящих путей.

22. Способ по п. 21, в котором указанная инфекция мочевыводящих путей является рецидивирующей.

23. Способ по п. 21, в котором указанная инфекция мочевыводящих путей является хронической.

24. Способ по п. 20, в котором указанная бактериальная инфекция представляет собой инфекцию, резистентную к антибиотикам.

25. Способ по п. 20, в котором указанное заболевание представляет собой болезнь Крона.

26. Фармацевтическая композиция, обладающая свойствами ингибитора в отношении функции или активности FimH, содержащая соединение или его фармацевтически приемлемую соль по любому из пп. 1-9 и изготовленная для перорального (ПО) введения.

27. Фармацевтическая композиция по п. 26, которая выбрана из таблетки и капсулы.

28. Фармацевтическая композиция, обладающая свойствами ингибитора в отношении функции или активности FimH, содержащая соединение или его фармацевтически приемлемую соль по любому из пп. 1-9 и изготовленная для местного введения.

Настоящее изобретение относится к соединению формулы: или его фармацевтически приемлемой соли или его сложному эфиру, обладающим ингибирующим действием в отношении SGLT2, а также к фармацевтической композиции. 3 н.п.

Кристаллические формы комплексов, полезные в качестве ингибиторов sglt2, и способы их получения // 2641905

Изобретение относится к кристаллической форме комплекса (2S,3R,4R,5S,6R)-2-(4-хлор-3-(4-(2-иклопропоксиэтокси)бензил)фенил)-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2Н-пиран-3,4,5-триол, бис(L-пролин), характеризующаяся паттерном дифракции рентгеновских лучей на порошке, включающим пики при 4,08, 17,19 и 21,12 градусов 2θ (±0.05 градусов 2θ), где указанный паттерн дифракции рентгеновских лучей на порошке получают с применением излучения CuKα1.

Способ получения бензилбензольных ингибиторов sglt2 // 2625795

Изобретение относится к способу получения бензилбензольных ингибиторов SGLT2, оказывающих ингибирующее действие на натрий-зависимый переносчик глюкозы соединения формулы Ia, включающему (a) получение первой реакционной смеси, содержащей соединение формулы IIa: алкил-магниевый комплекс, выбранный из группы, состоящей из С1-С4 алкилмагния хлорида, С1-С4 алкилмагния бромида, ди(С1-С4 алкил)магния, С3-С7 циклоалкилмагния хлорида, С3-С7 циклоалкилмагния бромида и ди(С3-С7 циклоалкил)магния, и первый органический растворитель, где соотношение алкил-магниевого комплекса и соединения формулы IIa выбрано из 0,9, 0,91, 0,92, 0,93, 0,94, 0,95, 0,96 и 0,97 (моль/моль), где первая реакционная смесь находится при температуре -50°С или ниже, с образованием промежуточного соединения; и (b) получение второй реакционной смеси, содержащей промежуточное соединение, второй органический растворитель и соединение формулы IIIa: с образованием соединения формулы Ia, где R4 представляет собой ОН и каждый Ra представляет собой Rb; (c) получение третьей реакционной смеси, содержащей C1-С3 алкилгидрокси, сильную кислоту и соединение формулы Ia, где R4 представляет собой ОН, и каждый Ra представляет собой Rb, с образованием соединения формулы Ia, где R4 представляет собой C1-С3 алкокси, и каждый Ra независимо выбран из группы, состоящей из Н и Rb; и (d) получение четвертой реакционной смеси, содержащей восстановитель и соединение формулы Ia, где R4 представляет собой C1-С3 алкокси, и где реакционная смесь содержит менее 0,1 эквивалентов магния по отношению к количеству соединения формулы Ia, с образованием соединения формулы Ia, где R4 представляет собой Н, где X представляет собой иод, R1 представляет собой хлор, R2 представляет собой Н, R3 представляет собой (С3-С6 циклоалкокси)С1-С3 алкокси, R4 выбран из группы, состоящей из Н, ОН и C1-С3 алкокси, каждый Ra независимо выбран из группы, состоящей из Н, C1-С3 алкила и Rb, Rb представляет собой защитную группу, где алкил, алкокси и циклоалкил группы или их части могут необязательно быть полностью или частично фторированными, и один или больше атомов водорода могут быть необязательно заменены на атомы дейтерия, а также описаны синтетические интермедиаты, которые могут применяться для получения таких соединений.

Производные с-арилглюкозидов, способ их получения и фармацевтическое применение // 2606501

Настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I), их фармацевтически приемлемым солям или стереоизомерам, способу их получения и применению в медицине: где А представляет собой фенил, , или тиенил, где фенил замещен 1-5 атомами галогена и -OR7; R7 представляет собой C1-6 алкил, где C1-6 алкил возможно замещен одной или более группами, выбранными из дейтерия, галогена, C1-6 алкокси и C1-6 циклоалкокси; или указанный фенил замещен только -OR7, где R7 представляет собой C1-6 алкил, и указанный C1-6 алкил дополнительно замещен 1-3 группами, выбранными из галогена и С3-10 циклоалкокси; или, если А представляет собой или тиенил, тиенил возможно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, C1-6 алкила и фенила, необязательно замещенного дейтерием или галогеном; R1, R2, R3 или R4 выбраны из водорода, C1-6 алкила или галогена; R5 и R6 выбраны из водорода и дейтерия.

Кристаллическая форма бензил-бензольного ингибитора sglt // 2569491

Изобретение относится к новой кристаллической форме ингибитора натрий-зависимого котранспортера глюкозы SGLT2 формулы характеризущейся порошковой рентгеновской дифрактограммой (XRPD) с использованием излучения CuKα1, включающей пики при 11,2, 12,9, 15,5, 17,8, 19,1, 20,0 и 20,7 градусах 2θ (±0,1 градуса 2θ), спектром комбинационного рассеяния, включающим пики при 353, 688, 825, 1178, 1205, 1212, 1608, 2945, 3010 и 3063 см-1, а также эндотермой, полученной методом дифференциальной сканирующей калориметрии (DSC), при 136°С, ее получению перекристаллизацией из этанола или метанола добавлением воды и фармацевтическим композициям на ее основе для лечения заболеваний, патогенез которых требует ингибирования натрий-зависимого котранспортера глюкозы 2 (SGLT2).

Способ получения ингибиторов sglt2 // 2530494

Данное изобретение относится к способу получения комплекса формулы IА: в котором аминокислота выбрана из группы состоящей из пролина и фенилаланина, где n представляет собой 1 или 2; R1 выбран из группы, состоящей из водорода и гало; V выбран из группы, состоящей из кислорода и одинарной связи; W выбран из группы, состоящей из C1-C6 алкилена, C2-C6 алкенилена, C2-C6 алкинилена и C3-C10 циклоалкилена; X выбран из группы, состоящей из одинарной связи и кислорода; Y выбран из группы, состоящей из водорода, C1-C6 алкила, C1-C2 галоалкила, C1-C6 гидроксиалкила, C2-C6 алкенила, C2-C6 алкинила, C3-C10 циклоалкила, (C3-C10 циклоалкил)C1-C4 алкила и (C1-C4 алкилокси)C1-C3 алкила, где алкильные или циклоалькильные группы или их части в W и Y при необходимости частично или полностью фторированы, или его фармацевтически приемлемой соли, включающему (а) реакцию соединения формулы II с восстановительным агентом в присутствии активирующего агента с образованием соединения формулы III (б) контактирование указанного соединения формулы III с аминокислотой c образованием указанного комплекса формулы IA; где стадии (а) и (б) проводят без очистки указанного соединения формулы III и где стадии (а) и (б) проводят последовательно без промежуточных этапов введения и снятия защиты группы, обладающих ингибиторным действием на зависимый от натрия транспортер SGLT.

Дейтерированные бензилбензольные производные и способы применения // 2509773

Представлены композиции, обладающие эффектом ингибирования натрий-зависимого ко-транспортера глюкозы (SGLT), имеющие структуру, указанную ниже, где значения радикалов указаны в описании. Настоящее изобретение также обеспечивает фармацевтические композиции и способы обогащения дейтерием диарилметиленового соединения, имеющего структуру, указанную ниже, где значения радикалов указаны в описании.

Бензиловые производные гликозидов и способы их применения // 2492175

C-арил глюкозидные sglt2 ингибиторы и способ их применения // 2337916

С-арилглюкозидные ингибиторы sglt2 // 2262507

Abx196 для применения при лечении рака мочевого пузыря // 2778812

Группа изобретений относится к области фармакологии и медицины и направлена на лечение рака мочевого пузыря. Раскрыто применение соединения ABX196, имеющего формулу (I), или одной из его фармацевтически приемлемых солей в способе лечения рака мочевого пузыря, причем указанный способ не включает введение дополнительного химиотерапевтического средства и/или иммунотерапевтического агента и/или антигена.