Питательная среда для культивирования менингококков

 

Союз Советских

Социалистических

Республик

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

<ц 990810 (6l ) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено Ol . 08. 79 (21) 2833604/28-13 с присоединением заявки,% (23) Приоритет (5I)M. Кл.

С 12 N 1/20

Гесудзрствеикьж комитет

Опубликовано 23. 0) . 83. Бюллетень Рй 3

le Renew к обретеккк и вткрьпкЙ (53) УДК 576.8. . 093 (088. 8) Дата опубликования описания 24 . 01.83

В.П. Шичкина, Е.Я, Виноградов, Б.М. Рабин и В.A. Мельникова

1.

Ленинградский ордена Трудового Красного Знаменй научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Пастера и Московский научно-исследовательский институт вакцин й- " сывороток им. И.И. Мечникова (72) Авторы изобретения (71) Заявители (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕЦА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ

МЕНИНГОКОККОВ

0,50-1, 35

0,4-0;5 го

Изобретение относится к области микробиологии, а именно к питательным средам для культивирования микроорганизмов.

Известна питательная среда .для культивирования менингококков, содержащая источник пептонов в виде мяного бульона, хлористый натрий, агар и дистиллированную воду. При использовании в среду вводят нативную сыворотку животных (11.

Однако известная питательная среда имеет плохие ростовые свойства, диагностика менингококковых инфекций при использовании этой среды затруднена и не достоверна.

Цель изобретения - улучшение росстовых свойств среды, облегчение и повышение точности диагностики менингококковых инфекций.

Цель достигается тем, что питательная среда для культивирования менингококков, содержащая источник

2 пептонов, хлористый натрий, агар и дистиллированную воду, в качестве источника пептонов содержит сухой гидролизат крови животных и дополнительно содержит экстракт кормовых дрожжей, глюкозу и dl-треоами- . на иодметилат при следующем соотношении компонентов, вес.4:

Сухой гидролизат крови животных 1 3-1,5

Экстракт кормовых дрожжей 0,20"0,35

Натрий хлористый

Глюкоза

dl-Треоамина иодметилат 0,003-0,005

Агар сухой порошковый 1,7-1,9

Дистиллированная вода Остальное

При использовании среды в нее дополнительно вводят 13-203 нормальной сыворотки животных.

3 9908

Новая питательная среда представляет собой гигроскопичный порошок светло-коричневого цвета, легко растворима в воде. Приготовленная среда светлая, прозрачная, рН 7,4. 5

П р и М е р 1. Все ингредиенты растворяют в дистиллированной воде, устанавливают рН 7,4-7,6, кипятят, фильтруют через ватно-марлевый фильтр, хорошо размешивают, разливают во флаконы, стерилиэуют при 113 С (0,6 атм) в течение 20 мин. Содержание аминного азота должно быть

150-180 мг 3.

Перед использованием среду расплавляют, охлаждают до,40-500С, добавляют нормальную сыворотку животных (например, нормальную лошадиную сыворотку) и разливают в чашки Петри. 20 ,Ниже приве 1ены примеры, показывающие улучшенные свойства новой питательной среды для культивирования менингококков по сравнению с известной средой. 25

Пример 2. Определяют откры1 ваемый минимум микробных клеток при посеве на новую и известную питательную среду ° Установили, что при посеве на новую среду колонии вырас- З0 тают при наличии в посевном материале 100 микробных клеток в О,1 мл, в то время как для образования колоний при посеве на известную среду необходимо, чтобы посевной материал содержал не менее 1000 микробных клеток в 0,1 мл (таблица) .

Пример 3. При посеве одного и того же материала на новую и известную питательную среду на новой 40 среде вырастает вдвое большее число колоний (таблица).

Пример 4. Рост менингококков на новой среде регистрируется через 12-15 ч после посева, на известной среде колонии формируются на 5-6 ч позднее (таблица) .

Пример 5. Через 20 ч после посева менингококков на новую сре10 4 ду образуются колонии диаметром

1,5-2,0 мм. В аналогичных условиях инкубации на известной среде менингококки образуют колонии значительно меньших размеров (таблица) °

Пример 6. При многократных пересевах менингококков на известную питательную среду наблюдают диссоциацию колоний из S-форм в OR- u

R-формы, что в значительной степени затрудняет выявление возбудителя в посевном материале. При пересевах на новую среду диссоциация не наблюдается.

Пример 7. Изучение 67 экспериментальных се ий новой питательной среды, изготовленных с использованием как кислотных, так и ферментативных гидролизатов крови животных показало высокие ростовые качества новой среды, стабильную воспроизводимость получаемых данных.

Пример 8. Известная питательная среда имеет хлопьевидный осадок, затрудняющий просмотр -ашек

Петри при оценке роста и развития менингококков, Непостоянная влажность, колебания величины рН, содер= жания аминного азота являются причиной больших колебаний в накоплении биомассы, выявлении биохимических свойств штаммов менингококков, изменения антигенного состава клеток. Новая среда лишена этих недостатков.

Пример 9 . Новая среда позволяет сократить на сутки диагностический анализ, что имеет особое значеwe в период массового обследования на бактерионосительство.

В таблице приведена характеристика боилогических свойств тест-штаммов менингококка, культивируемых на новой и известных питательных средах.

Таким образом, новая питательная среда для культивирования менингококков имеет улучшенные ростовые свойства, позволяет облегчить и повысить .точность диагностики менингококковых инфекций.. 1 а и

1

I

i И Ii

1 ф 3

1 m Ш

ct 1 !

1 1.

I 1 ! 3«ф

1 >33 ct I

I Ш Э 1 о а1 х и

I 1

1 I

33\

«Ф

LA !

СЧ

СЧ

СО

СЧ

«О

СЧ

3 ъО

СЧ

СЧ

LA

СЧ

3л

СЧ

Ln3

СЧ

О 3«

1 и а

S S

:1 Z

1

I

1

1

I

1

I

1 ! 1

1 !

I

1 !

1 CO л

CD

tA

CO

CD

LA

LA

CD

Ю

Гл

Ю

1 О л

Lnc л

СЧ

О

СЧ

° \

СЧ

OO л

О. л (Ч!

СО

° I

Ю

СЧ

Ln> л о а х. Cl

СЧ

О

СЧ

CO

Ю

СЧ

CO

Ю

CV

CO

s ш

x v

cl m о т е

>5

v s

М\

СЧ

CV. EA

СС3

СС\

СЧ о х а о о

2 о о 3С

m э щ чч

Ф ф л 4> !

In

CD

С33 О а х

Ф m

О 3Z 3

Z о с о

r» 3щ и хео

s 1-.а

CD

ОС!

CD

1

Ю!

CD

33> о и

«33 с с

С33 е

V> CO — Ю

- СЧ о

1° — 3

«3> с

° — Ct

c= э е а

О. ф О

С3

Р

CD и r

Ф sа 1-

Ф о ом

I- Э о сю. о о ct

1 11 >

>s о

z m о э

«; o о о м. с

>Я

s х о с Y о z

Y S д т а е О

X nC

С>3

333 Ф а. с

И CII эох

s c

Z S

ctX s

Ф X 5 а ш

l2 10.

1 Z

1 щ а

m z ф m.>х и

Y e

CO S ! л:.r

1 С33 Х.

1-1- О

I 3 3С ! о

I . 3» 3

1 1

I 5

I 3

1 I

I >S 3 о

v э

333 Ч

1 m Ф 1

1 с>3 а

z o

1 1

1

>х э оч! ш 33) I

О а1 и

I

I

1

>S 1 о

z ! и е

Э Ч1 а э ф Q. л: v

I

>s е .О Ч1 ш Ф 1 о а1 х v

1 э I а и !

>s 1 о у 1 ! и э 1 ф и е

Z ctI

l !

1 >л Е 1

1 О ct 3 ш е о а! и

1 I

990810

>>3 о и ц> л с

С С3

Ф: е а I3

>>>

3» О и.

СЧ р О .c= .-х

Ф е е ° а IZ 1 3!

L3L 1

I. Л 1

° — I

I!

I

«30

СС !

СЧ

1

1.1

3У> 1

С-Р 3 (1

a !

Ю 1

О 3 л 1

СЧ

1 а 3 л 1

1

1

СЧ

С>0 1

1

СС . !, 1

СЧ

1.. 3

1

1 Я

О 1 л 1

I,1

I

I г

3О |

1

СС> 1

1 о

1 и 1, I

О3 iО I с ъО, I с ч Ь 1Ф 4

a II 3 I

990810

Формула изобретения

0,20-0,35 о,50-1,35

0,4-0,5

0,003-0,005

1 7-1,9

Остальное

Питательная среда для культивирования менингококков, содержащая источник пептонов, хлористый натрий, З агар и дистиллированную воду, о тл и ч а ю щ а я с я тем, что, с цепью улучшения ростовых свойств, облегчения и повышения точности диагностики менингококковых инфекций, в качестве источника пептонов среда содержит сухой гидролизат крови животных и дополнительно содержит экстракт кормовых дрожжей, глюкозу и dl-треоамина иоаметилат при следую-. щем соотношении компонентов, вес.3:

Сухой гидролизат крови животных 1,3-1,5

Экстракт кормовых дрожжей

Хлористый натрий

Глюкоза

dl-Треоамина иодметилат

Агар (сухой по- рош ко вый)

Дистиллированная вода

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Руководство по микробиологической диагностике инфекционных болезней. М ., Медицина, 1973, с. 331332 прототип).

Составитель Л. Серова

Техред Т,Маточка Корректор Г. Огар

Редактор Г. Волкова

Заказ Б 6

5 /3 Тираж 521 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делая изобретений и открытий

113035 Москва„ Ж-35 Раушская наб . д . 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная,,f