Дата опубликова ия ания-23 61.82. (53) УДКД616-07(088.8) В.И.Покровский, Н. .Семина, С.В.Шабалина, И.В.Рубцов, В.С.Цветков и jГ.А.Ермолин (72) Авторы изобретения

Центральный ордена Ленина институт усовершенствования врачей и Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии (71) Заявители (54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ ИЕНИНГОКОККОВОГО

АНТИГЕНА

Изобретение относится к медицине, точнее к иммунологии, и касается способа выявления менингококкового антигена в биологических суботратах (в крови, ликворе).

Известен способ выявления менингококкового антигена путем фиксации иммуноглобулинов кроличьей антисыворотки против менингококкового антигена на полистироле, внесения исследуемого антигена и инкубирования с последующим внесением меченых антител к иммуноглобулинам, повторным инкубированием смеси и выявлением менингококкового антигена по образованию комплекса с ферментной меткой f.ll .

Однако известный способ недостаточно чувствителен для выявления менингококкового антигена в биологических субстратах (в сыворотках, ликворе) и требует большого количества сыворотки.

Цель изобретения вЂ” повышение чув ствительности способа.

Эта цель достигается тем, что выявление менингококкового антигена проводят путем фиксации иммуноглобулинов кроличьей антисыворотки против менингококкового антигена на полистироле, внесения исследуемой сыворотки, содержащей менингококковый антиген, и инкубирования с последующим внесением меченых антител к иммуноглобулинам, повторным инкубированием смеси и выявлением менингококкового антигена по образованию комплекса с меткой, причем иммуноглобулины используют в концентрации 5-7 мкг/мл, фиксацию проводят при рН 9,4-9,8, а инкубирование с исследуемым антигеном ведут в течение 50-60 мин.

Пример. В лунки микротитровальных плашек вносят раствор гаммаглобулиновой.фракции в концентрации

5-7 мкг/мл (по белку) с содержанис

899043

Формула изобретения антител 0,1 мкг/мл. Плашки с содержанием лунок инкубируют 18-20 ч при +4 вЂ” +5 С. Содержимое из лунок удаляют. Лунки промывают от несвязавшихся белков и вносят исследуемый субстрат. Плашки инкубируют

50-60 мин при +37 вЂ” +38 С. Содержимое из лунок удаляют и лунки отмывают от несвязавшихся сывороточных белков, после чего в лунки вносят 1р тот же гаммаглобулин, которым были сенсибилизированы плашки, но меченый ферментом. Инкубируют плашки

50-60 мин при +37 вЂ” +38 С. Содержимое лунок удаляют, лунки отмывают от несвязавшихся меченых антител и вносят в них раствор субстрата на фермент-метку.

Результаты учитывают качественно визуально по разнице в окраске раст- ур вора субстрата в лунках, сенсибилизированных менингококковыми антителами и в лунках, сенсибилизированных инертным белком, и характеризуют количественно по превышению раз- д ности,экстинкций в этих двух лунках двух ошибок измерения используемого спектрофотометрического устройства.

Использование предложенного способа позволяет определять менинго- щ кокковые антигены с содержанием их в биологических субстратах до

0,0001 мкг/мл с целью ранней диагкостики менингококковой инфекции при эпидемиологическом обследовании различных контингентов для своевременного выявления опасных источников менингококковой инфекции.

Способ выявления менингококкового антигена путем фиксации иммуноглобулинов кроличьей антисыворотки против менингококкового антигена на полистироле, внесения исследуемого антигена и инкубирования с последующим внесением меченых антител к иммуноглобулинам, повторным инкубированием смеси и выявлением менингококкового антигена по образованию комплекса с меткой, о твЂ” л и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения чувствительности способа, иммуноглобулины используют в концентрации 5-7 мкг/мл, фиксацию проводят при рН 9,4-9,8, а инкубирование с исследуемым антигеном ведут в течение 50-60 мин.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Фримень Х. Иммунологические методы. M., "Мир", 1979.

Составитель Г.Крюкова

Редактор А.Козориз Техред И. Гайду Корректор У.Пономаренко

Заказ !1992/5 Тй раж 716 . Подписное

BHHHIIH Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

ll3035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал !1!1П "Патент", г, Ужгород, ул .. Проектная, 4

Способ выявления менингококкового антигена

Способ профилактики и лечениядизентерии // 833258

Поливалентная вакцина вгнки против лептоспироза животных и способ ее получения и использования // 828459

Способ получения ацетилированных водорастворимых экстрактов, обладающих иммуностимулирующим действием // 710503

Способ получения пептида // 701641

Способ получения препарата для профилактики и лечения синегнойной инфекции // 688195

Способ получения антигена // 686737

Способ получения растворимого антигена // 662104

Способ получения родоспецифического эритроцитарного лептоспирозного диагностикума // 638336

Способ получения антигена // 631157

Иммуногенная композиция против боррелиоза лайма, способ иммунизации млекопитающего против боррелиоза лайма, способ получения белка pc borrelia burgdorferi, диагностический агент для обнаружения b.burgdorferi и способ обнаружения антител к b.burgdorferi // 2102081

Изобретение относится к предотвращению болезни Лайма у млекопитающих

Способ получения антигена для вакцины, эффективной для защиты свиней от инфекции, вызванной микроорганизмом родов mycoplasma и acholeplasma отряда mycoplasmatales // 2104712

Штамм бактерий citrobacter diversus, обладающий комплексом факторов патогенности // 2105807

Штамм бактерий rettgerella rettgeri, обладающий комплексом факторов патогенности // 2105808

Оральное лечение геликобактерной инфекции // 2107513

Способ серологической диагностики бруцеллеза крупного рогатого скота // 2111009

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к диагностике инфекционных болезней животных, и является усовершенствованием известных способов серологической диагностики бруцеллеза и туберкулеза крупного рогатого скота в реакции связывания комплемента (РСК)

Штамм бактерий morganella morganii - продуцент термолабильного энтеротоксина // 2113473

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения термолабильного энтеротоксина и анатоксина Morganella morganii при производстве вакцин

Штамм бактерий morganella morganii - продуцент термолабильного энтеротоксина // 2113474

Способ получения гипериммунной сыворотки против гемофилеза, стрептококкоза и пастереллеза свиней // 2118169

Изобретение относится к ветеринарной микробиологии, в частности к получению лечебной сыворотки против гемофилеза, стрептококозза и пастереллеза свиней

Способ получения антигена для серологической диагностики паратуберкулеза у жвачных животных // 2118538