Способ получения препарата крови

 

Изобретение относится к медицине , точнее к производству препаратов из крови человека, содержащих альбу-т мин, иуЗ-глобулины. Цель изобретения - сокр ащение времени проведения процесса путем сокращения количества технологических операций. Для этого используют в качестве исходного сырья балластньй осадок, образующийся при получении альбумина из гемолизированной плазмы или сьторотки, обрабатывают 15-20%-ным этанолом рН 4,5-5,5 суспендированный осадок после разрушения гемпигментов перекисью водорода , удаляют осадок центрифугированием , осаждают целевой продукт этанолом в концентрации 30-40%, рН 3,8-4,5. Инактивируют препарат, подвергают осветляющей и стерилизующей фильтрации и разливают по флаконам. Процесс сокращен на 3 стадии, составляет 1,5- 2 дня против 5-7 дней. СЛ

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

- (19) (11) (50 4 A 61 К 35/16 () ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4042326/28-14 (22) 24.03.86 (46) 30.12.87. Бюл. Ф 48 (71) Уфимский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова (72) А.Г.Лютов, С.А.Еникеева, В.А.Алешкин и Ф.З.Хакимова (53) 615.361.018.51 (088.8) (56) Фром А.А., Киселев А.Е., Русанов В.М., Никитенко А.А. Типовой регламент производства протеина. Препараты крови, М.: 1976, с.253-271. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА КРОВИ (57) Изобретение относится к медицине, точнее к производству препаратов из крови человека, содержащих альбу мин, — и,ф -глобулины. Цель иэобретения — сокращение времени проведения процесса путем сокращения количества технологических операций. Для этого используют в качестве исходного сырья балластный осадок, образующийся при получении альбумина иэ гемолизированной плазмы или сыворотки, обрабатывают 15-207-ным этанолом рН 4,5-5,5 суспендированный осадок после разрушения гемпигментов перекисью водорода, удаляют осадок центрифугированием, осаждают целевой продукт этанолом в концентрации 30-407., рН 3,8-4,5.

Инактивируют препарат, подвергают осветляющей и стерилизующей фильтрации и разливают по флаконам. Процесс а

Ф сокращен на 3 стадии, составляет 1,52 дня против 5-7 дней.

1362478

Изобретение относится к медицине конкретно к производству препаратов из крови человека, содержащих альбумин, 4 - и J3-глобулины.

Целью изобретения является сокращение времени проведения процесса за счет сокращения количества технологических операций.

Цель осуществляется за счет ис-. пользования в качестве исходного сырья балластного осадка, образующегося при получении альбумина из гемолизированной плазмы или сыворотки крови, обработки 15-25 -ным этанолом при РН 4,5-5,5 суспендированного осадка после разрушения гемпигментов перекисью водорода, удаления осадка центрифугированием и осаждением целевого продукта этанолом в концентра ции 30-40 и рН 3,8-4,5.

На чертеже представлена схема про- цесса получения протеина и препарата крови.

Пример 1. Балластный осадок белков, образующихся в процессе гроизводства альбумина спиртово-каприлатным методом, в количестве 1 кг заливают 6 л дистиллированной воды, гомогенизируют. К полученной суспензии добавляют 2н. раствор NaOH до

РН 7,2 + 0,1, при этом раствор приобретает темно-красный цвет. его равномерно нагревают до 60 С и небольшими порциями вносят 10%-ную перекись водорода до янтарного цвета раствора, аналогично стадии 3 известного устройства. Раствор выдерживают при

60 С в течение 2 ч, охлаждают до 1 С о о и снижают РН до 5,5 1н. растворам

НС1. При непрерывном перемешивании вводят 2,5 л 96%-ного этанола (до концентрации 25 ). Температуру смеси о снижают до -3 С и выстаивают в этих условиях 3-4 ч. Смесь центрифугируют, осадок удаляют. Супернатант в количестве 9,5 л помещают в реактор, охлажедают до -2 С и при перемешивании вводят охлажценный этиловый спирт в количестве 2,4 л до концентрации 40%, а РН раствора снижают до 4,5. Через

3-4 ч выстаивания раствор центрифу1 0 гируют при температуре не вьппе -4 С.

Осадок в количестве 0,21 кг (целевой продукт) собирают, подвергают сублимации для удаления остаточного спирта, растворяют в дистиллированной воде до концентрации белка 4,3-4,8%, устанавливают РН 7,0 0,5, инактивируют вирус гепатита, подвергают осветляющей, стерилизирующей фильтрации и разливают по флаконам.

Пример 2. Балластный осадок белков в количестве 1 кг- заливают

5 л дистиллированной воды, гомогенизируют и устанавливают РН 7,2 + 0,1.

Суспенэию равномерно нагревают до

60 С, путем добавления перекиси водорода осветляют раствор и через 2 ч о понижают температуру до 1 С. Устанавливают РН 4,5 1н. раствором НС1 и медленно вводят этанол до концентрации 15 (всего 1,15 л). Температура смеси к концу осаждения достигает

-3 С. Коррегируют РН до 4,5 и выстаивают смесь 3-4 ч. Образующийся осадок удаляют центрифугированием. Супернатант 7,2 л переносят в реактор, охлаждают до -2 С и при перемешивании доводят концентрацию этанола до 30% (1,3 л), РН раствора должен быть 3,8.

Ф

После выстаивания целевой продукт

25 (0,16 кг) получают центрифугирова-: нием.

Пример 3. 5 кг осадка заливают 30 л дистиллированной воды и гомогенизируют 30 мин. Не прекращая перемешивания, повьппают pH до 7,2 0,1 введением 2н. NaOH. Суспензия приобретает вид темно-красного опалесцирующего раствора. его равномерно нагревают до 60 С и после дости о

35 жения заданной температуры порциями добавляют 10 -ную перекись водорода до достижения янтарного цвета. После

2 ч прогрева раствор охлаждают до

1 С, снижают РН до 4,7 О, 1 добавле4о нием 1н. НС1. Медленно при перемеши" вании вводят 9,5 л охлажденного этанола до конечной концентрации 20, температуру к концу осаждения снижают до -3 С; РН поддерживают 4,7. Раствор

45 перемешивают 1 ч и после 2-3 ч, выстаивания удаляют осадок центрифугированием. Далее супернатант (42 л) охлаждают до -3 С, снижают РН до о

4,1 и 0,1 и медленно вводят 7,4 л ох50 лажденного этанола до концентрации

35. К концу осаждения температуру о. снижают до -5 С. Проверяют и при не» обходимости коррегируют РН. Раствор перемешивают 2-3 ч. Возможно отстаивание смеси 10-12 ч при температуре

-3 С. Выпавшмй осадок собирают центрифугированием. Остаточный спирт удаляют сублимацией, сухую массу растворяют в воде до содержания белка

1362478

Ipe8naеаемаi спосоЮ оиФк кеиел.

Фктоирболлостнии оеодок

Стадил

Отадил

Стадил о йайк Стодил кеисл. г

Вещдок Стодир снап, лрисот иоп. йеидокцелеВой лродикт

1/вне,в рум ке Ы 7. Рукт

4,3-4,8Х, инактивируют вирус гепатита прогреванием, раствор подвергаютосветлякщей и стерилизирующей фильтрации, разливают по флаконам и исполь зуют.

Согласно предлагаемому способу получают препарат крови, близкий по своим свойствам к протеину, при электрофорезе и иммунофорезе распределение белковых эон и линий преципитаций 10 аналогично, как у протеина. Препарат крови не содержит НВВ-антигена, бактериальной примеси и пирогенных веществ, конечный продукт содержит не. менее 75Х альбумина. При использова- 15 нии запредельных концентраций спирта показателей рН конечный продукт содержит альбумина менее 75Х.

В результате предлагаемой технологической схемы процесс сокращен на 20 три стадии, вместо шести центрифугирований по известному способу необходимо проводить только два центрифугирования, общие затраты времени на технологический процесс по известно-. 2ь му способу составляют 5-7 дней, а по предлагаемому — 1,5-2 дня.

Прототил иеюЧищьуют.В(д+ау днам

Формула изобретения

Способ получения препарата крови путем обработки этанолом при низких температурах разрушения гемпигментов перекисью водорода в присутствии каприлата натрия, осаждением целевого продукта этанолом при низких температурах в кислых условиях, о т л и— ч а ю шийся тем, что, с целью сокращения времени проведения процесса за счет сокращения количества технологических операций, в качестве источника сырья используют отходы производства — балластный осадок белков, образующийся в процессе получения альбумина из гемолизированной плазмы или сыворотки крови, при этом обработку этанолом проводят в концентрации этанола 15-25Х при рН 4,5-5,5 после суспендирования осадка в дистиллированной воде и разрушения пигментов перекисью водорода, осадок удаляют центрифугированием, а целевой а продукт осаждают этанолом в концентрации 30-40Х и рН 3,8-4,5.