Способ определения аллергенных свойств сорбированных гриппозных вакцин,содержащих яичный белок

 

Изобретение относится к медицине , точнее к производству сорбированных гриппозных вакцин. Цель изобретения - повьппение точности определения аллергенных свойств сорбированных гриппозных вакцин, содержащих яичный белок. Для этого морских свинок иммунизируют гриппозной сорбированной вакциной, вводя -две дозы препарата , повторяя инъекцию через 3 недели . Через 7 дней после второй инъекции препарата у животных берут кровь, помещают ее в стерильной посуде в термостат на 30 мин при 37 С. Сгусток отделяют от стенки сосуда бактериологической петлей, запаянным концом пастеровской пипетки стеклянной палочкой и ставят сосуд с кровью в холодильник (4-8 с). Через 18-20 ч сыворотку отсасывают и хранят на холоде, Сыворотку проверяют на наличие гомоцитотропньсс реагиновых антител. Для этого животным внутрикожно в предварительно вьпципанный участок вводят сыворотку свинок, иммуни.зированных гриппозной сорбированной вакциной, и изотонический раствор NaCl (контроль) Через 6 суток свинок осматривают и при необходимости вновь выщипывают шерсть на месте введения сыворотки. На 7-8-е сутки после введения сыворотки животным вводят 1%-ный р-р яичного альбумина с растворенной краской синий Эванса. Через 0,5 ч учитывают результат . Реакция положительная, если на месте введения сыворотки в кожу не менее чем у 3 из 5 животных обнаружено голубое (синее) пятно 5 мм, а на контрольном участке такого пятна нет. Вакцину считают аллергенной. Если реакдия отсутствует, вакцину считают неапшергенной. а S ОЭ

до с oimззИя

О1 1ИОАНИЕ ИЗОаРЕТЕКИ

М A ВТОРСНОМЪ СВИДЕТЕЛЬСТВУ госуд@ старинный ноыитет сссР по дклАм изоБретений и отнр11тий (21) 3778069/28-14 (22) 03.08,84 (46) 30.08.87. Бюл. М 32 (71) Уфимский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова (72) В.А.Стригин (53) 615.373 (088.8) (56) Erdos L. et.al. U.Biol.Stand, 1975, 3, N 1, р. 77-82. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АПЛЕРГЕННЫХ

СВОЙСТВ СОРБИРОВАННЫХ ГРИППОЗНЫХ ВАКЦИН,. СОДЕРЖАЩИХ ЯИЧНЫЙ БЕЛОК (57) Изобретение относится к медицине, точнее к производству сорбированных гриппозных вакцин. Цель изоб.ретения — повышение точности определения аллергенных свойств сорбированных гриппозных вакцин, содержащих яичный белок. Для этого морских свинок иммунизируют гриппозной сорбированной вакциной, вводя .две дозы препарата, повторяя инъекцию через 3 недели. Через 7 дней после второй инъекции препарата у животных берут кровь, помещают ее в стерильной посуде в термостат на 30 мин при 37 С. Сгусток отделяют от стенки сосуда бактериологической петлей, запаянным концом пастеровской пипетки, стеклянной палочкой и ставят сосуд с кровью в холодильник (4-8 С). Через !8-20 ч сыворотку отсасывают и хранят на холоде, Сыворотку проверяют на наличие гомоцитотропных реагиновых антител. Для этого животным внутрикожно в предварительно выщипанный участок вводят сыворотку свинок, иммунизированных гриппозной сорбированной вакциной, и изотонический раствор NaC1 (контроль)

Через б суток свинок осматривают и при необходимости вновь выщипывают шерсть на месте введения сыворотки. На 7-8-е сутки после введения сыворотки животным вводят 1Ж-ный р-р яичного альбумина с растворенной краской синий

Эванса". Через 0,5 ч учитывают результат. Реакция положительная, если на месте введения сыворотки в кожу не менее чем у 3 из 5 животных обнаружено голубое (синее) пятно 5 мм, а на контрольном участке такого пятна нет. Вакцину считают аллергенной.

Если реакция отсутствует, вакцину считают неаллергенной.

25

Составитель Г.Крюкова

Texpeд Л.Сердюкова

Редактор А.Огар

Коррекгср А.Тяжко

Заказ 3958/42 Тираж 7?o Подпис нс е

ВНИИПИ Государстзеннor о кдмитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, )К-35, Раушская наб,, д. 4/5

Прсиэводстзенно-полиграфическое предприят:e,. г. Ужгopop @II,, Проектная 4

1 13

Изобретение относится к медицине, в частности к производству сорбиро- ванных гриппозных вакцин.

Цель изобретения - повышение точности определения аллергенных свойств сорбированньтх гриппозйых вакцин, содержащих яичный белок.

Пример. Иммунизация морских свинок.

Морских свинок массой 200-250 г внутрибрюшинно иммунизируют гриппозной сорбированной вакциной, вводя две дозы препарата и повторяя эту инъекцию через 3 недели.

Через ? дней после второй инъекции препарата у животных из сердца или после перереэки крупных сосудов шеи берут кровь в стерильную посуду и помещают в термастат (+37 С) на

30 мин. Затем в стерильных условиях образовавшийся сгусток отделяют от стенки сосуда бактериологической петлей, запаянным концом пастеровской пипетки, стеклянной палочкой и помещают сосуд с кровью з холодильник (4-8 С) . Спустя 18-20 ч сыворотку отсасывают и хранят до проведения опыта на холоде (4-8 C) или в эамоо,. роженном виде при -20 С.

Проверка сыворотки на наличие гомоцитотропных реагиновых антител .

У 5 интактных морских свинок с белой шерстью массой 200-250 r зьш ипывают шерсть на участке боковой поверхности туловища. Спустя сутки внутрикожно з зьпципанный участок стерильным шприцом и иглой вводят по 0,,05О, 1 мл сыворотки свинок, иммунизированных гриппозной сорбированной вак— циной, и изотонический раствор хлорида натрия (контроль) . Через 6 суток свинок осматривают и при íeoáõoärìoe-. ти шерсть на боковой поверхности туловища, куда вводились сыворотка и иэотонический раствор хлорида натрия, выщипывают повторно. Через 1-2 дня (т.е. на 7-.8-е сутки после введения з кожу сызоротки) животным внутри- венно вводят по 1 мл 1%-ного раствора яичного альбумина, в котором растворена краска "синий Эванса" по концентрации 1%. Спустя 30 мин учитывают результат. Реакция положительна, eeëè на месте введения сыворотки в кожу не менее чем у 3 из 5 животных обнаруживается голубое (синее) пятно диаметром более 5 мм, а на контрольном участке такого пятна нет. Вакцину в этом случае считают аллергенной.

Если реакция отсутствует у всех взятых з опыт животных, вакцина ква.— лифицируется как не члергенная.

Таким образом, предлагаемый спое06 дает вОэможнОсть IIoBbIcHTb точ» ность определения аглергенности вакцины, так как более обоснованно позволяет судить о потенциальной аллергенной Опасности испытуемого препарата для человека.

Формула изобретения

ЗО

Способ Определения аллергенных свойств сорбирозанных гриппозных вакцин, содержащих яичный белок, включающий введение вакцины животным и выявление наличия антител„ о т л и— ч а ю шийся тем, что, с целью г.озышения точности способа, после вакцинации у животных выделяют сыворотку крови и вводят ее в кожу ин- . тактным морским свинкам, далее через

7-8 дней им же внутривенно вводят яичный белок с красителем и выявление наличия антител осуществляют по окраске з месте введения сыворотки.