Реактив для лизиса эритроцитов

 

A. A. Алексеев и Э. С.,Карпенко (72) Авторы изобретения (71) Заявитель (54) РЕАКТИВ ДЛЯ ЛИЗИСА ЭРИТРОБИТОВ

0,8 -2,6,0 07-0,48, 0,2-2,3

Остальное

Уксусная кислота

Серная кислота

Перекись водорода

B ода

0,3-4,0

0,05-3,50

Остальное, Пенсии

Соляная кислота

Вода

Изобретение относится к области медицины, а именно гематологии.Известен сапонин — реактив для гемолиза эритроцитов (1 .Однако этот реактив не позволяет дифференцировать лизис apHTpollHTnB.

Целью изобретения является дифференцированный лизис, эритроцитов.

Это достигается тем, что реактив состоит из двух растворов, причем первый содержит уксусную и серную кислоты и перекись водорода, второй - пенсии и соляную кислоту при следующем количественном соотношении ингредиентов г/мл:!

Сначала готовят первый раствор. В мерный цилиндр наливают 60-80 мл дистиллированной воды и последовательно добавляют 1,55 мл пергидроли (29% активного кислорода) 0,22 мл концентрированной серной кислоты, 1,6 мл ледяной уксусной кислоты и доводят дистиллированной водой до 100 мл.

В зависимости от процентного содержания активного кислорода в пергидроли для достижения оптимального соотношения пергидроль добавляют в следующем количестве:

Активный кислород,% Пергидроль, мл

26 1,73

27 1,67

28 1,60

29 1,55

30 1,50 .31 1,45

32 1,40

Затем готовят второй раствор. Для этого в .мерный цилиндр наливают 60-80 мл дистиллированной воды, 0,7 мл соляной

79

4 людаться и через 48 час в зимнее время, когда температура помещения не превышает 18-20 С. В этих случаях лизирование эритроцитов после добавления второго раствора происходит ранее, чем за 1-2 мин и подсчет требуется проводить сразу же после просветления смеси растворов с кровью.

Предлагаемый реактив позволяет производить JIHBHpobaBHe эритроцитов до бел- к0вых компонентов и подсчитывать íà аппаратах — счетчиках не только лейкоциты, но и тромбоциты.

Предлагаемый реактив доступен и де шев и может быть применен в любой лаборатории.

Формула изобретения

Реактив для ливиса эритроцитов,- о тл и ч а ю щ и g с я тем, что, с целью дифференцировайного лизиса эритроцитов, он состоит из двух растворов, причем первый содержит уксусную, серную кислоты и перекись водорода, второй пепсин и соляную кислоту при следующем коли- чественном соотношении ингредиентов, .г/мл.

Ъ2ВЮЗ и2Вж

Уксусная кислота

Серная кислота

Перекись водорода

Вода

0,8-2,6

0,07 -0,48

0,2 -2,3. Остальное

Пепсин 0,3 -4,0

Соляная кислота ..0,05 -3,50

В ода Остальн ое

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Кост Е. А, Справочник по клиническим лабораторным методам исследования.

М., 1975, с. 34.

6633

3 концентрированной кислоты и доводят дистиллированной водой до 100 мл, затем добавляют 2,2 г пепсина. Используют через

2-3 дня после приготовления, Растворы хранят в посуде из темного стекла при комнатной температуре более месяца, Изменения концентрации ингредиентов в растворах от оптимального соотношения ведет к закономерным изменениям свойств смеси. Изменения процентного содержания уксусной кислоты в определенных пределах не ухудшает свойств смеси, но снижение до 0,8 г/мл и более ведет к замедлению реакции лизиса и к ускоренному разрушению лейкоцитов и тромбоцитов; повышение концентрации улучшает их сохранность, но ускорения лизиса эритроцитов не наблюдается.

Снижение процентного соотношения серной кислоты ведет к замедлению реак- 20 цйи лизиса, а содержание менее 0,07 г/млк остановке; повышение при неизменной концентрации уксусной. кислоты приводит .к быстрому разрушению лейкоцитов и тромбоцитов. Одновременное повышение и ук- 25 сусной кислоты улучшает их сохранность, "Но ухудшается лизирование эритроцитов °

Сниженйе процентного соотношения переки" си водорода ведет с замедлению лизирова ния" эрйтроцитов, повышение - к затрудне- 30 нию во время забора крови и ускоренному разрушению лейкоцитов и тромбоцитов..

Исследования показали, что лейкоциты и тромбоциты могут длительное время со храняться в первом и втором растворах. реактива.

В первом растворе через 5-30 мин и

6 час после взятия крови отсутствует повреждаемость лейкоцитов и тромбоцитов, через 24 час намечается частичное поврежде-40 ние тромбоцитов, а затем и лейкоцитов, но такое повреждение позволяет производить . подсчет с обычной точностью. Отсутствие повреждаемости этих клеток может набСоставитель С. Малютина

PegaK P А. Бер " Техред О. Андрейко Корректор С. |IIeKMap

:!.-Зак а з 28 1 9/3 Тираж 671 ° Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб,; д. 4/5

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул, Проектная, 4