Способ определения морозостойкости древесных растений
Изобретение относится к области сельского хозяйства и может быть использовано в селекции и сортоизучении древесных растений, преимущественно яблони. Цель изобретения состоит в повышении точности и объективности определения морозостойкости. Отрезки побегов помещают в условия искусственной оттепели на 2-3 дня при 4-5 С и промораживают в низкотемпературных камерах при (-39)-(-40) С в течение 3,5-4,0 ч. Лабораторный метод прямого промораживания побегов сочетается с физиолого-биохимической оценкой морозостойкости по содержанию спирторастворкмой фракции белка - проламинов - в культуре каллусных тканей, регенерированных из промороженных побегов. Содержание проламинов в каллусе находится в прямой зависимости от степени морозостойкости. 1 табл. (/
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК азЯ0пи 1 2
g r r., с g r, xg y g
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
М АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ, ю.1
1 ьИ ;й1М . ."
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3915270/30-15 (22) 17.06.85 (46) 15.07.87. Бюл. В 26 (71) Центральная генетическая лаборатория им. И.В.Мичурина (72) В.А.Суздальцева, P П.Евсеева и В.С.Кудрявкин (53) 632.111.53(088.8)
1 (56) Авторское свидетельство СССР
В 89716, кл. А 01 С 7/00, 1978. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МОРОЗОСТОИКОСТИ ДРЕВЕСНЫХ РАСТЕНИЙ (57) Изобретение относится к области сельского хозяйства и может быть использовано в селекции и сортоизучении (Sf)4 А 01 С 7 00 А 01 Н 1/04 древесных растений, преимущественно яблони. Цель изобретения состоит в повышении точности и объективности определения морозостойкости. Отрезки побегов помещают в условия искуссто венной оттепели на 2-3 дня при 4-5 С и промораживают в низкотемпературных
0 камерах при (-39)-(-40) С в течение
3,5-4,0 ч. Лабораторный метод прямого промораживания побегов сочетается с физиолого-биохимической оценкой морозося ойкости по содержанию спирторастворимой фракции белка — проламинов — в культуре каллусных тканей, регенерированных из промороженных побегов. Содержание проламинов в калФ лусе находится в прямой зависимости от степени морозостойкости. 1 табл.
1323028
Изобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано в селекции и сортоизучении древесных растений, преимущественно яблони, для ускоренной оценки морозостойкости гибридных сеянцев, элитных форм и новых сортов.
Цель изобретения — повышение точности и объективности определения морозостойкости. f0
Способ осуществляется следующим образом.
В конце зимовки с плодовых деревьев нарезают однолетние побеги испы-. туемых форм и сортов — эталонов с 15 известной морозостойкостью, которые помещают в условия искусственной ото тепели на 3 дня при 5 С, и промораживают в низкотемпературных камерах при (-39)-(40) С в течение 3,5-4,0 ч. 20
Проморожейные побеги делят на отрезки длиной 1,5-2 см и высаживают на питательную среду в модификации
А.M.Ñìèðíîâà для образования каллуса.
После 30 дней культивирования в каллусных тканях определяют содержание проламинов общеизвестным колориметрическим методом на фотоэлектроколориметре ФЭК-56 (по Ермакову). Морозостойкие формы отличаются более высо- 30 ким содержанием проламинов по сравнению со слабоморозостойкими. При оценке используются сорта-эталоны.
Применение предлагаемого способа позволяет более точно и объективно выявить различия в мороэостойкости.
Так, в каллусе устойчивых сортов содержание проламинов более высокое и колеблется в пределах 5 10-8,60 мкг/
100 мг абс. сух. вещества, тогда как у слабомороэостойких оно снижено до
3,53-3,60. Преимущество предлагаемого способа заключается в том, что он сочетает метод прямого промораживания и физиолого-биохимическую оценку морозостойкости на каллусной ткани из побегов, которые повергались экстремальному воздействию низкой отрицательной температуры после оттепели. Учитывается регенерационная способность сортов после промораживания по отрастанию каллуса.
Кроме того, оценка проводится по растворимым белкам, которые играют важную роль в жизнедеятельности клетки и обусловливают физиолого-биохимическую адаптационную способность растений к низким температурам. Учитывается также период зимовки для диагностики на мороэостойкость. Оценка морозостойкости является обязательным этапом селекционного процесса, который у плодовых древесных культур занимает более десяти лет. Использование предлагаемого способа позволяет сократить его в 2-3 раза.
Пример . В 1980-1983 г„были 35 проведены определения морозостойкости известным и предлагаемым способом у сортов яблони, морозостойкость которых оценена ранее многолетними полевыми наблюдениями. 40
Данные по морозостойкости сортов яблсни приведены в таблице.
Как видно из таблицы, известный способ по приросту массы каллуса не 45 всегда позволяет достаточно точно определить морозостойкость. Например, при изоляции отрезков побегов яблони в конце зимы прирост каллуса в нулевом пассаже (в культуре первичных эксплантаторов) у морозостойкого сорта Антоновка обыкновенная намного меньше, чем у слабоморозостойких сортов.
Формула изобретения
Способ определения морозостойкости древесных растений, включающий культивирование отрезков побегов на питательной среде в течение 30 сут и последующий анализ биологического показателя, по которому судят о мороэостойкости, отличающийся .тем, что, с целью повышения точности и объективности определения, перед
\ культивированием на питательной среде на побеги воздействуют в течение
2-3 дн. температурой 4-5 С, затем в течение 3,5-4,0 ч температурой (-39)— (-40) С,.а в качестве биологического показателя используют содержание проламинов в каллусе, которое находится в прямой зависимости со степенью морозостойкости.
1323028
Способ
Сорт
Мороэостойкость по многолетним
Предлагаемый
Известный полевым наблюдениям
Вес каллуса в конце зимы через 30 дней культивирования, мг сухой сырой сух. вещества
Мороэостойкий
Антоновка обыкновенная
17,6+0,4
5)10+0,05
114,0+1,6
Ренет Кичунова
8,60+0, 13
4 18)6+0,3 48)6+0,8
То же
Слабоморозостойкий
Пепин шафранный
33,2+0,3
35,1+0 6
3,60+0)02
3)53+0,12
220,2+0)5
246,6+2,0
То же
Мекинтош
Корректор С.Черни
Заказ 2887/2 Тираж 629 Подписное
ВНИИ11И Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Произволе геенно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4
Составитель Е.Шкрадюк
Редактор М.Недолуженко Техред А.Кравчук
Содержание проламинов в каллусе иэ побегов, промороженных в конце о зимы при 40 С
4 ч после оттепели (3 дня при 5 С), мкг на 100 мг абс .
