Способ диагностики бактерионосительства брюшно-тифозной инфекции

 

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (р 4 А 61 К 39/02

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯН АBTOPCKGMV CBMAETEnbCTBV

И ;

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3774835/28-!4 (22) 24.07.84 (46) 15.06,86. Бюл. У 22 (71) Ордена Трудового Красного 3наме ни научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи и 2-й Московский ордена Ленина государственный медицинский институт им. Н.И.Пирогова (72) С.В.Прозоровский, Ю.В.Вульфович

Г.А.Левина, Л.В.Погорельская, А.Л.Горелов и Ю.А.Ильинский (53) 615.373 (088. 8) (56) Беседнова Н.И., Сомов Г.Н. Сравнительное изучение эффективности некоторых иммунологических методов диагностики брюшного тифа и бактерионосительства. Журнал гигиены, эпидемиологии, микробиологии и иммунологии, 1972, т.,16, !1- 2, с. 302-. 307.

„.SU„„1237216 A 1 (54) (57) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ БАКТЕРИОНОСИТЕЛЬСТВА БРЮШНОТИФОЗНОИ ИНФЕК—

ЦИИ путем постановки реакции иммунофлюоресценции между испытуемым материалом и специфической иммунной сывороткой, отличающийся тем, что, с целью повышения точности диагностики, в качестве исследуемого материала используют костный мозг, а в качестве иммунной сыворотки — специфическую сыворотку к L-формам S.typhi.

1237216

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для диагностики бактерионосительства брюшнотифозной инфекции.

Цель изобретения — повышение точности диагностики путем выявления

L-форм S.typhi с помощью специфической иммунной сыворотки в костном мозге носителя.

Способ осуществляют следующим об-. разом.

Для исследований получают образцы костного мозга путем стернальной пункции. Из пунктата осторожно отделяют пробы ткани самого костного мозга (а на периферической крови) и наносят на предметное стекло, рас— пределяя его легким движением шлифованного стекла (аналогично приготовлению мазков крови), мазок фиксируют в 96 спирте 15 мин и высушивают на воздухе. Препараты обрабатывают по непрямому методу Кунса, используя стандартные специфические иммунные сыворотки к глобулинам кролика, меченные изотиоцианатом флюоресцеина

1,ФИТЦ ), и бычий альбумин, меченный родамином, а также специфическую гипериммунную кроличью сыворотку к

L-форме S..typhl При непрямом методе иммунофлюоресценции (РИФ ) мазки костного мозга обрабатывают сначала специфическими иммунными сыворотками против Е-форм S.typhi в их рабочем разведении, инкубируют о при 37 С в течение 30 мин и промывают забуференным физиологическим раствором с рН 7,2-7,4. Затем на препарат наносят меченную ФИТЦ ослиную антисыворотку против глобулинов кро лика, к которой предварительно добавляют раствор бычьего альбумина, конъюгированного с родамином, используемый для контрастирования фона и освобождения от возможного неспецифического свечения. Затем мазки снова инкубируют во влажной камере о

30 мин при 37 С, тщательно промывают забуференным физиологическим раствором с рН 7,2-7,4 и высушивают на воздухе. Реакцию учитывают с помощью люминесцентного микроскопа.

Специфическое свечение антигена -форм S.typhi, присутствующего, как правило, на мембранах клеток эритроцитарного и лимфоидного ряда, а также в цитоплазме макрофагов, является диагностическим признаком и

i5!

О !

ЗО

10 5 свидетельствует о носительстве боюшнотифсзной инфекции.

Приме р 1. М-ов, 45 лет.

В 1975 году перенос брюшной тиф. Диагноз был подтвержден выделением гомо- и копрокультур. После перене".. сенной инфекции сформировалось хрончческое бактерионосительство, при котором копрокультуру выделяли в

1980-1981 годах. В 1982 году проведен повторный курс лечения (бактериофаг, диуцефон,ампициллин), после которого как микробиологические (высев крови, костного мозга, кала мочи), так и серологические (РПГА с

0- и Vi-антигенами. реакция Видаля, реакция коагглютинации) исследования были отрицательными. Только в препаратах костного мозга в РИФ с сывороткой против L-форм был выявлен антиген L-форм S.typhi. Это позволило диагностировать у данного больного латентную фазу бактерионосительства н оставить его на диспансерном . уче.т.е.

Прим е р 2. А-ва. 26 лет. В

1977 году перенесла брюшной тиф с атипичной клинической картиной, подтвержденный выделением гемокультуры Б.typhi. После заболевания сформировалось хроническое бактерионосительство с периодическим выделением копрокультуры S.СурЬ1. 1!еоднократно получала лечение против хронического носительства (курс антибиотиков), после чего устанавливалась фаза латенции.

Была обследована в один из таких периодов,, все попытки выявить возбудитель с помощью микробиологических (посев крови костного мозга, желчи, кала) и серологических методов (реакция Видаля, РПГЛ, реакция коагглютинации) давали отрицательный результат. Только при использовании метода

РИФ с антисывороткой против Ь-форм

S typhi в препаратах костного мозга был выявлен антиген 1.-форм, что позволило подтвердить бактерионосительство в латентной фазе.

П р и и е р 3. К вЂ” в 46 лет. В

1974 году перенес брюшной тиф, под— твержденный выделением гемокультуры

S.typhi. Бактерионосительство сформировалось сразу после перенесенного заболевания: с 1974 по 1981 год в посевах кала периодически обнаруживали возбудитель. В период обследования находился в фазе латенции, ства.

Составитель М.Васильев

Техред В.Кадар

Редактор Л. Пчелинская

Корректор В. Бутяга

Заказ 3220/7 Тираж 660

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное

Производственно-полиграфическое предприятие, г.ужгород, ул.Проектная, 4

3 !2 когда факт бактерионосительства не удавалось установить ни бактериологическими (посевы крови, кала, мочи), ни серологическими исследова— ниями (реакция Видаля, РПГА с 0- и

Ui-антигенами, реакция коагглютинации). Только применение метода РИФ с использованием иммунной сыворотки против L-форм Б.t 7ðh| позволило выя 72!б 4 вить антиген возбудителя в препаратах костного мозга, что свидетельствовало о наличии бактерионоситель5

Таким образом, предлагаемый способ позволяет повысить точность диагностики при обследовании больных в латентной фазе.