Штамм дрожжей всб-744-продуцент белка

 

с. ою э Соаетскееи

Соцкалысткческкк

Респубики

<» 732388

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 23.02.77 (21) 2456298/28-13 с присоединением заявки М (23) Приоритет

Опубликована 05.05.80.. Бюллетень И 17

Дата опубликования описания 08.05.80 (51)М. Кл.

С 12 K 3/00

С 12 С 11/08

Гееударстеенный квмнтет

СССР но делам нэебретений и еткрытнй (53) (ДК 663.18 (088.8) (72) Авторы изобретения

P. Н. Бравичева, Л. В. Винникова, Н. Б. Градова, Г. С. Родионова, В. М. Симаев. A. И. Заикина и Т. Л. Ауэрбах (7I) Заявитель

Всесоюзный научно-исследовательский институт биосинтеза белковых вепеств (54) ШТАММ дРОжжяй Сапбтс) pntt erIonal

BCE-744 — ПРОДУБЕИТ БЕЛКА

Изобретение относится к микробиоло« гическому синтезу, точнее к получению нового штамма дрожжей, используемого для производства биомассы путем его культивирования на питательных средах, содержаших различные источники углерода, 5 в том числе углеводороды нефти.

Известны различные штаммы дрожжей Ca@ 6ida (э"ц1И1е1.тпопй11, например штаммы ВСБ-640 и ВСБ-638, ис10 пользуемые для производства биомассы на средах с углеводородами (11, (21.

Недостатком известных штаммов дрожжей при использовании в промышленных условиях.является узкий диапазон оптимальных условий культивирования (при 32-34 С и рН 4,5 — 5,5), а . также невысокие показатели роста.

Целью изобретения является получе ние нового штамма дрожжей, обладакэнего повышенной активностью и поэволяю1цего расширить диапазон оптимальных условий культивирования по температуре и, рН среды.

Штамм дрожжей Сап816а цЖмгтпод.

М BCB-744 выделен из популяции производственной культуры уфимского опытно-промышленнсиъ завода белкововитаминных «онцентратов и идентирэаци ован как СаЫИаса дц ЕЕ Е,.тт,сэттаэ1 (тле yas АЛахотпоттиs еМЖ аййог 1уа j Xod4ег DEMI,ÒÌ йьЪЬв Ваткой.1 ) 10Ногтт1hieaoa ЬИвсы oII a j

Штамм хранится в коалекции

BH ИИсинтеэб елка под номером IBCS744.

Морфологические нриэнаки.

Клетки двухсуточной к пжтуры иа îoлодовом сусле одиночныв, округло-овала ной и овальной формы с одиороднъа т содержимьва и небольшими вклкэчениими, Активное почкование.

Размер клеток 5,0-5,5õ5,75-7,0 мкм.

Культуральные признаки.

Колонии на сусло-агаре гладкие, се-. роватые, матовыв. Бвнтр колоини возвышается в виде бугорка, край роэаный, со временем окружается тонкой зоной мицелияе

732388

4 штамма ВСБ-744 достигает 3,7 г/л.ч, удельный расход субстрата 1,07 при содержании белка в биомассе 53,34.

В примерах 2-5 проводят опыт, как в примере 1.

Пример 2. При скорости протока среды 0,.15 ч и концентрации парафина

-1 в приточной среде 29,6 г/л удельная продуктивность штамма 4,6 г/л ч, удель10 ный расход субстрата 0,97, содержание белка в биомассе 53,.1%.

Пример 3. При скорости про4 тока среды 0,35 ч и концентрации парафина в приточной среде 14,8 г/л, удель15 ная продуктивность штамма 5,1 г/л ч, удельный расход субстрата 1,01, содержание белка в биомассе 50,,9%. .П р и м е.п 4. При схорости протока среды О, 25 ч,и концентрации парафина в приточнои среде 15,6 г/л при рН

2,5-3,0 удельная продуктивность штамма 3,6-3,8 г/л ч, удельный расход субстрата 1,03-1,11, содержание белка в биомассе 54,9%, При повышении рН среды до 5,0 удельная продуктивность штамма достигает 4,2 г/л ч при удельном расходе субстрата 0,97.

Пример 5. При скорости протока среды 0,25 ч и концентрации парафина в приточной среде 15,6 r/ë при

26-30 С удельная продуктивность штамма 3 5 г/л ч, содержание белка в биомассе 58,0%.

На солодовом сусле образует остров хи тонкой .матовой пленки и едва замет ное кольцо.

Осадок белый, значительный.

На стеклах обрастания образует лож ный мицелий с супротивно расположенными на нем веточками из овальных бластоспор.

Спор не образует.

Физиологические признаки.

Отношение к углеводам.

Ассимилирует глюкозу, сахарозу, мальтоэу, хсилозу, целлюлозу сорбозу.

Арабиноэу ассимилирует слабо или совсем не ассимилирует. Сбраживает глюкозу, сахарозу, слабо — галактозу.

Отношение к источникам азота.

Использует сернохислый аммоний, аспарагин, пептон, мочевину.Аэотнокислый халий не использует.

Желатину не разжижает.

При выращивании на минеральной ср де с углеводородами не нуждается в до бавлении ростовых факторов. Активно разм южается в условиях непрерывного культивирования при изменении скорости . протока среды от 0,1 до 0,5 ч . Акт но растет при температуре 28-38 С и рН 2,5-5,0.

Штамм непатогенен и конкурентноспособен. .Пример 1. Непрерывное культи вирование штамма дрожжей СапЖда gtH бег акоп& . ВСБ-114 осущест вляют в ферментере объемом 15 л с коэффициентом заполнения 0,4 при ме- 35 ханическом перемешивании и аэрации среды воздухом, обеспечивающим скорость сорбции кислорода 14 г/л.

Выращивание проводят на минеральной среде; содержащей КСС,Ь® 90 -9H О, 6 04 1HаО ИЮ 5î 1НяО,Zn Soà IHã . (ми -ьо, и,ро, добавляемые процорционально,количеству задаваемого парафина из расчета потребления при синтезе 1 r АСД, мг .

И - 90 Рй05 45; К вЂ” 26;

%g — 3; Pe — 1,2; уп- 0,6; ф,р -0,6.

В качестве источника углерода используют парафин Уфимского НПЗ.

Я

Температуру (34-35"С) и рН (4,04,2) поддерживают постоянным автоматическим регулированием. Для поддержания рН среды используют 5%-ный

55 раствор NH@OH

При скорости протока среды 0,52 ч и хонцентрации парафина в приточной среде 7,6 г/л удельная продуктивность о

Повышение температуры до 36-38 С не вызывает снижения удельной продуктивности штамма, которая составляет;3,64,0 г/л.ч .

Наряду с отличительными морфологическими и физиологическими признаками отличием нового штамма ВСБ-744 от известного штамма ВСБ-640 является способность активно расти при изменении о температуры среды от 28 до 38 С и рНот 25до 50.

Кроме того, штамм ВСБ-744 обладает по сравнению с известным штаммом большей скоростью роста позволяющей осуществлять непрерывное хультивирование в широком интервале скоростей протока среды (от 0,1 до 0,5 ч ).

Использование штамма ВСБ-744 в промышленности обеспечивает стабилизацию производственного процесса, а также его интенсификацию эа счет проведения культивирования при высоких скоростях протока среды.

5 732388

Формула изобретения

Составитель А. Бражникова

Техред М. Петко Корректор Г. Назарова

Редактор Т. Шарганова

Подписюе

Заказ 1657/18 Тираж 522

l1HHHITH Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

Штамм дрожжей Conbida дцЮбю-топdaj ВСБ-744, -продуцент белка, хранится в коллекции ВНИИсинтеэбелка под номе 5 ром ВСБ-744.

Морфологические признаки.

Клетки двухсуточной культуры на солодовом сусле одиночные, округло-овальной и овальной формы с однородным содержимым и небольшими включениями.

Активное почкование. Размер клеток 5,05,5х5,75-7,0 мкм.

Культуральные признаки.

Колонии на сусло-агаре гладкие, сероватые, матовые Центр колонии возвышается в виде бугорка, край ровный, со временем окружается тойкой зоной мицели4.

На солодовом сусле образует островки тонкой матовой пленки и едва заметное кольцо. Осадок белый, значительный.

На стеклах обрастания образует лож25 ный мицелий с супротивно расположенными на нем веточками иэ овальных бластоспор.

Спор не образует.

Физиологические признаки. зо

Отношение к углеводам.

Ассимилирует глюкозу, сахароэу мальтозу, ксилозу, целлюлозу, сорбозу.

Арабинозу ассимилирует слабо или совсем не ассимилирует. Сбраживает глюкозу, сахарозу, слабо — галактозу.

Отношение к источникам азота.

Использует сернокислый аммоний, аспар агин, пептон, мочевину.

Не использует азотнокислый калий.

Желатину не разжижает.

При выращивании на минеральюй среде с углеводородами не нуждается в добавлении ростовых факторов.

Активно размножается в условиях непрерывного культивирования при изменении скорости протока среды от

Оlдо 05ч.

Характеризуется широким диапазоном оптимальных условий куль.гивирования по температуре и рН среды. Активю, растет при температуре 28-38 С. и

РН среды 2 5-5 0

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Авторское свидетельство СССР

ЬЬ заявке 2098240/28-13, кл. С 12 К 3/00, 17.01.75.

2. Авторское свидетельство СССР по заявке % 2378161/28-13, кл. С 12 К 3/00, 25.06.76.