Иммунологический способ ]щгностики актишости туберкулезнош пшцбсслф1'sji'd^ju-s" 5!1изобретение относится к облас- 1 ти медицины и касается тшунологических способов диагностики активности туберкулезного процесса.известен способ оценки гзт путем учета цитотоксжческого эффекта, развивающегося при добавлении иммунных лимфоцитов испытуемого организма к клеткам-мишеням, например макро(|)агам» обработанним туберкулином.с целью повышения специфичности и чувствительности способа лимфоциты добавляют к макрофагам животного, зараженного туберкулезом.пример. эксперимент выполняют на мышах линии ва1ь/с. 20 мышей за 21 и 28 дней до исследования заражают 0.1 мг культурыhi7^v , 20 мышей - за 1,5 месяца до опыта вакцинируют i мг бцк и 20 мышей берут в качестве контроля. макрофаги из перитонеальной полости от зараженных, вакцинированных и контрольных мышей вы-10152025ращивают в течение 48 час в плоскодонных пробирках (в каадую пробирку вносят по 200-250 тыс.макрофагов в i мл среды 199 с 20^ сыворотки крупного рогатого скота и 10/0 лактальбумина;. затем в пробирк-й добавляют лимфоциты также от зараженных, вакцинированных и контрольных животных в соотношении 100 жизнеспособных лимфоцитов на i макрофаг (лнк4'оциты получают из лимфоузлов "выдавливанием^, шзнеспособность их оценивают при окраске 0, 1^ трепановым синим и 0,1^ эозином), 2*10*^ жизнеспособкшх лимфоцитов добавляют в каждую пробирку с макрофагами в i nji среды 199 с 15^ лактальбумина, через i сутки соеду заменяют на новую порцию с 2% сыворотки «рудного рогатого свота и 10^ лайтальоумина. результаты реакции оценивают еще через 48 час по формуле^ -ь . 1оо:й, а

 

и>) 424430

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

Союз Советских

Социьттистииеских

Республик (61} Зависимое от авт. свидетельства(22) Заявлено08, I2 7I (21)1722835/3Н

Р1) М

С I2k I/00 с присоединением заявки—

Государственный комитет

Совета Министров СССР во делам изобретений и открытий (32) Приоритет—

Опублиновант05,09,ЯБюллетень № 33

Дата опубликования описания 15 12 т 4 (Ьз} удкбХ6-002.5 (088.8) М.М.Авербах, В.И,Литвинов, В.А. Клюев, В,Я.Гергерт, А.М.Мороз и Н, С.Колодяжная (72) Авторы изобретения (т1} За„,„„, ФНтраЛЬНЫИ НауЧНО-ЛССЛЕдОВатЕЛ ЬСКИй ИНСтИту т туберкулеза

ИММУНОЛОГИЧЕСКИЙ СПОСОБ ЯИ

АКТИВНОСТИ ТУБЕРКУЛЕЗНОГО

Изобретение относится к облас- 1 ти медицйны и касается иммунологических способОВ диагностики актиВности туберкулезного процесса.

Иэве(:тен способ оценки ГЭТ путем учета цитотоксического эффекта, развивающегося при добавлении иммунных лимфоцитов испытуемого организма к клеткам-мишеням, например макрофагам, обработайным туберкулином.

С целью повышения сйецифичности и чувствительности способа лимфоциты добавляют к макрофагам животного, ", араженного туберкулезом.

Пример, Эксперимент в олняют HB мышах линии Вд ь/с. 20 мышей за 21 и 28 дней до исследования заражают 0 I мг культуры

H> 9V Ы мишей — за I,5 месяца до опыта вакцинируют I мг

Б4Ж и 20 мышей берут в качестве контроля. Макрофаги из перитонеальной полости от зараженных, вакцинированных и контрольных мышей вы-ращивают в течение 46 час в плоскодонных пробиркаХ (в каждую пробирку вносят по 200-250 тыс,макрофагов в Х мл среды I99 с 20 сыворотки крупного рогатого скота и

П) лактальбу1уина). Ьатем в пробирки добавляют л мфоциты также от зараженных, вакцинированных и контрольных жйвотных в соотношении в IU0 жизнеспособных лимфоцитов на

Х макрофаг (лимфоциты пол чают из лимфоузлов "выдавливанием, жизнеспособность их оценивают при окраске 0,Х% трепановым синим и О, ГЯ зозийом). 2 ХО жизнеспособнйх лимфоцитов добавляют в каждую пробирку с цакрофагами в I вл среды

I9î с Х5% лактальбумина, через I сутки среду заменяют на новую пор>0 цию с 2$ сыворотки крупного рогатого сиота и ХОЗ лаитальбумина. Результаты реаиции оценивают еще через

48 час по формуле в- . тоси, Составитель Q цЕНЕВа

Редактор Ц ЯЛОХИНа техред Н pe корректоры: Q ЩДОбИНЯ

Заказ Щ1а>

Изд. K ging Тираж у Яр Подписное

ЦНИИПИ Госуда рственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

Москва, И3035, Раупзская наб., 4

Предприятие «Патент», Москва, Г-59, Бережковская наб., 24

3 где а - число живых макрофагов (в среднем на одно поле зрения, увеличение 200 раз) после иякубации с контрольными., а Ь вЂ” с сенсибилизированнйми лимфоцитами.

В качестве сенсибилизированных лимфоцитов в клинике берут клетки крови больных, а в качестве клеток иишеней - клетки экссудата, по. лученного у лиц ей с помощью конта.ридинового пузыря либо клетки экссудата животных (так как межвидовые различия в этой ремции играют незначительную роль, если не было

4 предварительной взаимнои иммунизации).g

НРИЗыет изОБРжтжиЯ

Иммунологический способ диагнос тики активности туберкулезного . процесса путем добавления иммунных лимфоцитов испытуемого к клеткам1О мишеням с последующим определением цитотоксического эффекта, о тл и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения специ ычйости и чувствительности способа, лимфоциTH добавляют R макрофагaM животного, зараженного туберкулезом.