Способ оценки действия антиаритмических факторов

 

Изобретение относится к биологии , точнее к физиологии и экспериментальной медицине, и предназначено для испытания новых антиаритмических средств. Цель изобретения - повышение специфичности способа. Для этого воспроизводят модель аритмии путем создания у подопытных крыс «остинфарктного кардиосклероза. Дпя создания экспериментального кардиосклероза перевязывают нисходящую ветвь левой коронарной артерии.Через 1,5-2 мёс по наличию белого рубца с оч ерченными краями (масса 85-90 мг, масса левого желудочка 760-820 мг, масса крысы 35 0-400 г) определяют постинфарктный кардиосклероз. Затем определяют электрическую стабильность сердца у животных и электрический порог фибрилляции желудочков (ПФЖ). Величину ПФЖ оценивают как минимальную силу тока в мА, при которой возникает фибрилляция. Одновременно с ЭКГ и артериальным давлением регистрируют силу тока, вызывающего фибрилляцию . Нар ушение электрической стабильности сердца - снижение ПФЖ и экстрасистолия, возникающая в условиях постинфарктного кардиосклероза при раздражении блуждающего нерва, устранимы традиционным антиаритмическим препаратом - лидокаином, а также ранее применяемыми антиаритмическими средствами, например, антиоксидантом ионола, немедикаментозными воздействиями - адаптацией к периодическому действию высотной гипоксии или коротким стрессорным воздействиям. Предлагаемая модель является адекватной, пригодна для оценки прямого терапевтического действия новых медикаментозных и немедикаментозных антиаритмических факторов. 2 табл. i (Л со ьо 4:: 35 i(

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН (19) (И

А1 щ) 4 А 61 В 5/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ, t с с с

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ 1 ОТКРЫТИЙ

Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (2 1) 4042795/28-14 (22) 27.03.86 (46) 23.07;87.Бюл. Ф 27 (71) Научно-исследовательский институт общей патологии и патологической физиологии АМН СССР

-(72) Ф.Ç.Меерсон, Л,М.Белкина, Е.Е.Устинова и С.С.Дюсенов (53) 612.015(088 ° 8) (56) . Cardiovas РЬагш, 1982, ч. 4, р. 53-58. (54) СПОСОБ ОЦЕНКИ ДЕЙСТВИЯ АНТИАРИТМИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ (57) Изобретенне относится к биологии, точнее к физиологии и экспериментальной медицине, и предназначено для испытания новых антиаритмических средств. Цель изобретения — повышение специфичности способа. Для этого воспроизводят модель аритмии путем создания у подопытных крыс аостинфарктного кардиосклероэа. Для созда-ния экспериментального кардиосклероза перевязывают нисходящую ветвь левой коронарной артерии. Через 1,5-2 мес по наличиЮ белого рубца с очерченными краями (масса 85-90 мг, масса левого желудочка 760-820 мг, масса крысы 350-400 r) определяют постинфарктный кардиосклероз. Затем определяют электрическую стабильность сердца у животных и электрический порог фибрилляции желудочков (ПФЖ) .

Величину ПФЖ оценивают как минимальную силу тока в мА, при которой возникает фибрилляция. Одновременно с

ЭКГ и артериальным давлением регистрируют силу тока, вызывающего фибрилляцию. Нарушение электрической стабильности сердца — снижение ПФЖ и экстрасистолия, возникающая в условиях постинфарктного кардиосклероза при раздражении блуждающего нерва, устранимы традиционным антиаритмическим препаратом — лидокаином,а также ранее применяемыми антиаритмическими средствами, например, антиоксидантом ионола, немедикаментозными воздействиями — адаптацией к периодическому действию высотной гипок- . сии или коротким стрессорным воздействиям. Предлагаемая модель является адекватной, пригодна для оценки прямого терапевтического действия

HopbIx медикаментоэных и немедикаментозных антиаритмических факторов.

2 табл. вой силы тока, составляющей 0,220,28 В, последовательно с интервалом в 5 мин оценивают ответ на раздражение величиной в 2,3 и 4 порога.

При этом регистрируют ЭКГ и артериальное давление в сонной артерии с помощью регистратора.

Затем определяют электрический порог фибрилляции желудочков (ПФЖ).

Для этого проводят торакотомию и с помощью электростимулятора, запускающегося от зубца R ЭКГ, раздражают сердце преждевременными одиночными прямоугольными импульсами длительностью 10 мс через коаксиальный электрод, введенный интракардиально в верхушку правого желудочка. Величину ПФЖ оценивают как минимальную силу тока (мА), при- которой возникает фибрилляция, В этих экспериментах одновременно с ЭКГ и артериальным давлением регистрируют силу тока, вызывающего фибрилляцию.

На основе этого методического подхода показано, что нарушение электрической стабильности сердца, а именно снижение порога фибрилляции и экстрасистолия, которая возникает в условиях постинфарктного кардиосклероза при раздражении блуждающего нерва, могут быть устранены с помощью антиаритмического препарата лидокаин, с помощью новых, ранее не применявшихся антиаритмических средств, например, антиоксиданта ионола, и наконец с помощью немедикаментозных воздействий, таких как адаптация к периодическому действию высотной гипоксии или коротким стрессорным воздействиям.

Таким образом, предлагаемая модель реагирует на эффективные антиаритмические факторы так же, как больное сердце человека, т.е. является адекватной и, вместе с тем, в отличие от существующих моделей, пригодна для оценки прямого терапевтического действия новых медикаментозных и немедикаментозных антиаритмических факторов, применяемых в форме курсовых воздействий, причем эффект этих факторов заведомо не завиДля оценки электрической стабильности сердца у животных с постинфарктным кардиосклерозом и параллельно у контрольных животных проводят опыты, которые состоят в том, что под нембуталовым наркозом (50 мг/кг) вначале оценивают реакцию! 1324640 г

Изобретение относится к биологии, а именно к физиологии и экспериментальной медицине, и может быть использовано для испытания новых антиаритмических средств. 5 ра ЭСЛ-2. После определения порогоПель изобретения — повышение специфичности способа за счет использования селективной модели стабильной аритмии и возможности оценки антиаритмического действия нефармаколо- 0 гических факторов.

Способ осуществляется следующим образом.

Модель аритмии воспроизводят путем создания у животных постинфарктного кардиосклероза, который через

1,5-2 мес после перевязки коронарной артерии характеризуется наличием в миокарде четко ограниченного соединительнотканного рубца и такими тра- 20 диционными, количественно оцениваемыми нарушениями электрической стабильности сердца, как снижение в 2-3 раза электрического порога фибрилляции и появление значительной эктопической активности, т.е. выраженной экстрасистолии при торможении активности синусного узла.

Необходимость выдерживания животных в течение 1 5-2 мес связана с тем, что в течение этого срока формируется плотный соединительнотканный постинфарктный рубец. При меньших сроках выдерживания рубец сформирован не в полной мере, а выдержива- 35 ние в течение сроков, превышающих

2 мес нецелесообразно в связи с развитием у животных возрастных изменений.

Для создания экспериментального 40 кардиосклероза .у животных (крыссамцов линии Вистар) перевязывают нисходящую ветвь левой коронарной артерии. После этого животные находятся в клетках, в обычных услови- 45 ях вивария. Через 1,5 мес постинфарктный кардиосклероз определяют по наличию белого рубца с очерченными краями, весом 85-90 мг, при весе левого желудочка 760-820 мг и весе крыс 350-400 r.

1324640 сит от их антистрессорного и антиишемического действия.

Пример 1. В табл.1 показано влияние лидокаина и ионола на электрическую стабильность сердца при постинфарктном кардиосклерозе. Данные представленные в табл. 1, свидетельствуют о том, что у контрольных животных электрический ПФЖ составляет 6,4-0,2 мА, а экстрасистолия при

10 брадикардии, вызванной раздражением блуждающего нерва, ограничивается отдельными случайными экстрасистолами, т.е. практически отсутствует.

У животных с постинфарктным кардио15 склерозом (через 1,5 мес после операции) того же возраста и веса электрический ПФЖ снижен в 2-2,5 раза, Брадикардия, возникающая при раз-дражении блуждающего нерва, сопровождается выраженной экстрасистолией. В среднем при равном времени раздражения блуждающего нерва у животных с постинфарктным кардиосклерозом возникли 62 экстрасистолы, а в контроле они отсутствовали. Введение животным одного из наиболее эффективных антиаритмических факторов .лидокаина в дозе 1 мг/кг под язык

30 в растворе за 30 мин до опыта приводило к выраженному антиаритмическому эффекту, который проявлялся .в том, что порог фибрилляции повысился до

4,2-0,3 мА, а количество экстрасистол уменьшилось в 2 раза. Ранее не пременявшийся в качестве антиаритмического препарата антиоксидант ионол (2,6-ди-трет-бутил-4-метил-фенол), вводившийся животным регоз в

40 суточной дозе 60 мг/кг в течение

4 дн до опыта, обладал не менее выраженным антиаритмическим действием чем лидокаин, и соответственно при-.. вел к увеличению порога фибрилляции и уменьшению эктопической активности сердца. Таким образом, предлагаемая модель реагирует на традиционЭ ный антиаритмический препарат (лидокаин) уменьшением вероятности фибрил50 ляции сердца и количества экстрасистол, т.е. в принципе так же, как сердце человека, страдающего аритмиями. Во-вторых, раким же действием обладает ранее не применявшийся для подавления аритмий антиоксидиант ионол, антистрессорный и антиишемический эффект которого в данном случае не играет роли.

Таким образом, предлагаемая модель применима для оценки действия новых фармакологических факторов, которые потенциально могут обладать антиаритмической активностью, Пример 2. В табл.2 показано влияние адаптации к гипоксии и адаптации к коротким стрессорным воздействиям на электрическую стабильность сердца при постинфарктном кардиосклерозе.

Данные представленные в табл.2 свидетельствуют о снижении электрического ПФЖ и повышении эктопической активности при постинфарктном кардиосклерозе (через 2 мес после операции) и показано, что постепенная адаптация животных к периодическому действию высотной гипоксии или повторным коротким стрессорным воздействиям устраняет эти нарушения электрической стабильности сердца.

В этих экспериментах адаптацию к коротким стрессорным воздействиям начинали через 30 дн после создания экспериментального инфаркта миокарда и проводили путем фиксации животных в положении на спине в течение 15 дн: в 1 день на 15 мин, 2 день — 30 мин, 3 день — 45 мин и остальные 12 дней— по часу. Такая адаптация повысила электрический порог фибрилляции сердца до нормального уровня 6,30,5 мА и уменьшила количество экстрасистол в 2 раза °

Адаптацию к гипоксии проводили в барокамере, начиная с 15 дня после создаиия экспериментального инфаркта:

1-2 день на "высоте" 1000 м над уровнем моря в течение 2-х часов, далее каждые 2 дн высоту увеличивали на 1000 м до достижения уровня

5000 м. После этого ежедневно увеличивали время пребывания в барокамере на I ч и доводили его до 6 ч. Всего животные получили 45 гипоксических воздействий. Такая адаптация приводила у животных с постинфарктным кардиосклерозом к увеличению порога фибрилляции до 5 3 мА и к 4-кратному уменьшению количества экстрасистол при раздражении блуждающего нерва.

Предлагаемый способ позволяет оценить не только предупреждающее но и прямое антиаритьжческое действие как фармакологических препаратов, применяемых одноразово или в виде курса, так и антиаритмический эффект

1324640

Таблица

Порог фибрилляции, мА

Группа животных

Контроль (n=10) 6, 4й.О, 2

Постинфарктный кардиосклероз (n-11) 2,9+0, 2

62+12

Постинфарктный кардиосклероз + лидокаин (n-10) 4,2то,з

Постинфарктный каридосклероз + ионол (n-10) 6,3+0,2

Достоверно по сравнению с постинфарктным кардиосклербзом.

Ф»

Достоверно по сравнению с контролем. дозированной адаптации организма к факторам внешней среды. Антиаритмический эффект указанных факторов реализуется на предлагаемой модели вне связи с их антистрессорным или антиишемическим действием и подцается строгой количественной оценке, т.е. является селективным. формулаизобретения

Способ оценки действия антиаритмических факторов путем применения этих факторов на животных с моделью аритмии и выявления восстановления ритма сердца, отличающийся тем, что, с целью повышения специфичности способа эа счет использования селективной модели стабильной арит1 мии и возможности оценки антиаритмического действия нефармакологических факторов, в качестве животных используют лабораторных крыс, у кото5 pbrx создают экспериментальный постинфарктный ка1)диосклероз путем перевязки левой коронарной артерии с последующим определением выраженности кардиосклероза по массе рубцовой

10 ткани через 1,5-2 мес после перевязки, у этих крыс оценивают снижение электрического порога фибрйлляции сердца и повышение его зктопической активности при раздражении блуждающего нерва, после этого применяют антиаритмический фактор и оценивают его действие по степени восстановления порога фибрилляции и эктопической активности, Среднее количество экстрасистол на 1 животное за 2 мин стимуляции блуждающего нерва силой тока, равной 3 порогам

1324640

Таблица 2

Порог фибрилляции, мА

Группа животных

Контроль и-12

6,4-0,2

62+12

2,9-0,2

16+ 1

5,4+0,5

33+3

6,3+0,5" Достоверно по сравнению с постинфарктным кардиосклерозом.

«-»

Достоверно по сравнению с контролем. Редактор О. Головач

Заказ 2987/3

Подписное

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород,ул. Проектная, 4

Постинфарктный кардиосклероз + и-11

Постинфарктный кардиосклероз + адаптация к гипоксии

Постинфарктный кардиосклероз + адаптация к стрессу

Среднее количество экстрасистол на 1 животное за 2 мин стимуляции блуждающего нерва силой тока, равной 3 порогам

Составитель Н.Гуляева

TexÐåÀ И.Попович Корректор Л. Пилипенко

Тираж 595

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по .делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5