Устройство для определения антигена или антитела

 

О п И С А Н И Е,щ твои

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

Союз Советских

Социалистических

Республик

К ПАТЕНТУ (61) Дополнительный к патенту (22) Заявлено 27.12.73 (21) 1980908/28-13 (23) Приоритет - (32) (51) М. Кл.

А 61 В 10/00

Гасударственный камитет

Совета Инннстрав СССР па делам изааретеннй и аткрытий (31) (33) (43) Опубликовано 05.10.77. Бюллетень _#_ 37 (45) Дата опубликования описания 16о877 (53) УДК 615.471:616. .07 (088.8) (72) Авторы изобретения

Иностранцы

Джеймс Дин Александер (США) и Пер Барфорт (Дания) (71) заявители (54) УСТРОЙСТВО ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИГЕНА

ИЛИ АНТИТЕЛА

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностическим приборам.

Электрическое сопротивление лнпидного двойного слоя в проводящем растворе может быть уменьшено при воздействии на ход имунной реакции, протекающей на поверхности двойного слоя, например, при взаимодействии. антитела и антнгена в присутствии дополнительных элементов: реакция прот кает так, что происходит лизирование двойного слоя в / или вблизи области протекания реакции, и обеспечивается проникновение ионов через двойной слой и тем самым протекание электрического тока между погруженными в раствор электродами, находящимися под различными потенциалами.

Предлагаемое устройство выполнено в виде электрической ячейки, в которой электролиты с электродами разделены пористой подложкой с двойным липипным слоем толщиной 40-1(Кф причем размеры пор Подложки от lA до 10 мк.

Кроме того, размеры пор могут. изменяться как от 10 мк до 0,1 мк, так и от 1А до 1000А. Толщина двойного липидного слоя, составленного из мембран, созданных на базе природных или искусственных липидных материалов, может быть равна

40 — 100А в области пор подложки, и имеет большие. или меньшие значения в других областях подложки, а также может (илн не может) содержать ред тельно введенный в нее заранее выбранный сопут5 ствующий реагент. Поверхность подложки на противоположной по отношению к липидному слою стороне, может быть покрыта агар-агаром или по- добным ему желатинозным материалом.

В качестве среды для имунного лиэиса, вызываемого наличием дополнительных компонентов, может быть использована любая, содержащая фосфолипид, мембрана, которая сохраняет свою физическую стабильность при физиологических значениях рН, температурах, силах взаимодействия

15 ионов. Примерами биологических мембран, которые могут быть успешно лизированы дополнительными компоненнтами, являются: эритроциты чело. века и овцы, элементы ацитных опухолей мышей, элементы пер нтонитных воспалительных клеток

20 крыс, стенки Грамотрицательных бактериальных клеток Escherichia col i, Veil lonellà aicalescens

Shigella shigae u Bacillus Zicheniforniis.

Можно подвергнуть имунному лиэису вирусные оболочки вирусов инфекционных бронхитсв;

25 характеристические повреждения после протекания

57601-

Составитель Л. Соловьев

Техред А. Демьянова

Редактор Л. Гончарова

Корректор А. Власенко

Заказ 2732/47

Тираж б77 Под и сное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

4иииал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

HM)annaõ реакций ofë åaàþòeí также на поверхпос нл пинопописахаридпых частиц, полученных из

1 рал1о рипа1епьных бактерий (Veil I onel I a a lca les.cens u Escherichia со1 ).

11скуccтвенпые мембраны, в которых содержигсH фосфшгипип, могут пизироваться с помощью ел сал ых компонентов, которыми пизируются мембраны па основе биологических элементов, перечисленных иьнпе. Включение в сocTBB липидных смесей нлас ифика гора приводит к увеличению промежутка нрсмсии, в течение которого сохрапяегся структурное едшгство мембраны, не оказывающее влияния на чувствительность обнаружения имунпого рсагеllfa. Так, например, присутствие холсс горина в биологических или искусственных липипных мембранах (двойных слоях) не сказываетсн на способности дополнительных элементов образовывать отверстия в мембранах, при этом структура лизированных мембран остается неизменной, что подтверждается данными, полученными при исследовании электронных микрофотографий.

Пригодные для ишьользования в качестве подложки материалы должны сцепляться с двойным липидным слоем или липидный слой должен сцепляться с ними, и размеры поперечного сечения пор этих материалов не должны превышать 10 мк.

Геометрия пор не является критичной — форма поперечного сечения пор может быть круглой, прямоугольной, а также квадратной или любой другой многоугольной. Наиболее предпочтительной формой поперечного сечения пор является круглая, Кроме того, внутренние стенки пор должны быть правильной геометрической формы и не должны быть заполнены, например, концами волокон, расположенными в произвольно ориентированных плоскостях, направления которых являются поперечными по отношению к продольным осям пор.

Также некритичной является длина или глубина пор, обычно она должна быть больше, чем ожидаемая толщина двойного липидного слоя, который располагается поперек отверстия поры. Для обеспечения требуемой прочности достаточно использовать пластичную пленку ипи фоны у толщиной

0,25- 5 мил (6,35 ° 10 — l.28. 10 см), причем результаты станови сн еще лучше, если вместе с ней использовать пленки поликарбопатной смолы толщиной 0,5"-!,5 мил (1,28 ° 10 3,8е10 см) .

Так как пористая подложка сиу для поддержания двойно1 о пипидного слоя в жидкой среде, в которой осуществпяклсн исследования, пленка, на базе которой создается подложка, должна быть нерастворимой в окружающих ее жидких системах и стойкой к их воздействию.

Предлагаемое устройство сводит к минимуму возможности разрывов двойного слоя и получение связанных с этим явлением ложных показаний, увеличивает время хранения двойного слоя, упрощает получение двойных слоев.и обеспечивает получение более надежных результатов исследований, связанных с более точным контролем перфорации двойного слоя.

При этом оно обеспечивает обнаружение имунного реагента, антитела пли антигена, потенциально присутствующего в исследуемом образце.

Устройство имеет двойной липидный слой, обеспечивающий за счет содермания в нем соответственно антигена или антитела ответную лизисную имунную реакцию, вызванную присутствием ее сореагентов; средства, обеспечивающие контакт двойного слоя с исследуемым образцом и дополнительными элементами, и средства, сигнализирующие об обнаружении лизисной реакции двойного слоя.

Формула изобретения

Устройство для определения антигена или антитела, о т л и ч а ю щ е е с я тем, что оно выполнено в виде электролитической ячейки, в которой эжктролиты с электродами разделены пористой подложкой с двойным липидным слоем толщиной

40 — 100A, причем размеры пор подложки от 1Адо

10 мк.