Способ предварительной обработки культуралбной жидкости новобиоцина

 

ew )f

ГЛЪТ ° - %сюмФ бт блветещп ц g ф

О П И С Л Н И Е 356862

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик

Зависимое от авт. свидетельства №

М. Кл. А 61k 21, 00

С 124 900

Заявлено 05.1V.1971 (№ 1646726)31-16) с присоединением заявки №

Приоритет

Опубликовано 01.ill.1973. Бюллетень № 13

Дата опубликования описания 31 V,1973

Комитет по делам изооретений и открытий при Совете йтииистрое

СССР

УДK 615.779.931(088.8) Авторы изобретения

С. A. Жуковская, Е. А. Рубан, В. Н. Русин и В. В. Бирюков

Всесоюзный научно-исследовательский инст

Заявитель

СПОСОБ ПРЕДВАРИТЕЛЬНОЙ ОБРАБОТКИ КУЛЬТУРАЛЬНОЙ

ЖИДКОСТИ НОВОБИОЦИНА

Изобретение относится к области медицины, а именно к способам получения антибиотиков.

Известен способ предварительной обработки культуральной жидкости новобиоцина, заключающийся в том, что культуральную жидкость обрабатывают тринатрийфосфатом до рН 9,2 и затем хлористым кальцием до рН 9,1 с последующим нагреванием.

Цель изобретения — предотвращение потерь антибиотика. Для этого по предлагаемому способу процесс обработки проводят при рН

7,5 — 7,7.

Пример 1. 15 л культур альной жидкости новобиоцина с общей активностью 600 ед/лтл и активностью водной фазы 500 ед/л л загружают в аппарат емкостью 20 л, снабженный системой автоматического управления процессом коагуляции, В мерники загружают раствор хлористого кальция,,содержащий 60 г безводной соли, 5%-ный раствор соды и 20%ный раствор фосфорной кислоты. Включают автоматическую систему, рН исходной культуральной жидкости, регистрируемый автоматическим потепцпометром типа ЭПД-32, сост а вл я ет 8,1.

К жидкости добавляют вручную 15 г двузамещенного фосфота аммония, рН ее прп этом снижается до 7,9. Через 5 лтин после включения автоматической системы открывается клапан на линии подачи раствора хлористого кальция, подача которого производится 10 вин.

В процессе добавления хлористого кальция рН достигает 7,5 и включается подача соли. рН жидкости после обработки ее коагулянта5 ми составляет 7,6. Линия подачи кислоты не включается и через 5 вин по окончании обработки коагулянтагмп включается пар. В процессе нагрева до 70 С рН жидкости снижается до 7,5, корректировка рН не производится

10 (рН остается в требуемых пределах), После выдержки в течение 10 лтин жидкость отфильтровывают на фильтр-прессе. Скорость фильтрации 70 л/лР час. Мицелий промывают

8 л 1%-ного раствора соды, суспензию фильт15 руют, осадок па фильтре промывают 1 л воды.

Фильтрат присоединяют к нативному раствору.

Получают 18,5 л фильтрата с активностью

415 ед/ ял. В ыход антибиотика 85,3% от содер20 жания его в культуральной жидкости. Из нативного раствора новобиоцин извлекают 2,8 л бутилацетата при рН водной фазы 5,0 с использованием контакта Петрова |в качестве дезамульгатора. Выход антибиотика на стадии

25 э кстракции 90ср.

Пример 2. 13 л культуральной жидкости т1овобпоцпна с общей активностью 530 ед/ял и активностью волной фазы 450 ед/.ил загружают в аппарат для коагулятцш и включают

30 автоматическую систему. рН исходной жндко356862

Составитель Т. Головина

Техред 3. Тараненко

Редактор Л. Горячева

Корректоры: Г. Агаяи и Н. Стельмах

Заказ 15627! Изд. № 412 Тираж 467 Подписное

ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР

Москва, Ж-35, Раушская иаб., д. 475

Типография, пр. Сапунова, 2 сти 7,3. Автоматически включается подача соды, рН при этом поднимается до 7,7, после чего к жидкости добавляют 13 г двузамещепноно фосфата аммония, рН жидкости прп агом становится равным 7,5. Затем включается подача раствора хлористого кальция и одновременно в коагулятор вводится сода для коррекции рН. Общий расход хлористого кальция

65 г (считая на безводную соль). рН жидкости после обработки 7,5. Далее процесс ведут по примеру 1.

Получают 16 л фпльтрата с активностью

382 ед/ил. Выход антибиотика 88,7% oT содержания его в культуральной жидкости. Выход на стадии экстракции 88%.

При мер 3. Обработке подвергают 14,5 л культуральной жидкости с общей активностью

740 ед/мл, активностью фильтрата 610 ед/ил и рН 8,6. Затем жидкость обрабатывают 14,5г фосфорнокнслого аммония, рН становится при этом равным 8,45, затем в жидкость вводят раствор хлористого кальция (из расчета добавления 58 г безводной соли) рН после добавления 8,0. Далее включается подача раствора фосфорной кислоты, которая снижает рН жидкости до 7,7.

B дальнейшем операция проводится так же, как в примере 1. В процессе нагрева происходит повышение рН выше 7,7, при этом рН корректируется подачей раствора фосфорной кислоты и поддерживается в пределах 7,5 — 7,7.

Получают 19 л фильтрата с активностью

485 ед/ял. Выход антибиотика 86% от содержания его в культуральной жидкости. Выход

íа стадии экстракцпи 91,5%

Выход на стадии экстракции после обра10 ботки культуральной жидкости известным способом составляет 89%, после обработки по предлагаемому способу 89,5%, т. е. выходы на этой стадии практически одинаковы.

Следовательно, предлагаемый способ оора15 оотки жидкости, не снижая степени очистки раствора, позволяет повысить выход антибиотика на стадии обработки жидкости и отделения мицелия с 74 до 86%.

Предмет изобретения

Способ предварительной обработки культуральной жидкости новобиоцина солью фосфорной кислоты и хлористым кальцием с последующим нагреванием, отличающийся тем, 25 что, с целью предотвращения потерь антибиотика, процесс обработки проводят при рН

7,5 — 7,7,